肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶9及其抑制因子1基因表达的动态变化及下瘀血汤对其影响

[目的]研究免疫性肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶9(MMP-9 mRNA)和基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1 mRNA)基因表达的动态变化及下瘀血汤对其影响,探讨下瘀血汤抗肝纤维化的机制。[方法]猪血清腹腔注射复制大鼠肝纤维化模型,造模8周后灌胃给予下瘀血汤流浸膏干预治疗,用药4周后和造模过程中的1、2、4、8周动态处死大鼠,获取标本,检测指标。[结果]与正常组相比,模型组1、8、12周MMP-9 mRNA表达明显降低(P0.05,0.01),2周MMP-9 mRNA表达显著升高(P0.01),4周表达无明显变化。与模型组12周相比,下瘀血汤组MMP-9 mRNA表达明显升高(P0.05)。与正常组相比,1、2、4、8和12周模型组TIMP-1 mRNA表达均有显著升高(P0.05,0.01))。与12周模型组相比,下瘀血汤组TIMP-1 mRNA表达显著降低(P0.01)。[结论]大鼠猪血清免疫性肝纤维化存在着MMP-9 mRNA和TIMP-1 mRNA的动态变化,下瘀血汤可通过促进MMP-9 mRNA表达和抑制TIMP-1 mRNA表达而发挥抗肝纤维化的作用。     

秋水仙碱对肝纤维化大鼠肝脏基质金属蛋白酶-1及其抑制因子-1表达的影响

目的 观察秋水仙碱对纤维化肝脏基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响,从胶原降解的角度探讨秋水仙碱对肝纤维化有无逆转作用及可能存在的机制.方法 制备免疫性大鼠肝纤维化模型,并给予秋水仙碱治疗;通过RT-PCR检测MMP-1、TIMP-1的表达,并作Ⅰ、Ⅲ型胶原的免疫组化以及Masson胶原染色.结果 发现秋水仙碱对肝纤维化大鼠MMP-1的表达无明显影响(P>0.05),但可以抑制TIMP-1的表达(P<0.05),促进Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解(P<0.05);然而在病理形态学的观察中,未发现秋水仙碱治疗组与肝纤维化模型组之间存在的显著性差异(P>0.05).结论 秋水仙碱可以抑制纤维化肝脏TIMP-1的表达,从而增强间质胶原酶的活性,促进Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解,产生抗肝纤维化的作用,但其作用有限.     

干扰素-γ对大鼠肝组织中的MMP-13与TIMP-1表达的干预作用

目的 探讨干扰素-γ对实验性大鼠肝组织中的基质金属蛋白酶-13(MMP-13)与金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响.方法 SD大鼠22只,随机分为3组:正常组(7只)、模型组(6只)和干扰素-γ组(9只);用四氯化碳制备大鼠肝纤维化模型,在10周末处死各组大鼠,取肝脏进行HE染色,并运用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织中MMP-13 mRNA与TIMP-1 mRNA的表达量.结果 MMP-13 mRNA的表达,与正常组对比,模型组和干扰素-γ组的MMP-13 mRNA的表达量增高(P<0.01),但模型组和干扰素-γ组之间还不能认为有统计学差别(P>0.01);而TIMP-1 mRNA表达与正常组相比,模型组和干扰素-γ组中的TIMP-1 mRNA的表达都升高(P<0.01),而且模型组中的TIMP-1 mRNA表达量比干扰素-γ组高(P<0.01).在肝纤维化病理学观察的量化秩和分析中,各组之间的差别明显(P<0.005).结论 干扰素-γ逆转肝纤维化的机制可能是减少肝纤维化大鼠肝脏中的TIMP-1 mR-NA的表达,从而逆转肝纤维化.     

益气活血方对急性心肌缺血大鼠模型MMP-9及TIMP-1表达的影响

目的观察益气活血方对急性心肌缺血大鼠模型基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶特异性抑制物-1(TIMP-1)表达的影响。方法应用结扎冠状动脉左前降支方法建立Wistar大鼠急性心肌缺血模型,运用HE染色观察其病理改变,同时以ELISA法和SP免疫组化法检测血清TIMP-1含量及心肌组织中MMP-9的阳性表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠出现显著的心肌缺血损伤的病理形态;与模型组比较,各药物干预组均可增加心肌缺血后大鼠血清TIMP-1含量(P<0.05),中药高剂量组血清TIMP-1含量显著高于低剂量组和阳性对照组(P<0.01);与模型组比较,各药物干预组大鼠心肌组织中MMP-9表达较有明显降低(P<0.01)。结论益气活血方对大鼠缺血心肌有显著的保护作用,其作用机制可能与影响TIMP-1及MMP-9的表达有关。     

慢性肝病患者血清MMP-1及TIMP-1的检测及临床意义

目的研究基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)在慢性肝病患者肝纤维化过程中的表达和动态变化。方法采用双抗体"夹芯"酶联免疫吸附(ELISA)法检测64例慢性乙型肝炎和22例乙型肝炎肝硬化患者血清MMP-1和TIMP-1水平,并与20例正常体检者进行对照。结果血清MMP-1水平在慢性肝病患者肝纤维化过程中逐渐降低,而血清TIMP-1水平则逐渐增高,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.01);其中慢性肝炎轻度患者血清MMP-1水平与中度、重度和肝硬化之间,中度与重度和肝硬化之间两两比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01),而慢性肝炎重度与肝硬化之间比较无显著性相差(P>0.05);慢性肝炎轻度患者血清TIMP1水平与中度、重度和肝硬化之间,中度与重度和肝硬化之间,重度与肝硬化之间两两比较均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论血清MMP-1和TIMP-1在慢性肝病患者肝纤维化过程中可能起重要作用,能够被用来做为判断肝纤维化程度的指标,尤其是血清TIMP-1意义更大。     

抗纤软肝颗粒对肝纤维化大鼠肝脏基质转换及肝窦毛细血管化的影响

目的:观察抗纤软肝颗粒对实验性肝纤维化时肝脏基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)以及肝窦毛细血管化的影响,探讨其防治肝纤维化的作用。方法:250ml/L CCl_4经大鼠皮下注射制备肝纤维化模型并同时给予秋水仙碱、小和大剂量抗纤软肝颗粒治疗,用光镜和电镜观察肝组织病理变化;免疫组织化学法检测肝组织Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原、层粘蛋白(LM)原住杂交的方法检测MMP-1 mRNA、TIMP-1 mRNA。结果:抗纤软肝颗粒能促进MMP-1的表达(P<0.05),抑制TIMP-1的表达(P<0.01),促进Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解(P<0.01);有效抑制Ⅳ型胶原、LM的生成和沉积(P<0.01),改善肝纤维化大鼠肝组织病理变化(P<0.01)。减轻肝窦毛细血管化程度。结论:抗纤软肝颗粒能促进MMP-1的表达,抑制TIMP-1的表达,促进胶原的降解,抑制肝窦毛细血管化的形成,从而产生抗肝纤维化的作用。     

藻鳖软肝汤抗肝纤维化的实验研究

目的:观察藻鳖软肝汤对实验性肝纤维化大鼠肝脏基质金属蛋白酶(MMP-1)、基质金属蛋白酶抑制物(TIMP-1)、血小板源性生长因子(PDGF-β)及肝组织病理学变化的影响,探讨其抗纤维化作用机制.方法:60?l4经大鼠皮下注射制备纤维化模型,按组分别给生理盐水,小、中、大剂量藻鳖软肝汤治疗.用光镜观察肝病理变化,免疫组化染色法检测PDGF-β、MMP-1、TIMP-1.结果:藻鳖软肝汤能显著改善肝纤维化大鼠肝脏病理变化(P＜0.05),抑制肝细胞变性坏死及纤维结缔组织增生;PDGF-β、TIMP-1及TIMP-1/MMP-1均显著下降(P＜0.05),MMP-1无明显变化.结论:藻鳖软肝汤抑制PDGF-β和TIMP-1的合成,调节TIMP-1/MP-1比值,阻止胶原的生成,促进胶原的分解,抑制肝细胞变性坏死及结缔组织增生,达到抗纤维化的目的.     

丹酚酸B对肝纤维化大鼠TGF-β1、MMP-2和TIMP-2表达的影响

目的:观察丹酚酸B盐(salvianolic acid B,SA-B)对肝纤维化大鼠肝组织转化生长因子-β1 (TGF-β1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)表达的影响,并探讨SA-B抗肝纤维化的可能机制.方法:♂SD大鼠30只随机分为正常对照组、模型组和丹酚酸B治疗组,以5 mL/L的二甲基亚硝胺(DMN)建立肝纤维化模型,治疗组在造模4 wk后给予SA-B治疗4 wk.应用HE,Masson染色观察肝组织病理纤维化分级,全自动生化分析仪检测ALT、AST和Alb,放免法检测HA和LN,S-P免疫组织化学方法检测TGF-β1、MMP-2和TIMP-2蛋白质的表达.结果:与模型组相比,SA-B能改善肝纤维化大鼠肝脏病理组织学结构,治疗组血清ALT、AST、HA和LN水平明显减低(87.0±28.7 U/L vs 190.4±27.4 U/L.85.6±25.3 U/L vs 178.2±15.9 U/L,179.7±32.8 mg/L vs 433.3±86.1 mg/L,135.6±21.1 mg/L vs 224.7±29.2 mg/L,均P<0.01),经SA-B干预后TGF-β1和TIMP-2表达明显下降,与模型组相比有显著性差异(18.53±2.54 vs 12.78±2.65,21.88±3.83 vs 14.69±4.51,均P<0.01),而MMP-2表达水平无明显变化.结论:SA-B能改善肝纤维化大鼠肝脏病理组织学结构,可能通过抑制TGF-β1和TIMP-2表达而促进肝纤维化的逆转.     

晚期血吸虫病肝纤维化指标与肝组织病理学的相关性研究、

目的探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）及其组织抑制因子-1（TIMP-1）在晚期血吸虫病（晚斑）肝组织和血清中的表达及其与肝组织病理学的关系。方法采用免疫组化sP法检测45例晚血（观察组）肝组织中TGF-β1、MMP-1、TIMP-1表达;采用EIASA法检测观察组和30例健康人（对照组）血清TIMP-1、TGF-β1、MMP-1水平。结果观察组肝组织中TGF-β1、TIMP-1表达强度与肝纤维化程度、有无合并HBV感染呈正相关（P均〈0．05）;而MMP-1无相关性。与对照组比较,观察组血清TGF-β1、TIMP-1水平及TIMP-1／MMP-1值明显增高（P均〈0．01）,并与肝纤维化程度、免疫组化表达强度呈正相关（P均〈0．01）,而血清MMP-1差异无统计学意义。结论TGF-β1、MMP-1、TIMP-1与晚血肝纤维化的发生、发展密切相关,三者联合检测可作为晚血患者肝纤维化诊断和疗效评估指标。     

胃肠安方对胃癌基质金属蛋白酶9及基质金属蛋白酶抑制因子1/2蛋白表达的影响

[目的]观察胃肠安方对人胃癌裸鼠原位移植瘤转移的抑制作用及其对基质金属蛋白酶9 (matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制因子(matrix metalloproteinases tissue inhibitor,TIMP)-1、TIMP-2蛋白表达的影响.[方法]建立裸小鼠胃原位癌模型,分为胃肠安方组及模型组,观察裸小鼠胃癌种植后肿瘤转移灶情况以及与肿瘤生长与转移密切相关的MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的影响.[结果]胃肠安方能够抑制胃癌生长与转移,与模型组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).胃肠安方组MMP-9蛋白阳性表达明显弱于模型组,TIMP-1及TIMP-2蛋白阳性表达明显强于模型组.[结论]胃肠安方具有抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤转移作用,其抑制胃癌转移的部分作用机制与抑制MMP-9蛋白表达及上调TIMP-1、TIMP-2蛋白表达有关.     

肝细胞生长因子抗大鼠肝纤维化作用及其机制的探讨

目的研究肝细胞生长因子(HGF)对实验性肝纤维化大鼠的基质金属蛋白酶13(MMP-13),抑制因子1(TIMP-1),转移生长因子β1(TGFβ-1)表达的影响,探讨HGF抗肝纤维化作用的可能机制。方法清洁级wistar大鼠30只,建立CCL4综合因素诱导的大鼠肝纤维化模型,造模2周后大鼠随机分为3组,每组10只正常对照组(A组),HGF治疗组(B组),模型对照组(C组),B组给予HGF治疗。治疗6周后处死全部大鼠,取血清检测肝纤维化指标,采用HE染色及VG染色观察大鼠肝纤维化程度,免疫组化法检验肝组织MMP-13,TIMP-1,TGFβ-1的表达。结果治疗组肝纤维化血清学指标较模型组有一定程度改善(P值<0.05)。HE染色及VG染色显示HGF治疗组(B组)较模型对照组(C组)在形态学及纤维形成方面均有显著性差异(P值<0.05)。B组与C组比较MMP-13活性升高(0.173±0.030vs0.120±0.049,P<0.05);TIMP-1活性降低(0.159±0.047vs0.0229±0.062,P<0.05);TGFβ-1活性降低(0.190±0.040vs0.235±0.028,P<0.05)。结论肝细胞生长因子可能通过促进MMP-13的活性或抑制TGFβ-1,TIMP-1活性而发挥抗肝纤维化的作用。     

阿尔茨海默病模型大鼠脑海马内MMP-9和TIMP-1 mRNA的表达

目的探讨基质金属蛋白酶(MMP)-9和基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1在阿尔茨海默病(AD)模型大鼠脑海马CA1区的mRNA表达水平。方法将30只雄性Wistar大鼠,随机分为A、B、C、D、E组,每组6只。A组注射5μl生理盐水,B、C、D、E组双侧海马注射凝胶态Aβ25~355μl(依次含有Aβ25~350.5,1.0,5.0,10.0μg),大鼠于14 d后处死。取各组大鼠新鲜血清采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β的表达量;取新鲜脑海马组织提取mRNA,qRTPCR技术检测MMP-9和TIMP-1 mRNA表达量。结果血清TNF-α含量D、E组明显高于A、B、C组(P<0.01);血清IL-1β含量D、E组明显高于A、B、C组(P<0.01)。MMP-9 mRNA表达量D、E组明显高于A、B、C组(P<0.01);TIMP-1 mRNA表达D、E组明显高于A、B、C组(P<0.01)。结论 Aβ所致AD大鼠脑内发生了炎症反应,MMP-9表达上调,而TIMP-1可与MMP-9特异性结合,进而抑制其活性,因此随着MMP-9上调,TIMP-1表达量也随之增加。     

H2松弛素对慢性阻塞性肺疾病大鼠支气管平滑肌增殖的抑制作用

目的探讨H2松弛素对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠支气管平滑肌增殖的抑制作用。方法观察正常对照组、COPD模型组及松弛素治疗组大鼠肺组织的病理变化,比较各组大鼠支气管壁及平滑肌厚度,检测基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-9、基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1表达水平及MMP-1/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1比值。结果与正常对照组大鼠相比,COPD模型组大鼠肺支气管壁及平滑肌厚度显著增厚,且松弛素治疗组大鼠肺支气管壁厚度及平滑肌厚度与COPD模型组大鼠相比显著降低(P0.05)。COPD模型组大鼠组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1的表达水平均高于正常对照组(P0.05),且MMP-1/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1比值与正常对照组相比,呈现明显升高趋势(P0.05);而对比COPD模型组大鼠,松弛素治疗组大鼠组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1的表达有所降低(P0.05),且MMP-1/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1比值与COPD模型组相比均降低(P0.05)。结论松弛素能抑制大鼠肺组织结构病理变化,抑制COPD气道平滑肌的增殖。     

慢性乙型肝炎血清MMP-1和TIMP-1与肝脏炎症及肝纤维化的相关性

目的观察慢性乙型肝炎患者血清基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)与肝脏炎症活动度及纤维化程度的相关性。方法选择2005年6月至2006年10月广州市第八人民医院收治的慢性乙型肝炎患者64例,均行肝穿刺活检病理组织检查并进行肝脏炎症活动度分级(G)及纤维化程度分期(S)。用双抗体夹芯酶联免疫吸附试验检测血清MMP-1及TIMP-1,用放射免疫法检测血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原N端肽(PⅢNP)、Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)。结果随着肝脏炎症活动度及纤维化程度加重,血清MMP-1逐渐降低,而TIMP-1逐渐升高,除G1期与G2期患者比较,S1期与S2期患者比较差异无显著性意义外,其余各级别患者之间两两比较差异均有显著性意义(P<0.05或P<0.01)。血清TIMP-1与肝脏纤维化程度分期呈正相关(P=0.003),与肝脏炎症活动度分级呈正相关(P=0.005);血清MMP-1与肝脏纤维化程度分期呈负相关(P=0.004),与肝脏炎症活动度分级呈负相关(P=0.007),且血清MMP-1和TIMP-1与HA、PⅢNP具有良好相关性。结论血清TIMP-1和MMP-1对评估肝纤维化程度有一定的参考价值。     

软肝化坚颗粒对肝纤维化C57小鼠肝组织中MMP-13和TIMP-1 mRNA表达的影响

目的观察软肝化坚颗粒对肝纤维化模型C57小鼠血清中基质金属蛋白酶13(MMP-13)和基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)的含量和肝组织中MMP-13和TIMP-1 mRNA表达的影响。方法 40只C57小鼠被随机分为4组,每组10只,即正常对照组、模型对照组、模型软肝化坚颗粒组和模型秋水仙碱组。采用四氯化碳腹腔注射制造小鼠肝纤维化模型。分别采用ELISA法和实时荧光定量PCR检测小鼠血清MMPs、TIMP-1含量及肝组织中MMP-13和TIMP-1 mRNA的表达。同一指标的多组间计量资料的比较采用方差分析。结果与正常对照组相比较,模型对照组血清中MMPs的含量明显降低,TIMP-1的含量明显升高,P=0.003、0.027,模型软肝化坚颗粒组与正常对照组相比差异均无统计学意义,P=0.364、0.217。与正常对照组相比,模型软肝化坚颗粒组小鼠肝组织中MMP-13 mRNA的表达量显著升高,P=0.005,TIMP-1 mRNA的表达量差异无统计学意义,P=0.997;模型对照组小鼠肝组织中TIMP-1 mRNA的表达量明显升高,差异具有统计学意义,P=0.009。结论软肝化坚颗粒不但可促进MMPs的产生,而且可抑制TIMP-1产生,进而促进ECM的降解,这可能也是软肝化坚颗粒抗肝纤维化的重要机制之一。     

抗纤合剂对血吸虫病肝纤维化的防治作用研究

目的 :观察抗纤合剂的抗肝纤维化作用。方法 :用日本血吸虫尾蚴感染新西兰兔 ,制成肝纤维化模型 ,病兔均以吡喹酮顿服杀虫治疗 ,继之中药组开始服用抗纤合剂治疗肝纤维化 ,并与秋水仙碱组及 0 .9%Na Cl组比较。RIA法检测血清 型前胶原 (PC )、透明质酸 (HA) ,苏木精 -伊红、天狼红染色观察胶原沉积 ,通过原位杂交检测基质金属蛋白酶 - 1(MMP- 1)和基质金属蛋白酶组织抑制剂 - 1(TIMP- 1)的表达 ,并作 、 型胶原和转化生长因子 β1 (TGF- β1 )免疫组化染色。结果 :中药组 PC 、HA水平降低 (P <0 .0 5 ) ,图像分析显示肝组织 、 型胶原和TGF- β1 表达减弱 (P <0 .0 5 ) ,肝组织 MMP- 1m RNA的表达增强 ,TIMP- 1m RNA表达减弱 (P <0 .0 5 ) ,肝纤维化程度减轻。结论 :抗纤合剂具有抗实验性血吸虫病兔肝纤维化的作用。     

辛伐他汀对肝纤维化大鼠Ⅳ-C、MMP-2及TIMP-2表达的影响

目的探讨辛伐他汀治疗肝纤维化的可行性及机制。方法将24只肝纤维化大鼠随机分为药物组、模型组各12只,另取12只正常大鼠作为对照组。模型组不干预,药物组予辛伐他汀5mg／（kg·d）灌胃13周;对照组予等量生理盐水灌胃。13周后取大鼠肝组织,苏木精-伊红染色观察肝组织病理学改变,免疫组织化学方法检测肝组织中Ⅳ型胶原（Ⅳ—C）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及基质金属蛋白酶抑制因子-2（TIMP-2）表达。结果与对照组比较,模型组肝组织炎症明显、Ⅳ-C表达与沉积增加,TIMP-2蛋白表达显著增加（P均〈0．05）,MMP-2蛋白表达变化不明显。药物组肝脏炎症较轻,相对模型组Ⅳ—C显著减少,MMP-2蛋白表达增多,TIMP-2蛋白表达减少。结论辛伐他汀可以在一定程度上减轻肝纤维化程度,其机制可能是抑制TIMP-2表达、增加MMP-2表达、促进Ⅳ-C降解。     

丹酚酸B对肝纤维化大鼠TGF-β1、MMP-2和TIMP-2表达的影响

目的: 观察丹酚酸B盐(salvianolic acid B, SA-B)对肝纤维化大鼠肝组织转化生长因子-beta1 (TGF-beta1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)表达的影响, 并探讨SA-B抗肝纤维化的可能机制. 方法: ♂SD大鼠30只随机分为正常对照组、模型组和丹酚酸B治疗组, 以5 mL/L的二甲基亚硝胺(DMN)建立肝纤维化模型, 治疗组在造模4 wk后给予SA-B治疗4 wk. 应用HE, Masson染色观察肝组织病理纤维化分级, 全自动生化分析仪检测ALT、AST和Alb, 放免法检测HA和LN, S-P免疫组织化学方法检测TGF-β1、MMP-2和TIMP-2蛋白质的表达. 结果: 与模型组相比, SA-B能改善肝纤维化大鼠肝脏病理组织学结构, 治疗组血清ALT、AST、HA和LN水平明显减低(87.0±28.7 U/L vs 190.4±27.4 U/L, 85.6±25.3 U/L vs 178.2±15.9 U/L, 179.7±32.8 mg/L vs 433.3±86.1 mg/L, 135.6±21.1 mg/L vs 224.7±29.2 mg/L, 均P<0.01), 经SA-B干预后TGF-beta1和TIMP-2表达明显下降, 与模型组相比有显著性差异(18.53±2.54 vs 12.78±2.65, 21.88±3.83 vs 14.69±4.51, 均P<0.01), 而MMP-2表达水平无明显变化. 结论: SA-B能改善肝纤维化大鼠肝脏病理组织学结构, 可能通过抑制TGF-beta1和TIMP-2表达而促进肝纤维化的逆转.     

硫化氢通过调控转化生长因子-β及基质金属蛋白酶-9/基质金属蛋白酶抑制剂-1改善糖尿病大鼠肾小管间质纤维化

目的探讨硫化氢(H_2S)气体信号分子对糖尿病大鼠肾小管间质纤维化及转化生长因子(TGF)-β、基质金属蛋白酶(MMP)-9/基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1表达的影响。方法单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型将成年雄性SD大鼠64只随机分为正常对照组(Control组)、STZ组、STZ+H_2S组、H_2S组。造模72 h后采尾静脉血检测,若血糖>16.7 mmol/L表明造模成功。H_2S组和STZ+H_2S组大鼠腹腔注射Na HS溶液100μmol·kg~(-1)·d~(-1),Control组和STZ组腹腔注射同等量生理盐水。8 w后取标本,Masson染色观察大鼠肾脏组织病理形态学改变,Western印迹检测大鼠肾脏TGF-β、MMP-9、TIMP-1、Ⅳ型胶原蛋白的表达水平。结果与Control组相比,STZ组存在明显肾小管间质纤维化,同时肾脏组织中Ⅳ型胶原、TGF-β、TIMP-1蛋白的表达升高,MMP-9蛋白的表达水平下降(P<0.05);与STZ组大鼠相比,STZ+H_2S组肾小管间质纤维化减轻,肾组织TGF-β、TIMP-1、Ⅳ型胶原蛋白的表达降低,MMP-9蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论 H_2S可改善糖尿病大鼠肾小管间质纤维化,其机制可能与调控MMP-9/TIMP-1失衡以及TGF-β蛋白的表达水平有关。     

益心方对血管再狭窄小鼠基质金属蛋白酶与组织型基质金属蛋白酶抑制因子表达的影响

目的 探讨再狭窄血管中基质金属蛋白酶(MMPs)与组织型基质金属蛋白酶抑制因子(TIMPs)的表达及益心方对其的影响.方法 制备大鼠血管再狭窄模型,采用不同浓度的益心方药物浓度干预,观察颈总动脉形态学改变,免疫组化法检测颈总动脉MMPs与TIMPs的表达.结果 假手术组血管内膜和中膜处均可见少量散在分布的MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的阳性染色表达颗粒,以MMP-2表达最为明显;与假手术组比较,球囊导管内皮剥脱术后,模型组血管中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2表达均显著增加(P<0.05或P<0.01),主要在新生内膜中表达,胞浆和基质内出现大量特异性的阳性颗粒;与模型组比较,益心方治疗低、高剂量组能明显抑制血管壁MMP-2、MMP-9的表达(P<0.05或P<0.01),其特异性的阳性颗粒与模型组相比显著减少,对TIMP-1和TIMP-2的表达也有减少的趋势.结论 益心方抑制血管再狭窄,其机制与抑制血管平滑肌细胞MMPs与TIMPs表达有关.