β-榄香烯抗肿瘤作用机制研究概况

β-榄香烯（Elemene）是从姜科植物莪术中提取的萜烯类化合物,近30年来对莪术抗肿瘤的作用机制进行了广泛的研究,基础及临床实验等研究结果表明,β-榄香烯是莪术抗肿瘤作用的主要物质基础,具有抗瘤谱广、疗效确切、毒副作用小等特点。诱导凋亡是β-榄香烯抗肿瘤作用的主要机制,同时β-榄香烯还具有抑制转移、抗多药耐药、抗肿瘤免疫、化疗增效、放疗增敏等作用,现就β-榄香烯抗肿瘤作用机制进行综述。     

β-榄香烯抗肿瘤作用和抑制微管蛋白体外聚合的研究

目的探讨β-榄香烯对微管蛋白体外聚合作用的影响，阐明其抗肿瘤的作用机制。方法采用MTT法测定β-榄香烯对体外培养的A549、WI38细胞增殖、生长的抑制作用；用浊度法测定β-榄香烯对提取的牛脑微管蛋白体外聚合的抑制作用。结果β-榄香烯能明显抑制A549、WI38细胞增殖、生长。其抑制作用呈浓度与时问依赖性；对A549、WI38细胞增殖的半数抑制率(1C50)分别为2．73μmol/L、3．53μmol/L。β-榄香烯明显抑制体外微管蛋白的聚合，并与药物浓度呈一定的线性关系，对微管蛋白体外聚合的半数抑制率(IC50)为5．12μmol/L。结论β-榄香烯对A549、WI38细胞增殖、生长有明显的抑制作用．β-榄香烯抑制微管蛋白的聚合是其抗肿瘤作用的重要机制之一，并与微管蛋白稳定剂紫杉醇的作用机理不同。     

榄香烯对多药耐药人红白血病细胞株的影响

[目的]探讨抗肿瘤药β-榄香烯对多药耐药细胞系的影响。[方法]利用MTT,荧光染料Hoechst33342染色、透射电镜的方法观察β-榄香烯对多药耐药性(mdr)人红白血病细胞株K562/ADM细胞的生长和凋亡的影响。[结果]β-榄香烯对K562/ADM细胞的抑制作用在5~40μg/mL的药物浓度范围内呈上升趋势,加药组24~72 h范围内细胞凋亡率不断增加,浓度40μg/mL 72 h时达高峰62.73%±,二者呈现药物浓度和作用时间依赖性(P<0.05或P<0.01)。[结论]诱导细胞凋亡是β-榄香烯抗肿瘤细胞作用机制之一。     

双光谱法研究β-榄香烯甘氨酸与牛血清白蛋白的相互作用

目的:研究莪术抗肿瘤有效成分β-榄香烯甘氨酸衍生物与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)相互作用,揭示β-榄香烯甘氨酸在体内的贮存、转运及作用机制,为阐明中药药效物质基础提供实验依据。方法:对β-榄香烯进行结构修饰得到β-榄香烯甘氨酸。利用紫外-可见分光光度法、荧光光谱法及同步荧光光谱法,研究β-榄香烯甘氨酸与BSA的相互作用。结果:β-榄香烯甘氨酸与BSA作用后引起BSA的紫外-可见吸收光谱及内源性荧光光谱变化,二者之间作用力类型为疏水作用。结论:β-榄香烯甘氨酸与BSA之间具有较强的相互作用,形成荧光较弱的复合物,血清白蛋白作为载体可以将β-榄香烯甘氨酸运输到特定部位,发挥药效。     

β－榄香烯抗肿瘤作用的实验研究 Ⅱ．β－榄香烯对Ca761－86乳腺癌的作用

本实验以小鼠乳腺癌Ｃａ７６１－８６细胞系为模型研究了β－榄香烯的抗肿瘤作用。β－榄香烯能直接引起肿瘤细胞变性坏死，作用强度大于莪术油及Ｔｗｅｅｎ８０。瘤内多点注射β－榄香烯对Ｃａ７６１－８６的生长有抑制作用。结果表明β－榄香烯是莪术油中所含的抗癌有效成分之一。     

双光谱法研究β-榄香烯甘氨酸与牛血清白蛋白的相互作用

目的:研究莪术抗肿瘤有效成分β-榄香烯甘氨酸衍生物与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)相互作用,揭示β-榄香烯甘氨酸在体内的贮存、转运及作用机制,为阐明中药药效物质基础提供实验依据。方法:对β-榄香烯进行结构修饰得到β-榄香烯甘氨酸。利用紫外-可见分光光度法、荧光光谱法及同步荧光光谱法,研究β-榄香烯甘氨酸与BSA的相互作用。结果:β-榄香烯甘氨酸与BSA作用后引起BSA的紫外-可见吸收光谱及内源性荧光光谱变化,二者之间作用力类型为疏水作用。结论:β-榄香烯甘氨酸与BSA之间具有较强的相互作用,形成荧光较弱的复合物,血清白蛋白作为载体可以将β-榄香烯甘氨酸运输到特定部位,发挥药效。     

β-榄香烯对肿瘤细胞上清液诱导的大鼠骨髓来源内皮祖细胞增殖与凋亡的影响

目的观察β-榄香烯对肿瘤细胞上清液诱导的大鼠骨髓来源内皮祖细胞(EPCs)增殖与凋亡的影响,探讨β-榄香烯对EPCs参与肿瘤血管形成过程的作用。方法原代培养大鼠骨髓来源EPCs经胃腺癌细胞株SGC-7901培养上清液诱导EPCs 12h后,分为浓度效应组(β-榄香烯0、5、10、20mg.L-1干预48h)和时间效应组(20mg.L-1β-榄香烯干预0、12、24、48h)。检测各组EPCs的增殖和凋亡率。结果随着β-榄香烯剂量的增加和作用时间的延长,EPCs的增殖显著下降(P<0.05),当β-榄香烯浓度为5mg.L-1及作用时间为12h时,EPCs凋亡率变化不明显,当β-榄香烯浓度增加至10mg.L-1及作用时间延长为24h时,EPCs凋亡率显著上升(P<0.05)。结论β-榄香烯通过诱导EPCs的凋亡抑制其增殖,并可削弱EPCs在肿瘤血管发生中的作用。     

不同因素处理瘤苗主动免疫及其体内外再致敏脾细胞抗瘤效应的比较研究

用β-榄香烯,MMC、戊二醛单独及不同组合处理的 L615瘤苗主动免疫615系小鼠,比较其免疫保护作用,优化出安全高效且能长久保存的瘤苗:β-榄香烯-MMC-戊二醛瘤苗。瘤苗免疫组攻击后存活小鼠经体内外瘤苗再致敏其免疫脾细胞的抗瘤效应提高,表现为对晚期 L615白血病鼠进行 AIT,特别是 ACIT 有明显疗效,对 L615细胞也显示相对特异性的 CTL、CDC、ADCC体外细胞毒活性。     

沉默Beclin1基因对β-榄香烯抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖与诱导自噬的影响

目的探讨Beclin1基因对β-榄香烯抗人胃癌SGC-7901细胞增殖及自噬诱导的影响。方法用前期实验构建成功的GV112-Beclin1-shRNA1(short hairpin RNA,短发夹RNA)慢病毒载体感染人胃癌SGC-7901细胞。采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测β-榄香烯对SGC-7901细胞增殖的抑制作用,以及沉默Beclin1基因后对β-榄香烯抗增殖能力的影响。免疫蛋白印迹(Western blot)检测自噬相关蛋白LC3-II、P62的表达,评价β-榄香烯作用SGC-7901后的自噬水平和Beclin1基因沉默对β-榄香烯诱导自噬的影响。结果 MTT法显示,β-榄香烯能够抑制胃癌SGC-7901细胞增殖,抑制作用随浓度的增加而递增(浓度为20、50、100μg/mL比0μg/mL时,抑制率为21.5%、31.7%、37.4%比0,P<0.05);沉默Beclin1基因后β-榄香烯抑制胃癌SGC-7901细胞抑制率增加(42.3%比36.1%,P<0.05)。Western blot法显示,β-榄香烯能诱导SGC-7901细胞发生保护性自噬,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ表达上调,P62蛋白表达下降,沉默Beclin1基因可抑制β-榄香烯对SGC-7901细胞保护性自噬的增强,LC3-Ⅱ蛋白表达水平下降,P62蛋白表达增加。结论β-榄香烯可诱导胃癌SGC-7901细胞发生保护性自噬,下调Beclin1基因有助于降低保护性自噬的发生,从而增强β-榄香烯的抗癌效果。     

β-榄香烯与核酸的结合作用

本文中用DNA热变性实验及荧光分析法研究了β-榄香烯与小牛胸腺DNA的结合作用．热变性实验表明β-榄香烯可使小牛胸腺DNA的热变性温度Tm值下降2℃，小牛胸腺DNA(30μg／ml)与β-榄香烯(20μg／ml)温育后．激发波长为3．4nm,发射波长为358nm,其荧光强度为0．315，此时小牛胸腺DNA(30μg／ml)的荧光强度仅为0．020,用酵母的t-RNA与-β-榄香烯实验也取得类似的结果。对β-榄香烯的抑癌机理用量子化学CNDO／2方法计算的结果进行了探讨。β-榄香烯的前沿轨道能级ELUMO=0．0168 au EHOMO=03239au鸟嘌呤的ELUMO=0．1629au其EHOMO=-0．25960au胸腺嘧啶的ELUMO=0．1324au．其EHUMO=0.3550au脲嘧啶的ELUMO-=0．0888au其EHOMO=-03940au。上述计算结果提示β-榄香烯与核酸碱基的前沿轨道之间的相互作用；因β-榄香烯上的一个甲基带有较正的静电荷，该甲基可能与核酸碱基上的氮原子存在分子间选择性疏水作用。     

榄香烯及榄香烯复合瘤苗对小鼠腹腔巨噬细胞功能影响的分析

目的：分析小鼠腹腔巨噬细胞（peritoneal exudative macrophage,PEMψ）在榄香烯复合瘤苗免疫保护效应中的作用。方法：用血红蛋白释放法，硝酸还原法，MTT法等检测榄香烯及榄香烯复合瘤苗对小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬，一氧化氮的产生，杀瘤以及对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和粗提淋巴因子刺激的反应等功能的影响。结果；低浓度（5，0.5μg/ml）的榄香烯和榄香烯复合瘤苗在体外可以增强PEMψ的活性，但瘤苗及其HSP70-肿瘤肽免疫后其PEMψ的上述功能未见变化。结论：榄香烯复合瘤苗的免疫保护效应并非通过PEMψ而实现，而短小棒状杆菌作为榄香烯复合瘤苗的佐剂，则可以明显增强PEMψ的功能。     

β-榄香烯衍生物抗肿瘤作用的研究进展

<正>β-榄香烯(elemene)是我国自行姜科植物温郁金(莪术)中提取的二类非细胞毒性抗肿瘤药物。大量研究结果表明β-榄香烯是抗肿瘤作用的主要物质基础,具有广谱、低毒、高效等优点,主要机制是诱导肿瘤细胞凋亡,同时还能抑制转移、抗肿瘤细胞耐药、增强机体免疫、增强化疗、放疗效果等。但β-榄香烯分子中只含C、H两种元素,造成其水溶性差,不利于跨膜转运,生物利用度低。在其结构中引入亲水基团,增强水溶性,     

β-榄香烯抑制人骨髓瘤细胞RPMI-8226增殖的实验研究

目的 研究β-榄香烯对人骨髓瘤RPMI-8226细胞增殖、周期和凋亡的影响.方法 用噻唑蓝(MTT)法检测β-榄香烯对骨髓瘤RPMI-8226细胞增殖的影响;Annexin V/ PI双标流式术检测β-榄香烯对骨髓瘤RPMI-8226细胞周期、细胞凋亡的影响;Hoechst33342/PI 双染荧光显微镜观察β-榄香烯处理后骨髓瘤RPMI-8226细胞形态学变化.结果 β-榄香烯对RPMI-8226骨髓瘤细胞生长具有显著抑制作用,呈浓度和时间依赖性.β-榄香烯处理后,与对照组相比G0/G1细胞比例显著升高,而S、 G2/M细胞比例降低.β-榄香烯作用48 h可诱导骨髓瘤细胞凋亡,凋亡率随药物浓度而递增.结论 β-榄香烯可有效抑制人骨髓瘤细胞增殖;其抑制作用与细胞周期阻滞和细胞凋亡激活有关.     

NDV/β-榄香烯瘤苗的临床应用及免疫效果的近期评价(附8例报告)

本文首次报道了应用新城鸡疫病毒(NDV)/β-榄香烯瘤苗对8例恶性肿瘤病人进行特异性主动免疫治疗。对瘤苗的临床应用方法、全身和局部反应情况以及近期抗瘤免疫效应等问题作了探讨。     

β-榄香烯对紫杉醇耐药肺癌细胞的抑制作用及Wnt/β-catenin信号通路的影响

  目的：研究β-榄香烯对紫杉醇耐药肺腺癌细胞A549/Taxol的抑制作用及其对Wnt/β-catenin信号转导通路的影响。  方法：采用浓度梯度诱导法制备紫杉醇耐药肺腺癌细胞株A549/Taxol。以不同浓度β-榄香烯作用于A549/Taxol细胞48 h,采用CCK8法检测细胞增殖;实时定量PCR法检测多药耐药基因(MDR1)及β-catenin、Survivin 基因的mRNA表达;Western blot法检测A549/Taxol细胞P糖蛋白(P-gp)及β-catenin、Survivin的蛋白表达。  结果：与对照组比较,β-榄香烯呈浓度相关性抑制A549/Taxol细胞增殖;β-榄香烯(20、40、80 μg/ml)作用48 h后,A549/Taxol细胞MDR1、β-catenin、Survivin mRNA及蛋白表达水平均明显下降(P<0.01)。  结论：β-榄香烯可能通过下调β-catenin、Survivin mRNA及其蛋白的表达,影响 Wnt/β-catenin 信号转导通路,发挥抑制A549/Taxol细胞增殖的作用;β-榄香烯对肺腺癌细胞紫杉醇耐药性具有拮抗作用,该作用可能通过抑制Wnt/β-catenin信号转导通路实现。     

β-榄香烯对肿瘤细胞上清液诱导的大鼠骨髓来源内皮祖细胞VEGF及VEGFR-2表达的影响

目的 观察β-榄香烯对肿瘤细胞上清液诱导的大鼠骨髓来源内皮祖细胞(EPCs)血管内皮生长因子(VEGF)及其受体mRNA表达的影响,进一步探讨β-榄香烯在抑制肿瘤血管形成过程中的作用.方法 原代培养大鼠EPCs.胃腺癌细胞株SGC-7901培养上清液诱导EPCs 12 h后,分别用0、5、10、20 μg/mL β-榄香烯干预48 h,用20 μg/mL β-榄香烯干预0、12、24、48 h.采用RT-PCR法检测各组EPCs VEGF和VEGFR-2的mRNA表达水平.结果 随着β-榄香烯浓度及作用时间的增加,EPCsVEGFR-2的表达明显下降;当β-榄香烯浓度增加至10 μg/mL及作用时间延长至24 h,EPCs VEGF的表达水平较对照组明显降低(P＜0.05).结论 β-榄香烯可降低EPCs VEGF及VEGFR-2 mRNA的表达水平,从而减少EPCs的动员,进一步抑制EPCs参与肿瘤血管的形成.     

β-榄香烯单取代胺衍生物的合成及体外抗肿瘤活性

目的:设计合成β-榄香烯单取代胺类衍生物,并探讨该类衍生物的体外抗肿瘤活性。方法:通过亲核取代反应合成β-榄香烯单取代胺类衍生物,采用WST-1法对它们的体外抗肿瘤活性进行评价。结果:合成得到了8个目标化合物(均未见文献报道),并利用1H NMR,MS,IR对其结构进行了表征。细胞试验表明:β-榄香烯单取代胺类衍生物对人白血病细胞(K562细胞)及人宫颈癌细胞(HeLa细胞)的体外抗增殖活性与β-榄香烯相比有了明显提高。结论:β-榄香烯单取代胺衍生物的抗肿瘤活性较β-榄香烯明显提高。     

β-榄香烯联合碘油栓塞对兔VX2肝癌凋亡、增殖的影响

目的 观察β-榄香烯.碘油不同给药方式对兔肝移植瘤残余肿瘤细胞凋亡、增殖的影响.方法 34只家兔肝内肿瘤种植后2周经MRI检查证实后,随机分为对照组:A组(6只生理盐水2ml 10min),治疗组:B组(7只碘油单纯栓塞0.5ml 10min),C组(7只β-榄香烯冲击灌注50mg 10min),D组(7只β-榄香烯持续灌注50mg 5hour),E组(7只碘油0.5ml+β-榄香烯50mg栓塞灌注10min)5组.实验兔介入治疗后2周处死,取全部肿瘤组织,采用原位末端标记法检测肿瘤细胞的捧亡指数,免疫组化方法测定肿瘤细胞增殖细胞核抗原的表达. 结果 各组的凋亡指数和增殖指数分别为1.63±0.24,2.3 5±0.73,1.94±0.28,2.41±0.40,3.50±0.54和77.3±5.9,57.1±6.8,73.4±6.7,63.0±9.6,58,0±5.0.两者存在负相关. 结论 1.β-榄香烯持续动脉灌注治疗效果好于一次性冲击灌注;2.β-榄香烯碘油栓塞治疗比单纯碘油栓塞及β-榄香烯持续动脉灌注效果好,可以取得较高的凋亡指数和较低的增殖指数.3.促进肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖是肝动脉化疗栓塞术抗肿瘤作用的分子机制之一.     

β-榄香烯对肺腺癌A549和H460细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨β-榄香烯对肺腺癌A549和H460细胞增殖和凋亡的影响。方法:应用不同浓度的β-榄香烯干预A549和H460细胞后,台盼蓝拒染试验和MTT试验检测肿瘤细胞的增殖,流式细胞术检测A549细胞凋亡率,Western Blot法检测凋亡相关蛋白的表达。结果:不同浓度β-榄香烯能抑制肺腺癌A549和H460细胞的增殖,且呈剂量与时间依赖性,β-榄香烯干预后的A549细胞凋亡率明显升高,其相关抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-xl表达下调。结论:β-榄香烯可抑制肺腺癌A549和H460细胞的增殖及诱导其凋亡,其作用机制可能与下调Bcl-2和Bcl-xl有关。     

β-榄香烯对HepG2和HT-29细胞体外抗癌作用的实验研究

目的 探讨β-榄香烯对肝癌和结肠癌的作用,为临床上利用β-榄香烯治疗肿瘤提供理论依据.方法 体外培养HepG2肝癌细胞和HT-29结肠癌细胞,用生长曲线和MTT法观察β-榄香烯对两种细胞生长的影响.结果 β-榄香烯组在培养的第6d,第7d、第8d能显著抑制HT-29细胞增殖;β-榄香烯在培养的第6d能显著抑制Hep02细胞增殖;在第2d,在第3d、在第4d,与对照组相比,β-榄香烯对HT-29和HepG2细胞增殖的抑制作用显著(P<0.05).结论 β-榄香烯能明显抑制体外培养的HT-29和HepG2细胞生长.