前列腺素EI对人脐静脉内皮细胞中NO和eNOS的影响

目的探讨前列腺素EI(prostaglandin EI,PGEI)对内皮细胞一氧化氮(NO)表达和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性的影响。方法以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为实验对象,检测不同浓度PGEI作用不同时间后,细胞培养上清液和细胞中NO水平的变化,以及细胞eNOS活性的改变。结果(1)随着PGEI浓度的升高,eNOS的活性和NO的含量均逐渐增加(P<0.05);(2)短时间PGEI的干预对eNOS和NO的影响均不明显,24h后细胞中eNOS活性明显升高(P<0.05),NO的含量自12h起随时间延长而增加(P<0.05);(3)用不同PGEI浓度预处理,使TNF-α对eNOS活动的抑制作用减弱。结论PGEI可能通过诱导eNOS的表达,促进NO的释放,且可以重新激活被TNF-α抑制的eNOS活性。     

AMP激活的蛋白激酶促进内皮祖细胞分化的机制

内皮祖细胞(EPC)可以分化为成熟内皮细胞(EC)并参与新生血管形成,但是关于影响内皮祖细胞分化的机制目前尚不清楚。AMP激活的蛋白激酶(AMPK)能够增加内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的激活从而增加一氧化氮(NO)的产生及其生物活性,本项研究目的旨在探讨AMPK在人EPC分化中的重要作用及     

NO、NOS、NOS基因与糖尿病微血管并发症

体内一氧化氮 (NO)主要通过激活可溶性鸟苷酸环化酶 (GC) ,使靶细胞内cGMP水平升高而发挥生理作用。内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)产生的NO可扩张血管、调节血压、改变局部血流、抑制血小板聚集、抗平滑肌细胞增殖。神经型一氧化氮合酶 (nNOS)产生的NO以递质形式参与神经信息传导和内分泌调节。诱导型一氧化氮合酶(iNOS)产生的NO在炎症、免疫反应中起细胞毒与细胞抑制作用。NO参与糖尿病微血管并发症的发病机制。NOS基因尤其是eNOS基因的突变或多态性可能与糖尿病血管并发症相关     

呼出气中一氧化氮的测定和意义

一氧化氮 (NO)是目前研究最为广泛的呼出气标志物 ,有关哮喘呼出气中NO异常已有相当多的文献报道。1　呼出气中NO的来源1.1　NO合酶 (NOS)　内源性NO是通过NO合酶NOS作用于底物L 精氨酸而成。NOS最少有 3种不同的同工酶 ,其中 2种为结构性同工酶 ,常被细胞内轻微的钙离子浓度升高而激活 ,神经性NOS(nNOS)主要位于神经系统 ,内皮细胞NOS(eNOS)则位于内皮细胞 ,另一种则为诱导型NOS(iNOS)。iNOS活性较高 ,不受钙离子浓度的影响 ,它可被炎症时所产生的白介素、内皮素和病毒性感染所诱导 ,在炎症性疾病时表达增强。1.2　NO来…     

抗氧化剂PZ51对SHRsp血管内皮细胞作用

目的研究抗氧化剂 PZ51对 SHR-sp高血压发展的慢性过程中内皮细胞的作用及可能的机制. 方法 22只8周龄 SHR-sp 大鼠随机分为 PZ51组和对照组,灌胃治疗6周.用分光光度计测血浆NO、MDA浓度;免疫组化检测颈动脉eNOS蛋白表达;电镜扫描颈动脉内皮细胞.结果 PZ51组较对照组血浆MDA浓度显著降低(7.88±1.06 vs 10.88±1.73) μmol/L, P<0.001、NO浓度显著升高(40.02±9.74 vs 22.22±10.05) μmol/L, P<0.001;颈动脉内皮eNOS蛋白表达显著增加(8.25±2.36 vs 4.46±3.14,P=0.026);电镜检查示 PZ51组血管内皮细胞病变较对照组轻.结论 PZ51对 SHR-sp 血管内皮有保护作用,可能与其升高内皮细胞eNOS表达、增加血浆NO水平、抑制脂质过氧化有关.     

心血管疾病中氧化应激与一氧化氮合酶脱耦联

<正>血管内皮细胞功能障碍是导致许多心血管疾病的共同病理生理基础,其突出表现为内皮依赖性血管舒张功能障碍,主要由一氧化氮(NO)减少及氧自由基增加所致。内皮型NO合酶(eNOS)脱耦联是导致NO水平下降和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平升高的重要机制,其中ROS水平升高又是造成eNOS脱耦联的主要原因。减少氧     

抵抗素对内皮细胞NO生成的影响及Akt信号机制

目的探讨抵抗素对内皮细胞NO生成的影响及其可能的信号机制。方法分离、培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）,以不同浓度抵抗素（15、50、100ng／ml）干预。荧光显微镜检测各组细胞中N0的生成,RT-PCR检测eNOS mRNA表达水平,Western blot检测Akt和eNOS磷酸化水平。结果15、50、100ng／ml抵抗素干预HUVECs 24h后,胰岛素刺激的内皮NO生成显著降低（三组分别为4．01±0．69、3．764±0．71、3．73±0．45,vs对照组P均〈0．05）,同时伴有内皮Akt和eNOS磷酸化水平的降低（us对照组P均〈0．05）,而eNOS mRNA表达无显著改变。结论抵抗素可通过P13K／Akt途径影响HuVECs eNOS磷酸化水平,进而调节内皮细胞NO生成,但该影响并非Akt依赖性。     

活血益气方药物血清对转染VEGF165脐静脉内皮细胞分泌NO、eNOS的影响

目的 探讨活血益气方及其拆方含药动物血清对pcDNA3.1-VEGF165质粒转染人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分泌-氧化氮(NO)、内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)的影响.方法 通过构建pcDNA3.1-VEGF165重组质粒,并瞬时转染至HUVEC,制备血管内皮生长因子(VEGF)信号通路激活细胞模型.同时,制备活血益气方及其拆方含药动物血清,作用于转染后的HU-VEC,采用Western blot法检测VEGF蛋白的表达,Griess反应法测定细胞上清NO的表达,ELISA法测定细胞上清eNOS的表达.结果 活血益气方不仅可以促进转染后HUVEC表达VEGF蛋白,还可以促进其分泌NO及eNOS.活血方和益气方单用均可以促进转染后HUVEC细胞分泌NO,但对eNOS的分泌未见明显影响.结论 活血益气方对VEGF信号通路具有促进作用.活血方药和益气方药在这方面均起主要作用,全方作用优于拆方各组.活血益气方治疗性血管生成作用机制可能与其促进内皮细胞分泌NO,从而促进内皮细胞迁移,提高血管通透性有关.其具体作用机制还有待进一步研究.     

NO合成与转归

NO在体内起什么作用?NO在体内的合成酶有：由内皮细胞NO合成酶(eNOS)；神经NO合成酶(nNOS)以及因外界刺激由炎症细胞等产生的诱导NO合成酶(iN—OS)。它在体内可以说是无所不在。在血管，内皮细胞产生的NO起着保持血管张力，防止细胞黏附，抑制血小板聚集防止平滑肌增生，抑制动脉粥样硬化斑块的作用。在脑部调控神经传导，过量引起神经元退行性变。在周围神经系统调节痛觉；在胃肠道它是非肾上腺能非胆碱能神经传导介质。在免疫系统NO是细胞毒的介质，调节免疫细胞功能。     

抗氧化剂PZ51对SHRsp血管内皮细胞作用

目的　研究抗氧化剂PZ5 1对SHRsp高血压发展的慢性过程中内皮细胞的作用及可能的机制。方法　 2 2只 8周龄SHRsp大鼠随机分为PZ5 1组和对照组 ,灌胃治疗 6周。用分光光度计测血浆NO、MDA浓度 ;免疫组化检测颈动脉eNOS蛋白表达 ;电镜扫描颈动脉内皮细胞。结果　PZ5 1组较对照组血浆MDA浓度显著降低 (7.88± 1 0 6vs 10 88± 1.73) μmol/L ,P <0 0 0 1、NO浓度显著升高 (4 0 0 2± 9.74vs 2 2 .2 2± 10 0 5 ) μmol/L ,P <0 0 0 1;颈动脉内皮eNOS蛋白表达显著增加 (8.2 5± 2 .36vs 4 .4 6± 3.14 ,P =0 0 2 6 ) ;电镜检查示PZ5 1组血管内皮细胞病变较对照组轻。结论PZ5 1对SHRsp血管内皮有保护作用 ,可能与其升高内皮细胞eNOS表达、增加血浆NO水平、抑制脂质过氧化有关。     

氯吡格雷对尼古丁诱导的血管内皮损伤的保护作用

目的探讨尼古丁对血管内皮细胞的影响及氯吡格雷的保护作用。方法将40只SD大鼠分为5组,对照组、模型组(尼古丁2 mg/kg)、尼古丁损伤+氯吡格雷低剂量组(低剂量组)、尼古丁损伤+氯吡格雷中剂量组(中剂量组)、尼古丁损伤+氯吡格雷高剂量组(高剂量组),每组8只。尼古丁造模4周后,测定大鼠血浆超氧化物歧化酶(SOD)、内皮素1、NO及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)浓度,免疫组织化学法及Western blot法测定血管eNOS阳性细胞的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠血浆NO、eNOS及SOD浓度明显下降,而内皮素1浓度明显上调,eNOS阳性细胞表达明显减少(P0.01);与模型组比较,低、中、高剂量组大鼠NO、eNOS及SOD浓度明显升高,eNOS阳性细胞表达明显增多,且中、高剂量组大鼠增多更显著(P0.05,P0.01)。结论氯吡格雷可能抑制氧化应激反应,调节内皮细胞中eNOS的正常表达,从而缓解尼古丁对血管内皮细胞的损害。     

NO在肿瘤微循环中作用

一氧化氮(NO)是一种具有高度反应性和各种生理活性的分子。一氧化氮合成酶有三种同功酶:内皮细胞性(eNOS)、神经细胞性(nNOS)和诱导性(iNOS)。在肿瘤微循环中,NO在维持肿瘤血流和营养方面可能起作用。作者提出这样假说:①来自于肿瘤血管内皮细胞以及(或)瘤细胞的内源性NO增加和(或)维持肿瘤血流、减少白细胞-内皮细胞间反应以及增加血管通透性;②外源性NO能通过血管扩张以增加肿瘤血流、减少白细胞-内皮细胞间反应;③NO的产生以及组织对NO反应是肿瘤依赖性。为了验证上述假说以及确定NO在肿瘤中作用,作者应用NOS抑制剂以及外源性NO观察肿瘤血流、血管管径、白细胞-内皮细胞间相互作用以及血管通透性的变化。     

胰岛素介导的内皮依赖性血管舒张功能与高血糖关系的实验研究

目的：研究不同浓度胰岛素，葡萄糖对培养血管内皮细胞一氧化氮（NO）产生的影响，探讨糖尿病时内皮依赖性血管舒张异常的作用机制。方法：用放免法测定内皮细胞cGMP水平来反映NO的量，半定量RT－PCR检测NO合酶（eNOS)mRNA水平。结果：胰岛素（0.18-6.0nmol/L)，葡萄糖（20mmol/L,40mmol/L)能增加内皮细胞cGMP产量，并呈浓度和时间依赖性；高浓度葡萄糖上调eNOS mRNA水平，而胰岛素对其无影响，在高浓度葡萄糖下，胰岛素（6.0nmol/L)刺激NO的生成作用明显降低。结论：胰岛素介导的内皮依赖性血管扩张与胰岛素刺激内皮细胞NO合成有关；血管内皮对胰岛素的敏感性减低是胰岛素抵抗的一部分；高浓度葡萄糖可能会抑制胰岛素介导的内皮依赖性血管舒张。     

NO、NOS、NOS基因与糖尿病微血管并发症

体内一氧化氮（NO）主要通过激活可溶性鸟苷酸环化酶（GC），使细胞内cGMP水平升高而发挥生理作用。内皮型一氧化氮合酶（eNOS)产生的NO可扩张血管、调节血压、改变局部血流、抑制血小板聚集、抗平滑肌细胞增殖。神经型一氧化氮合酶（nNOS)产生的NO以递质形式参与神经信息传导和内分泌调节。诱导型一氧化氮合酶（iNOS)产生的NOD在炎症、免疫反应中起细胞毒与细胞抑制作用。NO参与糖尿病微血管并发症的发病机制。NOS基因尤其是eNOS基因的突变或多态性可能与糖尿病并发症相关。     

小葱葱白提取物对人脐静脉内皮细胞一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的观察小葱葱白提取物对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分泌一氧化氮(NO)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的影响,探讨其对HUVECs血管活性分子分泌的调节作用。方法从小葱葱白中提取活性成分,体外培养HUVECs用不同浓度(100g/L,50g/L,25g/L,12.5g/L)的葱白提取物分别作用于HUVECs。观察细胞形态,MTT法观察葱白提取物对HUVECs活性的影响,比色法测定各组的NO含量,RT-PCR法及Western Blot法测定内皮型eNOS的表达水平。结果和对照组比较,小葱葱白提取物对内皮细胞形态和活性无明显影响,能增加HUVECs释放NO及eNOS生成(P<0.05或P<0.01)。结论小葱葱白提取物可能通过增加eNOS生成而提高HUVECs释放NO,从而保护内皮功能。     

运动的血管内皮效应及其分子机制

内皮祖细胞(EPCs)、一氧化氮(NO)及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)等在调节血管内皮功能中起着关键作用,有助于维持心血管健康。运动作为一种干预心血管疾病风险因素的有效手段,已经被大量的研究证明。本文分析了EPCs和NO、eNOS的相关分子机制,并综述了运动对其的影响。     

内皮型一氧化氮合酶在骨髓内皮祖细胞治疗缺血性脑血管病中的作用

内皮型一氧化氮合酶( eNOS)/NO在血管新生和血管发生中起着重要作用.脑缺血时,缺血组织内的eNOS表达增加,促进NO的释放,有利于骨髓内皮祖细胞(EPCs)的动员、迁移、归巢.而EPCs能在缺血组织分化为成熟的血管内皮细胞,修复损伤的内皮,参与新生血管的形成,改善组织细胞的供血.本文就eNOS在EPCs治疗缺血性脑血管病中的可能作用做一综述.     

缺少内皮细胞NO合成酶、生成NO障碍引起成年心室心肌细胞肥厚

压力负荷引起心力衰竭的心肌细胞内皮NO合成酶(eNOS)的表达与反应性下降。该文研究eNOS产生NO减少是否与这些心肌细胞肥厚有关。成年大鼠体外培养心室心肌细胞,以Nω-硝基-L-精氨酸(L-NNA)抑制NO生成,并以eNOS基因缺失小鼠心肌细胞培养做对照。检查包括:细胞生长、反应性氧族(ROS)、p38丝裂原激活蛋白(MAP)激酶磷酸化、细胞因子表达。L-NNA加速蛋白合成速率、增加细胞体积,并呈浓度依赖型。p38MAP激酶抑制或抗氧化剂可阻抑细胞肥大。L-NNA引起ROS迅速增加继而激活p38MAP激酶以及p38MAP激酶-依赖性TGF-β与TNFα增加。…     

氟伐他汀对人脐静脉内皮细胞游离钙离子水平及内皮型一氧化氮合酶活性的影响

目的:观察氟伐他汀对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)游离钙离子水平及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性的影响及可能机制。方法:体外培养HUVECs,随机分为5组:空白对照组,氟伐他汀(10-8,10-7,10-6,10-5mol/L)组。采用硝酸还原酶法测定细胞上清液中NO含量,液体闪烁计数仪测定L-[3H]-精氨酸和L-[3H]-瓜氨酸的含量,用激光共聚焦扫描显像系统检测内皮细胞内游离钙离子浓度([Ca2 ]i)水平的变化。结果:与空白对照组比较,10-8,10-7,10-6,10-5mol/L氟伐他汀孵育细胞12h后可显著升高HUVECs细胞内eNOS活性,促进NO释放,同时伴有[Ca2 ]i升高,且呈浓度依赖性。另外,10-5mol/L氟伐他汀在0～12h时间段呈时间依赖性增高eNOS活性,作用12h使eNOS活性达到最高(P<0.01)。结论:氟伐他汀呈浓度依赖性升高HUVECseNOS活性和促进NO释放,该作用与其增加内皮细胞内[Ca2 ]i有关。     

17β-雌二醇对牛视网膜毛细血管内皮细胞eNOS mRNA及NO调控的实验研究

目的探讨17β-雌二醇(E2)在不同氧(O2)环境下对牛视网膜毛细血管内皮细胞(BRECs)一氧化氮合酶(eNOS)mRNA及NO的影响。方法在正常O2及缺O2环境下,采用不同生理浓度(10-12、10-10、10-8mol/L)的17β-E2及雌激素受体拮抗剂他莫昔芬处理培养的BRECs。采用RT-PCR检测eNOS mRNA,硝酸还原酶法测定NO。结果①低O2条件下BRECs的eNOS mRNA、NO表达较正常O2条件下明显增多(P<0.05)。②正常O2及低O2条件下,不同生理浓度17β-E2作用24 h后,17β-E2均呈浓度依赖性促进BRECs的eNOS mRNA、NO表达(P<0.05);10-8mol/L 17β-E2作用8、24 h,eNOS mRNA表达量呈时间依赖性增多(P<0.05)。结论生理浓度的17β-E2使BRECs的eNOS mRNA、NO表达呈浓度、时间依赖性增加。