蛋白酶体抑制剂单用或联合顺铂对人胃癌细胞的抑制效应

背景：蛋白酶体抑制剂通过阻断泛素．蛋白酶体通路中的蛋白降解，致使错误折叠蛋白或受破坏蛋白堆积．启动热休克反应并进一步导致细胞死亡，对多种恶性肿瘤细胞具有抑制作用。目的：探讨蛋白酶体抑制剂Z-Leu—Leu—Phe-CHO（ZLLFC）单用或联合顺铂对人胃癌细胞株SGC-7901体外增殖和凋亡的影响及其对肿瘤多药耐药相关切除修复交叉互补基因1（ERCC1）mRNA表达的影响。方法：将ZLLFC和顺铂单独或联合作用于SGC-7901细胞。以甲基噻唑基四唑（MITT）法检测细胞存活率，透射电子显微镜观察凋亡细胞形态，流式细胞仪检测细胞凋亡率．逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测ERCC1 mRNA表达。结果：ZLLFC或顺铂单独作用后，SGC-7901细胞存活率较对照组显著降低（P〈0．01），呈现轻度凋亡形态；ZLLFC联合顺铂组细胞存活率较单用顺铂组显著降低（P〈O．01），细胞凋亡率显著升高（P〈O．01），呈现明显凋亡形态。联合组ERCC1 mRNA表达显著低于单用顺铂组（P〈0．01）。结论：蛋白酶体抑制剂ZLLFC能轻度抑制人胃癌细胞株SGC．7901生长，诱导细胞凋亡，与顺铂联用具有协同抑制效应。ZLLFC可能通过下调ERCC1转录水平逆转顺铂耐药，从而增强顺铂的抗肿瘤作用。     

紫杉醇联合顺铂治疗晚期胃癌临床观察

目的观察紫杉醇与顺铂合用治疗晚期胃癌的近期疗效。方法紫杉醇175mg/m2每天1次静脉滴注,顺铂60~80mg/m2每天1次静脉滴注;21d为1周期。结果可评价者19例,PR9例,总有效率47.4%。毒副反应主要是骨髓抑制和消化道反应。结论紫杉醇与顺铂联合治疗晚期胃癌可获得较高疗效,毒副反应可耐受,是一种较好的联合化疗方案。     

顺铂对人胃癌SGC7901细胞株中干细胞的影响

<正>肿瘤组织中存在极少量具有无限自我更新能力和多向增殖潜能的细胞,即肿瘤干细胞(CSC),它们不仅在肿瘤的形成、发展和转移方面起着重要的作用,也可能是肿瘤耐药及抵抗放化疗的根源〔1,2〕。Nanog基因作为全能性或多能性干细胞标记物,在胚胎干细胞和包括肺癌、胃癌在内的多种CSC中表达〔3,4〕。本研究旨在揭示顺铂干预人胃癌SGC7901细胞后,对胃癌干细胞的影响。1材料与方法     

恩度联合顺铂对胃癌种植瘤生长与血管生成的影响

目的 观察重组人血管内皮抑制素恩度以及顺铂对裸鼠胃癌移植瘤生长以及微血管密度的影响.方法 0、5 mg/kg恩度,5 mg/kg体积顺铂,5 mg/kg恩度及5 mg/kg顺铂干预人胃癌荷瘤小鼠,免疫组化法检测CD34(MVD)表达情况,应用RT-PCR和Western印迹方法分别从mRNA和蛋白水平检测ID1、VEGF表达量的变化,透射电镜检测细胞凋亡.结果 与对照组相比,恩度组ID1、VEGF、MVD表达量减少,顺铂组肿瘤减小,细胞凋亡量增加;联用组肿瘤减,细胞凋亡最多,而MVD表达量与恩度组无明显差异.结论 恩度可以通过抑制ID1表达减少胃癌血管生成,增加化疗药物敏感性.     

紫杉醇联合顺铂或奥沙利铂治疗晚期胃癌疗效比较

2000年以来,我们采用紫杉醇(TAX) 顺铂(DDP)或TAX 奥沙利铂(TL)治疗晚期胃癌43例．并观察比较两种方案的疗效与不良反应。现报告如下。     

抑制端粒酶活性能增加胃癌细胞对顺铂的敏感性

肿瘤细胞存在多药耐药现象和化疗药物的毒副作用是影响肿瘤化疗效果的主要原因。新近研究表明 ,表达于绝大多数肿瘤细胞而不表达于正常体细胞的端粒酶与化疗敏感性有关[1,2 ] 。在我们既往研究工作的基础上 ,我们观察了反义人端粒酶ＲＮＡ(ｈＴＲ)转染的ＳＧＣ 790 1胃癌细胞在端粒酶活性受抑制后对常用化疗药物顺铂敏感性的变化 ,探索胃癌联合化疗的新途径。一、材料与方法1 细胞培养 :人胃癌细胞系ＳＧＣ 790 1和反义人端粒酶ＲＮＡ转染的ＳＧＣ 790 1细胞 (790 1 ａｈＴＲ) [3] 均培养于含 10 %灭活的小牛血清、10 0 μｇ/ｍｌ链霉素、10…     

端粒酶反义寡核苷酸促进顺铂诱导原代胃癌细胞凋亡

目的:探讨端粒酶反义寡核苷酸(PS-ASODN)对顺铂诱导原代胃癌细胞凋亡的影响。方法:采用台盼蓝拒染法计算细胞生长抑制率,观察PS-ASODN联合顺铂对原代胃癌细胞生长的影响;流式细胞学观察细胞凋亡率及细胞周期变化。结果:终浓度为3μM的PS-ASODN作用于原代胃癌细胞24 h后加入顺铂(2.0μg/ml),能明显抑制胃癌细胞增殖,同时流式细胞学检测到凋亡峰,细胞受阻于G0/G1期,作用48 h及72 h的凋亡细胞百分率(35.1％,45.7％)明显高于N-ASODN组、PS-ASODN组、DDP组及N-ASODN+DDP组,差异有显著性(P<0.05)。其作用呈时间依赖性及序列特异性。结论:以端粒酶RNA模板区为靶点的反义寡核苷酸可促进顺铂诱导的胃癌细胞凋亡,对胃癌具有重要治疗价值。     

顺铂压力下HepG2细胞内活性氧及线粒体膜电位的变化

目的了解顺铂压力下人肝母细胞瘤株(HePG2)细胞内活性氧(ROS)的水平及线粒体膜电位的变化及意义。方法低剂量顺铂与HePG2细胞共孵。活性氧探针(2，7二氯荧光素)探测顺铂压力下HePG2细胞内活性氧水平的变化；用反应膜电位荧光探针罗丹明-123，在激光扫描共聚焦显微镜下，通过荧光强度反映线粒体膜电位的变化。于0、24、48、72、120、l68h动态观察HePG2细胞内活性氧和线粒体膜电位的变化。结果顺铂持续作用24h和48h时，活性氧的产生较正常明显增多，尤以24h时最明显，72h后开始下降，120h后基本接近正常；顺铂选择性压力下，24h和48h HePG2细胞内罗丹明-123的荧光强度明显减弱，以24h时最明显，72h以后逐渐升高，120h以后与未经处理的HePG2细胞无明显差异。结论HepG2细胞在低剂量顺铂的压力下，细胞内活性氧水平和线粒体膜电位的变化，提示HepG2细胞可对低剂量顺铂的持续压力发生适应性变化。     

p38MAPK抑制剂增强人宫颈癌细胞对顺铂的敏感性

目的 探讨p38 MAPK抑制剂通过蛋白激酶B(Akt)有关的信号途径对人宫颈癌细胞顺铂(CDDP)化疗敏感性的影响.方法 应用CDDP和p38MAPK特异性抑制剂SB203580及两者联合应用处理人宫颈癌Hela细胞株.采用MTT法检测化疗药物对肿瘤细胞的生存抑制率,Western印迹技术检测化疗药物处理后Akt和磷酸化Akt的表达水平.结果 MTT显示CDDP和SB203580对人宫颈癌细胞均有抑制作用(24.34％,36.58％),两者相同用量联合后癌细胞抑制率更明显(58.76％).Western印迹结果说明CDDP处理组与联合处理组Akt表达水平无明显差异,而pAkt水平较SB203580组和联合组显著升高.结论 p38 MAPK抑制剂SB203580可能通过阻断PI3K/Akt途径或其他有关Akt的通路提高人剧颈癌细胞CDDP化疗的敏感性.     

顺铂鱼肝油酸钠配伍治疗胃癌的实验研究

用ＭＴＴ法观察顺铂（ＣＤＤＰ）与鱼肝油酸钠（ＳＭ）配伍对人胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１的体外杀伤效果。人胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１被接种于裸鼠皮下以建立荷瘤裸鼠。ＣＤ－ＤＰ每次３ｍｇ·ｋ（－１）．ｔｉｍｅ（－１），ＳＭ：５０ｍｇ·ｋｇ（－１）·ｔｉｍｅ（＿１），容量：５０μｌ，肿瘤组织中心注射。配伍组肿瘤ＳＭ和ＣＤＤＰ交叉给药，两药间隔３０分钟，每３天１次，共３次。ＳＭ在体外对胃癌细胞有很强的杀伤作用；局部注射后，配伍组的抗癌作用明显高于各单一药物组，肿瘤细胞全部坏死，周围有纤维组织包绕，血管内皮细胞坏死。ＳＭ与ＣＤＤＰ协同抗肿瘤作用明显。     

人胃癌顺铂耐药细胞系的建立过程

目的:建立人胃癌顺铂耐药细胞系方法:采用逐步递增顺铂浓度,间歇作用体外诱导法建立人胃癌顺铂耐药细胞系SGC7901/ DDP,每月作相关检测;MTT法测定药物敏感性:光镜、电镜、MTT法计数活细胞、流式细胞仪等方法观察其生物学特征的改变.结果:历时4 mo建成人胃癌顺铂耐药细胞系SGC7901/DD P,1,2,3,4mo的耐药指数分别为2.13,5.32,12.60,12.93,并且与5-氟尿嘧啶、丝裂霉素等多种抗癌药有不同程度的交叉耐药性:SGC7901/DDP的细胞形态逐渐发生改变;体外群体倍增时间较亲代细胞逐渐延长:细胞周期分析发现其S期与G_2/M期细胞逐渐减少,G_0/G_1期细胞逐渐增多.结论:SGC7901/DDP细胞具有耐药表型特征,耐药性能稳定,增殖能力逐渐下降.     

顺铂鱼肝油酸钠配伍治疗胃癌的实验研究

用ＭＴＴ法观察顺铂（ＣＤＤＰ）与鱼肝油酸钠（ＳＭ）配伍对人胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１的体外杀伤效果。人胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１被接种于裸鼠皮下以建立荷瘤裸鼠。ＣＤ－ＤＰ每次３ｍｇ·ｋｇ~（－１）·ｔｉｍｅ~（－１），ＳＭ：５０ｍｇ·ｋｇ~（－１）·ｔｉｍｅ~（－１），容量：５０μｌ，肿瘤组织中心注射。配伍组肿瘤ＳＭ和ＣＤＤＰ交叉给药，两药间隔３０分钟，每３天１次，共３次。ＳＭ在体外对胃癌细胞有很强的杀伤作用；局部注射后，配伍组的抗癌作用明显高干各单一药物组，肿瘤细胞全部坏死，周围有纤维组织包绕，血管内皮细胞坏死。ＳＭ与ＣＤＤＰ协同抗肿瘤作用明显。     

EZH2抑制剂联合顺铂对非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响

目的探讨EZH2抑制剂UNC1999联合顺铂对肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响。方法传代培养人肺癌A549细胞系,取生长良好的传代细胞分为对照组、联合用药组、顺铂组和UNC1999组。所有组均给予RPMI 1640培养液及10%的胎牛血清培养,对照组不加药液,联合用药组分别加入10、20、40、80、160 nmol/L UNC1999药液及2.5、5、10、20、40μg/ml顺铂药液;顺铂组分别加入2.5、5、10、20、40μg/ml顺铂药液;UNC1999组分别加入10、20、40、80、160 nmol/L的UNC1999药液;采用MTT比色法检测各组细胞增殖抑制率中IC50及联合指数(CI)。Western印迹法检测各组相关凋亡蛋白及细胞外调节蛋白激酶(ERK)及p-ERK的表达水平。流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。结果与对照组相比,UNC1999组、顺铂组、联合用药组细胞增殖均受到不同程度抑制(P0.05)。各组细胞增殖抑制作用存在剂量-时间依赖关系,且UNC1999与顺铂存在协同作用。UNC1999组、顺铂组、联合用药组与对照组比较细胞凋亡差异显著(P0.05)。UNC1999组、顺铂组、联合用药组中凋亡蛋白Bax、Caspase-3表达明显升高,p-ERK蛋白表达明显降低,联合用药组Bcl-2表达低于对照组(P0.05)。结论 EZH2特异性抑制剂UNC199可能通过抑制MAPK-ERK细胞通路起到抑制肺癌A549细胞增殖,促进其凋亡,与顺铂单药或联合均具有协同效应。     

顺铂腹腔热灌注化疗对胃癌患者术后免疫功能和预后的影响

目的探讨顺铂腹腔热灌注化疗(HIPC)对胃癌患者术后免疫功能和预后的影响。方法胃癌手术患者90例按随机数字表法分为对照组和观察组,每组45例,两组均接受胃癌根治术和静脉化疗方案,观察组在此基础上给予HIPC。治疗完成后,随访调查患者生存质量、化疗疗效、化疗毒副作用发生情况和T细胞亚群改变情况。结果观察组治疗后CD3~+、CD4~+和CD4~+/CD8~+比值均显著升高(P<0.05),而CD8~+显著低于治疗前(P<0.05),对照组治疗前后差异无统计学意义(P>0.05);观察组治疗后生存质量和疗效显著优于对照组(P<0.05);两组化疗毒副作用发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HIPC较传统化疗疗效更佳,可以提高患者生存质量,改善患者免疫功能,但其毒副作用暂时未发现,有待延长随访时间和扩大样本量做进一步研究。     

多帕菲联合顺铂治疗晚期胃癌临床观察

据文献报道,胃癌的发病率及死亡率分别居恶性肿瘤的第2、4位。目前．国内外通常将5-氟尿嘧啶与顺铂（PDD）或奥沙利铂与5-氟尿嘧啶联用作为胃癌的常规化疗方案,但其临床有效率低,缓解期短。近年来,我们应用紫杉烷类抗肿瘤药多帕菲联合PDD治疗晚期胃癌,取得较好疗效。现报告如下。     

体外香菇多糖对顺铂抑制胃癌细胞增殖的促进作用

目的:研究体外香菇多糖(Lentinan)对多药耐药基因表达的影响和促进顺铂抑制胃癌细胞增殖的作用.方法:分别用顺铂(Cisplatin)、香菇多糖和顺铂联合香菇多糖处理SGC-7901胃癌细胞,将其分为4组:对照组(Con组),香菇多糖组(Len组),顺铂组(Cis组)和顺铂联合香菇多糖组(L+C)组.应用RT-PCR检测多药耐药基因MDR1、MRP1和LRP基因mRNA表达;应用CCK-8试剂盒检测Con组和药物处理组前后的胃癌细胞增殖状态.结果:正常SGC-7901胃癌细胞中多药耐药基因MDR1、MRP1和LRP均表达mRNA,香菇多糖能显著降低多药耐药基因表达而对细胞增殖无明显影响;顺铂明显增加多药耐药基因表达,同时抑制细胞增殖(P<0.05);香菇多糖联合顺铂作用后,MDR1和MRP1基因表达完全受到抑制,LRP表达显著降低,细胞增殖速度明显低于Con组、Len组和Cis组,差异具有统计学意义(10d:0.54vs1.90,1.88,0.92,均P<0.05).结论:香菇多糖联合顺铂后因抑制多药耐药基因表达而显著增强顺铂的抑制细胞增殖作用.     

顺铂结合CIK细胞对裸鼠人胃癌模型体内的抗肿瘤作用

目的:探讨顺铂、CIK细胞以及顺铂联合CIK对裸鼠人胃癌移植瘤生长的抑制作用,为临床上联合应用顺铂和CIK细胞治疗胃癌提供实验依据.方法:应用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞,给予多种细胞因子(rhIFN-g、CD3mcAb、rh1L-1、rhlL-2),诱导生成CIK细胞;培养人胃癌细胞株SGC-7901,接种至80只裸鼠右腋皮下,10 d后取移植瘤直径基本一致的裸鼠随机分4组:NS对照组、顺铂组、CIK细胞组和顺铂+CIK细胞组,每组16只.连续5 d在接种肿瘤细胞部位处给予相应注射治疗,观察其对胃癌移植瘤模型的抗肿瘤疗效.结果:与NS对照组相比,顺铂组、CIK细胞组、顺铂+CIK细胞组裸鼠人胃癌移植瘤模型治疗后肿块质量均减轻,生存期均明显延长,尤以顺铂+CIK组效果显著(P<0.01).裸鼠体内实验表明,顺铂+CIK细胞联合应用能够显著抑制胃癌细胞的生长,其抑瘤率可达57.8%,明显高于NS对照组(P<0.01).免疫功能检测显示红细胞C3b反应受体明显升高,红细胞免疫复合物受体明显降低(P<0.01).结论:顺铂联合CIK细胞对人胃癌移植瘤生长的抑制作用大于单独应用顺铂或CIK细胞.     

多西紫杉醇+顺铂方案联合康艾注射液治疗晚期胃癌的近期疗效及安全性

目的探讨多西紫杉醇+顺铂方案联合康艾注射液治疗晚期胃癌的近期疗效及安全性。方法以78例晚期胃癌患者为研究对象,采用随机数字法分为多西紫杉醇+顺铂方案联合康艾注射液组(D+C+K组)40例和多西紫杉醇+顺铂方案组(D+C组)38例,观察两组临床治疗效果及相关症状发生情况。结果治疗前,D+C+K组与D+C组患者的白细胞计数没有统计学差异(P0.05);治疗后与治疗前比较两组白细胞计数均有较大幅度的降低(P0.05);但相对于D+C组,治疗后D+C+K组白细胞计数有了较大幅度的下降(P0.05)。治疗前,D+C+K组与D+C组的CD4,CD8,CD4/CD8比值无显著性差异;而治疗后,D+C+K组与治疗前相比差异不明显(P0.05),D+C组的CD4,CD8,CD4/CD8比值与治疗前相比却有了较大幅度的下降(P0.05)。D+C+K组临床症状改善率和健康状况变化(KPS)提高率分别为92.5%(37/40)和82.5%(33/40),明显高于D+C组〔50.0%(19/38),47.4%(18/38)〕(P0.05)。结论多西紫杉醇+顺铂方案联合康艾注射液治疗晚期胃癌近期效果较好,可以缓解由于化疗药物引起的白细胞计数降低,从而改善患者生活质量并提高安全性。     

替吉奥与多西他赛联合顺铂治疗老年晚期胃癌的疗效比较

目的比较替吉奥与多西他赛联合顺铂治疗老年晚期胃癌的疗效和不良反应。方法将138例老年胃癌患者按性别、年龄、病理类型、癌细胞转移等指标进行筛选编号,分成两个组,每组69例,其中,体力状况较好的患者采用替吉奥与多西他赛联合顺铂治疗(称为联合治疗组),另一组采用替吉奥联合顺铂治疗(称为常规治疗组)。比较两组患者的疗效和不良反应。结果常规治疗组和联合治疗组的有效治疗率分别为44.93%和47.83%,有效控制率分别为78.26%和79.71%,两组间比较差异无统计学意义(χ~2=0.047,P=0.623;χ~2=0.038,P=0.617)。联合治疗组患者的白细胞减少、中性粒细胞减少、血小板减少、腹泻、恶心呕吐、口腔黏膜炎、色素沉着和周围神经毒性等不良反应的发生率明显高于常规治疗组(均P<0.05)。结论替吉奥与多西他赛联合顺铂治疗老年晚期胃癌有效率较高,不良反应发生率较高但可控制。