补阳还五汤对中风后遗症"气虚血瘀" 大鼠模型能量代谢的影响

目的:研究补阳还五汤对中风后遗症"气虚血瘀"大鼠模型能量代谢的影响。方法:建立中风后遗症"气虚血瘀"大鼠模型,观察补阳还五汤对模型大鼠能量代谢方面的影响。能量代谢方面指标选取血糖、乳酸、肌酸激酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶。血糖测定采用葡萄糖氯化酶—过氧化物酶法测定;乳酸采用还原法测定;肌酸激酶采用酶氢连接测定法;乳酸脱氢酶采用连续检测法(LD-L法);碱性磷酸酶采用连续性测法。结果:模型组大鼠其症状基本符合中医"气虚血瘀"证候。血糖含量模型组(8.70±2.33)mmol/L显著低于正常组(13.69±3.22)mmol/L(P<0.05),中剂量组(11.53±2.21)mmol/L显著高于模型组(P<0.05);乳酸含量模型组(1.64±0.53)mmol/L显著高于正常组(0.92±0.41)mmol/L(P<0.05),中剂量组(1.12±0.46)mmol/L显著低于模型组(P<0.05);肌酸激酶含量模型组(4062.60±2176.94)IU/L显著低于正常组(7135.90±1919.42)IU/L(P<0.05),中剂量组(6050.30±1816.14)IU/L显著高于模型组(P<0.05);乳酸脱氢酶含量模型组(1590.10±367.99)IU/L显著高于正常组(1120.40±358.10)IU/L(P<0.05),中剂量组(1257.80±338.68)IU/L显著低于模型组(P<0.05);碱性磷酸酶各组之间差别无明显意义。结论:补阳还五汤能有效纠正中风后遗症"气虚血瘀"大鼠能量代谢障碍,反映了该方对中风后遗症疗效的部分内涵。     

加味补阳还五汤治疗气虚血瘀型中风后遗症临床观察

目的:观察加味补阳还五汤治疗气虚血瘀型中风后遗症临床疗效,评价其临床实际应用价值.方法:选择120例气虚血瘀型中风后遗症患者,随机分为例数相等的观察组和对照组,对照组60例口服步长脑心通治疗,观察组采用加味补阳还五汤治疗,对两组疗效进行比较及统计学分析.结果:采用加味补阳还五汤治疗观察组的治疗效果明显优于口服步长脑心通的对照组,组间差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:加味补阳还五汤治疗气虚血瘀型中风后遗症疗效显著,值得临床推广应用.     

补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血后血管内皮生长因子及其受体Flk1的影响

目的探讨补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血后血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(Fetal liver kinase1,Flk1)的影响。方法大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组、补阳还五汤组,大脑中动脉线栓法复制局灶性脑缺血模型,采用免疫组织化学法和酶联免疫法检测各组动物脑内VEGF、Flk1的表达和蛋白水平,同时评价动物神经功能。结果在正常大鼠脑内有少量VEGF和Flk1阳性细胞,脑缺血后VEGF和Flk1阳性细胞增加;与模型组比较,尼莫地平、补阳还五汤均能改善模型大鼠的神经功能缺失症状,增强VEGF和Flk1的表达,提高VEGF蛋白水平(P<0.05);于7、14d补阳还五汤作用强于尼莫地平(P<0.05)。结论补阳还五汤增强大鼠局灶性脑缺血后VEGF及Flk1的表达和提高VEGF蛋白水平,是其抗脑缺血的可能作用机制之一。     

补阳还五汤、天麻钩藤饮与高血压病气虚血瘀证、 肝阳上亢证关联性研究

目的:探讨补阳还五汤、天麻钩藤饮与高血压病气虚血瘀证、肝阳上亢证之间的关联性,以此来验证"方证相关"的客观存在。方法:制作高血压病气虚血瘀证和高血压病肝阳上亢证细胞模型,用补阳还五汤和天麻钩藤饮含药血清干预细胞模型,观察内皮细胞活性改变及内皮细胞蛋白C受体(EPCR)、血管内假性血友病因子(vWF)、血栓调节蛋白(TM)3种血管内皮细胞损伤标志物的表达。结果:气虚血瘀加补阳还五组与气虚血瘀加空白血清组比较,肝阳上亢加天麻钩藤组与肝阳上亢加空白血清组比较,细胞活性较高,vWF,TM,EPCR含量较低,差异显著(P<0.01);气虚血瘀加天麻钩藤组、肝阳上亢加补阳还五组与气虚血瘀加补阳还五组比较,细胞活性较低,vWF,TM,EPCR含量较高,差异显著(P<0.01或P<0.05);气虚血瘀加天麻钩藤组、肝阳上亢加补阳还五组与肝阳上亢加天麻钩藤组比较,细胞活性较低,vWF,TM,EPCR含量较高,差异显著(P<0.01)。结论:补阳还五汤、天麻钩藤饮与高血压病气虚血瘀证和肝阳上亢证具有显著的关联性。     

补阳还五汤治疗气虚血瘀型中风后遗症临床疗效观察

目的：分析补阳还五汤治疗气虚血瘀型中风后遗症的临床疗效.方法：选取82例气虚血瘀型中风后遗症患者,随机分为对照组与研究组各41例.对照组采用西药治疗,研究组患者在对照组治疗基础上加用补阳还五汤治疗.比较两组患者治疗效果.结果：研究组患者治疗效果以及血脂水平明显优于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论：采用补阳还五汤治疗气虚血瘀型中风后遗症疗效显著,安全可靠,值得临床推广应用.     

三七补阳还五汤治疗中风后遗症35例

目的：观察三七补阳还五汤治疗气虚血瘀型中风后遗症的临床疗效。方法：将70例气虚血瘀型中风后遗症患者随机分为两组。治疗组35例,给予三七补阳还五汤,每日1剂,水煎服。对照组35例,以银杏叶胶囊、阿斯匹林治疗。两组均连续治疗2月并随访1月后对比观察临床疗效。结果：治疗组和对照组总有效率分别为94.29%和71.43%,两组总有效率比较差异有统计学意义（P〈0.05）,治疗组无不良反应发生。结论：三七补阳还五汤治疗气虚血瘀型中风后遗症的临床疗效可靠。     

三首活血化瘀方对气虚血瘀模型大鼠红细胞膜蛋白组成影响的研究

目的研究补阳还五汤、少腹逐瘀汤和丹参饮对气虚血瘀型大鼠红细胞膜蛋白组成的影响。方法 80只Wistar大鼠,随机分为8组,分别为空白对照组、气虚血瘀模型组、补阳还五汤高低剂量组、少腹逐瘀汤高低剂量组、丹参饮高低剂量组,每组10只。大鼠采取饥饿加力竭游泳法复制气虚血瘀模型,每日1次,连续14天。末次造模后禁食不禁水24 h。每日1次灌胃给药,连续给药15天。取血制备红细胞膜,采用SDS-PAGE法分析红细胞膜蛋白组成变化。结果与空白组比较,模型组带5及带6蛋白含量显著降低(P0.05)。与模型组比较,补阳还五汤可显著升高带5蛋白(P0.05)、带6蛋白(P0.05)和带7蛋白含量(P0.05);少腹逐瘀汤可显著升高带2蛋白(P0.05)、带3蛋白(P0.05)、带5蛋白(P0.01)和带6蛋白含量(P0.05);丹参饮可显著升高带4.1蛋白(P0.05)、带5蛋白(P0.05)、带6蛋白(P0.05)和带7蛋白含量(P0.05)。结论补阳还五汤、少腹逐瘀汤和丹参饮可以不同程度地纠正气虚血瘀模型大鼠红细胞膜的膜蛋白组成。     

补阳还五汤加减治疗中风后遗症临床观察

探讨补阳还五汤加减治疗气虚血瘀型中风后遗症的疗效。将 80例中风后遗症患者随机分为补阳还五汤治疗组及中风回春丸对照组 ,各 4 0例 ,疗程 2个月。结果 :治疗组完全恢复 15例 ,显效 13例 ,好转 8例 ,无效 4例 ,总有效率为 90 0 % ,与对照组总有效率 77 5 %相比有显著差异 (P <0 0 5 )。提示补阳还五汤对气虚血瘀型中风后遗症具有较好疗效     

基于定量蛋白质组技术探索补阳还五汤治疗脑梗死气虚血瘀证的作用机制

中药"补阳还五汤"广泛应用于治疗脑梗死气虚血瘀证,但是其药理机制仍不明确。该研究应用非标记定量蛋白质组学技术探索"补阳还五汤"治疗脑梗死气虚血瘀证的生物学基础。以脑梗死气虚血瘀证大鼠模型为研究对象,比较假手术组、模型组、模型给药组大鼠脑组织的全蛋白表达水平。对3组样品进行定量分析,假手术组、模型组、模型给药组脑组织样品分别鉴定到3 959,3 996,4 055种蛋白。以模型组为对照,假手术组和给药组表达水平差异在2倍以上且趋势一致的蛋白共计391种。对差异表达蛋白进行生物信息学分析和功能聚类,发现补阳还五汤可能通过影响能量代谢、神经系统及一些信号通路蛋白的表达,从而对脑梗死气虚血瘀证发挥治疗作用。该研究从蛋白质水平探索了补阳还五汤发挥药效的生物学机制,为脑梗死气虚血瘀证的临床治疗和中医相关研究提供了分子依据。     

针刺配合补阳还五汤治疗中风后遗症疗效观察

目的：观察针刺配合补阳还五汤治疗气虚血瘀型中风后遗症的临床疗效。方法：运用体针法配合补阳还五汤治疗气虚血瘀型中风后遗症100例,观察临床疗效。结果：痊愈58例,显效25例,好转14例,无效3例,总有效率97．0％。结论：体针法配合补阳还五汤治疗气虚血瘀型中风后遗症效果显著,具有较好的益气扶正、活血祛瘀、补气通络的作用。     

水蛭酶解前后对缺血性脑卒中大鼠治疗作用比较

目的:利用酶解法制备水蛭肽,与水蛭原粉平行作用于脑卒中模型大鼠,比较酶解前后的药效。方法:对大鼠实施脑中动脉电凝术,80只大鼠腹腔注射水合氯醛0.35 g·kg~(-1)(10%,3.5 m L·kg~(-1))麻醉,20只大鼠作为假手术组,仅切开皮肤,然后缝合饲养。于脑缺血后24 h进行行为评分。取造模后≥1分的大鼠,随机分为3组:模型组(无菌蒸馏水),水蛭组(水蛭0.8 g·kg~(-1)),水蛭肽组(水蛭肽0.64 g·kg~(-1))。每组20只大鼠。灌胃给药,每天1次,连续7 d,给药容积均为1.0 ml/100 g体质量。末次给药后24 h进行各项指标的检测。各组大鼠腹腔注射水合氯醛0.35 g·kg~(-1)(10%,3.5 ml·kg~(-1)),股动脉取血2 m L,3 500转·min-1,离心10 min,取血清,测定SOD和MDA。取大脑(去掉嗅球、小脑和低位脑干),-20℃速冻10 min后切成厚约2 mm的冠状脑片(5~6片),立刻置于1%TTC溶液中,37℃孵育40 min。缺血区呈现白色,非缺血区呈现红色。根据染色分离缺血区和非缺血区,分别称重,并计算缺血区重量占整个脑组织的百分比(%)。结果:给药7天后,与假手术组比较,模型对照组动物出现明显的向外侧转圈、行走时向对侧倾倒等神经功能损伤症状,行为评分显著高于假手术组(P0.01)。与模型对照组比较,水蛭肽组和水蛭组神经行为评分明显降低(P0.01,P0.05)。结论:水蛭酶解后所得的水蛭肽,对缺血性脑卒中大鼠的治疗作用优于水蛭。     

补阳还五汤及不同配伍组方对缺血性脑中风后大鼠神经增殖作用的对比研究

目的观察补阳还五汤及不同配伍组方对缺血性脑中风后大鼠神经增殖作用的影响。方法采用机械开颅电凝法阻断大鼠大脑中动脉24h后,用随机电脉冲刺激仪每天刺激2h,连续15天,造成大鼠缺血性中风模型,分为模型组（给予等体积生理盐水灌胃）、补阳还五汤组、补阳还五汤去地龙组、当归补血汤组（同时给予相应药物灌胃进行干预治疗）。以免疫组织化学方法检测大鼠脑组织中5-溴脱氧核苷尿嘧啶（Br-dU）的表达。结果补阳还五汤组和补阳还五汤去地龙组大鼠海马区域中有大量BrdU阳性细胞存在,排列密集,部分呈簇状聚集,与模型组相比较,差异有显著性（P〈0.01）,并且脑缺血侧海马区域BrdU阳性细胞数与对侧比较显著增多（P〈0.05）;当归补血汤组与模型组和大鼠海马区域BrdU阳性细胞数比较,差异无显著性（P〉0.05）。结论补阳还五汤促神经增殖作用优于当归补血汤。     

侯氏黑散对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后神经生长因子表达的影响

目的:研究侯氏黑散对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织神经生长因子(NGF)表达的影响.方法:栓线法阻断大脑中动脉建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,术后观察动物神经行为学变化并进行神经病学评分,采用免疫组化与医学图像分析相结合的方法检测假手术组、模型组、侯氏黑散各组大鼠缺血脑组织NGF的表达.结果:与模型组缺血侧比较,侯氏黑散组大鼠神经功能缺损得到改善,皮质及海马区NGF的阳性细胞数及面积光密度值比模型组明显增加(P＜0.05).结论:侯氏黑散可上调脑缺血再灌注后缺血脑组织内源性NGF的表达,而起到脑保护作用.     

芪蛭胶囊对缺血性中风大鼠PKC-MARCKS信号通路相关蛋白表达的影响

目的:研究芪蛭胶囊对缺血性中风大鼠PKC-MARCKS信号通路相关蛋白表达干预作用。方法:制备SD大鼠大脑中动脉闭塞模型,随机分为假手术组、模型组、中药组、西药组,缺血2h后行再灌注,除假手术组外,其余3组分为4个亚组,即IR6h、IR24h、IR72h、IR7d组。对各组进行神经功能缺损评分、运用免疫组化方法检测大鼠缺血区脑组织目标蛋白PKC、p-PKC、MARCKS、p-MARCKS表达情况。结果:与模型组比较,中药组神经细胞损伤程度相对较轻,自IR72h起神经功能缺损评分显著降低(P<0.05);中药组PKC、p-PKC自IR6h起显著低于模型组(P<0.05),MARCKS、p-MARCKS自IR72h起显著低于模型组(P<0.05)。结论:芪蛭胶囊可以减轻缺血性中风大鼠脑组织的损伤,下调PKC-MARCKS信号通路相关蛋白的过高表达,缓解脑缺血再灌注损伤。     

竹节参总皂苷对中动脉栓塞模型大鼠血液流变学的影响

目的研究竹节参总皂苷对中动脉栓塞模型大鼠血液流变学的影响,进一步明确其阻抑脑缺血损伤的作用机理。方法建立大鼠永久性中动脉栓塞模型(MCAO),观察竹节参总皂苷对模型大鼠红细胞变形性、聚集性、血液粘度的影响。结果竹节参总皂苷(200、100、50mg/kg)能显著降低中动脉栓塞模型大鼠全血粘度、红细胞聚集性,增加红细胞变形性。结论竹节参总皂苷对脑缺血损伤的保护作用可能与其改善中动脉栓塞模型大鼠血液流变学指标有关。     

参附注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究

[目的]探讨参附注射液对局灶性脑缺血大鼠Na-K-Cl协同转运蛋白1(NKCC1)的影响。[方法]雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham),缺血模型组(Ischemia)和缺血后给予参附注射液治疗组(SFI)。利用线栓法制作脑缺血/再灌注模型,再灌注3 h及24 h后进行神经功能评分,再灌注24 h后2,3,5氯化三苯基四氮唑蓝(TTC)法比较脑梗死面积,免疫组织化学及蛋白印迹法检测NKCC1的表达。[结果]参附注射液治疗组的脑梗死面积、神经功能缺损程度均比对照组明显降低(P0.05)。和对照组相比,SFI组的NKCC1表达明显低于Ischemia组(P0.05)。[结论]参附注射液对大鼠脑缺血模型的神经保护作用可能与抑制NKCC1相关。     

参蛇偏瘫胶囊对局灶脑缺血大鼠降钙素基因相关肽和内皮素含量的影响

目的:观察参蛇偏瘫胶囊对大鼠局灶脑缺血模型神经肽的影响,探讨其治疗脑缺血的可能机制。方法:采用FeCl3致大脑中动脉栓塞模型,应用放免法测定SD和自发性高血压大鼠(HSR)血浆、下丘脑中ET和CGRP含量。结果:参蛇偏瘫胶囊可明显拮抗缺血24h以内的血浆CGRP降低及ET的升高,提高SHR脑缺血时脑组织CGRP含量。结论:参蛇偏瘫胶囊主要对缺血早期CGRP和ET的异常变化有改善作用,而对缺血后期神经肽尚无明显影响,且以升高血浆及下丘脑中CGRP含量为主,对血浆ET的升高也有一定影响。     

脑心通胶囊对局灶栓塞性脑缺血大鼠内皮素及降钙素基因相关肽含量的影响

目的：在大鼠局灶栓塞性脑缺血模型上观察脑心通胶囊对神经肽的影响，探讨其治疗脑缺血的可能机制。方法：采用FeCl3致大脑中动脉栓塞模型，应用放免法测定SD和自发性高血压大鼠(HSR)血浆、下丘脑中ET和CGRP含量。结果：脑心通可明显拮抗缺血24h以内的血浆CGRP降低及ET的升高，提高SHR脑缺血时脑组织CGRP含量。结论：脑心通主要对缺血早期ET及CGRP的异常变化有改善作用，而对缺血后期神经肽尚无明显影响，且以升高血浆及下丘脑中CGRP含量为主，对血浆ET的升高也有一定影响。     

电针任脉联合bFGF对脑缺血大鼠ERK通路的调节作用

目的:研究电针任脉联合碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对局灶性脑缺血细胞外信号调节激酶(ERK)通路的调节作用。方法:线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型。通过Western blot方法研究各组ERK1/2表达和磷酸化的活性特征。结果:MCAO电针联合bFGF治疗后14d,ERK1/2表达在局灶缺血大鼠脑组织中即开始显著升高,ERK1/2磷酸化水平在MCAO后7d开始提高。结论:电针任脉联合bFGF对大鼠局灶性脑缺血的ERK通路起着重要的调节作用,电针任脉联合bFGF治疗对缺血性脑损伤有一定保护作用。     

Neuroprotective effects of Longxue Tongluo Capsule on ischemic stroke rats revealed by LC-MS/MS-based metabolomics approach

Objective: The present study aimed to evaluate the therapeutic effect and explore the underlying mechanisms of Longxue Tongluo Capsule (LTC) on ischemic stroke rats. Methods: Twenty-six rats were randomly divided into four groups, including sham group, sham + LTC group, MCAO group, and MCAO + LTC group. Ischemic stroke rats were simulated by middle cerebral artery occlusion (MCAO), and LTC treatment group were orally administrated with 300 mg/kg of LTC once daily for seven consecutive days. LTC therapy was validated in terms of neurobehavioral abnormality evaluation, cerebral infarct area, and histological assessments. The plasma metabolome comparisons amongst different groups were conducted by UHPLC-Q Exactive MS in combination with subsequent multivariate statistical analysis, aiming to finding the molecules in respond to the surgery or LTC treatment. Results: Intragastric administration of LTC significantly decreased not only the neurobehavioral abnormality scores but also the cerebral infarct area of MCAO rats. The interstitial edema, atrophy, and pyknosis of glial and neuronal cells occurred in the infarcted area, core area, and marginal area of cerebral cortex were improved after LTC treatment. A total of 13 potential biomarkers were observed, and Youden index of 11 biomarkers such as LysoPC, SM, and PE were more than 0.7, which were involved in neuroprotective process. The correlation and pathway analysis showed that LTC was beneficial to ischemic stroke rats via regulating glycerophospholipid and sphingolipid metabolism, together with nicotinate and nicotinamide metabolism. Heatmap and ternary analysis indicated the synergistic effect of carbohydrates and lipids may be induced by flavonoid intake from LTC. Conclusion: The present study could provide evidence that metabolomics, as systematic approach, revealed its capacity to evaluate the holistic efficacy of TCM, and investigate the molecular mechanism underlying the clinical treatment of LTC on ischemic stroke.