恶性实体瘤患者自体CIK细胞的体外扩增及初步临床应用

目的观察恶性实体瘤患者外周血来源的细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)在自体血浆中的增殖特性,回输治疗的安全性及近期疗效。方法用淋巴细胞分离液分离获取40例恶性实体瘤患者外周血单个核细胞,在含10%自体血浆的RPMI-1640培养液中添加rhIFN-γ、Anti-CD3mAb和rhIL-2联合诱导单个核细胞为CIK细胞。在培养第13天进行细胞计数,通过流式细胞术检测细胞免疫表型,并将细胞进行自体回输。结果在培养第13天,CIK细胞得到大量扩增,细胞数增加30.0±5.2倍。CD3 和CD3 CD16 CD56 细胞在培养第13 d分别为(93.0±6.1)%和(25.8±12.2)%。40例恶性实体瘤患者回输自体CIK细胞后,6例部分缓解;13例好转;9例病情稳定;12例进展。治疗总有效率为15%。治疗过程中主要出现畏寒、发热,未观察到其它明显的毒副作用。结论恶性实体瘤患者自体血浆可以高效扩增CIK细胞,回输治疗安全有效,且无明显的毒副作用。     

自身细胞因子诱导的杀伤细胞过继性免疫治疗恶性肿瘤的临床观察

背景与目的:细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)具有增殖快、杀瘤活性强和杀瘤谱广的特点。但用于临床肿瘤治疗的报告较少,本文旨在评估用CIK细胞过继回输治疗晚期肿瘤的疗效。方法:用淋巴细胞分离液分离患者末梢血单个核细胞,然后将末梢血单个核细胞加入含有IFN-γ、IL-2和CD3单抗的培养基中进行培养扩增,再将培养后的CIK细胞回输给病人;患者一个疗程接受CIK细胞总数在5×109～15×109之间。在CIK细胞治疗前有47例患者做了化疗,3例做了放疗。化放疗与CIK细胞治疗间隔时间在2～4周以上。结果:在63例接受治疗者中,部分缓解(PR)+微效(MR)为28例(44.46%)。20例CEA增高者,治疗后有14例减低,6例增加;10例AFP增高者,治疗后有9例减低,1例增加。CD3、CD4和CD8T淋巴细胞绝对值在CIK细胞治疗后均增加45%以上。治疗后63例中有51例患者有食欲增加、32例患者睡眠和体力改善,18例患者中有13例疼痛减轻,结论:用自身CIK细胞过继性回输治疗能明显提高癌症患者细胞免疫功能,改善临床体征,且无毒副作用。     

恶性实体瘤患者自体PHA-LAK细胞过继性免疫治疗对淋巴细胞表型及功能的影响

目的：研究回输自体PHA-LAK细胞对恶性实体瘤患者淋巴细胞表型及功能状态的影响．方法：入组204例实体瘤患者．并以10例健康成人作为对照．采集与分离外周血单个核细胞，体外扩增PHA—LAK蜘胞，采用流式细胞术分析淋巴细胞表型．MTT法榆测淋巴细胞杀伤活性。结果：实体瘤患者较正常人淋巴细胞亚群CD3 ^ ／CD4^ 细咆、CD、3^ /CD8^ 细胞、B细胞、NK细胞减少，淋巴细胞杀伤活性下降。扩增的PHA-LAK是以激活的淋巴细咆亚群CD.^ ／CD8^ 细胞、CD3^ ／CD56^ 细胞、CD4^ ／CD2^ 细胞为主的异质性群体，其数量及杀伤活性明显增加，激话淋巴细胞标记性抗原分子表达亦增加：PHA-LAK细胞回输冶疗后．患者外周血上述激活淋巴细胞亚群数量增加．淋巴细胞系伤活性增强。结论：实体瘤患者淋巴细胞亚群数量及功能低下．PHA-LAK细胞过继性免痉治疗使患者体时激活淋巴细胞亚群数量增加．杀伤活性增强。     

CIK细胞-肿瘤过继免疫治疗的新希望

1 概述CIK细胞（cytokine－induced killer）是将人外周血单个核细胞在体外用多种细胞因子（如抗CD3McAb、IL－2、IFN－γ、IL－1α等）共同培养一段时间后获得的一群异质细胞。由于该种细胞同时表达CD3和CD56两种膜蛋白分子1,故又被称为NK细胞样T淋巴细胞,兼具有T淋巴细胞强大的抗瘤活性和NK细胞的非MHC限制性杀瘤优点。因此,应用CIK细胞被认为是新一代抗肿瘤过继细胞免疫治疗的首选方案。2 CIK细胞表型特点CIK细胞中的效应细胞CD3＋CD56＋细胞在正常人外周血中极其罕见,仅1％～5％,在体外经多因子培养28～30天,…     

恶性实体瘤患者自体CIK细胞的体外大量扩增与生物学指标检测

ＣＩＫ细胞 (ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｉｎｄｕｃｅｄｋｉｌｌｅｒ)是人外周血单个核细胞在体外经多种细胞因子刺激后获得的一群异质细胞[1] 。与ＬＡＫ和ＴＩＬ细胞相比 ,其具有增殖速度快、杀瘤活性高、杀瘤谱广、对多重耐药肿瘤敏感、不受免疫抑制剂的影响、对正常骨髓造血毒性小[2 ] 等优势。目前常用的ＣＩＫ细胞主要来自异体正常供者或白血病患者的外周血[3 ] ,对于实体瘤患者自体外周血来源ＣＩＫ细胞 ,尤其是不同临床阶段患者自体ＣＩＫ细胞体外增殖和杀瘤特点以及体内治疗作用未见任何报道。本文比较了我院 2 0 0 0 .11～ 2 0 0 1.4半年…     

T细胞过继免疫治疗技术的研究进展

随着科学技术的发展和治疗理念的转变,以免疫治疗为基础的肿瘤生物疗法作为现代肿瘤治疗的第四种模式,越来越受到重视,应用前景广阔。相比起传统的手术和放化疗,这种方法毒副作用小、安全稳定,适应性广泛,其原理是通过利用现代生物技术调     

嵌合抗原受体T细胞治疗实体瘤的研究进展和挑战

随着嵌合抗原受体疗法在血液系统癌症中的惊人疗效,研究者们也在实体瘤方面展开探索。我们将回顾近年来嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）治疗卵巢癌、肺癌、肝癌等实体瘤的研究进展;还将对CAR-T细胞治疗实体瘤的局限性,即抗原特异性问题、CAR-T细胞贩运问题以及肿瘤微环境问题结合相应对策进行综述。     

细胞因子诱导的杀伤细胞治疗恶性黑素瘤临床疗效的初步分析

目的:初步评价细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cell,CIK)在恶性黑素瘤治疗中的效果。方法:收集天津医科大学附属肿瘤医院2005年1月至2010年12月术后接受CIK治疗的38例恶性黑素瘤患者作为CIK治疗组,按1∶3比例选取同期术后未接受CIK治疗的114例恶性黑素瘤患者作为对照组,两组配对因素包括临床分期、性别、年龄、有无溃疡、乳酸脱氢酶(lactate dehyolrogenase,LDH)活性、病理类型、KPS评分(Karnofsky performance status scale)等均衡一致。随访时间为2005年3月至2012年3月,临床疗效的观察终点为总生存(overall survival,OS)期。结果:CIK治疗组与对照组1年OS率分别为86.8%、74.6%(P=0.097),3年OS率分别为76.3%、46.5%(P=0.001),5年OS率分别为71.1%、43.9%(P=0.004);CIK治疗组中位生存期明显长于对照组(CIK治疗组中位生存期未达到观察终点,对照组中位生存期为20.1个月,P=0.004)。单因素和多因素分析显示,病理类型、LDH水平是影响CIK治疗恶性黑素瘤患者疗效的独立影响因素;CIK免疫治疗的疗程数可能与黑素瘤患者OS相关,CIK疗程>8次具有延长黑素瘤患者OS期的趋势。结论:CIK免疫治疗能改善恶性黑素瘤患者的OS期,增加CIK疗程数可能提高其疗效。     

细胞因子诱导的杀伤细胞对恶性肿瘤患者细胞表型的影响

目的:探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer cells,CIK cells)治疗对恶性肿瘤患者淋巴细胞亚群的影响,对比接受CIK细胞免疫治疗前后,培养细胞表型及患者淋巴亚群的变化.方法:选取辽宁省肿瘤医院手术、放化疗治疗结束1个月以上或无法进行以上治疗,单纯接受4个周期CIK细胞免疫治疗的恶性肿瘤患者67名入组.应用流式细胞术检测分析接受4周期CIK细胞免疫治疗前后患者淋巴细胞CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+/CD8+、CD3+CD56+、CD3-CD56+、CD3+PD1+亚群的变化情况.同时对各次输注细胞表型(CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD56+)进行检测,观察其变化.结果:患者接受4周期CIK细胞免疫治疗后,与治疗前相比,淋巴细胞CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+/CD8+、CD3+CD56+亚群略有升高,但无统计学差异.CD3-CD56+、CD3+PD1+亚群无明显变化.值得注意的是,输注细胞表型与第一次培养后相比,第二次、第三次的CIK细胞CD3+CD8+、CD3+CD56+表型呈阶梯型上升,结果有统计学差异.第三次与第四次无明显变化.结论:CIK细胞免疫治疗能稳定肿瘤患者免疫状态.接受过CIK细胞回输的患者,再次抽取外周血进行培养时,可增加体内CD3+CD56+前体细胞增殖和定向分化的能力,有望得到远期获益.     

Autograft mediated adoptive immunotherapy of cancer in the context of autologous stem cell transplantation

The infused stem cell autograft in autologous stem cell transplantation (ASCT) has been viewed mainly as hematologic rescue from the myelosuppressive side effect of conditioning regimens. However, recent reports have shown that the immune effector cells collected at the same time as the stem cells can produce an autologous graft-versus-tumor effect, similar to the graft-versus-tumor effect seen in allogeneic stem cell transplantation without the detrimental effects of graft-versus-host disease. In this article, we review the different immune effector cells collected and infused from the stem cell autograft and their association with clinical outcome post-ASCT, suggesting that ASCT can be viewed not only as a therapeutic maneuver to recover bone marrow function after deliver high-dose chemotherapy, but also as an adoptive immunotherapeutic intervention capable of eradicating residual tumor cells in patients with cancer.     

自然杀伤细胞过继免疫治疗的新进展

分子生物学的深入探讨使自然杀伤细胞（ｎａｔｕｒａｌ ｋｉｌｌｅｒ ｃｅｌｌ,ＮＫｃｅｌｌ）在肿瘤发生发展过程中的作用重新被人们所认识;ＮＫ细胞的扩增作为免疫治疗的手段又开始受到人们的重视。以往,虽然证明ＮＫ细胞的过继免疫治疗是安全的,但自体ＮＫ细胞过继免疫治疗的临床疗效却不能令人满意。新近的研究发现,通过靶向药物单克隆抗体的协同,可以明显改善其抗肿瘤效果。对ＮＫ细胞表面受体的研究证明抑制性受体ＫＩＲ在逃避免疫中起了重要作用,而抑制这些受体能够明显提高ＮＫ细胞的杀伤效率,为临床应用提供了可靠的理论基础和实际应用的可行性。异体半相合ＮＫ细胞的临床应用有可能克服自身ＮＫ细胞的缺陷,而对细胞信号进行靶向调节是最重要的突破,将进一步为临床广泛应用提供了可能。本文就ＮＫ细胞过继免疫治疗的最新进展作一综述。     

Local adoptive immunotherapy using lymphokine-activated killer cells and interleukin-2 against malignant pleural mesothelioma: report of two cases.

Malignant pleural mesothelioma is refractory to conventional therapy. We tried local adoptive immunotherapy using lymphokine-activated killer (LAK) cells and interleukin-2 (IL-2) to control malignant pleural effusion due to mesothelioma in two patients: Case 1 was that of a 69-year-old man, and Case 2 that of a 49-year-old woman with complicating chronic idiopathic thrombocytopenic purpura. A systemic survey revealed no sign of metastasis in either case. Intrapleural instillations of 6.7 x 10(9) autologous LAK cells in Case 1, or 11.3 x 10(9) allogeneic LAK cells in Case 2, with daily injections of IL-2 resulted in reductions of the pleural effusions in each case and in a decline in the level of hyaluronic acid in the effusion, in Case 1. The instillations of autologous and allogeneic LAK cells were well tolerated. The results suggest that local adoptive immunotherapy could be useful in the treatment of malignant effusion due to mesothelioma.     

CIK细胞联合白介素-2对鼻咽癌病人免疫功能及EB病毒指标的影响

目的：细胞因子诱导杀伤细胞（cytokine-induced killer cells，CIK细胞）是目前抗肿瘤过继细胞免疫治疗最为有效的方案。本研究通过治疗30例鼻咽癌病人，探讨CIK细胞联合IL-2对鼻咽癌病人免疫学功能及EB病毒指标的影响。方法：将符合条件的30例病人配对分为两组。治疗组病人接受CIK细胞过继细胞免疫治疗，每周一次，连续4周与对照组比较。免疫功能及EB病毒学指标分别通过测定外周血T淋巴细胞亚群，EB病毒VCA—IgA、EA—IgA、EDAb、DNA免疫荧光定量进行评估。结果：随访8—18个月，中位随访时间12个月。CIK治疗1个月后患者CD4^＋CD25^＋％明显下降，EB病毒VCA—IgA、EA—IgA、DNA免疫荧光定量下降显著。结论：CIK细胞可改善鼻咽癌病人的免疫功能，加速EB病毒抗体及DNA拷贝数下降。提示CIK治疗可消灭肿瘤微小残留灶及转移灶，可作为一种鼻咽癌的辅助治疗。     

CIK细胞联合白介素-2对鼻咽癌病人免疫功能及EB病毒指标的影响

目的:细胞因子诱导杀伤细胞(cytokine-inducedkillercells,CIK细胞)是目前抗肿瘤过继细胞免疫治疗最为有效的方案。本研究通过治疗30例鼻咽癌病人,探讨CIK细胞联合IL-2对鼻咽癌病人免疫学功能及EB病毒指标的影响。方法:将符合条件的30例病人配对分为两组。治疗组病人接受CIK细胞过继细胞免疫治疗,每周一次,连续4周与对照组比较。免疫功能及EB病毒学指标分别通过测定外周血T淋巴细胞亚群,EB病毒VCA-IgA、EA-IgA、EDAb、DNA免疫荧光定量进行评估。结果:随访8～18个月,中位随访时间12个月。CIK治疗1个月后患者CD4 CD25 %明显下降,EB病毒VCA-IgA、EA-IgA、DNA免疫荧光定量下降显著。结论:CIK细胞可改善鼻咽癌病人的免疫功能,加速EB病毒抗体及DNA拷贝数下降。提示CIK治疗可消灭肿瘤微小残留灶及转移灶,可作为一种鼻咽癌的辅助治疗。     

DCIK细胞联合化疗治疗晚期消化道肿瘤的临床疗效

目的:评价树突状细胞调节的细胞因子诱导的杀伤细胞(DC activated and cytokins induced killer,DCIK)联合化疗治疗晚期消化道肿瘤的疗效。方法:实验采用武警总医院2005年6月至2007年8月应用DCIK联合全身化疗治疗晚期消化道肿瘤的患者23例作为联合治疗组。同期进行单纯化疗的20例晚期消化道肿瘤患者作为对照组。联合治疗组患者均于化疗前采集外周血单个核细胞(PBMC)。将PBMC体外培养产生DCIK细胞。联合治疗组患者首先行2周期全身化疗,化疗结束后回输质量合格的DCIK细胞。单纯化疗组仅进行2周期全身化疗。观察两组近期疗效、临床受益反应改善程度、肿瘤标志物、免疫指标及1年、3年生存率。结果:两组近期疗效无显著性差异(P>0.05)。联合治疗组治疗后KPS评分升高(P<0.05),单纯化疗组治疗后KPS评分较治疗前无改善(P>0.05)。联合治疗组患者治疗后外周血CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞的比例大幅升高(P<0.01);而单纯化疗组患者无明显变化(P>0.05)。联合治疗组1年生存率78.3%;单纯化疗组1年生存率80%(P>0.05)。联合治疗组3年生存率52.2%;单纯化疗组3年生存率30%(P<0.01)。结论:DCIK联合化疗治疗晚期消化道肿瘤具有更好的疗效,其临床受益反应有较大的提高,免疫功能有所改善,3年生存率提高。