淫羊藿苷改善高糖培养乳鼠心肌细胞活性的线粒体相关机制

目的研究淫羊藿苷对抗体外高浓度葡萄糖诱导乳鼠心肌细胞的损伤及其潜在的线粒体相关机制。方法SD乳鼠心肌细胞分别在含5.5mmol／L葡萄糖（正常对照组）、5．5mmol／L葡萄糖＋20.0mmol／L甘露醇（高渗对照组）、25.5mmol／L葡萄糖（高糖损伤组）、25.5mmol／L葡萄糖＋10μmol／L淫羊藿苷（低剂量淫羊藿昔保护组）和25.5mmol／L葡萄糖＋100μmol／L淫羊藿苷（高剂量淫羊藿苷保护组）的培养基中进行原代培养48h后,检测细胞活力、细胞培养上清液乳酸脱氢酶（LDH）含量、细胞活性氧自由基（ROS）生成、超氧化物歧化酶（SOD）活性,同时检测心肌线粒体跨膜电位,并检测线粒体通透性转换孔（MPTP）开放值。结果与正常对照组比较,高糖培养组心肌细胞活性、细胞SOD活性及心肌线粒体跨膜电位水平均显著下降（P〈0．01）,而培养上清液LDH含量、细胞ROS生成及心肌细胞MPTP开放值则明显升高（P〈001）。淫羊藿苷干预减轻了高糖对心肌细胞各项指标的损伤,尤其是高剂量淫羊藿苷保护组的细胞活性、LDH漏出量、ROS生成值、SOD活性、MPTP开放值、线粒体跨膜电位均有明显改善。高渗对照组各项指标与正常对照组相比差异无统计学意义。结论淫羊藿苷对体外高糖培养乳鼠心肌细胞具有保护作用,其作用机制可能通过提高细月旬抗眚化能力．减少ROS诱导的心肌MPTP开放程度．维持线粒体正常跨膜电位而实现的。     

淫羊藿苷预适应对乳鼠心肌细胞的保护作用

目的:探讨淫羊藿苷预适应对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤和氧化损伤的作用及其机制。方法:体外培养原代乳鼠心肌细胞,淫羊藿苷预适应24h后,采用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)诱导心肌细胞缺氧/复氧损伤和过氧化氢(H2O2)诱导氧化损伤模型,测定细胞存活率(MTT法)、细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)释放量、细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果:在缺氧/复氧损伤模型和氧化损伤模型中,淫羊藿苷预适应明显提高细胞存活率,增加胞内SOD活性,降低培养液中LDH释放量和胞内MDA含量。结论:淫羊藿苷预适应对缺氧/复氧损伤以及氧化损伤心肌细胞都具有明显的保护作用,可能与其抑制脂质过氧化作用有关。     

淫羊藿苷诱导鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞的作用

干细胞移植治疗心肌坏死性疾病是一种比较理想的治疗手段。胚胎干细胞以其分化的全能性成为了目前研究的热点。淫羊藿苷是一种历史悠久、无毒副作用的传统补药,除有抗氧化作用、调节内分泌、抗肿瘤等作用外,其益气强心之功效越来越受到人们的重视。探索淫羊藿苷诱导胚胎干细胞分化为心肌细胞的作用,为心肌损伤的干细胞治疗提供最佳的细胞资源     

淫羊藿苷的药理活性研究进展

淫羊藿苷是淫羊藿的主要活性成分之一,具有免疫调节、抗炎、抗衰老、抗肿瘤等活性,可改善骨质疏松、阿尔兹海默病、帕金森、脑缺血、动脉粥样硬化、风湿病等多种疾病的症状。其药理活性包括:促进成骨细胞的生成和活化,抑制破骨细胞的形成和功能缓解骨质疏松;抑制β-淀粉样蛋白的产生、tau蛋白的过度磷酸化及多巴胺含量的降低以保护神经系统;通过保护心肌细胞、增加心肌细胞数量、改善内皮功能障碍保护心血管系统;促进生殖器官的功能;通过调节T细胞平衡调节免疫系统。目前,对于淫羊藿苷的研究仍有以下不足:其药理活性与多种信号通路有关,但如何调控这些信号分子、直接效应分子尚不明确;对其药理活性的研究多为单一靶点、单一途径,说服力不强;与他药配伍增效减毒的作用有待挖掘。今后的研究首先应借助激动剂、拮抗剂和基因编辑,明确淫羊藿苷调控信号通路与相应药理作用的关系,揭示通路变化的上游及下游效应分子;其次,联合采用表面等离子体共振、配体-受体结合实验、靶分子共定位、质谱等方法论证其多途径、多靶点作用,增加说服力;再次,结合中医药理论与现代分子生物学技术,对淫羊藿苷与他药配伍的药理作用进行深入探讨。     

淫羊藿苷与淫羊藿次苷Ⅱ的体外抗氧化作用

的：检测淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的体外抗氧化活性,阐明淫羊藿黄酮类化合物的抗氧化机制。方法: 以抗坏血酸(Vc)、二丁基羟基甲苯(BHT)为阳性对照,测定淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅱ和BHT对1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH?)的清除率;铁氰化钾还原法测定其还原力;利用NADH-NBT-PMS系统测定其对超氧阴离子(O2－?)的清除率;2-脱氧-D-核糖降解法测定淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ对羟自由基(OH?)的清除率,硫代巴比妥酸法测定其对脂质过氧化的抑制率,β-胡萝卜素-亚油酸自氧化体系测定其总抗氧化能力。结果:不同样品对DPPH?均有一定的清除作用,淫羊藿次苷Ⅱ清除DPPH?的能力较淫羊藿苷强(P<0.05)。淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ在浓度梯度范围内对O2－?有一定的清除作用,均表现出一定的浓度依赖性,与同浓度的BHT比较,淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ对O2－?的清除率较低,且淫羊藿苷的清除能力略低于淫羊藿次苷Ⅱ。      淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ在浓度为0.1～0.5 g.L^-1时对OH?清除率分别为(16.76±0.35)%~(40.56±1.46)%和(15.65±0.72)%~(28.51±0.91)%。当浓度为0.9 g.L^-1时,淫羊藿苷、Vc和淫羊藿次苷Ⅱ对脂质过氧化的抑制率为(58.79±1.56) %、(75.05±2.12)%和 (37.82±1.43)%。随着浓度的增加,抑制率不再有显著的增加。随着样品浓度的增加,淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅱ和标准品Vc还原力均表现出浓度依赖性。30~120 min内淫羊藿次苷Ⅱ的抗氧化活性均低于淫羊藿苷和BHT（P<0.05或P<0.01）。淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ在体外抗氧化的各项指标中表现出的抗氧化活性均弱于Vc和BHT。结论: 淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ在清除DPPH?、O2－?、OH?和抑制脂质过氧化、总抗氧化能力和还原力方面,均具有明显的抗氧化能力。     

淫羊藿苷药理作用的分子机制研究进展

淫羊藿苷是补肾要药淫羊藿的主要药效成分之一,具有抗神经元损伤、促神经突触生长、促成骨、抗炎症、抗肿瘤、提高性功能和抗抑郁等作用。为了解淫羊藿苷发挥药理效应的分子机制,本文检索了1995年1月1日至2011年5月1日PubMed数据库中收录的题目中含“icariin”的文献共122篇,发现淫羊藿苷可通过影响丝裂原活化蛋白激酶／p38信号通路和磷脂酰肌醇3激酶／Akt信号通路,作为磷酸二酯酶5抑制剂和核受体调节剂发挥作用。本文还进一步分析了研究淫羊藿苷分子机制的主要方向。     

淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ对内皮细胞eNOS表达和NOS活性的影响

目的：用过表达表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）的猪动脉内皮细胞（porcine aorta endothelial, PAE）作为研究对象,探讨淫羊藿苷(icariin)和淫羊藿次苷Ⅱ(icarisideⅡ)对PAE中内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase, eNOS)表达和一氧化氮合酶(nitric oxide sythase, NOS)活性的影响及其可能机制。方法：利用PAE中转染EGFR并筛选稳定株, 分别用12.5 μmol/L的淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ处理PAE和PAE-EGFR细胞48 h,观察各组细胞eNOS的表达变化;另在淫羊藿苷或淫羊藿次苷Ⅱ处理PAE和PAE-EGFR细胞时,分别加入表皮生长因子（epidermal growth factor, EGF）共同处理细胞,观察各组细胞eNOS的表达变化;检测淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ处理前后PAE和PAE-EGFR细胞NOS的酶活性改变,并以西地那非作为对照。结果：Western blot显示PAE-EGFR细胞表达eNOS的基础值要比PAE细胞高,淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ处理时PAE和PAE-EGFR细胞株中都能引起eNOS表达增加,并且在PAE-EGFR稳定株中eNOS的表达量比PAE细胞明显提高(P<0.01);在表达EGFR的PAE-EGFR细胞中,当淫羊藿次苷Ⅱ的浓度达到10^-8 mol/L时,NOS活性增加到(15.37±1.49) u/mg ,比PAE细胞高4.66 u/mg。在药物浓度达到10^-7,10^-6和10^-5 mol/L时,淫羊藿次苷Ⅱ对PAE-EGFR细胞NOS活性的影响较PAE细胞显著增加(P<0.01);淫羊藿苷也能增加PAE和PAE-EGFR细胞的NOS酶活性,但是其效果比较淫羊藿次苷Ⅱ组平均低20%,而西地那非没有显著影响NOS酶活性。 结论：淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ可上调PAE和PAE-EGFR细胞eNOS的表达和提高NOS活性,对血管内皮细胞功能可能具有改善作用,而且淫羊藿次苷Ⅱ的效果优于淫羊藿苷,其作用机制可能与激活PAE细胞的EGF-EGFR信号通路有关。     

淫羊藿提取物中淫羊藿苷含量的HPLC测定

淫羊藿药材为《中华人民共和国药典》2 0 0 0年版收载品种 ,淫羊藿苷为其中有效成分。为了控制其质量 ,本实验建立了 HPLC法测定淫羊藿提取物中淫羊藿苷的含量 ,并在方法学考察过程中 ,对文献 [1～ 6 ]报道的多种色谱条件进行了比较 ,建立了合适的测定方法。1　仪器与试剂Waters(2 690 -996)高效液相色谱仪 ,Sart-o-rius BP2 1 1 D型电子天平 ,CQ-2 5 0超声波清洗仪。淫羊藿提取物 (浸膏粉 )为本公司自制。淫羊藿苷对照品 (中国药品生物制品检定所提供 ,供含量测定用 ,批号 :0 73 7-2 0 0 1 1 1 )。乙腈为色谱纯 ,甲醇为分析纯 ,水为重…     

淫羊藿苷改善糖尿病小鼠血管功能的作用及其机制

为探讨淫羊藿苷（icariin,ICA）对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠血管舒缩功能的影响及其分子机制,采用腹腔注射200 mg/kg四氧嘧啶的方法诱导1型糖尿病小鼠模型,连续14 d灌胃给予60,120 mg/kg ICA后,考察药物对糖尿病模型小鼠血糖、体重、摄食量、饮水量的影响;分离各组小鼠的胸主动脉并检测其对乙酰胆碱（acetylcholine,Ach）、硝普钠（sodium nitroprusside,SNP）诱导的血管环舒张反应和对苯肾上腺素（phenylephrine,Phe）、KCl诱导的血管环收缩反应,以评价ICA对各组小鼠离体胸主动脉血管环舒缩功能的影响。为进一步探讨ICA改善血管功能的机制,采用高糖（35 mmol/L）诱导人脐静脉内皮细胞（HUVECs）建立细胞模型,Western blot法检测ICA对高糖诱导的HUVECs中eNOS、p-eNOS、p38 MAPK和pp38 MAPK蛋白表达的影响。结果显示,ICA显著改善糖尿病小鼠的体重下降和饮水量增多,对摄食量、血糖有一定改善作用,但无统计学差异。离体胸主动脉血管环舒缩功能实验结果显示,ICA显著改善糖尿病小鼠...     

淫羊藿苷药理研究进展

淫羊藿苷(Ica)为药用植物淫羊藿的主要有效成分.Ica具有滋阴补阳、保护心血管系统、调节免疫、抗肿瘤和促进造骨细胞的增殖和发育等多种重要的药理作用,是一类很有应用前景的中药单体,本文对Ica药理作用研究概况作一综述.     

淫羊藿苷治疗骨质疏松的相关通路研究进展

骨质疏松是一种以骨量减少、骨脆性增加、骨组织微结构破坏为特点的全身性代谢性疾病, 发病人群主要为中老年人。淫羊藿苷作为中药淫羊藿的主要活性成分, 可以通过多种通路抑制破骨细胞, 激活成骨细胞, 调节骨髓间充质干细胞分化, 从而治疗骨质疏松。文章从Wnt/β-catenin通路、OPG/RANK/RANKL通路、MAPK通路、Notch通路、Hedgehog通路、BMP/Smads通路、PI3K/Akt通路、PPAR-γ通路、cAMP/PKA通路等淫羊藿苷治疗骨质疏松的相关通路做一篇综述, 以期为淫羊藿苷治疗骨质疏松的进一步开发提供思路。     

替代对照品法测定淫羊藿中淫羊藿苷的含量

目的：建立HPLC替代对照品法测定淫羊藿中淫羊藿苷的含量。方法：选取芦丁作为淫羊藿中淫羊藿苷的替代对照品,在不同的条件下测定替代对照品相对对照品的校正因子,利用校正因子和替代对照品芦丁进行淫羊藿中淫羊藿苷的含量测定。结果：淫羊藿苷和芦丁进样量分别在0.13～3.20μg（r=0.999 6）和0.34～8.50μg（r=0.999 7）内与峰面积呈良好的线性关系（n=6）,测得校正因子f=2.586 1,用替代对照品测定法测得回收率为96.01%（n=9）,RSD=1.42%。结论：在高效液相色谱仪上用替代对照品测定淫羊藿中淫羊藿苷的含量是可行的、实用的。     

HPLC法测定复方淫羊藿颗粒中淫羊藿苷的含量

[目的]建立复方淫羊藿颗粒剂中淫羊藿苷的含量测定方法。[方法]采用Shim-packclsODS柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-水(65∶35),检测波长270nm。[结果]淫羊藿苷在0.05~0.30μg范围内有良好的线性关系,平均回收率为97.81%,RSD为1.42%。[结论]此法简便,快速,精密度和稳定性好。     

淫羊藿苷抗心肌重塑的作用机制

心血管疾病因极高的发病率、死亡率引起了人们的高度关注.心肌重塑(MR)是引发心血管疾病的病理基础,其在冠心病、心肌梗死、原发性高血压、病毒性心肌炎等心血管系统疾病心功能从代偿向失代偿转化的病理过程中扮演着重要角色.MR的发病机制较为复杂,与免疫炎症反应、氧化应激、血液流变学改变、内皮细胞功能失常等密切相关.当前,预防和...     

淫羊藿苷药理作用的研究进展

淫羊藿苷(ICA)是温阳补肾中药淫羊藿的主要活性成分之一,对心脑血管、肾功能、生殖功能、免疫调节等都有作用。淫羊藿苷能增加心脑血管血流量,对心肌缺血有不同的改善,对脑血管有很好的保护作用;它还有补肾壮阳之功效,能促进造血功能,抗血栓形成,增强机体免疫功能,预防骨质疏松,抗肿瘤,抗衰老等。本文对ICA的药理作用研究概况予以综述。     

高糖对乳鼠心肌细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的:探讨高糖对乳鼠心肌细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法:分离培养SD乳鼠心肌细胞,以20mmol/L终浓度的葡萄糖干预48h后,激光共聚焦显微镜、TUNEL染色和流式细胞术检测心肌细胞凋亡;荧光定量PCR检测高糖对凋亡相关基因P53、Pax3、Bmp4、Slug、Msx1表达的影响。结果:激光共聚焦显微镜观察可见高糖组心肌细胞凋亡明显增加;TUNEL检测心肌细胞凋亡指数,高糖组为(19.67±3.45)%,明显高于对照组(1.12±0.24)%(P<0.05);流式细胞术显示高糖组细胞凋亡率较对照组明显增加(P<0.05);荧光定量PCR表明高糖能上调P53、Msx1基因的表达,下调Pax3、Bmp4、Slug基因的表达。结论:高糖可能通过影响凋亡相关基因P53、Pax3、Bmp4、Slug、Msx1的表达而诱导心肌细胞凋亡。     

淫羊藿属9种淫羊藿叶中朝藿定C和淫羊藿苷量的考察

淫羊藿属Epimedium L．药用植物，在我国有29种，产于川陕者14种，具有多方面的药理活性。《中国药典》作为淫羊藿药材的有5种，分别为淫羊藿、朝鲜淫羊藿、箭叶淫羊藿、巫山淫羊藿和柔毛淫羊藿，笔者在进行淫羊藿成分系统分离研究的基础上，对采集的川陕豫产9种习惯人药的淫羊藿品种，将其叶中的主要成分朝藿定C和淫羊藿苷的量进行了考察，结果表明大部分品种朝藿定C量大于淫羊藿苷。     

淫羊藿苷急性毒性试验研究

目的：观察淫羊藿苷小鼠急性毒性,初步评价其用药安全性。方法：取健康ICR种小鼠28 只,体质量18~22 g,随机分为2 组（给药组,空白组）,每组14 只,雌雄各半,选用最大给药量法进行实验。给药组按淫羊藿苷可以灌胃的最大给药浓度（0.36 g·mL-1）及小鼠可承受的最大体积（0.4 mL·10 g-1）灌胃,上下午各一次,空白组羧甲基纤维素钠（CMC）（0.4 mL·10 g-1）灌胃。灌药后4 h 内,每1 h观察小鼠死亡情况,行为活动,精神状态等。连续观察14 d,每日称重,记录小鼠的毒性反应、死亡情况,并计算各脏器的脏器指数。结果：无法得出淫羊藿苷LD50;给药后连续观察14 d,小鼠未见中毒反应,无动物死亡;给药14 d 后解剖小鼠,肉眼未见脏器异常;脏器指数评价,2 组比较无显著性差异（P>0.05）。结论：小鼠灌胃给药最大给药量为 28.8 g·kg-1,相当于临床成人日用量的253.19倍,提示淫羊藿苷口服毒性小,临床剂量下用药安全。     

不同来源对中药淫羊藿中淫羊藿苷含量的影响

目的中药淫羊藿临床应用非常广泛,来源相对复杂,全国各省、区均有野生,外观性状差别很大,通过HPLC对各来源样品淫羊藿苷的含量考察。方法《中国药典》2015年版一部淫羊藿项下【含量测定】淫羊藿苷的测定方法。结果色谱峰分离情况良好,检验结果显示,不同来源及同一来源不同产地的淫羊藿中淫羊藿苷的含量的差别非常大。结论淫羊藿中淫羊藿苷的含量执行《中国药典》规定的限度,不合格率较高,并且跟来源、产地关系不大,建议国家药典委员会调整淫羊藿中淫羊藿苷的含量的限度。     

微波辅助提取淫羊藿中淫羊藿苷工艺条件的研究

淫羊藿具有补肾阳、强筋骨、祛风湿之功效,可治疗阳萎遗精、风湿痹痛、麻木拘挛、更年期高血压等症。目前淫羊藿补肾壮阳的功效已得到药理证实,作为一种抗衰老的中草药,淫羊藿具有广泛的应用开发前景。淫羊藿提取工艺常以淫羊藿苷质量分数为质量指标。目前,淫羊藿苷的提取工艺有有机溶剂提取、水提取等。水提取较有机溶剂提取在降低成本、保证操作安全性及降低环境污染方面都有优势。因此研究以水为溶剂具有重要的意义[1,2]。近年来,微波用于天然药用植物的提取方面受到日益重视,微波用于植物提取主要是利用其强烈的热效应,微波对物料内外介…