TLR4受体抑制剂对脂多糖诱导的小胶质细胞炎症因子的影响

目的探讨TLR4受体抑制剂TAK-242对脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞炎症因子的影响。 方法用脂多糖诱导BV2细胞构建炎症反应模型。(1)利用CCK-8法检测不同浓度的TAK-242预处理BV2小胶质细胞后的细胞存活率,确定最佳TAK-242浓度。(2)BV2小胶质细胞加入0,0.1,0.5,1μg/mL脂多糖(LPS)刺激24 h后,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测TLR4炎症因子mRNA表达的变化。(3)将BV2小胶质细胞分为四组：对照组,TAK-242组,LPS组和TAK-242预处理组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测TLR4、MyD88,IL-1β、IL-6炎症因子mRNA表达的变化。 结果(1)CCK-8：低剂量的TAK-242不影响BV2细胞活力;与LPS组相比,TAK-242预处理组细胞活力明显升高(P<0.05)。(2)实时荧光定量PCR法：与正常对照组相比,LPS处理组TLR4的mRNA表达明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)实时荧光定量PCR法：与正常对照组相比,LPS处理组TLR4、MyD88、IL-1β、IL-6的mRNA表达明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05);与LPS组相比,TAK-242预处理组TLR4、MyD88、IL-1β、IL-6的mRNA表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论LPS可激活TLR4信号通路;TAK-242可降低疾病因子TLR4、MyD88、IL-1β、IL-6等的mRNA表达,并从而增加细胞存活率。     

miR-146a-5p及miR-9-3p对炎症反应及脂代谢调节因子的作用

目的 通过检测microRNA-146a-5p(miR-146a-5p)、microRNA-9-3p(miR-9-3p)对HepG2细胞白介素受体相关激酶-1(interleukin receptor-associated kinase-1,IRAK-1)、ATP结合盒转运蛋白A1(ATP-binding gassette transporter A1,ABCA1)蛋白水平表达的影响，探讨miR-146a-5p及miR-9-3p对炎症反应及脂代谢调节因子作用。方法 以HepG2细胞为试验对象，分别进行miR-146a-5pmimics转染及miR-9-3pmimics转染，采用Westernblot检测miR-146a-5p对HepG2细胞IRAK-1蛋白表达的影响及miR-9-3p对HepG2细胞ABCA1蛋白水平表达的影响。结果 miR-146a-5p转染组IRAK-1蛋白水平显著低于对照组；miR-9-3p转染组ABCA1的蛋白水平显著低于对照组，差异均具有统计学意义（P=0.001）。结论 miR-146a-5p能够显著下调HepG2细胞IRAK-1蛋白表达，miR-9-3p能...     

姜黄素对脂多糖诱导腹腔巨噬细胞释放炎症因子的影响

目的探讨姜黄素对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激腹腔巨噬细胞(peritoneal macrophages,PMs)分泌炎症因子的影响。方法分离、培养腹腔巨噬细胞,用不同浓度姜黄素(12.5、25、50 mg/L)预处理细胞12 h,进而使用100ng/ml LPS刺激细胞,12 h后收集培养基上清液,ELISA检测促炎介质肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素6(interleukin-6,IL-6)的含量;30 min后收集细胞裂解物,Western blot检测p38 MAPK激酶活性。结果未经处理的腹腔巨噬细胞经LPS刺激12 h后,上清中TNF-α、IL-6的表达水平显著上升(p<0.05);12.5 mg/L姜黄素对LPS诱导的TNF-α、IL-6表达无显著影响(p>0.05);而50、25 mg/L姜黄素可以明显抑制LPS诱导的TNF-α、IL-6的表达(p<0.05);且25 mg/L姜黄素能够明显抑制LPS激活的p38 MAPK激酶的磷酸化水平。结论一定浓度的姜黄素可以抑制LPS刺激腹腔巨噬细胞炎症因子TNF-α、IL-6的分泌,进而减轻炎症反应的程度。     

LncRNA PCED1B-AS1调控NLRP3促进巨噬细胞清除结核分枝杆菌的机制研究

目的　研究长链非编码RNA PCED1B-AS1调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体3（NLR family pyrindomain containing 3, NLRP3）对巨噬细胞清除结核分枝杆菌和分泌炎症因子的影响。方法　在巨噬细胞RAW264.7中转染pcDNA-PCED1B-AS1,并用结核分枝杆菌感染,qRT-PCR方法检测PCED1B-AS1和TNF-α、IL-6 mRNA水平,用菌落形成实验检测巨噬细胞对结核分枝杆菌的清除作用,Western blot方法检测细胞中NLRP3蛋白表达水平。将NLRP3 小干扰RNA（small interfering RNA, siRNA）和pcDNA-PCED1B-AS1共转染到巨噬细胞中,用结核分枝杆菌感染,同样检测细胞中TNF-α、IL-6 mRNA水平和菌落量。结果　结核分枝杆菌感染后的巨噬细胞中PCED1B-AS1水平降低,TNF-α、IL-6 mRNA水平升高。转染pcDNA-PCED1B-AS1后的巨噬细胞经过结核分枝杆菌感染以后,细胞中PCED1B-AS1、TNF-α、IL-6 mRNA水平升高,形成的菌落量减少,细胞中NLRP3蛋白表达水平升高。NLRP3 siRNA可以逆转过表达PCED1B-AS1对结核分枝杆菌感染的巨噬细胞中TNF-α、IL-6 mRNA表达和菌落量形成的影响。结论　上调PCED1B-AS1促进巨噬细胞清除结核分枝杆菌,诱导细胞表达TNF-α、IL-6 mRNA的机制与上调NLRP3表达有关。     

低剂量鱼藤酮诱导BV2细胞IL-6产物及montelukast的作用

目的：在体外帕金森病（Parkinson's disease,PD）模型观察低剂量鱼藤酮诱导的BV2小胶质细胞白介素6（IL-6）生成及montelukast的作用。方法以PD诱导因子鱼藤酮处理小鼠小胶质细胞系BV2细胞。 Western blot方法检测BV2细胞前炎症细胞因子 IL-6蛋白表达, ELISA 方法检测 BV2细胞 IL-6释放。观察 CysLT1R 拮抗剂montelukast对鱼藤酮诱导的小胶质细胞IL-6的影响。结果低剂量鱼藤酮（0．3～3 nM）浓度依赖性地增加IL-6蛋白表达;以鱼藤酮（3 nM）处理细胞1～24h,时间依赖性的诱导IL-6释放增加。 CysLT1R拮抗剂montelukast降低鱼藤酮增高的BV2细胞IL-6水平。结论低剂量鱼藤酮诱导小胶质细胞前炎症细胞因子IL-6增加,montelukast抑制鱼藤酮诱导BV2细胞效应。     

C5aR/C5L2在小胶质细胞炎症中的作用及机制

目的观察棕榈酸(PA)及C5aR拮抗剂(PMX53)干预后小胶质细胞的炎症改变,探讨C5a受体(C5aR)及C5L2在PA诱导的小胶质细胞炎症中的作用。方法取新生1日龄小鼠,分离脑组织,原代培养小胶质细胞并进行分离纯化及鉴定。纯化小胶质细胞随机分成3组:正常对照组、PA处理组、PA+PMX53处理组。分别应用Western blot检测PA及PA+PMX53干预后小胶质细胞C5aR、C5L2、p38MAPK蛋白表达;RT-PCR检测C5L2 mRNA表达及ELISA法检测IL-6表达变化。结果通过免疫组化鉴定,成功培养小胶质细胞。PA干预后,C5aR蛋白表达较对照组明显上升(P0.001),而加入PMX53后,C5aR蛋白表达较PA组显著下降(P0.001);PA干预后,C5L2蛋白及mRNA表达较对照组增加(P0.001),而加入PMX53后,C5L2蛋白表达与PA组差异无统计学意义(P=0.978),而C5L2 mRNA表达较PA组明显上升(P0.001);PA组较对照组p38MAPK蛋白的表达增加(P=0.002),PA+PMX53组p38MAPK蛋白表达较PA组降低(P=0.004);PA干预后,IL-6浓度较对照组显著升高(P0.001),而PMX53干预后,PA+PMX53组较PA组IL-6浓度显著下降(P0.001)。结论 PA可能通过C5a-C5aR激活MAPK信号途径中的p38MAPK通路,从而诱发小胶质细胞炎症反应,而C5L2在此过程中可能发挥抗炎作用。     

脓毒症患者外周血miR-98-5p与全身炎症反应激活及预后的相关性研究

目的研究脓毒症患者外周血miR-98-5p与全身炎症反应激活及预后的相关性。方法选择2019年1月至2021年1月期间自贡市第四人民医院收治的102例脓毒症患者作为脓毒症组,同期体检的100例健康志愿者作为对照组,采用荧光定量PCR法检测外周血miR-98-5p的表达水平,采用Elisa法检测血清炎症细胞因子TNF-α、HMGB-1、IL-1β的含量,采用急性生理和慢性健康评分Ⅱ(APACHEII)、序贯性器官衰竭评分(SOFA)评分评估脓毒症病情,采用28d生存情况评估预后。结果脓毒症组患者外周血miR-98-5p的表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);脓毒症组中miR-98-5p表达≥中位数患者的APACHEII、SOFA评分低于miR-98-5p表达<中位数患者,差异有统计学意义(P<0.05);脓毒症组中miR-98-5p表达≥中位数患者的血清TNF-α、HMGB-1、IL-1β含量低于miR-98-5p表达<中位数患者,差异有统计学意义(P<0.05);经K-M曲线分析,脓毒症组中miR-98-5p表达≥中位数患者的28 d累积生存率高于miR-98-5p表达<中位数患者差异有统计学意义(P<0.05);外周血miR-98-5p表达水平对脓毒症患者28 d生存具有预测价值(P<0.05)。结论脓毒症患者外周血miR-98-5p表达降低与病情加重、全身炎症反应激活及预后不良有关。     

miR-374a-3p靶向Syk对ox-LDL诱导内皮细胞损伤及炎症反应的影响

目的探讨miR-374a-3p对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤及炎症反应的影响及作用机制。方法实验分为ox-LDL组、对照(Con)组、miR-NC组、miR-374a-3p组、anti-miR-NC组、anti-miR-374a-3p组、ox-LDL+miR-NC组、ox-LDL+miR-374a-3p组、ox-LDL+si-NC组、ox-LDL+si-Syk组、ox-LDL+miR-374a-3p+pcDNA3.1组、ox-LDL+miR-374a-3p+pcDNA3.1-Syk组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-374a-3p表达水平;蛋白质印迹(Western Blot)检测脾酪氨酸激酶(Syk)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白表达水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量水平;荧光素酶报告实验检测miR-374a-3p和Syk的靶向关系。结果 ox-LDL作用的HUVEC中miR-374a-3p低表达,Syk高表达;细胞活性显著降低,细胞凋亡率显著升高,TNF-α、IL-6含量显著升高(P<0.05)。过表达miR-374a-3p和抑制Syk表达抑制ox-LDL作用的HUVEC凋亡和炎症因子TNF-α、IL-6的释放。miR-374a-3p靶向调控Syk,过表达Syk逆转了miR-374a-3p对ox-LDL作用的HUVEC损伤及炎症因子释放的抑制作用。结论过表达miR-374a-3p可抑制HUVEC凋亡和炎症因子的释放,保护ox-LDL引起的HUVEC损伤及炎症反应,其机制可能与Syk有关。     

ATP在海马CA1区长时程增强中的作用及机制

目的探讨三磷酸腺苷(adenosine5'-triphosphate,ATP)在海马CA1区长时程增强(LTP)中的作用及机制。方法本研究采用海马在体电生理记录和免疫组织化学方法。在体电生理记录海马CA1区兴奋性突触后电位(field excitatory postsynaptic potentials,fEPSPs)以及高频刺激诱导的LTP,免疫组织化学观察海马CA1区小胶质细胞的激活情况。结果①侧脑室内给予ATP不影响基础性fEPSPs,但能显著抑制高频刺激诱导的LTP,高频刺激后fEPSPs平均幅度较生理盐水对照组明显降低。②侧脑室内给予P2X7受体拮抗剂oxidized ATP,可阻止ATP对海马CA1区LTP的抑制。③给予ATP后30 min,海马CA1区的小胶质细胞明显被激活;侧脑室内给予小胶质细胞抑制剂美满霉素或TNF-α中和抗体,均可阻止ATP对海马CA1区LTP的抑制。结论 ATP可能与P2X7受体结合,激活小胶质细胞抑制海马CA1区LTP,TNF-α参与此作用。     

ω-3多不饱和脂肪酸抑制大鼠创伤性脑损伤后小胶质细胞介导的炎症反应

目的　研究ω-3多不饱和脂肪酸对大鼠创伤性脑损伤(TBI)后神经细胞凋亡、脑水肿、小胶质细胞活化、炎症反应及神经功能的影响,以探讨ω-3多不饱和脂肪酸对大鼠TBI的保护及机制。方法　采用改良Feeney DM法建立大鼠TBI模型,将90只SD大鼠完全随机分为假手术组（Sham组）,TBI组,TBI+c-Jun氨基末端激酶（JNK）选择性激活剂 anisomycin组（TBI+Aniso组）;TBI+ω-3多不饱和脂肪酸组（TBI+ω-3组）,TBI+ω-3多不饱和脂肪酸+JNK选择性激活剂 anisomycin组（TBI+ω-3+Aniso组）,分别于伤后1、3、7 d进行神经行为学评分（mNSS）;采用干湿重法测损伤区脑组织脑水含量;TUNEL和免疫荧光等方法测定细胞凋亡和小胶质细胞活化特异标志物IBA-1的表达;PCR、Westerrn blot等检查脑组织炎症因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-1α、IL-1β、IL-6及上游JNK信号通路JNK、p-JNK分子表达水平的变化。结果　与同期Sham组比较,其余4组细胞凋亡、脑水肿、神经细胞凋亡和炎症反应明显增高（P＜0.05）;与TBI组比较,TBI+ω-3组大鼠创伤后脑水含量降低,尤其在脑损伤3 d后降低更为明显［(78.14±0.57)%比（82.31±0.81）%,P＜0.01］,神经功能评分相应的改善明显（P＜0.05）。ω-3多不饱和脂肪酸抑制神经细胞凋亡和小胶质细胞的活化;降低大鼠TBI后升高的炎症因子TNF-α、IL-1α、IL-1β、IL-6 mRNA及蛋白表达水平;同时抑制了炎症因子上游JNK信号通路的活化。结论　ω-3多不饱和脂肪酸明显减轻大鼠TBI后脑水肿的程度,抑制神经细胞凋亡,改善伤后神经行为,其机制可能是通过抑制JNK信号通路和小胶质细胞的活化,减轻小胶质细胞介导的中枢性炎症反应,降低TNF-α、IL-1α、IL-1β、IL-6的表达。     

miR-212-3p在乙肝病毒感染诱导的巨噬细胞激活中的作用机制

目的 探究miR-212-3p在乙肝病毒感染诱导的巨噬细胞激活中的作用及其机制。方法 CCK-8法检测不同浓度乙型肝炎E抗原(HBeAg)刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞活力,分别转染miR-212-3p mimic和miR-212-3p inhibitor,检测miR-212-3p mRNA相对表达量、细胞活性、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平及mRNA相对表达量,采用磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂预处理细胞后再用HBeAg刺激,检测PI3K/蛋白激酶B(Akt)信号通路蛋白表达。结果 RAW264.7细胞活力随HBeAg浓度增加而上升(P<0.05),HBeAg浓度为2 000 ng/ml时细胞活力最高,miR-212-3p mRNA相对表达量上调,24 h时达到峰值,随后降低(P<0.05); HBeAg刺激后,转染miR-212-3p mimic的细胞中miR-212-3p的mRNA相对表达量上调(P<0.05),且IL-6、TNF-α水平和mRNA相对表达量上升(P<0.05);渥曼青霉素预处理RAW264.7细胞后m...     

亚甲蓝对LPS诱导巨噬细胞炎性反应的影响

目的观察亚甲蓝对脂多糖(LPS)诱导小鼠RAW246.7巨噬细胞炎性反应因子表达和细胞NF-κB活性的影响,以初步探讨亚甲蓝在LPS诱导巨噬细胞炎性反应中的作用。方法体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,利用脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞建立体外内毒素炎性反应模型。进行实验分组:Ⅰ组(对照组):完全无血清培养基孵育;Ⅱ组(模型组):在无血清培养基中加入浓度为1 g/m L的LPS进行孵育;Ⅲ组(亚甲蓝组):完全无血清培养基中加入亚甲蓝20μmol/L,2 h后加入1 g/m L的LPS孵育,细胞培养24 h后:1实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)观察IL-6、IL-8、MCP-1 m RNA的表达;2酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中IL-6、IL-8、MCP-1蛋白水平;3荧光素酶报告实验(luciferase activity assay)检测细胞中NF-κB的活性。结果LPS刺激巨噬细胞后,细胞中炎性反应因子m RNA和蛋白表达增高,而亚甲蓝预处理能够减弱LPS对炎性反应因子的诱导作用;LPS可以诱导巨噬细胞NF-κB活化,亚甲蓝能够抑制NF-κB的激活。结论亚甲蓝可以通过抑制NF-κB的激活调控LPS诱导的炎性反应。     

内源性大麻素系统对孤独症谱系障碍异常神经炎症反应调控作用的研究进展

孤独症谱系障碍(ASD)是一种严重的神经发育障碍性疾病。近年来,世界各地ASD的患病率均呈上升趋势。目前,越来越多的证据表明,神经炎症反应可能是ASD的病因之一,包括炎性细胞因子异常表达和小胶质细胞异常激活等。内源性大麻素(eCB)系统是中枢神经系统调节的重要调节系统,可调控神经炎症反应,维持机体的免疫平衡。有研究证实,ASD体内存在eCB信号低表达,并且升高eCB信号可以纠正ASD的异常神经炎症反应,从而改善ASD样症状,因此,通过调节eCB系统抑制神经炎症反应可作为治疗ASD的新靶点。综上,本文对eCB系统-神经炎症-ASD三者之间的关系及调控作用进行简要概述。     

C5aR拮抗剂在油酸诱导的小胶质细胞炎性改变中的作用

目的观察油酸(oleic acid,OA)及C5a受体(C5aR)拮抗剂(PMX53)干预后小胶质细胞的炎性改变,探讨C5a-C5aR在油酸诱导的小胶质细胞炎症中的作用。方法取新生1 d龄小鼠,分离脑组织,原代培养小胶质细胞并进行分离纯化及鉴定。纯化小胶质细胞随机分成5组,分别为正常对照组、OA 100μmol/L处理组、OA 100μmol/L+PMX53 100 nmol/L处理组、OA 200μmol/L处理组、OA 200μmol/L+PMX53 100 nmol/L处理组。应用Western印迹、ELISA法检测不同浓度OA及OA+PMX53干预后小胶质细胞Iba-1、C5aR蛋白及TNF-α表达变化。结果成功培养小胶质细胞,且纯度≥99%。不同浓度OA干预后,Iba-1、C5aR蛋白表达及TNF-α浓度较对照组明显升高(P<0.01);OA+PMX53干预组较OA组Iba-1及TNF-α浓度有所下降(P<0.01);OA+PMx53干预组较OA组C5aR蛋白表达有所下降(OA100 vs.OA100+PMX53,P<0.05,OA200 vs.OA200+PMX53,P<0.01)。200μmol/L OA干预组较100μmol/L OA干预组Iba-1、C5aR蛋白表达及TNF-α浓度高(P<0.01)。结论应用C5aR拮抗剂可以抑制油酸诱导的小胶质细胞的炎症反应,提示C5a-C5aR参与了油酸诱发的炎症反应,推测C5aR拮抗剂在神经系统炎性损伤中具有神经保护作用。     

竹荪醇提物对脂多糖诱导的RAW264.7细胞炎症反应的影响

目的探讨竹荪醇提物对LPS诱导的RAW264.7细胞肿瘤坏死因子(TNF-α)、一氧化氮(NO)的分泌,TNF-α、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)的m RNA水平以及核转录因子(NF-κB)p65蛋白表达的影响及可能的抗炎机制。方法以不同浓度(100、200、400μg/ml)的竹荪醇提物作用于LPS(1μg/ml)诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞,采用ELISA法和Griess法检测炎性介质TNF-α和NO的分泌量;RT-PCR法测定促炎介质TNF-α、iNOS、IL-6和抗炎介质IL-10的m RNA水平;Western blot检测NF-κB p65蛋白的表达水平。结果与LPS组相比,200、400μg/ml的竹荪醇提物能显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞TNF-α和NO的释放(P0.01);且不同程度抑制RAW264.7细胞中促炎介质iNOS、TNF-α和IL-6的m RNA表达水平(P0.01),剂量依赖性的促进抗炎介质IL-10的m RNA表达水平(P0.01);不同浓度的竹荪醇提物均可显著抑制LPS诱导RAW264.7细胞中NF-κB p65蛋白的表达,差异有统计学意义(P0.01)。结论竹荪醇提物可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞TNF-α和NO的释放,其抗炎作用的发挥可能与抑制NF-κB p65蛋白的表达,从而调节炎性介质的基因水平有关。     

白细胞介素-33在外周血中表达变化及调控肺上皮细胞在肺炎支原体肺炎患儿发病中的作用

目的探讨肺炎支原体肺炎(MPP)患儿体内白细胞介素(IL)-33表达水平与其在疾病发展中的作用。方法将60例MPP患儿按照病情严重程度分为MPP组30例及重症MPP组30例,同期选取年龄相近的健康儿童30例作为对照组。利用荧光定量PCR技术及酶联免疫技术检测IL-33在患儿及对照儿童外周血及外周血单核细胞中的表达差异,利用荧光定量PCR技术检测IL-33上游炎性小体信号通路变化,利用体外表达的IL-33刺激肺上皮细胞研究IL-33在炎症发生发展过程中的作用。结果 MPP组及重症MPP组患儿外周血中IL-33蛋白表达水平及外周血单核细胞中IL-33 mRNA的表达水平远高于对照组儿童,且重症组患儿表达量更高,差异均有统计学意义(P0.05)。MPP组及重症MPP组患儿外周血单核细胞中炎性小体信号通路活性显著上调且NLRP3等相关基因表达量远高于对照组儿童,差异有统计学意义(P0.01)。MPP组及重症MPP组患儿NLRP3表达量与IL-33表达量具有正相关关系(r~2=0.685 2,P0.01)。体外表达的IL-33能够明显诱导支气管上皮细胞产生及分泌IL-6等炎症因子,并促进炎症的发生发展。结论 IL-33在MPP患儿中表达量显著高于正常人群,且IL-33的表达量可以作为判别MPP病症严重与否的检测标志物。IL-33产生于单核细胞炎性小体信号通路激活,进一步促进肺上皮细胞产生炎症因子并促进炎症的发生发展。     

从神经科学角度分析脱髓性疾病——免疫细胞，神经胶质细胞，神经细胞三者之间的相互作用

小胶质细胞（Microglia ）对炎症性脱髓鞘性病变-多发性硬化症（MS）的发展起到至关重要的作用。作为抗原呈递细胞,小胶质细胞会对炎性淋巴细胞发挥作用,并产生炎性细胞因子,谷氨酸和活性氧。现在大家普遍认为神经退行性疾病是一种脱髓鞘病变,它会影响到多发性硬化症的预后表现。在神经退行性疾病-多发性硬化症的早期阶段,神经树突和轴突的串珠状肿胀的出现是神经病理学的标志。由小胶质细胞产生的谷氨酸和活性氧能启动串珠形成。最近我们的研究表明,当多发性硬化症发症时,小神经胶质细胞能减少细胞死亡及诱导神经营养因子分泌,而且产生抗炎症细胞因子和抗氧化剂酶来发挥神经保护作用。神经细胞被认为是小胶质细胞的被动目标,同时它也能够通过各种通路来控制小胶质细胞的活性,包括：细胞因子和趋化因子。受损的神经细胞一方面能分泌可溶性不规则趋化因子（sFKN;CX3CR1）并促进小胶质细胞吞噬神经细胞的碎片,同时也诱导小胶质细胞产生抗氧化血红素加氧酶-1（HO-1）。另外,我们还发现神经细胞分泌的 IL-34可以诱导小胶质细胞的神经保护作用,同时也发现星形细胞也具有神经保护作用。由星形细胞产生的IL-33能诱导小胶质细胞的活化,但是,星形细胞的受体-Toll样受体却会诱导神经毒性分子分泌。因此,进一步探讨神经胶质细胞和神经细胞之间的良性互动的平衡关系,将来对于探讨神经退行性疾病的治疗策略来说是至关重要的。     

鱼藤酮下调对BV-2小胶质细胞中Drosha蛋白水平和白介素-1β表达影响的研究

目的在鱼藤酮处理BV-2小胶质细胞后,观测细胞中Drosha蛋白水平的变化以及相关炎症因子的表达改变。方法在不同浓度及时间的鱼藤酮处理后,用蛋白免疫印迹检测细胞中Drosha的蛋白水平,同时通过荧光定量PCR的方法检测Drosha下游miR-181a及其靶向炎症因子白介素-1β的表达。随后,在使用miRNA mimics补偿miR-181a的水平降低后,进一步观测白介素-1β的表达改变。结果在鱼藤酮处理BV-2小胶质细胞后,Drosha蛋白水平呈现为浓度和时间依赖地降低,同时,其下游miR-181a的表达水平也被下调,而miR-181a的靶向炎症因子白介素-1β的表达增强。在使用miRNA mimics增加miR-181a的水平后,可抑制白介素-1β的表达增强。结论鱼藤酮在BV-2小胶质细胞通过影响Drosha蛋白及其下游miR-181a的水平,调节白介素-1β的表达。     

lncRNA DDX11-AS1靶向miR-299-3p调控宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)DDX11反义RNA1(DDX11 antisense 1,DDX11-AS1)靶向miR-299-3p对宫颈癌细胞增殖、迁移侵袭的影响。 方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测宫颈癌组织、癌旁组织中DDX11-AS1和miR-299-3p表达水平。将小干扰RNA阴性对照(si-NC组)、DDX11-AS1小干扰RNA组(si-DDX11-AS1组)、miR-299-3p模拟物组(miR-299-3p组)、miRNA模拟物阴性对照组(miR-NC组)、si-DDX11-AS1+miRNA抑制物阴性对照组(si-DDX11-AS1+anti-miR-NC组)、si-DDX11-AS1+miR-299-3p抑制物组(si-DDX11-AS1+anti-miR-299-3p组)分别转染HeLa细胞。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)、transwell实验分别检测细胞活力、迁移侵袭能力。双荧光素酶报告实验和RT-qPCR验证DDX11-AS1对miR-299-3p的靶向调控作用。 结果 与癌旁组织相比,宫颈癌组织中DDX11-AS1表达显著升高,miR-299-3p表达显著降低(P<0.05)。与si-NC组相比,si-DDX11-AS1组HeLa细胞活力、迁移和侵袭细胞数显著降低(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-299-3p组HeLa细胞活力、迁移和侵袭细胞数显著降低(P<0.05)。与si-DDX11-AS1+anti-miR-NC组比较,si-DDX11-AS1+anti-miR-299-3p组HeLa细胞活力、迁移和侵袭细胞数显著升高(P<0.05)。miR-299-3p是DDX11-AS1的靶基因,DDX11-AS1负调控miR-299-3p表达。 结论 宫颈癌中DDX11-AS1呈高表达。沉默DDX11-AS1通过上调miR-299-3p能够降低宫颈癌细胞增殖、迁移侵袭能力。     

小胶质细胞在缺血性脑损伤中的作用

正常情况下,小胶质细胞处于静息或休眠状态,当中枢神经系统遭受到伤害刺激时,小胶质细胞作为中枢神经系统固有的免疫效应细胞,迅速被激活并发挥“双刃”作用。缺血性脑损伤时小胶质细胞反应的激活极其复杂,现将其的激活的机制及在缺血脑损伤中的作用综述如下。1小胶质细胞激活的形态学中枢神经系统中的小胶质细胞来源于胚胎期的骨髓单核细胞,在哺乳动物大脑发育胚胎期或新生期进入中枢神经系统,为圆形或梭形的阿米巴样小胶质细胞,主要分布于大脑皮层、胼胝体、皮层下白质、内被盖、穹隆、小脑白质、视网膜等区域。阿米巴样小胶质细胞可表达非特异性单核巨噬细胞抗原、MHC I类抗原及其他活化标志抗原,还可表达其他辅助刺激信号分子细胞间黏附因子(ICAM-1/LFA-1)和LFA-3等,可以有效的刺激T细胞活化[1]。此时阿米巴样小胶质细胞胞浆丰富,有较多的吞噬体及溶酶体,具有活跃的细胞吞噬、水解作用,可清除脑内细胞外氧化蛋白,吞噬细胞碎屑和溃变的髓鞘,还可产生超氧阴离子等自由基,发挥细胞杀伤功能[2]。大脑发育成熟后阿米巴样小胶质细胞在细胞外基质(ECM)等因子的调节作用下分化为分枝状活性低的小胶质细胞[3],表现为胞浆浓缩、伸出多个细长突起,广...