分枝杆菌多糖促人LAK细胞增殖及对喉癌HEP－2细胞杀伤活性的研究

为探讨分枝杆菌多糖（ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａｌｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＭＰＳ）在体外对ＬＡＫ细胞（ｌｙｍ－ｐｈｏｋｉｎｅａｃｔｉｖａｔｅｄｋｉｌｅｒｃｅｌｋｉｎｅ）活性的影响，以提高ＬＡＫ细胞杀瘤活性、减少ＩＬ－２（白细胞介素－２）用量和毒副作用。通过ＭＴＴ法测定不同浓度ＩＬ－２、不同浓度ＭＰＳ对ＬＡＫ细胞促增殖能力的影响；以细胞计数法测定不同浓度ＩＬ－２、ＭＰＳ对ＬＡＫ细胞扩增倍数的影响；应用乳酸脱氢酶法测定不同条件刺激的ＬＡＫ细胞对喉癌ＨＥＰ－２细胞杀伤活性的作用。结果证明小剂量ＩＬ－２（２×１０５Ｕ／Ｌ）诱导ＬＡＫ细胞过程中加入ＭＰＳ０．４ｍｇ／Ｌ能显著增强ＬＡＫ细胞的增殖和杀伤喉癌ＨＥＰ－２细胞的活性。其扩增倍数及杀伤活性均显著超过单纯应用ＩＬ－２（１０６Ｕ／Ｌ）诱导的ＬＡＫ细胞。通过检测不同条件下诱导的ＬＡＫ细胞表型，显示ＭＰＳ联合ＩＬ－２诱导的ＬＡＫ细胞ＣＤ２５百分率明显增高，提示ＭＰＳ可能通过促进ＬＡＫ细胞表面ＩＬ－２膜受体表达，提高ＬＡＫ细胞增殖及杀伤活性。因此，ＭＰＳ可望作为一种新型免疫调节剂用于抗肿瘤治疗     

分枝杆菌多糖促人LAK细胞增殖及对喉癌HEP—细胞杀伤活…

为探讨分枝杆菌多糖在体外对ＬＡＫ细胞活性的影响，以提高ＬＡＫ细胞杀瘤活性，减少ＩＬ－２用量和毒副作用，通过ＭＴＴ法测定不同浓度ＩＬ－２，不同浓度ＭＰＳ对ＬＡＫ细胞促增殖能力的影响；以细胞计数法测定不同浓度ＩＬ－２，ＭＰＳ对ＬＡＫ细胞扩增倍数的影响；应用乳酸脱氢酶法测定不同条件刺激的ＬＡＫ细胞对喉癌ＨＥＰ－２细胞杀伤活性的作用。     

两种免疫调节剂辅助LAK细胞杀伤喉癌细胞的体外研究

为探讨如何提高白细胞介素－２（ＩＬ－２）／ＬＡＫ细胞过继免疫治疗的抗肿瘤作用，应用免疫调节剂分枝杆菌多糖（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａｌｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＭＰＳ）或ＣＤ３单克隆抗体协同ＩＬ－２诱导的健康人外周血淋巴细胞来源的ＬＡＫ细胞在体外扩增，测定其对喉癌ＨＥＰ－２细胞杀伤活性。实验结果：①不同免疫调节剂对ＬＡＫ细胞扩增的影响：实验组三组细胞于体外扩增均明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）；ＭＰＳ组或ＣＤ３组细胞的扩增倍数比单纯应用ＩＬ－２组为高（Ｐ＜０．０１）；其中扩增倍数最高者为ＭＰＳ组，与ＣＤ３组相比，Ｐ＜０．０５。②不同免疫调节剂诱导的ＬＡＫ细胞对喉癌ＨＥＰ－２细胞的杀伤活性比较：在培养一周时，实验组三组对ＨＥＰ－２细胞的杀伤活性均高于对照组，以ＣＤ３组及ＭＰＳ组杀伤活性最高，其杀伤活性均为５５．５％；于培养第二周，ＣＤ３组杀伤ＨＥＰ－２细胞活性仍较高，其他实验组细胞杀伤活性均明显下降。结论：免疫调节剂ＭＰＳ和ＣＤ３单克隆抗体均可通过增强ＬＡＫ细胞体外增殖和杀瘤活性而提高肿瘤过继免疫治疗效果。     

两种免疫调节剂辅助LAK细胞杀伤喉癌细胞的体外研究

为探讨如何提高白细胞介素－２（ＩＬ－２）／ＬＡＫ细胞过继免疫治疗的抗肿瘤作用，应用免疫调节剂分枝杆菌多糖或ＣＤ３单克隆抗体协同ＩＬ－２诱导的健康人外周血淋巴细胞来源的ＬＡＫ细胞在体外扩增，测定其对喉癌ＨＥＰ－２细胞杀伤活性。实验结果：（１）不同免疫调节剂对ＬＡＫ细胞扩增的影响。实验组三且细胞于体外扩增均明显高于对照组（Ｐ〈０．０１）；ＭＰＳ组或ＣＤ３组细胞的扩增倍数比单纯应用ＩＬ－２组为高（Ｐ〈０     

CD3A细胞体内,外抗喉鳞癌细胞株（Hep—2）的实验研究

为探索理理想的过继免疫治疗手段，对由健康人外周血分离、经ＣＤ３单克隆抗体与白细胞介素－２共同诱导激活的ＣＤ３Ａ细胞的体外扩增情况及其杀２务喉癌细胞Ｈｅｐ－２的活性水平进行了观察和研究，并与ＬＡＫ细胞作了比较。研究发现，ＣＤ３ＡＫ细胞除具有体外扩增能力强，存活时间长、ＩＬ－２依赖性等特点外，其体内、外抗喉癌作用亦十分显著。培养早期，ＣＤ３ＡＫ细胞的抗瘤活性与常规培养的ＬＡＫ细胞相似，延长培养时间至７     

喉癌患者不同来源淋巴细胞毒性的对比研究

应用细胞生物学方法，从１２例喉癌患者分离的外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）、肿瘤引流淋巴结淋巴细胞（ＴｄＬＮＬ）和肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）在体外经重组务细胞介素２（ｒＩＬ－２）诱导５－７天后，成为具有杀瘤活性的淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ细胞）或激活的ＴＩＬ。采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法，检查它们对Ｋ５６２靶细胞的杀伤能力。实验结果显示：加入ｒＩＬ－２栖外培养的ＰＢＬ、ＴＤＬＮＬ和ＴＩＬ细胞体积增大，呈不     

正常清醒豚鼠的畸变产物耳声发射特性

目的 研究正常清醒豚鼠的畸变产物耳声发射（ＤＰＯＡＥ）的特性。方法 采用ＣＥＬＥＳＴＡ ５０３型耳声发射分析仪对２６只正常清醒豚鼠（３５耳）进行ＤＰ图及ＤＰ输入／输出曲线（ＤＰ－Ｉ／Ｏ）的测试，随机选择１１只正常清醒豚鼠（２０耳）进行ＤＰＯＡＥ的重复测试，用ＳＰＳＳ１０．０对数据进行统计分析。结果 在ＤＰ图中，当初始音强度Ｌ１／Ｌ２为 ７０／６５ ｄＢ ＳＰＬ时，正常清醒豚鼠的 ＤＰＯＡＥ幅值随测试频率ｆ０从０．７５－８ｋＨｚ的增加而逐渐升高（２７．９０±１．９６－5０．６５±０．７１）。在 ＤＰ－Ｉ／Ｏ中，当ｆ０分别为４、６、８ ｋＨｚ时，正常清醒豚鼠的ＤＰＯＡＥ幅值随Ｌ１／Ｌ２从７０／６５以５ｄＢ－挡降至１５／１０ ｄＢ ＳＰＬ而呈线性下降（Ｐ＜０．０１），在Ｌ１／Ｌ２为５５／５０或６０／５５ ｄＢ ＳＰＬ处出现饱和或低谷，同一Ｉ／Ｏ曲线上Ｌ１／Ｌ２分别从７０／６５及５５／５０ ｄＢ ＳＰＬ递减至阈值的Ｉ／Ｏ斜率（分别记为ＫＴ及ＫＬ）均接近于１，且ＫＬ大于ＫＴ（Ｐ＜０．０１）。重复测试的ＤＰＯＡＥ幅值差异小（＜ １ｄＢ ＳＰＬ）且无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论 正常清醒豚鼠ＤＰＯＡＥ测试充分表现了其捡出率高、反应幅值大     

人疱疹病毒6型对EB病毒复制影响的研究

目的 探讨人疱疹病毒６型（ＨＨＶ－６）对ＥＢ病毒（ＥＢＶ）复制的影响。方法 用ＨＨＶ－６感染Ｒａｊｉ细胞和ＥＢＶ转化的淋巴细胞（ＬＣＬ），并用抗ＨＨＶ－６单克隆抗体（ＭＡｂ）作免疫萤光分析（ＩＦＡ）确定ＨＨＶ－６已感染这二种细胞。用抗ＥＢＶ人血清作ＩＦＡ观察ＥＢＶ抗原表达。结果 ＨＨＶ－６感染Ｒａｊｉ细胞后可见细胞病变效应（ＣＰＥ）；而ＬＣＬ未见ＣＰＥ。这二种细胞株用抗ＨＨＶ－６的ＭＡｂ作ＩＦＡ均     

嗅神经母细胞瘤的临床与免疫组化研究

嗅神经母细胞瘤系发生于鼻腔上部或筛板的罕见的恶性肿瘤，病理组织学诊断较困难。配方报告１１例，采用免疫组化进行了ＮＳＥ，ＮＦ－Ｓ－１００，ＧＦＡＰ，ＬＣＡ和Ｋａｒａｔｉｎ抗体联合标记结果显示，ＮＳＥ阳性率１１／１１，ＮＦ５／１１，Ｓ－１００３／１１；而ＧＡＦＰ，ＬＣＡ和Ｋａｒａｔｉｎ均为阴性；为５例光镜下病理确诊困难者明确诊断。     

γ—干扰素对喉癌细胞株HEP—2增殖活性的影响

用单克隆抗体Ｋｉ－６７（抗ＰＣＮＡ），以链霉菌素－生物素技术（ＬＳＡＢ）检测喉癌细胞株ＨＥＰ－２增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达。人重组γ－干扰素（ｒｈｕ－ＩＦＮ－γ）抑制ＰＣＮＡ表达（即抗增殖活性）强弱与其剂量有关；雌激素对ｒｈｕ－ＩＦＮ－γ抗增殖作用无影响。提示：ｒｈｕ－ＩＦＮ－γ对喉癌细胞株ＨＥＰ－２有抗增殖作用，因而在喉癌的治疗中具有应用价值的。     

EB病毒反义LMP1基因对人低分化鼻咽癌CNE－3细胞株生长的抑制作用

为研究鼻咽癌基因治疗的可能性，应用ＥＢ病毒反义ＬＭＰ１基因的重组逆转录病毒载体，用ＰＡ３１７细胞包装成假型逆转录病毒，免疫荧光检查该病毒能明显抑制Ｂ９５－８细胞内ＥＢ病毒的激活，抑制率达７１％。用此病毒成功地感染了人低分化鼻咽癌ＣＮＥ－３细胞株，使ＣＮＥ－３细胞生长速率下降约７０％，软琼脂集落形成和裸鼠致瘤能力均明显下降。用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证实转染的肿瘤组织细胞中有较高水平的ｐＺＩＰ载体ｎｅｏ基因存在，证实了ＥＢ病毒反义ＬＭＰ基因能有效地抑制人低分化鼻咽癌ＣＮＥ－３细胞的生长和裸鼠致瘤能力，为鼻咽癌的基因治疗提供了实验依据。     

初始音强度差对听力正常青年人畸变产物耳声发射的影响

目的 探讨初始音强度差对听务正常青年人畸变产物耳声发射（ＤＰＯＡＥ）幅值的影响,为临床应用ＤＰＯＡＥ提供最佳的刺激强度组合。方法 用ＩＨＳ Ｖｅｒｓｉｏｎ ３．２型耳声发射仪对听务正常青年人３９耳进行了ＤＰＯＡＥ测试,分别记录Ｌ１为７５,６５,５５ｄＢ ＳＰＬ,强度差Ｌ１－Ｌ２为０,５,１０,１５,ｄＢ ＳＰＬ时,不同Ｌ１－Ｌ２值对ＤＰＯＡＥ幅值的影响。     

肿瘤过继免疫疗法新进展

ＬＡＫ／ＩＬ－２疗法是目前临床上最常应用的肿瘤过继免疫疗法，ＴＩＬ／ＩＬ－２疗法也在一定范围内得到应用。但这两种方法都尚存在一些不足。ＣＤ３ＡＫ细胞是一种集ＬＡＫ，ＴＩＬ优点于一身的新型肿瘤免疫杀伤细胞。基础试验已表明它具有细胞前体来源丰富，扩增及杀伤力强，ＩＬ－２依赖性低等诸多优点，不失为一种安全可靠，经济有效的免疫细胞。     

RA和VD诱导喉癌患者LAK细胞TNF－α的表达

本文应用全反式维甲酸（ＲＡ）和１，２５－二羟维生素Ｄ３（ＶＤ）诱导培养喉癌患者ＬＡＫ细胞，采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术和ＥＬＩＳＡ检测ＴＮＦ－α基因ｍＲＮＡ及其蛋白的表达。结果显示，ＶＤ或ＲＡ加ＶＤ诱导的ＬＡＫ细胞ＴＮＦ－αｍＲＮＡ及其蛋白的表达显著增高。提示ＶＤ或ＲＡ加ＶＤ能够促进ＬＡＫ细胞合成和释放ＴＮＦ－α，有可能因此增强了ＬＡＫ细胞的抗肿瘤作用。这为提高头颈部恶性肿瘤过继免疫治疗的疗效开避了一条新的途径。     

卡因酸耳蜗毒性的电生理学研究

目的：观察谷氨酸类受体激动剂卡因酸（ＫＡ）对豚鼠耳蜗的毒性作用。方法：健康杂色豚鼠８只，每只动物经圆膜给予６０ｍＭ ＫＡ１μｌ，于用药前及用药后１２ｈ分别检测听神经复合动作电位（ＣＡＰ），耳蜗微音电位（ＣＭ）和畸变产物耳声发射（ＤＰＯＡＥ）之２ｆ２－ｆ２。结果：用药后ＣＡＰ明显下降或消失（Ｐ〈０．００１），而ＣＭ和ＤＰＯＡＥ无明显变化。结论：ＫＡ对初级听觉传入神经末梢具有选择性毒性作用。     

RA和VD诱导喉癌患者LAK细胞TNF—α的表达

本文应用全反式维甲酸和１，２５－二羟维生素Ｄ３诱导培养喉癌患者ＬＡＫ细胞，采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术和ＥＬＩＳＡ检测ＴＮＦ－α基因ｍＲＮＡ及其蛋白的表达，结果显示，ＶＤ或ＲＡ加ＶＤ诱导的ＬＡＫ细胞ＴＮＦ－αｍＲＮＡ及其蛋白的表达显著增高。     

短时纯音暴露对畸变产物耳声发射的影响

畸变产物耳声发射（ＤＰＯＡＥ）测试中所采用的参数可以对测试结果有明显影响，为研究改变ＤＰＯＡＥ测试参数对反映耳蜗功能变化是否有影响，使１０只大白兔（１６耳）接触短时（３分钟）、中等强度（８２ｄＢＳＰＬ）的纯音暴露后发现，以等强原始音（Ｌ１＝Ｌ２）诱发的ＤＰＯＡＥ的幅度变化小于以差强原始音（Ｌ２＝Ｌ１－１２ｄＢ）诱发的ＤＰＯＡＥ（相差１０．１１ｄＢ），而其恢复过程也短于后者（相差１００．７１秒）。这种差别可能提示在ＤＰＯＡＥ的产生过程中有多个生理机制发挥作用，而变化测试参数则可以选择性地突出表现其中某一个机制     

短时纯音暴露对畸变产物耳声发射的影响

畸变产物耳声发射（ＤＰＯＡＥ）测试所采用的参数可以对测试结果有明显影响，为研究改变ＤＰＯＡＥ测试参数对反映耳蜗功能变化是否有影响，使１０只大白兔（１６耳）接触短时（３分钟）、中等强度（８２ｄＢ ＳＰＬ）的纯音暴露后发现，以等强原始音（Ｌ１＝Ｌ２）诱发的ＤＰＯＡＥ的幅度变化小于以差强原始音（Ｌ２＝Ｌ１－１２ｄＢ）诱发的ＤＰＯＡＥ（相差１０．１１ｄＢ），而其恢复过程也短于后者（相差１００．７１秒）。这     

头颈外科

940242人LAK细胞在体外和裸鼠体内杭头颐部肿瘤细胞的研究/段东升…I中华耳鼻咽喉科杂志一1993,25(5)一251~253 报道人LAK细胞对头颈部肿瘤细胞的影响。结果发现:①LAK细胞,在体外对人喉鳞癌细胞系HEP一2、人鼻咽鳞癌细胞系CNE-2和人口腔鳞癌细胞系KB均表现出明显的杀伤活性,与对照组比较差异有显著性(P<。.05)②LAK细胞在移植瘤裸鼠体内同样具有很强的抑瘤作用。本实验结果提示临床上运用LAK细胞治疗头颈部肿瘤可能是一种较新的有效方法。表2参8(原提要)940243头颐部恶性肿瘤晚期患者血液流变学检测与意义/王红海…了临床耳鼻咽…     

鼻咽癌活检组织中HLA、EBNA及间质中T淋巴细胞亚群的分布

本实验对人类白细胞抗原（ＨＬＡ）、爱波斯坦－巴尔病毒核抗原（ＥＢＮＡ）、Ｔ细胞亚群的表达及分布进行综合分析，探讨其在癌变过程中的作用。用单克隆抗体Ｗ＿６／３２（抗ＨＬＡ－Ａ，Ｂ，Ｃ）、ＣＲ＿３／４３（抗ＨＬＡ－ＤＲ，ＤＰ，ＤＱ）、和Ｔ＿４、Ｔ＿８、Ｔ＿（１１），以碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法（ＡＰＡＡＰ）和用鼻咽癌患者血清以抗补体Ｃ＿３免疫荧光法，检测鼻咽癌（２５例）及慢性鼻咽炎（１０例）活检组织中ＨＬＡ、Ｔ细胞亚群分型和ＥＢＮＡ的表达。结果显示，鼻咽癌癌细胞多有ＨＬＡ－Ⅰ和Ⅱ型抗原表达，而以ＨＬＡ－Ⅱ型抗原表达为明显；慢性鼻咽炎上皮细胞表达ＨＬＡ－Ⅰ和Ⅱ型抗原较弱，与癌细胞比较，差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。提示在癌变过程中，存在着ＨＬＡ表达的异常，体内ＥＢ病毒特异性Ｔ细胞可能不能识别带ＨＬＡ－Ⅱ型抗原的癌细胞，因而使其逃脱了机体的免疫监视。鼻咽癌组织中，癌细胞ＥＢＮＡ呈阳性和强阳性；癌间质中Ｔ细胞总数、Ｔ辅助、Ｔ杀伤细胞数量均减少，证明鼻咽癌局部细胞免疫功能降低。