一氧化氮在牙周炎发病机制中的作用

目的 :通过测定大鼠牙周炎模型牙龈组织中亚硝酸盐 (NO2 -)的含量 ,分析一氧化氮在牙周炎病理进程中所起的作用 ,为探讨牙周炎的发病机理提供实验依据。方法 :健康Sprague -Dawley(SD)大鼠共 6 0只 ,雌雄各半 ,体重 2 0 0 - 2 5 0g ,经两周饲养后 ,随机分为 2组 ,每组 30只。 1 正常对照组 (n =30 ) ;2 牙周炎组 (n =30 ) ,参照Mirna法复制牙周炎动物模型 :实验大鼠用2 %戊巴比妥钠 (0 2 3mL/ 10 0g体重 )经腹腔注射麻醉 ,用 2 / 0的丝线及眼科缝针缝扎牙颈部 ,在前庭区打结。术后第 1d开始每日腹腔注射生理盐水 (normalsaline,NS) )…     

实验性精索静脉曲张大鼠睾丸组织和血清一氧化氮和一氧化氮合酶的改变

目的：检测实验性精索静脉曲张大鼠睾丸组织和血清NO含量和NOS活性的改变，以进一步阐明精索静脉曲张的发生机制。方法：通过手术方法建立大鼠精索静脉曲张模型，检测NO和NOS的变化。结果：实验组左侧睾丸组织NO含量显著高于对照组左侧睾丸含量；实验组血清NOS活力明显低于对照组。结论：实验性精索静脉曲张大鼠睾丸组织和血清NO和NOS有改变。     

实验性精索静脉曲线大鼠睾丸组织和血清一氧化氮和一氧化氮合酶的改变

目的：检测实验性精索静脉曲线大鼠睾丸组织和血清NO含量和NOS活性的改变，以进一步阐明精索静脉曲线的发生机制。方法：通过手术方法建立大鼠精索静脉曲张模型，检测NO和NOS的变化。结果：实验组左侧睾丸组织NO含量显著高于对照组左侧睾丸含量；实验组血清NOS活力明显低于对照组。结论：实验性精索静脉曲张大鼠睾丸组织和血清NO和NOS有改变。     

实验性牙周炎大鼠模型的建立

背景：建立实验性牙周炎大鼠模型是研究牙周病的基本方法之一,目前常用的建模方法存在许多弊端,需要进一步改进。 目的：建立一种近似于人类临床的牙周炎动物模型方法。 方法：将20只8周龄的Wistar大鼠随机分为实验组和对照组,锐分离实验组大鼠双侧下颌第一磨牙颊侧牙龈,局部黏结慢性牙周炎患者的牙石于牙颈部,滴入慢性牙周病炎患者的唾液10 μL/次,2次/d;对照组大鼠牙齿不做处理。两组大鼠均喂以高糖黏性食物。 结果与结论：造模14 d后实验组动物一般生物学特征和牙周组织病理、X射线变化均符合典型牙周炎表现。局部黏结牙石加混合细菌感染的方法建立的大鼠牙周炎模型可以模拟人类牙周炎的组织变化,是一种接近于人类临床的简单、实惠、有效的建模方法。     

氨基胍对牙周炎抑制作用的研究

目的: 观察氨基胍(AG)对牙周炎的作用。方法: 采用丝线结扎法建立大鼠牙周炎模型; 利用分光光度仪测定大鼠牙龈组织中亚硝酸盐(NO₂^-)含量, 以间接确定一氧化氮(NO)含量; 应用Tiger细胞图象仪分析牙周附着丧失; 采用组织切片法观察牙周组织的病理学改变。结果: AG能明显降低大鼠牙周炎牙龈NO含量, 抑制牙周组织附着丧失和减轻炎症程度。结论: AG通过选择性抑制诱导型一氧化氮合酶(iNOS), 降低牙周组织NO含量, 达到减轻牙周组织炎症程度的作用, 提示AG对临床牙周炎可能有疗效.     

实验性大鼠肝纤维化一氧化氮动态变化及意义

用ＣＣＬ４复制肝纤维化大鼠模型，于第４、８、１２ｗｋ分别采血，取腹腔巨噬细胞和肝组织，测定血中ＮＯ、ＴＮＦα、ｓＩＬ－２Ｒ和腹腔巨噬细胞培养中清中ＮＯ、ＴＮＦα，同时作肝脏组织病理的检验。结果显示：随着肝纤维化的进展，血清ＮＯ、ＴＮＦα－ｓＩＬ－２Ｒ的含量递增，约在第８ｗｋ达到高峰，ＮＯ的增高较上述其他指标更明显，呈正相关（ｒ＝０．８８０５）。肝纤维化与腹腔巨噬细胞产一的ＮＯ、ＴＮＦα的量呈正相关     

牙周炎时牙髓组织改变的研究

为了观察牙周炎时牙髓组织的改变,在临床上采集了100个牙体完整的具有不同牙周破坏程度的牙周炎患牙,进行了组织学检测。同时,用三只狗的42个牙齿制作牙周炎模型,以观察牙周炎时牙髓组织有无改变。结果表明:(1)在100个牙周炎患牙中正常牙髓占40%;牙髓炎症占15%;牙髓坏死占时6%;牙髓钙化占30%;修复性牙本质占30%;牙髓变性占15%。(2)在实验性牙周炎模型中,11.9%的牙髓有炎症;牙髓坏死占4.8%;修复性牙本质占28.6%;牙髓变性占19%。这些结果表明牙周炎有可能引起牙髓病变。     

一氧化氮在实验性NIDDM大鼠心肌病变中的变化

目的:用非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)模型,研究一氧化氮(NO)、构建型一氧化氮合酶(cNOS)与NIDDM早期心肌病关系。方法:给大鼠尾静脉注射小剂量链尿佐菌素,使大鼠糖耐量异常,然后加喂高热量食物,引起大鼠肥胖,饲养8周,可形成类似NIDDM模型。观察实验性NIDDM大鼠心肌超微结构、心肌NO产物NO₂^-/NO₃^-、cNOS表达的变化。结果:①透射电镜观察发现,NIDDM大鼠心肌有超微结构改变,例如:线粒体肿胀、心肌闰盘间隙增宽。②NIDDM大鼠心肌组织NO₂^-/NO₃^-水平显著低于正常对照大鼠(P＜0.01),L-精氨酸组心肌组织NO₂^-/NO₃^-显著高于NIDDM组(P＜0.01)。③NIDDM大鼠心肌组织cNOSmRNA表达显著低于正常对照大鼠(P＜0.01)。结论:NIDDM早期存在心肌病变,NO与其发生机制有关,L-精氨酸对NIDDM大鼠心肌病有一定的防治作用。     

外用重组人碱性成纤维细胞生长因子 在牙周炎中的应用效果

目的 探究外用重组人碱性成纤维细胞生长因子（rh FGF）在牙周炎治疗中的应用效果。方法 选取2018年1月~2019年1月在我院就诊的牙周炎患者100例,随机分为对照组和观察组,每组50例。对照组采用基础疗法进行治疗,观察组在基础疗法的基础上给予外用重组人碱性成纤维细胞生长因子进行治疗。比较两组治疗后不同时间点的龈沟出血指数（SBI）、牙周探诊深度（PD）、临床附着丧失（CAL）、炎症因子和治疗有效率。结果 两组治疗3周、6周的SBI、PD和CAL与治疗前比较均有所改善,治疗6周的改善程度高于治疗3周,差异具有统计学意义（P＜0.05）;观察组治疗3周、6周的SBI、PD和CAL均优于对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）。两组治疗3周、6周的IL-1β、IL-8和IL-17与治疗前比较均降低,治疗6周的IL-1β、IL-8和IL-17均低于治疗3周,差异具有统计学意义（P＜0.05）;观察组治疗3周、6周的IL-1β、IL-8和IL-17均低于对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）。观察组治疗总有效率高于对照组（90.00% vs 62.00%）,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 rh FGF治疗牙周炎患者,能够改善龈沟出血指数,减少牙周探诊深度、临床附着丧失,减低炎性因子,提高牙周组织的愈合速度。     

尼美舒利对大鼠实验性牙周炎防治作用的评价

目的： 评价尼美舒利对实验性牙周炎的防治效果，探讨前列腺素与牙周炎发病的关系，为牙周炎临床治疗的联合用药提供依据。方法： Sprague-Dawly大鼠120只，随机分成4组。正常对照组及各实验组分别于4、5和8周末分批处死动物。在处死动物前测量各时点的牙龈指数，通过组织学方法观察各组动物牙周组织的病理学改变，用Tiger细胞图像分析仪测量牙周附着丧失情况。结果： （1）大鼠经丝线结扎4周后成功复制出牙周炎模型。（2）实验性牙周炎组，4周时牙龈指数明显高于正常对照组(P<0.01)，附着丧失明显高于正常对照组(P<0.01)。组织学观察到牙周组织出现明显的病理改变，并且牙周组织破坏程度随着时间的推移逐渐加重。（3）尼美舒利预防组牙龈指数和附着丧失明显低于牙周炎组(P<0.01)，组织学观察到牙周组织的炎症较轻，牙槽骨未见明显破坏吸收。（4）在实验性牙周炎形成后，尼美舒利治疗组自第5周开始给予尼美舒利治疗，5周和8周末时牙龈指数和附着丧失明显低于牙周炎组(P<0.01)，8周时牙龈指数和附着丧失降低尤为明显。结论： 预防性给予尼美舒利，可有效阻止实验性牙周炎的发展；在牙周炎发生后，给予尼美舒利治疗，能有效降低牙周组织的炎症和破坏程度。     

自发性高血压大鼠血浆一氧化氮浓度的变化

目的　观察自发性高血压大鼠 (SHR)血浆NO浓度的变化 ,探讨NO与高血压发生发展的关系。方法　颈总动脉插管测定大鼠血压 ,硝酸银还原法测定SHR血浆中NO的含量。结果　 (1)血压变化 :各时期WKY大鼠血压无显著性差异 ;高血压组大鼠血压随着月龄增加逐渐升高 ,均明显高于WKY大鼠 (P <0 0 1)。 (2 )血浆NO浓度的变化 :WKY大鼠血浆NO浓度各时期无显著性差异 ;高血压组大鼠血浆NO浓度在 3m、6m时间点明显高于WKY大鼠 ,但在 12m时间点却较WKY大鼠明显降低 (P<0 0 1) ,同组内与 3m、6m时间点比较亦显著减少 (P <0 0 1)。相关分析显示 ,在 3m、6m时间点高血压大鼠血浆NO浓度与血压之间呈正相关 (P <0 0 1) ,在 12m时间点与血压呈负相关 (P <0 0 1)。结论　随着高血压发生和发展 ,血浆NO升高 ,而在高血压后期 ,NO的变化不明显 ,这种变化可能与高血压的发生发展有关。     

Antimicrobial peptides and nitric oxide production by neutrophils from periodontitis subjects

Neutrophils play an important role in periodontitis by producing nitric oxide (NO) and antimicrobial peptides, molecules with microbicidal activity via oxygen-dependent and -independent mechanisms, respectively. It is unknown whether variation in the production of antimicrobial peptides such as LL-37, human neutrophil peptides (HNP) 1-3, and NO by neutrophils influences the pathogenesis of periodontal diseases. We compared the production of these peptides and NO by lipopolysaccharide (LPS)-stimulated neutrophils isolated from healthy subjects and from patients with periodontitis. Peripheral blood neutrophils were cultured with or without Aggregatibacter actinomycetemcomitans-LPS (Aa-LPS), Porphyromonas gingivalis-LPS (Pg-LPS) and Escherichia coli-LPS (Ec-LPS). qRT-PCR was used to determine quantities of HNP 1-3 and LL-37 mRNA in neutrophils. Amounts of HNP 1-3 and LL-37 proteins in the cell culture supernatants were also determined by ELISA. In addition, NO levels in neutrophil culture supernatants were quantitated by the Griess reaction. Neutrophils from periodontitis patients cultured with Aa-LPS, Pg-LPS and Ec-LPS expressed higher HNP 1-3 mRNA than neutrophils from healthy subjects. LL-37 mRNA expression was higher in neutrophils from patients stimulated with Aa-LPS. Neutrophils from periodontitis patients produced significantly higher LL-37 protein levels than neutrophils from healthy subjects when stimulated with Pg-LPS and Ec-LPS, but no difference was observed in HNP 1-3 production. Neutrophils from periodontitis patients cultured or not with Pg-LPS and Ec-LPS produced significantly lower NO levels than neutrophils from healthy subjects. The significant differences in the production of LL-37 and NO between neutrophils from healthy and periodontitis subjects indicate that production of these molecules might influence individual susceptibility to important periodontal pathogens.     

一氧化氮对成纤维细胞内游离Ca2+浓度的影响

目的: 研究一氧化氮(NO)对成纤维细胞内游离Ca²⁺浓度的影响。方法: 体外培养人胚肺成纤维细胞(HLF), 给予NO前体-L-精氨酸(L-Arg)及一氧化氮合酶(NOS)抑制剂-硝基-L-精氨酸(L-NNA), 采用比色法测定细胞培养液NO水平, 采用Fura-2/AM荧光法测定细胞内游离Ca²⁺浓度, 观察NO对成纤维细胞内游离Ca²⁺浓度的影响。结果: 随着细胞培养液NO水平逐渐升高, 成纤维细胞内游离Ca²⁺浓度逐渐升高[实验组NO水平、Ca²⁺ 浓度比正常对照组NO水平、Ca²⁺浓度分别为(3.82±0.53) mol/L比(2.62±0.55) mol/L和(894.48±93.01) nmol/L比(824.56±33.22) nmol/L, P<0.05]; 但进一步升高NO水平, Ca²⁺浓度却逐渐降低[实验组NO水平、Ca²⁺浓度比正常对照组NO水平、Ca²⁺浓度分别为(5.82±0.45) mol/L比(2.62±0.55) mol/L和(162.11±68.50) nmol/L比(824.56±33.22) nmol/L, P<0.01]。结论: NO对成纤维细胞内游离Ca²⁺浓度具有双向调节作用。即低水平NO升高细胞内游离Ca²⁺浓度, 高水平NO降低细胞内游离Ca²⁺浓度。     

叶酸对去卵巢大鼠抗氧化酶、一氧化氮合酶和一氧化氮的影响

 目的: 观察叶酸对去卵巢大鼠抗氧化酶、一氧化氮合酶和一氧化氮的影响。方法: 40只3月龄健康雌性SD大鼠,随机分成5组:假手术组、去卵巢组、二乙基己烯雌酚(0.03 mg·kg^-1·d^-1)组、低剂量(5 mg·kg^-1·d^-1)叶酸组和高剂量(20 mg·kg^-1·d^-1)叶酸组。各组大鼠于术后1周开始灌胃给药,假手术组和去卵巢组给予蒸馏水,10周后,取L₅椎体和右股骨行骨密度(BMD)检测;测定血浆和骨匀浆总抗氧化能力(TAC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、一氧化氮合酶(NOS)和一氧化氮(NO)水平。结果: 与假手术组比较,去卵巢组大鼠L₅椎体和股骨BMD显著降低(P < 0.01),血浆GSH-Px、NO和骨匀浆TAC、GSH-Px、NOS及NO水平明显降低(P < 0.01),MDA浓度升高显著(P < 0.01);与去卵巢组大鼠比较,高剂量叶酸组大鼠L₅椎体和股骨BMD增加(P < 0.01),骨匀浆TAC、GSH-Px、NOS和NO水平升高(P < 0.01),MDA浓度降低(P < 0.01),血浆GSH-Px和NO水平升高。结论: 去卵巢大鼠体内抗氧化酶、NOS和NO水平降低,氧化应激参与了去卵巢大鼠骨质疏松的发生;高剂量叶酸能提升去卵巢大鼠腰椎和股骨BMD,提高其体内抗氧化酶、NOS和NO水平,改善氧化应激,这可能是高剂量叶酸防治去卵巢大鼠骨质疏松的机制之一。     

The expression and activity of renal nitric oxide synthase and circulating nitric oxide in polycystic kidney disease rats

Nitric oxide (NO) influences tubular fluid and electrolyte transport, and hence possibly also fluid accumulation in renal cysts. The expression and activity of intrarenal constitutive NO synthase (cNOS) [neuronal NOS, nNOS and endothelial NOS, eNOS] and inducible NOS (iNOS) and plasma nitrite/nitrate (PNOx) concentration were assessed in homozygous Han:SPRD polycystic kidney disease (PKD) rats (cy/cy), heterozygous Han:SPRD PKD rats (cy/+), homozygous normal Han:SPRD littermates (+/+) and Sprague Dawley rats (sd). The results showed: 1) nNOS expression was decreased in proximal tubules and thick ascending limbs of the loop of Henle in cy/cy and cy/+ rats compared to +/+ and sd rats (p<0.05). nNOS was weakly expressed in the epithelium of small cysts and unexpressed in epithelium of large cysts. 2) iNOS expression was increased in proximal tubular epithelial cells in cy/+ rats compared to +/+ rats and sd rats (p<0.01). iNOS expression in cyst epithelium was decreased in cy/+ rats (p<0.05) and absent in cy/cy rats. 3) eNOS expression was similar in the endothelium of intrarenal arteries in all groups. 4) The activity of renal cNOS was decreased in cy/cy and cy/+ rats; the activity of iNOS was decreased only in cy/cy rats, with no significant difference among the other three groups. 5) PNOx concentration was higher in cy/cy rats than in the other three groups, and correlated positively with plasma creatinine and urea. In conclusion, NOS expression and activity decreased as cysts developed, suggesting that NO downregulation is involved in the pathogenesis of PKD.     

Effect of focal cerebral ischemia on nitric oxide synthase expression in rats

Time- and cell-type-dependent immunohistochemical activity of nitric oxide synthase (NOS) was investigated in rat cerebral cortex following focal ischemia and the local concentration of nitric oxide (NO) was measured. NO concentration increased 2 min after the ischemia. Brain NOS-immunoreactive neurons increased in number 5 min after the ischemia. Endothelial cell NOS immunoreactivity was first detected in vascular endothelial cells and astrocytes 5 min after the ischemia, and it increased again during 60 min to 4 days after the ischemia in reactive astrocytes. Inducible NOS immunoreactivity was detected in astrocytes, vascular endothelium, and microglia/macrophages at the periphery of the ischemic core during 2–4 days after the ischemia.This study was presented at the 28th Annual Meeting of the Clinical Electron Microscopy Society of Japan, Osaka, October 17–19, 1996.     

一氧化氮/诱导型一氧化氮合酶在动脉粥样硬化过程中的作用

 目的：探讨一氧化氮（NO）/诱导型一氧化氮合酶（iNOS）在动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）过程中的动态变化,分析其对动脉粥样硬化形成过程的影响。方法：将60只SD大鼠随机分成2组：对照组及AS组,每组30只。AS组采用维生素D3腹腔注射联合高脂饲料饲养的方法构建动脉粥样硬化模型。用相关生化方法检测血清各项生化指标：总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖和钙离子,比色法检测血清NO浓度,并对主动脉行HE染色,免疫组化技术检测iNOS蛋白表达,将所得数据进行统计分析,用简单线性相关分析NO与钙离子及动脉粥样硬化指数的相关性。结果：90 d后成功构建了主动脉中膜钙化型动脉粥样硬化模型。血清NO浓度在动脉粥样硬化过程中逐步下降,各组间差异均有统计学意义（均P<0.05）。动脉粥样硬化过程中动脉粥样硬化指数与钙离子呈正相关,与NO呈负相关。在90 d的AS组粥样斑块区免疫组化技术检测到iNOS蛋白表达。结论:在动脉粥样硬化形成过程中,主动脉粥样斑块区iNOS蛋白高表达,但血清NO浓度逐渐降低,NO抗动脉粥样硬化作用减弱。     

脑挫伤后一氧化氮合酶阳性细胞及一氧化氮含量的变化

目的　探讨脑挫伤后一氧化氮合酶 (NOS)阳性细胞和一氧化氮 (NO)的变化和意义。方法　采用自由落体法致Wistar大鼠顶叶皮质挫裂伤动物模型。伤后 2 4h、72h和 7d取脑 ,制作冰冻切片 ,采用NADPH组织化学染色 ,显示脑挫伤区NOS阳性细胞。用硝酸还原酶法测定血液和脑组织中NO含量。结果　脑挫伤后 72h ,NOS阳性细胞数密度 (Nv)和面密度(Sv)明显增高 (P <0 0 5 ) ,而且 7d时仍无明显下降。血液和脑中NO含量也增高 ,并与NOS细胞呈平行关系。结论　脑挫伤后不同时间NOS细胞数目和NO含量有明显改变 ,提示NOS和NO参与了脑挫伤的病理过程