在体阿霉素干预联合全克隆培养方法富集肾上腺皮质癌肿瘤干细胞的研究

目的 通过阿霉素在体干预联合全克隆的富集方法来研究肾上腺皮质癌SW13肿瘤干细胞的特性。方法 建立裸鼠SW13移植瘤连续传代3代模型，实验组尾静脉注射阿霉素，对照组注射等量生理盐水。收集移植瘤细胞进行单克隆培养，所获克隆分别进行克隆转移实验、克隆连续传代实验、Hoechst33342/PI双染色检测凋亡率实验，并通过RT-qPCR检测肿瘤标志物CXCR4在两组瘤体细胞中的表达。结果 与对照组相比，实验组的瘤体直径小、CXCR4表达更高，实验组全克隆细胞的克隆转移能力、连续传代能力最高、凋亡率最低(P<0.05)。结论 在体阿霉素干预联合全克隆富集方法可以有效富集肾上腺皮质癌肿瘤干细胞，肾上腺皮质癌肿瘤干细胞高表达CXCR4。     

人肾上腺皮质癌裸鼠腹腔种植转移模型的建立及意义

目的：建立人肾上腺皮质癌裸鼠腹腔种植转移模型并探讨其生物学特性。方法：将1×10^6/mL体外培养的人肾上腺皮质癌SW-13细胞悬液接种于10只裸鼠腹腔内,分别于接种后第2、3周随机处死3只裸鼠,余下裸鼠于第4周全部处死取材。动态观察裸鼠体内成瘤及组织浸润转移情况,对肿瘤组织和可疑转移脏器进行病理形态学观察及免疫组化检测Ki67的表达。结果：10只裸鼠接种第8天于接种部位成瘤率100%,接种后3、4周裸鼠腹腔内均可见到转移瘤结节,以肠系膜最为显著,转移率均为100%,第4周时可见到2只裸鼠肾转移,1只裸鼠胰腺转移。镜下发现受侵犯的肠系膜淋巴结大部分被破坏,受累的肾、胰腺组织有明显肿瘤细胞浸润。SW-13细胞在体内外均高表达Ki67。结论：成功构建人肾上腺皮质癌裸鼠腹腔种植转移模型,为深入研究肾上腺皮质癌浸润转移机制及防治研究提供较为理想的动物模型。     

人肾上腺皮质腺癌细胞株裸鼠移植瘤模型的建立及其意义

目的 建立人肾上腺皮质腺癌移植瘤动物模型,为研究肾上腺皮质腺癌提供实验平台.方法 选取4～6周龄裸鼠5只,将体外培养的人肾上腺皮质腺癌细胞株(SW-13)注射至其双侧腋窝皮下,建立人肾上腺皮质腺癌移植瘤模型.结果 6周后5只裸鼠双侧腋窝皮下均长出肿瘤,肿瘤胞膜完整,HE染色可见大量肿瘤细胞.结论 成功建立人肾上腺皮质腺癌移植瘤动物模型,可以为肾上腺皮质腺癌的研究提供有效的动物模型平台.     

兔肝癌裸鼠移植模型的建立

目的 建立兔肝癌裸鼠模型，为兔肝癌可移植模型的建立奠定基础。方法 利用二乙基亚硝胺诱发日本大耳白兔肝癌，将获得的肝细胞癌接种于裸鼠皮下，并反复传代，将传代瘤块经体外培养后回植于裸鼠皮下，并继续在裸鼠体内传代。结果 肝细胞癌组织前5代对裸鼠致瘤率约40％；经体外传代后移植瘤成活率100％，潜伏期7～10d，无自然消退，无转移。病理检查证实该移植瘤保持着兔肝细胞癌特征，肝细胞抗原阳性，甲胎蛋白阳性。结论兔肝部细胞经传代和体外培养可增加移植成功率，并可缩短时间。     

膀胱癌细胞在不同生长环境中癌干细胞相关标志物CD44、CXCR4表达情况的初步研究

目的 观察癌干细胞相关标志物CD44、CXCR4在不同环境下膀胱癌细胞的变化情况,为人体膀胱癌干细胞的进一步研究提供前期数据与背景资料.方法 采用免疫组织化学与流式细胞术等技术,对体外培养、皮下移植瘤以及裸鼠淋巴结转移模型等不同的生长微环境的膀胱癌5637细胞系癌干细胞相关标志物CD44、CXCR4的表达进行检测.结果 在体外培养环境中,膀胱癌5637的细胞膜蛋白CD44呈阳性表达,而CXCR4呈弱阳性表达;膀胱癌裸鼠移植瘤中CD44、CXCR4均呈阳性表达.与体外培养体系比较,流式细胞术检测发现膀胱癌细胞中5637的CD44阳性表达水平无显著变化,而CXCR4阳性表达水平显著高于体外培养体系（P＆lt;0.01）;在裸鼠淋巴结转移模型中,转移淋巴结均有CD44、CXCR4阳性表达.结论 膀胱癌细胞中部分癌干细胞相关标志物的变化受体内外不同环境变化的调控,也提示膀胱癌5637细胞系存在有癌干细胞.     

两种人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型的比较研究

目的 比较两种人卵巢癌裸鼠移植瘤模型.方法 将1例人卵巢癌组织移植裸鼠,建立人卵巢癌裸鼠原代移植实体瘤模型的基础上,传代第十五代实体瘤细胞和人卵巢癌SKOV3细胞分别皮下移植裸鼠.观察两种人卵巢癌裸鼠肿瘤生长速度、存活时间、组织病理学检查、染色体.结果 实体瘤细胞皮下移植瘤生长速度高于SKOV3细胞皮下移植瘤(P＜0.05).实体瘤细胞皮下移植瘤裸鼠可存活30～58 d;SKOV3细胞皮下移植瘤裸鼠存活96～158 d.病理检查:肉眼观察实体瘤瘤细胞皮下移植瘤:瘤为实体,血性少量腹水,有肝、脾转移;SKOV3细胞皮下移植瘤呈囊形,肿瘤长大后可出现破溃,坏死、脱落,未见腹水及肝、脾转移.组织病理显微镜观察均呈乳头状生长,癌细胞生长活跃,细胞核大小不规则,核分裂多见与人癌组织一致.实体瘤细胞皮下移植瘤染色体多为亚二倍体和多倍体;SKOV3细胞皮下移植瘤多为三倍体或四倍体.结论 实体瘤细胞与SKOV3细胞皮下移植瘤有区别,实体瘤模型与人卵巢癌更为一致,并向肝、脾转移.     

人卵巢癌组织移植裸鼠实体瘤肝脾转移癌模型的建立

目的建立人卵巢癌组织移植裸鼠实体瘤肝脾转移癌模型。方法将1例人卵巢癌组织移植裸鼠，建立人卵巢癌裸鼠原代移植实体瘤模型的基础上，再将实体瘤腋下、背部皮下移植，实体瘤原位移植，实体瘤细胞移植裸鼠。观察裸鼠实体瘤生长和转移情况，称量其体重、肝、脾、子宫卵巢、瘤重及瘤的大小，并作病理、电镜检查。结果成功地建立人卵巢癌组织移植裸鼠实体瘤肝脾转移癌模型。组织学和超微结构形态均证明该实体瘤保留了原人卵巢癌、肝癌、脾癌特征。已传至第18代，传代移植成功率100％，肝脾转移100％。结论建立了人卵巢癌组织移植裸鼠实体瘤肝脾转移癌模型。通过18代传代和实验观察，肝脾转移100％。为人卵巢癌肝脾转移的研究提供了理想的动物模型。     

不同生长环境中膀胱癌干细胞相关标志物CD44、CD133表达情况的初步研究

目的探讨在不同环境中观察膀胱癌细胞表达癌干细胞相关标志物CD44、CD133的变化情况,为进一步研究人体膀胱癌干细胞提供背景资料和前期数据。方法采用免疫组织化学与流式细胞术等技术,以膀胱癌5637细胞系为研究对象,通过建立体外培养、皮下移植瘤以及裸鼠淋巴结转移模型等模拟不同的生长微环境,观察CD44、CD133等癌干细胞相关标志物的表达情况。结果在体外培养环境中,膀胱癌5637的细胞膜蛋白CD44阳性表达,CD133则阴性表达;膀胱癌裸鼠移植瘤中CD44阳性表达,而CD133弱阳性表达。与体外培养体系比较,流式细胞术检测发现膀胱癌细胞5637中的CD44阳性表达水平无显著变化,而CD133阳性表达水平显著高于体外培养体系（P〈0.01）;在裸鼠淋巴结转移模型中,转移淋巴结均有CD44、CD133阳性表达。结论体内外环境的改变可以调控膀胱癌细胞中部分癌干细胞相关标志物的变化,也提示膀胱癌5637细胞系存在癌干细胞。     

人γδT细胞、CD3AK细胞和NK细胞对裸鼠移植人结肠癌的抑制作用及对肿瘤细胞凋亡的影响

目的 探讨人γδT细胞、CD3AK细胞和NK细胞对裸鼠移植人结肠癌的抑制作用及对肿瘤细胞凋亡的影响.方法 将人结肠癌细胞株(SW-116)接种于BALC /c裸鼠皮下,建立结肠癌裸鼠模型,随机分为4组,每组6只.设定建立模型为第1天,分别于第1天、第4天、第7天每组给予相应的治疗.A组:尾静脉注射RPMI 1640培养液;B组:注射NK细胞+γδT细胞;C组:注射NK细胞+CD3AK细胞;D组:注射NK细胞+CD3AK细胞+γδT细胞.并于第10天处死裸鼠,测量肿瘤体积,用Tunel法检测肿瘤细胞凋亡率.结果 24只裸鼠接种5×106结肠癌细胞后第4天,在接种部位均有肿瘤形成,皮下结节最大径为2～3 mm,成瘤率为100%.治疗组肿瘤体积增加小于对照组,第1次治疗后10天时测A、B、C、D组平均肿瘤体积分别为(86.78±7.19)、(52.80±5.59)、(54.05±6.53)、(43.16±7.40)mm3,各治疗组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),B、C组组间无显著差异(P>0.05),D组与B、C组相比有显著差异(P<0.05).Tunel检测结果显示,与对照组相比,治疗组肿瘤细胞的凋亡率升高(P<0.05),以D组为甚.结论 人的γδT细胞、CD3AK细胞和NK细胞能不同程度延缓裸鼠移植的人结肠癌瘤体生长,免疫治疗能提高肿瘤细胞的凋亡率.     

两株人胃腺癌裸鼠移植瘤模型的建立

用两株人胃腺癌细胞系（ＧＣ－８０３和ＳＧＣ－７９０１）接种于裸小鼠皮下，形成初代移植瘤后鼠间传代，观察和比较了两株胃癌细胞系初代和子代移植瘤的移植成功率、生长特性和组织病理变化。结果显示：两株胃癌细胞系均能形成裸鼠皮下移植瘤，鼠间传代目前已至第１０代，总移植成功率达１００％，尚未发现移植瘤自发消退现象。比较两组移植瘤的生长速度，发现ＳＧＣ－７９０１组比ＧＣ－８０３组生长迅速。实验中未观察到裸鼠的主要脏器有转移灶形成。组织学检查表明两组移植瘤均为低分化腺癌结构，染色体分析显示两株移植瘤均具有人类恶性肿瘤细胞染色体的特点。该裸鼠移植瘤模型可作为一种有价值的工具用于胃癌防治的研究