子痫前期胎盘组织中LAMA4蛋白表达量及其与滋养细胞侵袭、胎盘缺氧的相关性

目的探讨子痫前期胎盘组织中层粘连蛋白α4链(LAMA4)蛋白表达量及其与滋养细胞侵袭、胎盘缺氧的相关性。方法收集2012年5月-2016年5月在该院接受治疗及分娩的子痫前期患者56例作为观察组;另选取同期进行产检及分娩的正常产妇50例作为正常对照组。根据胎盘组织中LAMA4蛋白表达中位数,观察组患者被分为高LAMA4蛋白组和低LAMA4蛋白组,每组各28例。采用Western-Blot法检测胎盘组织中LAMA4蛋白表达量;采用荧光定量PCR法检测胎盘组织中滋养细胞侵袭相关基因mRNA表达量;采用化学发光法检测脐血中胎盘缺氧相关指标含量。结果观察组胎盘组织LAMA4蛋白表达量低于正常对照组(P0.05);高LAMA4蛋白组、低LAMA4蛋白组胎盘组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)、胎盘生长因子(PLGF)mRNA表达量低于正常对照组,可溶性fms-样酪氨酸激酶受体-1(sFlt1)mRNA表达量高于正常对照组,脐血胎盘缺氧指标,缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、缺氧诱导因子脯氨酸羟化酶-1(HPH-1)、瘦素含量均高于正常对照组(P0.05);高LAMA4蛋白组胎盘组织中MMP-9、VEGF、PLGFmRNA表达量高于低LAMA4蛋白组,sFlt1mRNA表达量低于低LAMA4蛋白组,脐血胎盘缺氧指标HIF-1α、HPH-1、瘦素含量低于低LAMA4蛋白组(P0.05)。结论子痫前期胎盘组织中LAMA4蛋白表达量减少,具体LAMA4蛋白表达水平与滋养细胞侵袭呈正相关,与胎盘缺氧程度呈负相关。     

骨转移蛋白-7及其受体Ⅱ在重度子痫前期胎盘组织中的表达

目的检测早发型、晚发型重度子痫前期胎盘组织中骨转移蛋白-7(BMP-7)及其受体Ⅱ(BMPRⅡ)的表达情况,探讨其与重度子痫前期发病的关系。方法选取2014年9月-2016年1月在该院产科住院,临床确诊为早发型、晚发型重度子痫前期患者的胎盘组织作为研究对象,每组各30例;选取同期行择期剖宫产的正常相应孕周产妇的胎盘组织30例为对照组,分别采用qRt-PCR和Western Blot方法检测3组胎盘中BMP-7和BMPRⅡ中mRNA及蛋白的表达情况,免疫组化方法检测两者在胎盘中的表达定位。结果 BMP-7、BMPRⅡ的mRNA和蛋白表达水平在重度子痫前期胎盘组织中升高,且在晚发型重度子痫前期中升高更加明显,差异均有统计学意义(均P<0.05);BMP-7主要表达于胎盘绒毛合体滋养细胞层和绒毛外滋养细胞的细胞质,BMPRⅡ主要表达于胎盘绒毛滋养细胞和绒毛外滋养细胞的细胞膜。结论胎盘组织中BMP-7和BMPRⅡ的表达量增高有可能参与了重度子痫前期的发病过程。     

子痫前期胎盘组织TGF—β1高表达对滋养细胞凋亡的影响

目的探讨转化生长因子β1（TGF-β1）在正常妊娠和子痫前期患者胎盘组织中的分布和表达及与滋养细胞凋亡的关系。方法采用免疫组织化学法检测30例子痫前期（轻、重度）和10例正常孕妇胎盘中TGF-β1的分布和表达,采用TUNEL法检测3组胎盘滋养细胞凋亡的情况。结果TGF—β1在正常妊娠和予痫前期患者胎盘的滋养细胞、内皮细胞、基质细胞中均有表达,以滋养细胞表达为主。TGF—β1在对照组、实验组1和实验组2的积分光密度逐渐增高,实验组1与对照组比较差异有统计学意义（t=10．834,P〈0．01）;实验纽2与实验组1比较差异有统计学意义（t=13．056,P〈0．01）。正常妊娠和子痫前期患者胎盘的滋养细胞、内皮细胞、基质细胞均存在凋亡,以滋养细胞凋亡为主。实验组1和组2均较对照组凋亡率明显增高（,值分别为18．42、48．87,均P〈0．01）;随着病情加重,实验组1、实验组2细胞凋亡率呈上升趋势（χ2=7．70,P〈0．01）。滋养细胞TGF—β1表达与胎盘绒毛细胞凋亡率在实验组2、实验组1均具有相关性（r值分别为0．910、0．520,均P〈0．01）。结论子痫前期患者胎盘组织中的TGF-β1高表达可能与其滋养细胞凋亡增加有关。     

子痫前期患者胎盘滋养细胞中TGF-β1与PLGF的表达及相关性

目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)与胎盘生长因子(PLGF)在子痫前期患者胎盘滋养细胞中的表达及两者在发病机制中的作用。方法:采用免疫组化法检测30例正常妊娠及68例子痫前期患者TGF-β1与PLGF的表达强度。结果:重度子痫前期组TGF-β1的表达强度明显高于正常妊娠组、轻度子痫前期组(P<0.05),PLGF的表达强度明显低于正常妊娠组、轻度子痫前期组(P<0.05),TGF-β1与PLGF的表达在各组中呈负相关。结论:TGF-β1与PLGF不仅与子痫前期患者胎盘浅着床有关,并且还参与调节了子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞和血管内皮细胞的生长发育分化过程,并在疾病的发生、发展过程中发挥了重要作用。     

重度子痫前期胎盘细胞凋亡及其基因的表达

目的 探讨重度子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞的凋亡情况及凋亡相关基因的表达.方法 选择重度子痫前期患者及正常以社会因素剖宫产者各12例,以TUNEL法检测胎盘绒毛滋养细胞的凋亡率,免疫组化法检测Bcl-2、Bax和Fas的表达.结果 子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞的凋亡率明显高于对照组(F=22.65,P＜0.05);与正常对照组比较,Bax和Fas在重度子痫前期组胎盘绒毛滋养细胞的表达水平显著增加,差异有显著性(x2分别为4.1958、6.1714,均P＜0.05);Bcl-2在两组胎盘绒毛滋养细胞的表达无明显差异性.结论 子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞的凋亡率增加及促凋亡基因Bax和Fas的高表达导致胎盘缺血和缺氧,可能与重度子痫前期的病因及病理过程有关.     

子痫前期患者胎盘组织中caspase-3,8,9的表达及临床意义

目的 研究半胱天冬氨酸蛋白酶-3,8,9(caspase-3,8,9)在子痫前期患者胎盘中的表达及临床意义.方法 选择2010年8月至2011年2月在西京医院妇产科住院分娩的孕妇40例,分为子痫前期组20例、正常妊娠对照组20例,采用免疫组化法、蛋白印迹法检测子痫前期患者和正常妊娠妇女胎盘中caspase-3,8,9的表达.结果 caspase-3,8,9在子痫前期胎盘和正常妊娠胎盘中均有表达;在子痫前期患者胎盘中,caspase-3,8,9表达与正常胎盘相比显著升高(t值分别为25.09、14.65、8.10,均P<0.01).结论 子痫前期患者胎盘组织中caspase-3,8,9的异常表达与滋养细胞凋亡增加有关,可能是导致子痫前期发生发展的重要病理因素.     

子痫前期滋养细胞ABCG2表达的研究

目的探讨正常及子痫前期胎盘滋养细胞分化前、后胎盘表达的主动转运因子ATP结合匣式转运子G2 (ABCG2)mRNA及蛋白的表达变化。方法酶消化法原代培养正常及子痫前期胎盘绒毛滋养层细胞,经传代与纯化后免疫鉴定滋养细胞及其纯度。收集培养后72 h (未分化状态)及培养后6 d (分化状态)的细胞,裂解后应用实时荧光定量PCR及Western Blot检测各组细胞ABCG2 mRNA及蛋白的表达水平。结果成功自正常及子痫前期胎盘中原代培养人绒毛滋养层细胞,未分化状态下子痫前期滋养细胞ABCG2mRNA及蛋白的表达平均值为正常的2. 54及2. 06倍,分化状态下子痫前期滋养细胞ABCG2mRNA及蛋白的表达为正常的1. 65及1. 53倍;正常胎盘滋养细胞分化后ABCG2 mRNA及蛋白表达增高3. 55及4. 06倍,子痫前期组仅增加2. 31及3. 03倍。结论自子痫前期及正常胎盘原代培养滋养细胞区分不同分化状态,实时荧光定量PCR及Western Blot检测子痫前期滋养细胞不同分化时期ABCG2 mRNA及蛋白的表达均高于正常,但滋养细胞分化后子痫前期ABCG2 mRNA及蛋白表达增长的程度低于正常。     

正常妊娠与子痫前期胎盘VEGF及其受体mRNA差异表达的研究

目的:探讨子痫前期患者VEGF、VEGF受体在胎盘中表达的变化及其与子痫前期发病间的关系。方法:采用实时荧光定量PCR技术分别检测正常妊娠、子痫前期患者胎盘组织中VEGF、VEGFR-1 mRNA和VEGFR-2 mRNA的表达水平。结果:与正常妊娠相比,子痫前期胎盘组织VEGF、VEGFR-1 mRNA和VEGFR-2 mRNA表达均上升,分别为2.82、2.67和1.25倍,前两者差异有显著性(P<0.05),VEGFR-2表达上升无统计学意义。结论:VEGF通过VEGFR-1在子痫前期发生、发展中发挥作用。     

REDD1蛋白在子痫前期患者胎盘的表达及意义

目的探讨子痫前期患者胎盘中REDD1蛋白的表达情况。方法选择2011年12月至2012年4月四川大学华西第二医院收治的确诊为子痫前期,年龄为(31.4±1.4)岁的单胎妊娠孕妇29例为研究对象。按照妊娠中子痫前期发生的时间,将其分为早发型子痫前期组(n=15)和晚发型子痫前期组(n=14)。同时按入院顺序号随机选择孕期在本院产前检查,年龄为(32.0±2.8)岁的单胎妊娠健康孕妇20例纳入对照组(本研究遵循的程序符合四川大学华西第二医院人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,分组征得受试对象知情同意,并与之签署临床研究知情同意书)。采用SP免疫组织化学染色技术,Western bloting杂交及实时荧光定量PCR检测受试者REDD1蛋白及其mRNA在胎盘组织中的表达,并采用相关统计学方法分析早发型子痫前期组、晚发型子痫前期组及对照组胎盘组织中REDD1蛋白表达差异。早发型子痫前期组及晚发型子痫前期组患者的一般临床资料(年龄、孕周及产次)分别与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结果 REDD1蛋白表达于胎盘滋养细胞的细胞质。早发型子痫前期组及晚发型子痫前期组胎盘组织中REDD1蛋白水平均较对照组显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。早发型子痫前期组REDD1mRNA表达水平较对照组明显增高,差异亦有统计学意义(P<0.05);但晚发型子痫前期组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 REDD1蛋白可能在子痫前期发病机制中起重要作用。     

子痫前期患者与正常妊娠胎盘中HLA-G的差异表达研究

目的 探讨人类白细胞相关抗原G(HLA-G)在子痫前期患者与正常妊娠胎盘组织中的表达差异.方法 选取24例子痫前期患者胎盘组织(实验组)及15例正常早期妊娠人工流产绒毛组织(对照组),应用RT-PCR及Western蛋白印迹技术检测两组间HLA-G蛋白的表达差异.结果 子痫前期患者胎盘组织中HLA-G基因及蛋白表达均显著低于正常流产组,差异有统计学意义(P<0.01).q结论 HLA-G在胎盘组织中的低表达可能与子痫前期的发生有关.     

白血病抑制因子在子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的:测定白血病抑制因子(LIF)在子痫前期患者胎盘组织中的表达,探讨其在妊娠高血压发病中的作用。方法:采用免疫组化技术-链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接(SP)法对在正常妊娠(正常妊娠组)、子痫前期(轻度子痫前期组和重度子痫前期组)孕妇胎盘组织中LIF的表达进行组织学定位和半定量分析。结果:3组孕妇胎盘组织中LIF均呈现阳性表达,阳性染色主要位于滋养细胞胞质中,胞核无明显着色。轻度子痫前期组和重度子痫前期组分别与正常妊娠组比较,胎盘组织的染色强度及范围显著减弱,差异有统计学意义(P<0.01),而轻度子痫前期组和重度子痫前期组的胎盘组织染色范围和强度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LIF对维持正常妊娠有一定的保护作用,LIF分泌或调控异常,影响了滋养细胞的浸润能力,导致病理妊娠,在胎盘组织中的低表达,参与了子痫前期发病机制。     

子痫前期患者胎盘滋养细胞中一氧化碳及肿瘤坏死因子-a的水平变化

目的:探讨血红素氧合酶-一氧化碳系统在子痫前期发病机制中的作用。方法:采集妊娠晚期的子痫前期孕妇和正常孕妇的胎盘,制备胎盘匀浆,用分光光度计双波长法和ELISA方法分别检测胎盘组织中的CO和TNF-a的含量,并进行相关分析;分别用两组孕妇血清培养滋养细胞,对指标进行测定和比较分析;结果:子痫前期患者胎盘组织及其血清培养的滋养细胞中CO的含量明显降低、TNF-a含量显著增加(P<0.05),且两者之间存在负相关。结论:CO和TNF-a的表达异常引起胎盘缺血缺氧、内皮损伤,可能是子痫前期发病的重要因素之一。     

子痫前期滋养细胞信号转导异常的研究

近年来的研究发现滋养细胞浅浸润是子痫前期发生、发展的关键环节,细胞信号转导调节细胞的生物学活性,在子痫前期患者滋养细胞中发现多种信号转导通路发生异常,并影响滋养细胞的侵袭性,推测其可能在子痫前期发生、发展中发挥重要作用。对滋养细胞信号转导的深入研究,有助于整体上揭示子痫前期的发病机制,随着蛋白激酶用于药物开发的研究,也为子痫前期的治疗提供了新的治疗方向。     

子痫前期滋养细胞信号转导异常的研究

近年来的研究发现滋养细胞浅浸润是子痫前期发生、发展的关键环节，细胞信号转导调节细胞的生物学活性，在子痫前期患者滋养细胞中发现多种信号转导通路发生异常，并影响滋养细胞的侵袭性，推测其可能在子痈前期发生、发展中发挥重要作用。对滋养细胞信号转导的深入研究，有助于整体上揭示子痫前期的发病机制，随着蛋白激酶用于药物开发的研究，也为子痫前期的治疗提供了新的治疗方向。     

Fasl在重度子痫前期胎盘滋养细胞表达的研究

目的:通过比较正常孕妇与重度子痫前期患者胎盘滋养细胞表面Fasl(Pas配体)表达,进一步从分子免疫学角度探讨重度子痫前期的免疫病理机制。方法:用特异性的Fasl抗体对重度子痫前期患者胎盘滋养细胞表面Fasl进行免疫组化染色,并通过高清晰彩色病理免疫组化测量系统对其定量分析,与同孕周的正常孕妇进行比较。结果:Fasl主要表达于胎盘绒毛合体滋养细胞及细胞滋养细胞的胞浆及胞膜内。重度子痫前期组胎盘滋养细胞表面Fasl表达强度明显低于正常对照组,两者间差异有非常显著意义(P<0.01)。Fasl在重度子痫前期组胎盘的表达与新生儿出生体重、胎盘均有明显相关性。结论:胎盘滋养细胞表面Fasl表达减少,导致母胎间的免疫耐受的破坏,引起异常的免疫反应可能是妊高征发病的重要机制。诱导Fasl的产生或调节母胎间的免疫耐受,将为临床治疗重度子痫前期提供新的方向。     

胎盘组织MMP-9表达与孕妇子痫前期发病的相关性研究

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与孕妇子痫前期发病的相关性。方法将2013年4月-2014年6月在该院住院分娩的孕妇按照其妊娠20周以后的血压以及蛋白尿情况分为实验组(子痫前期66例)和对照组(正常妊娠34例),实验组分为轻度子痫前期组(33例)和重度子痫前期组(33例),应用免疫组化SP法对两组胎盘组织中MMP-9的表达水平进行检测,并测定其光密度值。同时对每个新生儿体重和胎盘重量进行测量和记录。结果在胎盘组织中,MMP-9的光密度值实验组低于对照组(t=4.375,P0.001),轻度子痫前期组高于重度子痫前期组(t=5.302,P0.001)。实验组胎盘重量(t=3.181,P=0.002)和新生儿体重(t=3.034,P=0.003)低于对照组,轻度子痫前期组胎盘重量(t=5.128,P0.001)和新生儿体重(t=4.956,P0.001)均高于重度子痫前期组。在胎盘组织中,MMP-9的表达水平与胎盘重量及新生儿体重呈正相关。与新生儿体重2.5 kg者相比,≥2.5 kg者的MMP-9在胚胎组织中的表达水平较高(t=17.121,P0.001)。结论 MMP-9在孕妇子痫前期的胎盘组织中表达程度低,孕妇病情恶化使其表达程度逐渐降低,表明MMP-9可能和子痫前期的发病有关。     

重度子痫前期患者胎盘组织中miR-21的表达及其临床意义

目的:检测miR-21在重度子痫前期患者与正常孕妇胎盘组织中的表达差异。方法:收集2011年1月～2011年8月在江西省妇幼保健院产科行剖宫产的16例重度子痫前期患者和16例正常妊娠妇女的胎盘组织,通过实时荧光定量PCR技术检测胎盘组织中miR-21的表达水平。结果:miR-21在重度子痫前期患者胎盘组织中表达水平明显升高,为正常对照组表达水平的2.02倍(P<0.05)。结论:miR-21在胎盘组织中的表达水平可能与子痫前期的发生发展病理过程存在一定相关性。     

子痫前期患者离体胎盘细胞的凋亡及其临床意义

目的:探讨子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞的凋亡情况及其临床意义。方法:选择重度子痫前期、轻度子痫前期患者及正常以社会因素剖宫产孕妇各12例,分别取胎盘组织进行培养,以流式细胞仪测胎盘细胞的凋亡率并进行比较。结果:子痫前期患者胎盘细胞的凋亡率明显高于正常孕妇(P<0.05);重度子痫前期组胎盘绒毛滋养细胞的凋亡率高于轻度者,差异有显著性(P<0.05)。结论:子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞的凋亡率增加,并与病情的严重程度呈正相关。凋亡率的增加与子痫前期的病因及病理过程密切相关。     

白血病抑制因子在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的:测定白血病抑制因子(LIF)在子痫前期患者胎盘组织中的表达变化,探讨其在子痫前期发病过程中的作用。方法:选取子痫前期(子痫前期轻度组和重度组)和正常妊娠孕妇作为研究组和对照组,采用免疫组化法测定其胎盘组织中LIF的表达,并通过BI2000医学图像分析系统对染色结果进行定量检测并作比较。结果:LIF在3组中均有表达,且主要表达于滋养细胞胞质中;子痫前期轻度组及重度组与正常妊娠组相比,胎盘组织中LIF的表达明显减弱,差异有统计学意义(P<0.01);子痫前期轻度组与重度组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LIF对正常妊娠的维持起到了一定的保护作用;LIF在胎盘组织中的低表达影响了滋养细胞的浸润能力,可能是子痫前期发病的病因之一。     

胎盘滋养细胞自噬的研究进展

自噬是一种从酵母菌到哺乳动物细胞中均广泛存在的保守性细胞物质清除机制。在细胞和组织重塑、抵御细胞外刺激和病原体的过程中,细胞内组分可以转移到溶酶体中完成物质的新陈代谢,这对于维护细胞内稳态和物质、能量平衡都至关重要。本文主要探讨滋养细胞自噬在胎盘形成、孕早期滋养细胞缺氧、胚胎着床等过程中的重要作用,并阐述自噬及自噬相关基因与子痫前期及胎儿生长受限发生的相关性。