腺苷蛋氨酸对酒精性肝损伤大鼠甲硫氨酸代谢和脂质过氧化的影响

观察腺苷蛋氨酸（S-adenosylmethionine,SAM）对酒精性肝损伤大鼠的防治作用及机制。48只SD大鼠随机分为4组（每组12只）：正常对照组、模型组、腺苷蛋氨酸低及高剂量组。除对照组外,其余三组给予酒精、鱼油灌胃配合高脂饮食构建酒精性肝损伤大鼠模型,造模4周后腹腔注射SAM,第8周处死全部大鼠。测定血浆总同型半胱氨酸（total plasma homocysteine,tHcy）、血清丙氨酸转移酶（ALT）、甘油三酯（TC）、总胆固醇（TG）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子（TGF-β）水平、肝匀浆丙二醛（MDA）和还原型谷胱甘肽（GSH）含量,及肝组织病理学检测。与对照组比较,模型组大鼠tHcy、ALT、TC、TG、TNF-α、TGF—β、MDA含量均明显升高（P〈0．01）;GSH水平降低（P〈0．01）。与模型组比较,SAM治疗组ALT、TC、TG、MDA（P〈0．01）和TNF-α、TGF—β明显降低（P〈0．05）,GSH含量升高（P〈0．01）,但血浆tHcy水平无显著变化（P〉0．05）。SAM低、高剂量组各项指标间比较无明显差别（P〉0．05）。SAM可明显改善大鼠酒精性肝损伤,其机制可能与其降低肝组织脂质过氧化、并与抗免疫炎性因子和抗增殖有关。     

胸腺肽对免疫性肝损伤并发败血症小鼠免疫功能的影响

47只昆明种鼠，其中7只尾静脉注射生理盐水0．2ml／只（正常对照组），1次／d，连续13d。另40只腹腔注射大肠埃希菌液和卡介苗建立肝损伤模型，分为观察1组和观察2组各20只，观察2组同时腹腔注射胸腺肽，1次／d，连续12d。第13天两组均经尾静脉注射脂多糖（LPS）诱导肝损伤。三组断头处死后测血清肿瘤坏死因子（TNF-α）及白介素-2（IL-2），并观察存活率。结果观察1组血清TNF-α水平明显高于正常对照组和观察2组（P〈0．01），IL-2明显低于上述两组（P分别〈0．01、〈0．05）；观察2组血清TNF-α高于正常对照组（P〈0．01），IL-2与正常对照组比较无显著差异（P〉0．05）。观察2组小鼠存活率显著高于观察1组，但低于正常对照组，P均〈0．01。认为胸腺肽可提高免疫性肝损伤合并败血症小鼠的机体免疫功能。     

乌司他丁对GalN／LPS引起大鼠急性肝损伤的保护作用

目的观察乌司他丁（UTI）对D-氨基半乳糖（D-GaIN）／脂多糖（LPS）引起大鼠急性肝损伤的保护作用,探讨其作用机制。方法72只SD雄性大鼠进行随机对照分组实验,分为正常对照组、模型组和UTI处理组,各组再分为6h、12h、24h、48h取材4个亚组。腹腔内注射D-GalN／LPS建立大鼠急性肝损伤模型,UTI处理组则在腹腔内注射D-GalN／LPS后立即注射UTI。在相应时间点,门静脉采血检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、一氧化氮（NO）水平;肝组织切片观察肝脏病理形态学变化;测定肝组织丙二醛（MDA）含量,Caspase-3和Caspase-8活性。结果与模型组相比,UTI处理组血清ALT、AST水平在12h、24h和48h组均明显降低（P〈0．01）;UTI处理组TNF-α、NO水平则在6h和12h有明显降低（P〈0．01或0．05）;UTI处理组肝组织MDA含量在12h、24h和48h明显降低〈P〈0．01）;UTI处理组处理6h后Caspase-3和Caspase-8活性明显降低（P〈0．01）。结论UTI对GalN／LPS引起大鼠急性肝损伤有保护作用,主要通过其抗炎、抗氧化和抗凋亡作用。     

枳黄方对急性酒精性肝损伤大鼠内毒素信号转导通路中白细胞分化抗原14的影响

[目的]探讨酒精性肝损伤时，枳黄方对内毒素信号通路中白细胞分化抗原14（CD14）表达的影响。[方法]将75只Wistar大鼠随机分为空白对照（正常）组、酒精攻击（模型）组、枳黄方（治疗）组，10d后，处死大鼠，取大鼠血清和肝脏测定丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST），苏木精-伊红染色观察肝脏病理变化，基质染色法测定血清内毒素，免疫组化法测定肝脏肿瘤坏死因子α（TNF-α），RT—PCR法测定肝组织CD14mRNA的变化。[结果]治疗组肝脏病理表现较模型组好，其血清内毒素、ALT、AST和肝组织TNF-α、CD14mRNA表达水平均高于正常组（P〈0．05，〈0．01，〈0．01，〈0．01，〈0．05），且均显著低于模型组（均P〈0．01）。[结论]枳黄方能显著降低内毒素信号转导通路上CD14基因水平的表达，减少肝组织TNF-α的表达，这可能是其对大鼠酒精性肝损伤有较明显保护作用的机制之一。     

库普弗细胞内毒素耐受时白细胞介素-1受体相关激酶-4的表达变化

目的观察库普弗细胞（KCs）内毒素耐受形成后白细胞介素-1受体相关激酶4（IRAK-4）表达的变化，探讨KCs内毒素耐受形成的相关机制。方法分离培养Balb／c小鼠KCs，分为非内毒素耐受组与内毒素耐受组[给予脂多糖（LPS）10ng／ml预处理24h]。用LPS100ng／ml刺激后，蛋白免疫印迹法及逆转录聚合酶链反应法测定两组细胞IRAK-4蛋白及mRNA的表达水平；酶联免疫吸附法检测两组细胞核因子-κB（NF-κB）活性及培养上清液肿瘤坏死因子α（TNFα）含量。结果LPS刺激在两组细胞均引起IRAK-4 mRNA表达及NF-κB活性增强、TNFα释放增加，但内毒素耐受组3种指标的高峰值明显低于非内毒素耐受组（t值分别为l2．4、l7．4、l38．9，P值均〈0．01）。结论LPS预处理可诱导KCs形成内毒素耐受状态，IRAK4表达受到抑制可能是KCs内毒素耐受形成的机制之一。     

姜黄素对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织TNF-α表达的影响

目的研究姜黄素防治非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的作用及其机制。方法采用高脂饮食制备大鼠NASH模型。大鼠分正常对照组、模型组、姜黄素防治组、东宝肝泰防治组，观察肝细胞脂肪变性、炎症活动程度；采用免疫组化和Western blot技术检测各组大鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）蛋白表达变化。结果与模型组相比，姜黄素防治组大鼠肝细胞脂肪变性、炎症活动程度皆有明显改善（P〈20．05），TNF-α蛋白含量显著减少（P〈0．01），部分作用明显优于东宝肝泰防治组（P〈0．01或P〈0．05）。结论姜黄素有防治NASH作用，作用机制考虑与纠正致炎因子TNF-α蛋白高表达相关。     

复方柴郁汤对小鼠免疫性肝损伤的影响

目的：观察中药复方柴郁汤对小鼠免疫性肝损伤的影响。方法：将72只小鼠随机分为空白组、病理组、日达仙组以及复方柴郁汤大、中、小剂量组，采用BCG＋LPS造模，观察并比较各组小鼠血清ALT、AST含量以及肝脏病理结构。结果：各治疗组和日达仙组的ALT、AST值明显低于病理组（P〈0．01），组织结构明显优于病理组（P〈0.01）。其中中剂量组又优于其他治疗组和对照组（P〈0．05）。结论：复方柴郁汤能明显降低免疫性肝损伤小鼠血清ALT、AST的活力单位．减轻其免疫性肝损伤程度。     

地塞米松在D-氨基半乳糖联合内毒素诱导小鼠急性肝功能衰竭

目的 探讨地塞米松冲击疗法对D-氨基半乳糖（DGal）联合内毒素（LPS）所致急性肝功能衰竭模型促炎与抗炎因子的影响，为深入阐明糖皮质激素在重型肝炎中的作用机制提供实验依据。方法 雄性BALB／c小鼠随机分为健康对照组6只、肝功能衰竭模型组24只和地塞米松治疗组24只，采用LPS10μg／kg和D—Gal 900mg／kg联合腹腔注射制备肝功能衰竭模型，治疗组同时注射地塞米松10mg／kg。健康对照组8h，肝功能衰竭模型组和地塞米松治疗组2、4、6、8h各6只小鼠心脏采血检测血清ALT、AST,肝组织经苏木精-伊红染色并应用病理学双盲评价行改良Knodell评分；不连续密度梯度法分离肝库普弗细胞（KCs）并鉴定，El。1SA法检测KCs上清液lLl0、TNF-a和核因子（NF）一KB变化，半定量RT—PCR检测肝组织TNF—α、IL-10mRNA表达。结果地塞米松治疗组与肝功能衰竭模型组组织学改良Knodell评分在6、8h分别为7．500±1．871、10．830±1．472和10．500±1．049、15．670±1．633，差异有统计学意义（P〈0．05）；血清ALT、AST、肝KCs上清液TNF-α水平随损伤时间延长均逐渐升高，但治疗组较肝功能衰竭模型组低，差异有统计学意义（P〈0．01），肝组织TNF-α mRNA亦随损伤时间增加而升高，治疗组与肝功能衰竭模型组在6、8h比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；肝KCs上清液及肝组织IL-10随损伤时间增加而升高，治疗组较肝功能衰竭模型组升高显著，在6、8h明显（P〈0．05）；肝KCs上清液NF—kB活性在2h即升高，4h达高峰，4～6h为一高峰平台，8h与正常无差异，两组2、4、6h各时点之间差异有统计学意义（P〈0．01）。结论 肝功能衰竭早期应用地塞米松冲击疗法对肝脏有保护作用，其机制可能为通过抑制肝脏KCsNF-kB表达，下调肝脏原位及循环中TNF—α水平，调节促炎与抗炎因子之间的平衡而起作用。     

杞蓟制剂对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织TNF-α蛋白表达的影响

目的：观察杞蓟制剂对大鼠非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholic steatohepatitis，NASH）肝组织肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor，TNF-α）蛋白表达的影响，探讨其作用机制。方法：采用高脂饮食复制大鼠NASH模型。实验分正常对照组、模型组、杞蓟制剂组、复方蛋氨酸胆碱片对照组。观察动物一般情况。计算肝指数、肝组织细胞脂肪变性、炎症活动程度，测定血清丙氨酸转氨醇（ALT）、天门冬氨酸转氨酶（AST）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TCH）等指标。结果：与模型组相比，杞蓟制剂预防给药明显改善NASH大鼠肝指数、肝组织脂肪变程度、炎症活动程度及血清ALT、AST、TG、TCH等指标（P〈0．01或P〈0．05），同时明显降低肝组织TNF-α蛋白表达（P〈0．05），优于复方蛋氨酸胆碱片对照组（P〈0．05）。结论：杞蓟制剂抑制TNF-α蛋白在肝组织表迭是其防治NASH的重要机制。     

脂欣康胶囊对载脂蛋白E基因敲除小鼠TNF-α、IL-1β干预作用

目的观察脂欣康胶囊对载脂蛋白E（ApoE）基因敲除小鼠血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素1β（IL-1β）的影响。方法将6周龄ApoE基因敲除小鼠随机分为模型组与脂欣康组，相同遗传背景的同龄正常C57BL／6J小鼠为正常对照组。脂欣康组灌服脂欣康胶囊内之药粉，模型组、正常对照组均灌服生理盐水。连续灌胃2周后（8周龄），各组随机取出半数小鼠，雌雄各半。麻醉后由腹腔静脉抽血。另一部分继续灌胃4周后（12周龄）由腹腔静脉抽血。离心分离血清，ELISA法检测TNF-α和IL-1β结果灌服2周后，脂欣康组小鼠血清TNF-α和IL-1β显著低于模型组（P〈0．05），模型组显著高于正常对照组（P〈0．05）；继续用药4周后，TNF-α和IL-1β无明显增高，脂欣康组显著低于模型组（P〈0.05），模型组显著高于正常对照组（P〈0．05）。结论脂欣康胶囊具有显著抑制ApoE基因敲除小鼠血清TNF-α与IL-1β增高的作用。