小鼠中两种感觉功能评价方法的比较

目的比较热板测痛试验与up-down测试机械痛这两种感觉功能评价方法的稳定性、准确性。方法用10只体重20~25 g的雄性C57BL/6J小鼠,分别用智能热板测痛仪、Von Frey Hair Test纤维丝测痛仪进行热痛的反应潜伏期、50%机械性撤足阈值的测试,比较这两种感觉功能评估方法的稳定性、准确性。结果 3次测量的热痛的反应潜伏期分别为26.24±7.36 s、22.28±7.78 s、20.80±6.85 s,差异无统计学意义(P0.05);左足3次测量的机械性撤足阈值分别为:2.69±1.22 g、2.71±1.19 g、2.58±1.15 g,差异无统计学意义(P0.05);右足3次测量的机械性撤足阈值分别为:2.97±1.07 g、2.99±1.03 g、2.99±1.04 g,差异无统计学意义(P0.05)。结论 3次测量的热痛之间无明显差异,3次测量的左右足机械痛之间无明显差异。     

鞘内注射辣椒素对恩氟醚和七氟醚镇痛作用的影响

目的 研究瞬时感受器电位香草酸受体1 (transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1),即辣椒素受体,在吸入麻醉药恩氟醚(enflurane,Enf)和七氟醚(sevoflurane,Sev)镇痛效果中的作用. 方法 实验分热板法和扭体法两轮进行,每轮实验昆明小鼠120只,完全随机法按腹腔注射(热板法)或皮下注射(扭体法)不同试剂分为生理盐水组、Enf组、Sev组三大组,建立小鼠注射吸入麻醉药镇痛模型.每大组再根据鞘内注射溶媒或不同剂量辣椒素(2.5、5、10 ng)分为4个亚组,观察鞘内注射不同剂量TRPV1激动剂辣椒素对Enf、Sev镇痛小鼠痛阈的影响. 结果 鞘内注射辣椒素2.5、5、10 ng对清醒小鼠热板法痛阈(pain threshold in hot-plate test,HPPT)和扭体次数的影响差异无统计学意义(P＞0.05);鞘内注射辣椒素2.5、5、10 ng可减少Enf、Sev镇痛小鼠HPPT(P＜0.05),增加扭体反应次数[Enf组:(22±7)、(24±5)、(29±6)次比(16±6)次;Sev组:(21±6)、(23±7)、(28±4)次比(13±5)次](P＜0.05). 结论 脊髓的TRPV1可能是吸入麻醉药Enf和Sev镇痛作用的重要靶位.     

鞘内注射Roscovitine对小鼠骨癌痛行为学的影响

目的 探讨鞘内给予细胞周期依赖性激酶5(cyclin-dependent kinases,Cdk5)特异性拮抗剂Roscovitine对小鼠骨癌痛行为学的影响.方法 24只C3H/Hej 小鼠采用随机数字表法随机分为3组,S组(假手术后14 d+溶媒)、C组(接种后14d+溶媒)、R组(接种后14 d+Roscovitine),每组8只.C组和R组将含2×105个纤维肉瘤NCTC 2472细胞的最小必需培养基(α-MEM)20μl注射到小鼠右侧股骨远端骨髓腔内,制作骨癌痛模型.S组只注入不含肿瘤细胞的α-MEM.术后14 d,R组小鼠鞘内注射含有20μg Roscovitine的二甲基亚砜(DMSO)5μl,C组及S组小鼠鞘内注DMSO 5 μl.观察给药前及给药后1、6、24、48、72 h检测小鼠痛行为学的变化:机械缩足阈值(paw uithdrawal mechanical threshold,PMWT)和热缩足潜伏期(Paw withdrawal thermal latency,PWTL).结果 各组术前基础机械缩足阈值及热缩足潜伏期比较差异无统计学意义(P＞0.05).接种后7 d,C组PMWT(1.08±0.24)g,与S组(1.85±0.28)g相比明显降低(P＜0.05);接种后10 d,C组PTWL(12.7±1.4)s较S组(18.6±2.1)s明显缩短(P＜0.05),C组小鼠的痛行为学随时间逐渐加重,与S组小鼠比较差异有统计学意义(P＜0.05);与C组及给药前基础值相比,鞘内注射Roscovitine 20μg后6 h PMWT(0.70±0.19)g显著增加(P＜0.05),PTWL(14.16±1.07)s显著延长(P＜0.05),并随时间逐渐增加,12 h达最大值,后逐渐降低,72 h降低到C组水平.结论 鞘内注射Roscovitine可有效缓解小鼠骨癌痛.     

不同剂量μ受体拮抗剂CTOP对瑞芬太尼诱发痛觉过敏的影响

目的 观察不同剂量的CTOP对瑞芬太尼引起的切口痛大鼠痛觉过敏的影响.方法 采用完全随机法将30只SD雄性大鼠随机为5组(每组6只):正常组(A组);切口痛组(B组);切口痛+瑞芬太尼组(C组);切口痛+瑞芬太尼+CTOP低剂量组(D组);切口痛+瑞芬太尼+CTOP高剂量组(E组).测定各组大鼠基础状态下(T0)的热缩足反射潜伏期(pawwithdrawal thermal latency,PWTL)后,以5％水合氯醛350 mg/kg大鼠腹腔麻醉,A、B、C组尾静脉注射生理盐水0.4 ml,D、E组分别注射CTOP 0.5 μg/kg、0.5 mg/kg,溶于0.4 ml生理盐水内.给药结束10 min后,除A组外全部于右后爪做切口,同时由尾静脉以0.8 ml/h的速度40 μg/kg的剂量分别给A、B组泵生理盐水,C、D、E组泵瑞芬太尼,各30 min.术后2(T1)、24 h(T2)测定PWTL,处死大鼠取脊髓,用酶联免疫法(ELISA)测定强啡肽表达. 结果 T1、T2时间点C组PWTL结果[(10.2±3.0)、(6.2±2.6)s]与A组[(13.3±2.4)、(13.4±2.2)s]、B组[(13.5±2.7)、(11.5±4.1)s]比较,差异有统计学意义(P＜0.05),PWTL时间缩短;且C组强啡肽结果(172±17) ng/L与A、B组(78±9)、(120±10) ng/L比较,差异有统计学意义(P＜0.05),强啡肽表达增多;D、E两组T2的PWTL值和强啡肽结果与C组比较,差异均有统计学意义,PWTL时间延长,强啡肽表达减少;D、E两组强啡肽表达比较,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 在大鼠切口痛模型中,瑞芬太尼导致了切口周围组织痛觉过敏;应用μ受体拮抗剂可以缓解痛觉过敏,低剂量的效果更加显著.     

急性子提取物抗炎镇痛作用的实验研究

目的探讨中药急性子的抗炎镇痛效果，为临床合理应用提供理论依据。方法采用二甲苯致小鼠耳肿胀、冰醋酸致小鼠扭体反应、小鼠热板法、蛋清致大鼠足肿胀和肉芽肿实验观察急性子提取物的抗炎镇痛效果。结果与模型对照组比较，急性子水提物中、大剂量组小鼠扭体次数明显减少（P＜0.05），急性子水提物中、大剂量组大鼠足肿胀减轻。中、大剂量急性子水提物对小鼠耳肿胀无效，其中大剂量可延长60 min（P＜0.01）和90 min（P＜0.05）小鼠疼痛阈值；急性子醇提取物大剂量可显著减少小鼠扭体次数（P＜0.01），减轻小鼠耳肿胀程度（P＜0.05），明显延长30 min疼痛阈值（P＜0.01），减轻大鼠肿胀程度；急性子醇提物大剂量可延长60 min疼痛阈值（P＜0.01）。急性子提取物对大鼠肉芽肿无抑制作用。结论急性子提取物有一定的镇痛效果和抑制急性炎症作用。     

不同剂量瑞芬太尼停药后对大鼠热痛觉阈值的影响

目的 探讨静脉持续输注不同剂量瑞芬太尼停药后对大鼠热痛觉阈值的影响,观察其与剂量的关系. 方法 40只健康雄性SD大鼠,采用随机数字表法分为5组,每组8只,建立颈静脉输液模型,R1、R2、R3、R4组分别通过颈静脉持续输注瑞芬太尼0.3、0.6、1.0、1.5 μg· kg-1· min-1,N组(对照组)输注生理盐水0.1 ml·kg1·min-1共4h.各组分别于模型前(T1),模型后(T2),停药后0.5(T3)、1(T4)、2(T5)、24(T6)、48 h(T7)测量大鼠热痛觉阈值. 结果 颈静脉置管前后,大鼠热痛觉阈值比较差异无统计学意义(P＞0.05);T3时点,各组阈值均降至最小,R4组(3.3±0.3)s、R3组(3.6±0.5)s、R2组(3.9±0.3)s和R1组(4.2±0.9)s阈值较T2时点分别降低34.0％、30.8％、13.3％和10.6％,较N组(4.6±0.4)s分别降低28.3％、21.7％、15.2％和8.7％;T4时点,R4组(3.5±0.4)s、R3组(3.7±0.4)s、R2组(4.0±0.4)s和R1组(4.2±0.8)s阈值较T2时点分别降低30.0％、26.0％、11.1％和10.6％,R4组和R3组,在T3[(3.3±0.3)、(3.6±0.5)s]、T4[(3.5±0.4)、(3.7±0.4)s]和T5[(3.9±0.4)、(4.2±0.7)s]时点较T2[(5.0±0.6)、(5.2±0.8)s]时点明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);R2组和R1组T5时点阈值[(4.2±0.6)、(4.4±0.9)s]较T2时点阈值降低6.7％和6.4％;其余与T2比较,差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 静脉持续输注瑞芬太尼停药后出现痛觉过敏(opioid-induced hyperalgesia,OIH),输注剂量越大,其热痛觉阈值下降程度越大,OIH越强.     

大鼠切口痛模型中鞘内注射不同剂量KN93对瑞芬太尼诱发的痛觉过敏的影响

目的 观察不同剂量KN93对瑞芬太尼痛觉过敏大鼠痛行为的影响. 方法 采用完全随机分组方法,将36只雄性SD大鼠分为6组(每组6只):①空白对照组;②切口组;③瑞芬太尼组;④KN93 25 μg组;⑤KN93 50 μg组;⑥KN93 100 μg组.除空白对照组外,其余各组均制作切口痛模型、瑞芬太尼组及KN93 3个剂量组,手术过程中皮下输注瑞芬太尼(40 μg/kg,1 mg溶于40 ml生理盐水中)30 min.各组大鼠分别于术前24h、术后2、6、24、48 h测定术侧机械缩足阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT)和热缩足潜伏期(paw withdrawal thermal latency,PWTL). 结果 与切口组比较,瑞芬太尼组术后出现痛觉过敏表现PWMT (20.9±2.6,19.6±1.8,21.9±2.0,22.3±1.9)及PWTL[(8.5±1.5)s,(8.6±1.5)s,(8.5±2.0)s,(9.1±1.5)s],P＜0.05.鞘内注射KN93 25 μg对痛觉过敏大鼠痛行为无改善作用,鞘内注射KN93 50、100 μg能剂量依赖性改善瑞芬太尼所致痛觉过敏大鼠痛行为,P＜0.05. 结论 瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏;KN93剂量依赖性的改善瑞芬太尼诱发的痛觉过敏.     

自身免疫性前列腺炎大鼠机械痛阈变化的研究

目的:建立免疫性前列腺炎大鼠模型,探讨模型大鼠机械痛阈的变化规律,为免疫性前列腺炎疼痛机制的研究及药物治疗提供动物实验依据。方法:将20只180～220 g的雄性Wistar大鼠随机均分为模型组与对照组,模型组大鼠分别于第0、30天皮下多点注射60 mg/ml大鼠前列腺蛋白提纯液,同时腹腔注射百白破疫苗及弗氏完全佐剂,建立免疫性前列腺炎大鼠模型。造模8周后处死动物,HE染色观察各组前列腺组织的病理学表现;运用Von Frey纤毛机械刺激针,于实验开始第0天起每周触压各组大鼠的后足,测定其对机械性轻压和轻触痛的反应阈值。结果:HE染色可见模型组大鼠前列腺组织出现不同程度的慢性炎症表现。与对照组[初始痛阈值为(69.33±4.99)g,第8周痛阈值为(66.53±4.48)g]相比,模型组大鼠的机械性痛阈值随造模时间的延长逐渐降低[模型组初始痛阈值为(65.52±6.27)g,第8周痛阈值为(23.67±4.09)g],差异有统计学意义(P0.01);且两组大鼠在不同时间点机械性痛阈的变化趋势不同,此差异有统计学意义(P0.01)。结论:本研究成功建立了自身免疫性前列腺炎大鼠模型,且造模后大鼠机械痛阈值逐渐降低,出现异常痛敏表现。     

单次鞘内注射mLin10-PDZ1结构域小肽抑制剂对骨癌痛小鼠痛行为学的影响

目的 探讨单次鞘内注射mLin 10-PDZ1(PSD-95,Drosophila disks-large,ZO-1)结构域小肽抑制剂对骨癌痛小鼠痛行为学的影响. 方法 40只雄性C3H/HeJ小鼠完全随机分为肿瘤组(T组)32例和假手术对照组(S组)8例.将含有2×105个纤维肉瘤细胞NCTC2472的最小必需培养基(α-MEM)接种到T组小鼠右侧股骨远端骨髓腔,建立骨癌痛模型；S组小鼠骨髓腔注入不含有NCTC2472细胞的α-MEM.于接种前1d、接种后3、5、7、10、14d测定痛行为学指标:自发性抬足次数、机械缩足阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT).T组小鼠在接种后第14天,进一步按照随机数字表法分为对照control组(C组)8例和mLin10-PDZ1结构域小肽抑制剂2.5μg/5μl、5μg/5μl、10 μg/5μl组(G1组8例,G2组8例,G3组8例).G1～G3组分别鞘内注射相应剂量的mLin10-PDZ1结构域小肽抑制剂,S组和C组鞘内注射等体积的溶媒10％二甲基亚砜(DMSO).在给药后的2、12、24 h分别测定各组小鼠的痛行为学指标. 结果 与S组[(2.1±0.7)次]和术前基础值[(1.8±0.7)次]比较,肿瘤细胞接种后第14天T组小鼠自发性抬足次数[(13.5±1.4)次]显著增多(P＜0.05),PWMT[(0.47±0.19)g]较S组[(1.7±0.3)g]和基础值[(1.83±0.23)g]降低(P＜0.05).给药后2h,与C组及14 d给药前比较,G1、G2组和G3组自发性抬足次数减少,PWMT增高(P＜0.05),且G3组较G1和G2组痛行为学改善更明显(P＜0.05).至12 h,与C组比较,G2和G3组自发抬足次数减少(P＜0.05),PWMT增高(P＜0.05)；而G1组给药后痛行为学差异无统计学意义(P＞0.05).给药后24 h,G3组与C组比较,自发抬足次数减少,PWMT升高,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 鞘内单次注射mLin10-PDZ1结构域小肽抑制剂能够改善骨癌痛小鼠的痛行为.     

益肾通癃胶囊对前列腺增生模型小鼠生殖激素水平的影响

目的:探讨益肾通癃胶囊对良性前列腺增生(BPH)模型小鼠生殖激素水平的影响。方法:对SPF雄性小鼠皮下注射丙酸睾酮5mg/(kg·d),连续3周,待造模成功后分为6组:正常对照组,模型组,癃闭舒胶囊组,益肾通癃胶囊高、中、低剂量组,每组10只。益肾通癃胶囊高、中、低剂量组分别用1.2,0.6,0.3 g/kg益肾通癃胶囊混悬液灌胃,癃闭舒胶囊组用0.45 g/kg癃闭舒胶囊混悬液灌胃,正常对照组及模型组给予同体积蒸馏水。给药8周后处死小鼠,称取前列腺湿重并计算前列腺指数(PI),测量小鼠血清中睾酮(T)、雌二醇(E2)的水平、E2/T比值,光镜下观察小鼠前列腺组织的形态变化。结果:与模型组比较,益肾通癃胶囊中、高剂量组及癃闭舒胶囊组均可降低模型小鼠前列腺湿重、PI指数(P均0.01)。各组小鼠血清T、E2、E2/T水平:正常对照组:(1.73±0.02)ng/ml、(73.08±1.03)pg/ml、42.30±0.53;模型组:(3.86±0.02)ng/ml,(145.79±0.88)pg/ml,37.76±0.25;癃闭舒胶囊组:(2.47±0.02)ng/ml,(95.87±0.47)pg/ml,38.80±0.13;益肾通癃胶囊高剂量组:(2.75±0.03)ng/ml,(107.11±0.61)pg/ml,38.92±0.36;益肾通癃胶囊中剂量组:(2.77±0.02)ng/ml,(112.16±0.82)pg/ml,40.56±0.29;益肾通癃胶囊低剂量组:(2.91±0.03)ng/ml,(112.68±0.77)pg/ml,38.80±0.42,各组与模型组相比,差异均具有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论:益肾通癃胶囊可能通过降低BPH模型小鼠血清T、E2,升高E2/T比值,揭示了益肾通癃胶囊治疗BPH的机制。     

金匮肾气丸对雄激素部分缺乏大鼠血清睾酮及StAR蛋白mRNA表达的影响

目的 探讨金匮肾气丸对雄激素部分缺乏模型大鼠血清睾酮及StAR蛋白mRNA表达的影响.方法 将40只SD大鼠采用腹腔注射环磷酰胺(20mg/kg·d-1)复制模型后,随机分为4组,即模型组、金匮肾气丸高、中、低剂量组,每组各10只,分别采用蒸馏水及金匮肾气丸水溶液高、中、低剂量灌胃,治疗28d后,观察血清睾酮及睾丸StAR蛋白mRNA表达.结果 与模型组(98.33±8.36)ng/dl比较,金匮肾气丸高剂量组(301.17:1:46.90)ng/dl、中剂量组(21.5.46±26.73)ng/dl血清睾酮显著性升高,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);金匮.肾气丸高剂量组(11.08±1.45)、中剂量(10.47±1.26)、低剂量组(7.30±1.08)之间睾丸StAR蛋白mRNA表达水平分别与模型组(4.87±0.95)比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 金匮肾气丸可提高雄激素部分缺乏大鼠血清睾酮水平,其机制可能是通过提高睾丸StAR蛋白mRNA表达水平实现.     

不同剂量驱动蛋白17反义寡核苷酸鞘内注射对骨癌痛小鼠痛行为的影响

目的 通过鞘内注射不同剂量驱动蛋白17(kinesin superfamily 17,KIF17)反义寡核苷酸,研究其在骨癌痛小鼠疼痛发生中的作用. 方法 55只雄性C3H/HeJ小鼠,4周～6周龄,体重20 g～25 g.用随机数字表法分为骨癌组(A组,41只)和假手术组(S组,14只).A组小鼠右侧股骨骨髓腔内注射20μl含约2×105个纤维肉瘤细胞(NCTC2472)的最小必须培养基(α-minimal essence medium,α-MEM)以制备骨癌痛模型,S组小鼠右侧股骨骨髓腔内注射等体积不含肿瘤细胞的α-MEM.各组小鼠于接种前(base)及接种后第4、7、10、14天进行痛行为学测试,包括自发抬足次数(the number of spontaneous flinches,NSF)和机械缩足反射阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT).每组每个时间点各取1只小鼠断头处死,取L3-5脊髓,用免疫印迹法(Western blot)测定KIF17蛋白含量.在接种后第14天,再将剩余A组小鼠按随机数字表法分为KIF17反义寡核苷酸2.5 μg组(A1组)、KIF17反义寡核苷酸5.0 μg组(A2组)、KIF17反义寡核苷酸10.0 μg组(A3组)以及对照组(AC组),每组9只.A1组～A3组小鼠分别鞘内给予相应剂量KIF17反义寡核苷酸,S组和AC组小鼠鞘内给予生理盐水,注药容积均为5μl.给药结束后2、12、24、36、48 h每个时间点取1只小鼠处死,再行痛行为学测试和脊髓水平KIF17蛋白含量. 结果 与S组[(2.15±0.49)次、(1.80±0.39)g]和基础值[(2.08±0.34)次、(1.88±0.35)g]比较,接种后第14天,A组小鼠NSF显著增加[(11.95±0.78)次],PWMT显著降低[(0.34±0.11)g](P＜0.05);同时A组小鼠脊髓水平KIF17表达增多;与AC组和给药前比较,A1组小鼠在给药后2、12h和24 h,NSF[2 h(4.80±0.40)次]减少,PWMT[2 h(0.95±0.33)g]升高(P＜0.05),A2组和A3组小鼠在给药后2、12、24 h和36 h,NSF[2 h(2.35±0.26)、(2.53±0.21)次]减少,PWMT[2 h(1.70±0.32)、(1.73±0.40)g]升高(P＜0.05),且与A1组比较,A2组和A3组小鼠痛行为学的改善更明显,A2组与A3组各时间点小鼠NSF和PWMT比较,差异无统计学意义(P＞0.05);给药后2h,A1组～A3组小鼠脊髓水平KIF17表达减少. 结论 骨癌痛小鼠脊髓水平KIF17表达上调,鞘内给予KIF17反义寡核苷酸能有效改善骨癌痛小鼠的痛行为学,其镇痛效果和作用时间与剂量有关.     

玉烛散对血虚型慢传输型便秘小鼠结肠平滑肌细胞内Ca~(2+)浓度及收缩的影响

目的:观察玉烛散对血虚型慢传输型便秘小鼠结肠平滑肌细胞胞内游离Ca~(2+)浓度及收缩作用的影响。方法:建立小鼠血虚型慢传输型便秘模型,制备不同浓度的玉烛散制剂,用莫沙必利做阳性对照,同时设置空白对照组。观察其对小鼠结肠平滑肌细胞胞内游离Ca~(2+)浓度及收缩的影响。结果:玉烛散中剂量组、玉烛散高剂量组和莫沙必利组在加入含药血清后,平滑肌细胞内Ca~(2+)浓度瞬时升高,30 s左右达到峰值,然后呈缓慢下降趋势,持续至600 s,与同组加药前Ca~(2+)浓度相比差异具有统计学意义(P0.05);莫沙必利组、玉烛散中剂量组、玉烛散高剂量组平滑肌细胞收缩率分别为(4.64±1.23)%、(4.86±1.47)%、(4.67±1.73)%,与空白对照组相比差异均有统计学意义(P0.01)。结论:玉烛散能提高血虚型慢传输型便秘小鼠结肠平滑肌细胞内Ca~(2+)浓度,中、高剂量的玉烛散可以促进结肠平滑肌的收缩。     

槲皮素对Ⅲ型慢性前列腺炎/骨盆疼痛综合征模型大鼠作用及其机制研究

目的:探究槲皮素对Ⅲ型慢性前列腺炎/骨盆疼痛综合征模型大鼠作用及机制。方法:将大鼠随机分为对照组、模型组、槲皮素低剂量组(100mg/kg)和槲皮素高剂量组(200mg/kg),复制Ⅲ型慢性前列腺炎/骨盆疼痛综合征模型。病理检查前列腺,测定机械性痛阈,Western blotting检测前列腺中p38和环氧合酶-2(COX-2)水平,ELISA检测血清中核转录因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果:槲皮素低剂量组较模型组前列腺组织病理有所改善但不显著,槲皮素高剂量组较模型组前列腺组织病理有显著改善。槲皮素低剂量组的机械痛阈值高于模型组,但两组比较差异无统计学意义(P0.05),槲皮素高剂量组的机械痛阈值显著性高于模型组(P0.05);槲皮素低剂量组血清中NF-κB和TNF-α水平、前列腺组织中p38和COX-2水平低于模型组,但两组比较差异无统计学意义(P0.05),槲皮素高剂量组的血清中NF-κB和TNF-α、前列腺组织中p38和COX-2水平显著低于模型组(P0.05)。结论:槲皮素对Ⅲ型慢性前列腺炎/骨盆疼痛综合征模型大鼠的前列腺病理和痛觉敏感性均有改善作用,其作用机制可能为降低多种炎性因子的表达,抑制炎症反应和痛觉敏感性。     

鞘内注射驱动蛋白17竞争性小肽抑制剂对骨癌痛小鼠的镇痛效果

目的 评价鞘内注射驱动蛋白17竞争性小肽抑制剂RC-13对骨癌痛小鼠的镇痛效果.方法 雄性C3H/HeJ小鼠40只,6～8周龄,体重20 ～ 25 g,采用随机数字表法,将其随机分为5组(n=8):假手术组(S组)、骨癌痛+5μ1 DMSO组(R0组)、骨癌痛+2.5 μg RC-13组(R1组)、骨癌痛+5μg RC-13组(R2组)和骨癌痛+10 μg RC-13组(R3组).R0组、R1组、R2组和R3组小鼠右侧股骨骨髓腔内注射含约2× 105个纤维肉瘤细胞的20μl α-MEM以制备骨癌痛模型.骨癌痛各组于接种肿瘤细胞后第14天开始,每天定时分别鞘内注射10％ DMSO 5 μl和溶于10％ DMSO的RC-13 2.5 μg/5 μl、5 μg/5μl、10 μg/5 μl,连续3d,每天1次.各组于接种前1d、接种后3、5、7、10、14 d时测定小鼠机械缩足阈值和自发抬足次数,R0-3组在给药结束后1、3、5和7d时行相同行为学测定.结果 与S组比较,其余组接种后7～14d时小鼠机械缩足阈值降低,自发抬足次数增加(P＜0.05);与R0组比较,R1组给药结束后1d、R2组1和3d、R3 组1、3、5d时机械缩足阈值升高,自发抬足次数减少(P＜0.05);与R1组比较,R2组给药结束后3d、R3 组1、3、5d时机械缩足阈值升高,自发抬足次数减少(P＜0.05);与R2组比较,R3组给药结束后1和3d时机械缩足阈值升高,自发抬足次数减少(P＜0.05).结论 鞘内注射驱动蛋白17竞争性小肽抑制剂RC-13对骨癌痛小鼠具有良好的镇痛效果,其效应呈剂量依赖性.     

淫羊藿对激素性股骨头坏死大鼠血液流变学及骨密度的影响

目的 观察淫羊藿提取液对激素性股骨头坏死大鼠血液流变学及骨密度的影响.方法 健康SD大鼠32只,雌雄各半,随机分为4组:空白组、模型组、淫羊藿高剂量组、淫羊藿低剂量组,每组8只.后3组采用臀肌注射醋酸泼尼松龙注射液制备激素性股骨头坏死模型,造模的同时淫羊藿高、低剂量组分别给予含生药浓度1.5、0.9 g/L的淫羊藿提取液10 ml/kg,模型组及空白组给予同等剂量的生理盐水,共6周.结果 经灌胃6周后,淫羊藿高剂量组和低剂量组全血高切黏度为(5.55±0.60)、(5.85±0.66) ms/s;血浆黏度为(1.88±0.10)、(1.93 ±0.17) ms/s;高于空白组相应指标[(4.48±0.56)、(1.64±0.11) ms/s,P＜0.05],淫羊藿高剂量组全血高切黏度、血浆黏度低于模型组相应指标[(6.66±0.65)、(2.11±0.21) ms/s,P＜0.05].淫羊藿高剂量组全血低切黏度、红细胞压积分别为(9.96±0.68)、(0.48±0.05)ms/s,均低于模型组[(12.21±1.11)、(0.60±0.07)ms/s,P＜0.05],且淫羊藿高剂量组低于淫羊藿低剂最组[(10.97±0.67)、(0.57±0.05) ms/s,P＜0.05].淫羊藿高剂量组和空白组骨密度高于淫羊藿低剂量组和模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 高剂量淫羊藿提取液对激素性股骨头坏死的作用机制可能与降低血液流变学的各项指标、保证组织有效灌注、改善股骨头的局部微循环,并能够抑制破骨细胞活性、促进体外成骨细胞的增殖和分化成熟、增强骨质密度有关.     

姜黄素对前列腺癌荷瘤小鼠肿瘤生长及免疫功能的影响

目的:探讨姜黄素对人前列腺癌RM-1细胞荷瘤小鼠肿瘤生长及免疫功能的影响。方法:C57BL/6小鼠接种RM-1细胞,建立前列腺癌皮下移植小鼠模型。50只建模成功的小鼠,按照随机数字表法分为:模型组[腹腔注射10%二甲基亚砜(DMSO) 0.2 ml],环磷酰胺(CTX)组(腹腔注射20 mg/kg CTX),姜黄素低、中、高剂量组(腹腔分别注射50、100、200 mg/kg姜黄素),1次/d,连续注射14 d。给药14 d后,测定瘤质量、抑瘤率及免疫学指标。结果:与模型组[(2.09±0.10) g]比较,CTX组[(1.32±0.06) g],姜黄素低[(1.54±0.08) g]、中[(1.48±0.08) g]、高[(1.42±0.07) g]剂量组瘤质量均显著下降(P0.05或P0.01);与CTX组比较,姜黄素低、中、高剂量组瘤质量差异无统计学意义(P0.05)。CTX组,姜黄素低、中、高剂量组抑瘤率分别为36.84%,27.27%、29.18%、32.06%。与模型组比较,CTX组除CD8~+ T细胞比例升高外其他免疫学指标均降低(P0.01);与CTX组比较,姜黄素低、中、高剂量组除CD8~+ T细胞比例降低外其他免疫学指标均升高(P0.01)。结论:姜黄素对前列腺癌荷瘤小鼠具有抗肿瘤作用,增强荷瘤小鼠的免疫功能。     

鞘内注射突触后致密物质-95反义寡核苷酸对神经病理性疼痛小鼠痛行为学的影响

目的 探讨鞘内给予突触后致密物质-95(postsynaptic density protein-95,PSD-95)反义寡核苷酸对坐骨神经结扎小鼠疼痛行为的影响. 方法 选取鞘内置管成功的C57BL/6雄性小鼠48只,采用随机数字表法分为4组(每组12只):假手术组(Sham组)、生理盐水组(NS组)、PSD-95反义寡核苷酸组(A组)、PSD-95错义寡核苷酸组(M组).采用结扎坐骨神经的方法制备小鼠坐骨神经慢性压迫性损伤(chronic constriction injury,CCI)模型,结扎坐骨神经后第1～14天,NS组、A组、M组分别鞘内注射生理盐水5μl、反义寡核苷酸5 μg/5μl、错义寡核苷酸5μg/5μl,1次/d.于术前1d及术后1、3、5、7、14、17、21 d测定小鼠结扎侧足底机械缩足反射阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT)和热缩足潜伏期(paw withdrawal thermal latency,PWL). 结果 A组小鼠术后1～14 d的疼痛阈值与Sham组维持一致[第14天,PWMT (5.69±1.34)g,P＞0.05;PWL(9.65±1.44)s,P＞0.05].术后17d,A组小鼠损伤侧足出现疼痛[PWMT (4.24±1.83)g,P＜0.05;PWL (7.18±0.41)s,P＜0.05],但是与NS组[PWMT (1.77±0.38)g,P＜0.05;PWL(4.33±1.21)s,P＜0.05]、M组[PWMT(1.6±0.37)g,P＜0.05;PWL (4.38±0.95)s,P＜0.05]比较,疼痛明显减轻,并且持续到术后第21天. 结论 在CCI所致神经病理性疼痛的发展阶段,连续鞘内给予PSD-95反义寡核苷酸可以完全逆转给药期内小鼠痛行为表现,并且在停止给药后7d仍有明显缓解疼痛的作用.     

磷霉素氨丁三醇散对慢性细菌性前列腺炎模型大鼠前列腺组织TNF-α、IL-8、IL-6含量的影响

目的:探讨磷霉素氨丁三醇散(FT)对慢性细菌性前列腺炎模型大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素8(IL-8)、白介素6(IL-6)表达水平的影响。方法:70只雄性SD大鼠随机分为7组,每组10只。A组:假手术组;B组:模型对照组;C组:阳性对照组[左氧氟沙星:100 mg/(kg·d),30 d];D组:FT低剂量、14 d疗程组[200 mg/(kg·d),14 d];E组:FT低剂量、7 d疗程组[200 mg/(kg·d),7 d];F组:FT高剂量、14 d疗程组[300 mg/(kg·d),14 d];G组:FT高剂量、7 d疗程组[300 mg/(kg·d),7 d],各组均采用灌胃给药。实验结束后留取各组大鼠前列腺组织,制作病理切片并使用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组大鼠前列腺组织匀浆中TNF-α、IL-8、IL-6的含量。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠前列腺组织匀浆中的TNF-α、IL-8、IL-6含量均明显升高,差异均有统计学意义[(19.83±6.1)ng/g prot vs(32.93±6.21)ng/gprot,(8.26±0.52)ng/g prot vs(16.2±2.84)ng/g prot,(1.55±0.11)ng/g prot vs(2.51±1.06)ng/g prot,P0.05或0.01];与模型组[(32.93±6.21)ng/g prot、(16.2±2.84)ng/g prot]相比,各治疗组大鼠前列腺组织匀浆中的TNF-α、IL-8含量[(20.54±5.78)ng/g prot、(21.95±6.48)ng/g prot、(23.8±6.93)ng/g prot、(19.97±2.58)ng/g prot、(21.97±3.38)ng/g prot;(12.43±3.64)ng/g prot、(11.11±2.86)ng/g prot、(12.43±4.02)ng/g prot、(8.83±1.32)ng/g prot、(12.68±1.97)ng/g prot]明显降低,差异具有统计学意义(P0.05或0.01);各治疗组大鼠前列腺组织匀浆的TNF-α、IL-8、IL-6含量与阳性对照组比较差异均无统计学意义(P0.05);F组大鼠前列腺组织匀浆中的IL-6的表达量较模型组显著减少[(2.51±1.06)ng/g prot vs(1.76±0.46)ng/g prot,P0.05],其余治疗组及阳性对照组前列腺组织匀浆中的IL-6的表达与模型组比较均无显著性差异(P0.05),但较模型组均有下降趋势。结论:FT通过抑制TNF-α、IL-8、IL-6的表达,减轻前列腺组织的炎症反应,达到治疗大鼠CBP的目的,为临床研究提供了实验依据。     

臂丛神经下干不同损伤诱发神经病理性疼痛大鼠后足的痛行为学特征

目的 比较颈胸椎前路和后路臂丛神经下干切断伤与根性撕脱伤诱发神经病理性疼痛大鼠术侧后足的痛行为学特征.方法 18只成年雌性SD大鼠随机接受右侧前路下干切断、前路及后路下干根性撕脱手术(每组6只),另外6只健康大鼠作为对照组.臂丛损伤术前及术后3、7、14和28 d,检测大鼠术侧后足的机械痛缩足阈值、冷刺激诱发痛评分及热刺激缩足潜伏期.结果 对照组与3个损伤组之间术前三项痛行为学指标的差异无统计学意义.与术前相比,前路切断伤组冷刺激诱发痛评分明显增高(P<0.01),机械痛缩足阈值及热刺激缩足潜伏期则无明显变化;前路及后路撕脱伤组术后各时间点机械痛缩足阈值均显著降低(P<0.01),冷刺激诱发痛评分均明显增高(P<0.01),而热刺激缩足潜伏期则无显著变化.与切断伤组相比,两撕脱伤组术后各时间点热刺激缩足潜伏期则无显著差异,而后足机械痛缩足阈值均显著降低(P<0.05),冷刺激诱发痛评分亦显著增高(P<0.01),这种痛行为学的变化可持续至28 d(最长观察期);两撕脱伤组间各痛行为学指标的差异无统计学意义.结论 大鼠前、后入路臂丛下干根性撕脱伤均可作为理想的神经病理性疼痛模型,而臂丛下干切断伤因致痛效果较差则不宜用作神经病理性痛模型.