FGF,IGF和EGF在成体脊髓的分布

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(FGF)、胰岛素样生长因子(IGF)和表皮生长因子(EGF)在成年猫脊髓的分布.方法:取脊髓(T11)制作20μm厚冰冻切片,用FGF,IGF和EGF(效价:1∶250)兔抗血清行免疫组织化学ABC法染色.观察FGF,IGF和EGF在正常脊髓中的分布以及亚细胞定位.结果:FGF的免疫阳性反应物主要分布于脊髓灰质神经元,胞浆染色,腹角较为明显,Ⅱ板层也有少量阳性细胞.背核神经元也有阳性;此外,神经突起及纤维亦有阳性染色.灰、白质内还见阳性胶质细胞,白质内血管也有阳性染色.相对之,IGF和EGF在脊髓的分布相似,免疫阳性反应物主要分布于灰质内各板层神经元,胞核染色明显,胞浆亦有浅染,灰质和白质内未见阳性胶质细胞.结论:成年猫脊髓存在FGF,IGF及EGF,提示这些生长因子与成体脊髓功能有关.     

CD44,CD54在成体脊髓表达（摘要）

目的：观察CD44，CD54在成年猫脊髓的分布。方法：将成年猫处死后取其脊髓（T11）制作20цm厚冰冻切片，用CD44，CD54兔抗体（效价：1:250）行ABC免疫组织化学染色。观察CD44,CD54在正常脊髓中的分布以及亚细胞定位。结果：脊髓灰质内见CD44神经元阳性，阳性细胞遍布灰质各板层，阳性反应物主要见于细胞核。腹角阳性神经元明显，大小不等，背核神经元亦有阳性反应。灰、白质内未见阳性反应的胶质细胞。与CD44者比较，背核、腹角神经元仅见CD54的弱阳性反应，未见胶质细胞阳性反应，但后角Ⅰ，Ⅱ板层见大量CD54阳性神经膨体。结论：成年猫脊髓有CD44,CD54分布，提示这些神经细胞黏附分子与成体脊髓神经元的信号传递功能有关。     

CD44,CD54在成体脊髓表达

目的:观察CD44,CD54在成年猫脊髓的分布.方法:将成年猫处死后取其脊髓(T11)制作20μm厚冰冻切片,用CD44,CD54兔抗体(效价:1∶250)行ABC免疫组织化学染色.观察CD44,CD54在正常脊髓中的分布以及亚细胞定位.结果:脊髓灰质内见CD44神经元阳性,阳性细胞遍布灰质各板层,阳性反应物主要见于细胞核.腹角阳性神经元明显,大小不等.背核神经元亦有阳性反应.灰、白质内未见阳性反应的胶质细胞.与CD44者比较,背核、腹角神经元仅见CD54的弱阳性反应,未见胶质细胞阳性反应,但后角Ⅰ,Ⅱ板层见大量CD54阳性神经膨体.结论:成年猫脊髓有CD44,CD54分布,提示这些神经细胞黏附分子与成体脊髓神经元的信号传递功能有关.     

Fas,FasL,Laminin,Fn在成年猫脊髓的分布（摘要）

目的 :观察Ｆａｓ ,ＦａｓＬ ,Ｌａｍｉｎｉｎ、Ｆｎ在成年猫脊髓的分布 .方法 :将成年猫处死后取其脊髓 (Ｔ11)制作 2 0 μｍ厚冰冻切片 ,用Ｆａｓ,ＦａｓＬ ,Ｌａｍｉｎｉｎ ,Ｆｎ (效价 :1∶10 0 0 ,1∶2 5 0 ,1∶2 5 0 ,1∶2 5 0 ,)行免疫组织化学ＡＢＣ法染色 .观察Ｆａｓ ,ＦａｓＬ ,Ｌａｍｉｎｉｎ ,Ｆｎ在正常脊髓中的分布以及亚细胞定位 .结果 :Ｆａｓ阳性神经元以腹角为主 ,胞浆染色 ,背角相对较少 ,灰质内胶质阳性反应 ,细胞核染色 .比较之 ,ＦａｓＬ阳性神经元遍布整个灰质 ,胞浆染色 ,未见胶质细胞阳性染色 .Ｌａｍｉｎｉｎ在灰、白质内见大量血管内皮阳性染色 ,灰质内血管内皮的免疫阳性反应比白质强 .未见神经元和胶质细胞染色 .与Ｌａｍｉｎｉｎ相比较 ,在白质内仅见少量的血管Ｆｎ免疫反应阳性染色 ,只有约 1/ 2 0～ 1/ 5 0左右 ,未见明显阳性神经元和胶质细胞染色 .结论 :在成年猫脊髓有Ｆａｓ ,ＦａｓＬ ,Ｌａｍｉｎｉｎ ,Ｆｎ分布 ,提示这些因子与成体脊髓神经元的信号传递功能有关     

Fas,FasL,Laminin,Fn在成年猫脊髓的分布

目的:观察Fas,FasL,Laminin、Fn在成年猫脊髓的分布.方法:将成年猫处死后取其脊髓(T11)制作20μm厚冰冻切片,用Fas,FasL,Laminin,Fn(效价:1∶1000,1∶250,1∶250,1∶250,)行免疫组织化学ABC法染色.观察Fas,FasL,Laminin,Fn在正常脊髓中的分布以及亚细胞定位.结果:Fas阳性神经元以腹角为主,胞浆染色,背角相对较少,灰质内胶质阳性反应,细胞核染色.比较之,FasL阳性神经元遍布整个灰质,胞浆染色,未见胶质细胞阳性染色.Laminin在灰、白质内见大量血管内皮阳性染色,灰质内血管内皮的免疫阳性反应比白质强.未见神经元和胶质细胞染色.与Laminin相比较,在白质内仅见少量的血管Fn免疫反应阳性染色,只有约1/20～1/50左右,未见明显阳性神经元和胶质细胞染色.结论:在成年猫脊髓有Fas,FasL,Laminin,Fn分布,提示这些因子与成体脊髓神经元的信号传递功能有关.     

TrK A在成年猫脊髓的表达

为探讨ｔｒｋＡ在成年猫脊髓的分布,用成年健康雄猫的腰段脊髓制作 ２０μｄ厚冰冻切片并行ＡＢＣ免疫组化染色,ＤＡＢ棕色反应显色。结果：ｔｒｋＡ的阳性反应物主要分布在脊髓背角Ⅱ板层的神经膨体,灰质一些神经元以及白质轴索内。结果提示这些部位存在ｔｒｋＡ。     

TrK C在成年猫脊髓和背根节的分布

采用免疫组织化学方法探讨trKC在成年猫脊髓L3,L5节段和L6 背根节的分布 .结果 :trKC的免疫阳性反应物 (trKC -IR)主要分布于脊髓腹角、中间带、背角深部以及背根节 (DRG)的大神经元胞浆内 .此外 ,脊髓Ⅱ板层还可见均质状的trKC -IR ,染色明显深于其它各层 ;而DRG的少数中、小神经元亦呈trKC阳性反应 .提示 ,trKC可能与成年猫脊髓和DRG某些神经元的生理功能有关 .     

凋亡基因Bax,Bcl-2,Fasl在成年猫脊髓中的表达

采用免疫组织化ＡＢＣ法，观察凋亡基因Ｂａｘ，Ｂｃｌ－２，Ｆａｓｌ在成年猫脊髓的分布。结果：在脊髓腹角、中间带及后角深部均见Ｂａｘ，Ｂｃｌ－２，Ｆａｓｌ阳性神经元。反应物定位于细胞浆，相对之，后角浅层除Ｂｃｌ－２阳性神经元尚多多，Ｂａｘ，Ｆａｓｌ阳性神经元较少。     

沉默IGF1和EGF二受体基因的肝癌HepG2细胞株的抗瘤放疗增敏及机制

目的：探讨同时沉默IGF1与EGF二受体基因的抗瘤放疗增敏以及其病理机制。方法按照特定的方式创造出靶向EGFR、IGF1R以及两受体的小分子干扰RNA,并在一定的条件下设定出同所有基因不产生同源的阴性对照质粒,对其进行转染超过48 h之后选择使用射线对肝癌HepG2细胞株进行照射。在成克隆的研究过程中对细胞的存活分数进行检测,选择使用单击多靶模型与线性二次函数模型两种方式共同制定出细胞存活曲线,进而获取放射生物学参数DO、Dq、N以及α、β、SF2的数值。结果将两个组之间进行对比我们可了解到,其明显控制了细胞增殖以及起到诱导细胞死亡的作用,减缓G1／S期的发展过程,bcl－2与cdk2两者之间呈现出明显的下降趋势,p21与bax则呈上升趋势。并且同时沉默EGFR与IGF1R组与对照组细胞的D0数值则是0.588与2.0704 Gy;Dq的数值则是0.5625与2.0307 Gy;a值则是0.515与0.0216 Gy－1;SF2值则是0.22与0.619。这一组的DO、Dq以及SF2值全部呈下降趋势,α值则呈上升趋势。结论同时沉默EGFR与IGF1R基因对于肝癌HepG2细胞株增殖以及死亡起到干扰的效果,并且病理机制也同bcl－2与cdk2等有着直接的联系,结合多种方法对此疾病进行治疗是目前发展前景比较广阔的方式,可在临床上进行推广及使用。     

复方苦参黄柏溶液联合康复新液对糖尿病创面愈合中EGF和FGF含量的影响

目的:探讨复方苦参黄柏溶液联合康复新液对糖尿病大鼠创面愈合的作用机制。方法:采用高脂高糖饲料联合链脲佐菌素(STZ)的方法建立糖尿病大鼠模型,分别切除大鼠脊柱两侧1 cm处1.5 cm×1.5 cm全层皮肤,诱导创面缺损。将48只糖尿病创面模型大鼠随机分为对照组、复方苦参黄柏溶液组、康复新液组和联合治疗组,每组12只。分别将0.9%Na Cl溶液、复方苦参黄柏溶液或(和)康复新液浸湿的无菌纱布湿敷在相应组别大鼠的创面处,20 min/次,1次/d,连续14 d。分别于第3、7、14天切除各组4只大鼠的创面愈合新生组织。肉眼观察创面愈合情况,计算创面愈合率; HE染色观察各组大鼠创面组织病理学改变; ELISA检测创面组织中表皮生长因子(EGF)与成纤维细胞生长因子(FGF)的含量。结果:(1)肉眼观察发现,第7、14天各药物干预组的创面愈合情况明显优于对照组,以联合治疗组最为明显。(2)药物干预第7、14天,复方苦参黄柏溶液组、康复新液组和联合治疗组的创面愈合率较对照组显著升高(P0.01);而联合治疗组的创面愈合率显著高于复方苦参黄柏溶液组和康复新液组(P0.05)。(3)HE染色显示,对照组大鼠创面肉芽组织生长缓慢,可见炎性细胞浸润和新生毛细血管增生;各药物干预组大鼠创面肉芽组织生长旺盛,成纤维细胞及新生毛细血管增多,炎症浸润减轻;其中联合治疗组最为明显,第14天肉芽组织已转化为瘢痕组织,新生血管已形成完整血管网。(4)药物干预第3、7、14天,与对照组比较,复方苦参黄柏溶液组、康复新液组和联合治疗组的EGF和FGF含量均显著升高(P0.05,P0.01),而联合治疗组的EGF和FGF含量显著高于复方苦参黄柏溶液组和康复新液组(P0.05)。结论:复方苦参黄柏溶液联合康复新液可增加创面组织微血管数量,升高创面组织EGF和FGF含量,从而促进糖尿病大鼠创面愈合。     

NGF在成年猫脊髓和背根节分布的免疫组化研究

目的：探讨神经生长因子在成年猫脊髓背角和背根节的表达和意义。方法：采用抗神经生长因子多克隆抗体免疫组织化学方法,对5只雄性家猫L6节段脊髓和背根节作石蜡切片的NGF免疫组织化学染色。结果：神经生长因子免疫阳性反应主要出现在脊髓背角I,Ⅱ、Ⅲ板层外侧部的神经元胞核和胞浆中,以胞核为主,而在背根节阳性反应的神经元却寥寥无几。结论：神经生长因子可能参与脊髓神经元正常功能的维持。     

多肽生长因子在成年猴脊髓的表达——免疫组织化学研究（摘要）

目的：探讨8种多肽生长因子NGF、BDNF、NT-3、NT-4、GDNF、、bFGF、IGF和EGF在成年猴脊髓的表达分布情况。为成年猴脊髓存在上述生长因子的表达提供可靠的免疫组织化学依据．方法：云南成年健康雄性猕猴5只，平均体重6k左右，氯氨酮(0．25mL／kg)肌肉注射麻醉后。Zamboni液经心脏主动脉插管灌注固定动物，取T8脊髓节段入4％多聚甲醛后固定(4℃)6h，修块后人20％sucrose-PBS液沉底。     

M-Enk在猫背根节切除后脊髓Ⅱ板层的表达

目的 探讨猫脊髓背根神经节切除后,甲硫胺酸脑啡肽(M-Enk)在脊髓后角Ⅱ板层内的表达变化及M-Enk异类终末.方法 10只成年雄性猫,在腹腔内注射麻醉下行腰1到骶2(L1~S2)单侧脊髓背根节切除术,建立猫背根节全切模型,术后分为急性组5只,存活2周,慢性组5只,存活2个月,观察到期后,动物心内灌注固定处死,取L6节段脊髓,采用免疫组化染色方法检测手术侧和对侧脊髓Ⅱ板层内M-Enk的表达,电镜下观察M-Enk异类终末.结果 光镜下M-Enk阳性染色主要分布于脊髓Ⅱ板层的外侧份,成颗粒状和线条状,急性组手术侧与对侧非手术侧阳性染色无明显差异,慢性组两侧阳性染色均减弱,手术侧约强于对照侧.电镜下,在慢性组手术侧Ⅱ板层脊髓中,观察到简单终末,发现了M-Enk阳性非典型复合终末(ACT),它们较小,外观上呈圆形或椭圆形,多与两个突触后成分形成联系,突触活性带形较平直或向外凸,突触内含均匀清亮小泡或致密核心小泡.结论 M-Enk在猫脊髓背根节切除后主要在脊髓Ⅱ板层外侧表达,M-Enk阳性ACT可能是脊髓背根节全切后的一种代偿终末.     

下行纤维5-HT在猫背根节切除后脊髓背角的表达

目的 观察猫脊髓背根神经节切除后下行纤维5-羟色胺(5-HT)在脊髓背角内的表达变化及5-HT异类终末,探讨其在脊髓背根节切除后的代偿意义.方法 10只成年雄性猫,在腹腔内注射麻醉下行腰1到骶2(L1～S2)单侧背根节切除术,建立猫腰骶背根节全切模型,术后分为急性组5只,存活2周,慢性组5只,存活2个月,实验结束时,动物腹腔内麻醉,开胸并心内灌注固定处理,取腰6(L6)节段脊髓,采用免疫组化染色方法检测手术侧和对侧脊髓背角、Ⅱ板层内5-HT的表达,电镜下观察5-HT异类终末.结果 光镜下5-HT阳性染色主要分布于脊髓背角,Ⅱ板层区域较突出,呈细颗粒状和线条状.急性组手术侧与对侧非手术侧阳性染色无明显差异,慢性组两侧阳性染色差异明显,手术侧强于对照侧.电镜下,在慢性组手术侧脊髓Ⅱ板层中,观察到简单终末,发现了5-HT阳性非典型复合终末(ACT),它们较小,外观上呈圆形或椭圆形,多与两个突触后成分形成联系,突触活性带较平直或向外凸,突触内多含均匀清亮小泡或致密核心小泡.结论 5-HT在猫脊髓腰骶背根节切除后主要出现在脊髓背角,Ⅱ板层表达突出,5-HT阳性ACT可能是脊髓背根节全切后的一种下行纤维代偿终末.     

BDNF在挤压伤脊髓背角表达的时相变化（摘要）

目的 :了解ＢＤＮＦ在挤压伤脊髓背角的表达变化 .方法 :用本室建立的成年ＳＤ大鼠 (Ｔ13 -Ｌ1)脊髓挤压伤模型 ,分别于术后 2 4ｈ ,7ｈ ,2 1ｈ处死动物并设正常对照组 ,取Ｌ3 节段脊髓制作 2 0 μｍ厚冰冻连续切片 ,用抗ＢＤＮＦ抗体按ＡＢＣ法行免疫组织化学染色 .观察挤压伤位点尾侧端 (Ｌ3 )背角ＢＤＮＦ免疫反应物的分布 ,记录其免疫反应强度 ,计数其免疫阳性神经元和胶质细胞数 .结果 :ＢＤＮＦ的阳性反应物主要分布于正常脊髓背角的神经元和胶质细胞 .术后 2 4ｈ ,ＢＤＮＦ的免疫反应强度较正常者明显增强并维持至 7ｈ (Ｐ <0 0 5 ) ,术后 2 1ｈ又进一步增强并高过术后 2 4ｈ者水平 (Ｐ<0 0 1) .ＢＤＮＦ的免疫阳性细胞数则从术后 2 4ｈ至 2 1ｈ进行性增加 (Ｐ <0 0 1) .结论 :脊髓挤压伤后早期 ,ＢＤＮＦ在损伤位点尾侧端背角的表达明显增加 ,提示ＢＤＮＦ在脊髓挤压伤的早期反应中可能起作用     

TrK C在成年猫脊骨和背根节的分布

采用免疫组织化学方法探讨ｔｒＫＣ在成年猫脊骨Ｌ３，Ｌ５节段和Ｌ６背根节的分布。结果：ｔｒＫＣ的免疫阳性反应物主要分布于脊髓腹角、中间带、背角深部以及背根节的大神经元胞浆内。提示，ｔｒＫＣ可能与成年猫脊髓和ＤＲＧ某些神经元的生理功能有关。     

多肽生长因子在成年猴脊髓的表达--免疫组织化学研究(摘要)

目的:探讨8种多肽生长因子NGF、BDNF、NT-3、NT-4、GDNF、bFGF、IGF和EGF在成年猴脊髓的表达分布情况,为成年猴脊髓存在上述生长因子的表达提供可靠的免疫组织化学依据.     

脊髓损伤早期治疗的实验研究（摘要）

采用Wistar大白鼠126只随机分成3组，Allen氏法250g-cm致伤T13-L1节段脊髓制成完全性截瘫脊髓损伤模型，应用三七总皂甙(PNS)进行治疗，以二甲亚砜(DMSO)为阳性对照药物，设立空白对照组(Control)，于伤后30min，2h，4h，第二及第三个24h分别腹腔注射给药，各时间段每组动物抽取脊髓行光、电镜形态学检查。动物饲养，观察功能6周。