卷柏属药用植物提取物体外抗柯萨奇病毒作用研究

目的:比较研究卷柏属7种药用植物的13种提取物在体外抗柯萨奇病毒CVB3的作用。方法:采用13种提取物培养CVB3感染的Hep-2细胞,观察比较细胞病变效应(CPE),72h后MTT法测定细胞活性。结果:在Hep-2细胞体系中,卷柏属7种药用植物的乙酸乙酯和95%乙醇提取物部位具有一定的抑制CVB3对细胞的致病变作用,使细胞存活率提高。结论:卷柏属药用植物可以作为新的抗CVB3的资源植物。     

柑橘属药材乙酸乙酯提取物抑制黄嘌呤氧化酶作用的谱效关系研究

目的 阐明不同柑橘属药材乙酸乙酯提取物指纹图谱特征峰对黄嘌呤氧化酶抑制作用的贡献程度.方法 建立枳实、青皮、陈皮、橘红和香橼乙酸乙酯提取物指纹图谱,HPLC法测定黄嘌呤氧化酶-黄嘌呤反应体系尿酸生成量,评价各提取物对黄嘌呤氧化酶活性的影响,采用灰关联度分析法研究谱效关系,对照品比对法鉴定主要色谱峰.结果 谱效关系分析表明,各药材提取物的黄嘌呤氧化酶抑制活性是多成分共同作用的结果,各色谱峰所代表的化学成分对抑制黄嘌呤氧化酶活性的贡献大小顺序为圣草次苷＞柚皮苷＞柚皮素＞橙皮苷＞桔皮素＞川陈皮素＞新橙皮苷＞橙皮素.结论 不同柑橘属药材乙酸乙酯提取物指纹图谱特征峰与黄嘌呤氧化酶抑制作用有一定的对应关系.     

木藤蓼不同提取部位抑制黄嘌呤氧化酶活性研究

目的:建立体外抗痛风药物筛选模型,对木藤蓼不同部位提取物进行抗痛风体外活性筛选研究。方法:利用黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶筛选模型,用木藤蓼不同部位的提取物进行抗痛风活性筛选,并测定IC50值。结果:木藤蓼不同部位提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制率大小顺序为:95%乙醇正丁醇乙酸乙酯水石油醚。结论:为进一步合理开发和利用木藤蓼资源提供了数据支撑。     

垫状卷柏中双黄酮抑制黄嘌呤氧化酶的活性研究

目的:探寻垫状卷柏中抑制黄嘌呤氧化酶的活性部位。方法:采用黄嘌呤氧化酶体外抑制实验测定各组分的半数抑制浓度IC50。结果:三个双黄酮成分的混合物Fr5对黄嘌呤氧化酶有强抑制作用(IC50=1.1μg/ml),Fr5继续分离得到的两个组分Fr5-1(IC50=2.9μg/mL)和Fr5-2(IC50=24.0μg/mL),其纯度增高但活性不及Fr5,当重新组合这两个组分时,活性仍然不能恢复或增强。结论:垫状卷柏中对黄嘌呤氧化酶抑制作用最强的部分是三个双黄酮类成分的混合物,继续分离活性减弱。     

药用植物内生真菌的分离及其次生代谢产物的生物活性研究

目的：从4种植物的内生真菌中筛选对单胺氧化酶及乙酰胆碱酯酶具有抑制活性的提取物。方法：用组织块法分离4种植物中的内生真茵;对分离出的纯内生真菌用液体培养基发酵培养,用等体积乙酸乙酯萃取发酵液并用乙醇对茵丝体进行回流提取,得到各组分提取物;用酶标法测定提取物的单胺氧化酶及乙酰胆碱酯酶抑制活性。结果：共分离出36株内生真菌,其中有16种内生真菌提取物有不同程度的抑制单胺氧化酶活性,其中GT-7茵液萃取物抑酶活性最强。2种内生真菌提取物有乙酰胆碱酯酶抑制活性。结论：药用植物中存在丰富的内生真菌,其代谢产物具有一定的单胺氧化酶及乙酰胆碱酯酶抑制活性,可作为筛选单胺氧化酶及乙酰胆碱酯酶抑制剂的新资源。     

14种不同中药材提取物抗痛风体外活性研究

目的:建立体外抗痛风药物筛选模型,并从14种常用中药提取物中筛选抗痛风活性药物。方法:运用黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶筛选模型,对常用的14种中药提取物进行抗痛风活性筛选,并测定活性提取物的IC_(50)值。结果:14种中药提取物显示出不同的黄嘌呤氧化酶抑制活性,其中虎杖、牡丹皮、荷叶、艾叶、葛根、何首乌、大黄的70%乙醇提取物和虎杖、牡丹皮、何首乌、大黄、蒲公英、枇杷叶的水提物显示出较强活性,其IC_(50)均小于5mg/mL。结论:该实验结果为阐述中药抗痛风的作用机制提供了数据支持,同时也为来源于天然药物的新药开发提供了参考依据。     

两种卷柏属植物对人单核细胞白血病U937细胞的增殖和凋亡影响

目的:研究垫状卷柏、翠云草两种卷柏属植物对体外培养的人单核细胞白血病细胞U937细胞的增殖和凋亡的影响。方法:分别采用95%乙醇对两种植物采用冷浸和热提取两种提取方法,回收溶剂后萃取得乙酸乙酯和石油醚萃取物。采用噻唑兰比色法(MTT)检测不同浓度样品作用于U937细胞24h后的细胞增殖情况,Hoechst33342染色分析细胞形态学变化,Western Bolt检测凋亡蛋白表达情况。结果:MTT法分析表明垫状卷柏、翠云草提取物均对U937细胞的增殖抑制成剂量依赖性关系。其中垫状卷柏热提物效果最佳,其乙酸乙酯和石油醚萃取物均有良好抑制效果,乙酸乙酯萃取部位抑制作用更强; Hoechst33342染色发现随着提取物浓度升高,凋亡细胞增多; Western印记分析凋亡相关蛋白,其中Bax蛋白表达量增加,Bcl-2蛋白表达量减少,Caspase-3和Caspase-8蛋白表达量减少。结论:两种卷柏均能有效抑制U937细胞增殖,并且热提总提物抑制效果优于冷浸总提物,其中垫状卷柏热提总提物的乙酸乙酯萃取层初步认为可能是垫状卷柏抗肿瘤的有效部位,其诱导U937细胞凋亡与Caspase依赖性线粒体途径相关。     

紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制作用

目的考察紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制作用。方法紫外分光光度法检测单位时间内酶促反应体系中尿酸含量的变化,计算紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制率。双倒数作图法确定紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制类型,Dixon作图法计算紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制动力学常数Ki。结果紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制作用随着提取物质量浓度增大而增强,5 mg/mL时抑制率达到43.93%,IC50为5.80 mg/mL。动力学分析表明,紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制属于竞争性可逆抑制,抑制动力学常数Ki为2.19 mg/mL。结论紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶有显著抑制作用,可为相关抑制剂治疗高尿酸血症提供一定的理论和技术支撑。     

民族药用植物鬼吹箫地上部分化学成分及其镇痛活性研究

目的:对民族药用植物鬼吹箫地上部分的化学成分及其镇痛活性进行研究。方法:鬼吹箫地上部分以95%的乙醇回流提取,提取物以正反相硅胶和凝胶柱层析等方法分离化学成分,分离得到的化合物通过NMR等波谱学方法进行结构鉴定;采用小鼠醋酸扭体法进行镇痛活性研究。结果:从鬼吹箫地上部分95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位中分离得到7个单体化合物,分别鉴定为木犀草素(1)、木犀草素-5-O-β-D-葡萄糖苷(2)、松柏醛(3)、乌索酸(4)、乙酰熊果酸(5)、β-谷甾醇(6)、胡萝卜苷(7)。化合物1、4、6可明显抑制醋酸诱发的小鼠扭体次数。结论:化合物2、3、5均为首次从该属植物中分离得到;化合物1、4、6具有一定的镇痛活性。     

泽泻乙醇提取物对氧嗪酸钾盐致大鼠高尿酸血症模型的影响

目的探讨泽泻乙醇提取物对氧嗪酸钾盐致大鼠高尿酸血症的作用。方法取SD大鼠40只,随机分成4组,每组10只,采用氧嗪酸钾造模,分别为空白组、模型组、别嘌醇组(30 mg/kg)、泽泻乙醇提取物组(5 g/kg),共给药30 d,分别于给药第0、15、30天取血,测定血清尿酸、血清肌酐、血清尿素氮。给药第30天,取肝组织匀浆后测定肝脏黄嘌呤氧化酶活性,取右肾进行病理切片。结果与模型组比较,泽泻乙醇提取物能够降低血尿酸与血清肌酐的水平,同时抑制黄嘌呤氧化酶的活性。病理切片结果显示,泽泻乙醇提取物无明显肾脏毒性,并且肾小管病变程度较模型组轻。结论泽泻乙醇提取物对氧嗪酸钾致大鼠高尿酸血症具有明显的改善作用,其作用机制可能是通过抑制黄嘌呤氧化酶活性。     

了哥王抗肿瘤活性部位筛选

目的:研究了哥王95%、75%、50%乙醇提取物、水提物及95%乙醇提取物的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取部位对肿瘤细胞的增殖抑制作用,确定了哥王抗肿瘤活性部位。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法考察了哥王不同提取物及95%乙醇提取物的不同溶剂萃取部位对Hela、SGC-7901、Bel-7402细胞的抗肿瘤活性。结果:了哥王95%乙醇提物对Hela、SGC-7901细胞有良好的抗肿瘤活性,其石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取部位对Hela、SGC-7901细胞均有不同程度的抗肿瘤活性。结论:石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取部位有较强的抗肿瘤活性,初步确定为了哥王抗肿瘤活性部位。     

异叶蛇葡萄和蛇葡萄提取物抑制黄嘌呤氧化酶和脂质氧化酶的活性研究

蛇葡萄和异叶葡萄是湖北地区应用的具有抗病毒作用的药用植物,它们的抗氧化活性用酶的和非酶的体外抗氧化测定方法进行研究.实验结果显示,两种植物的提取物具有抑制黄嘌呤氧化酶和脂质氧化酶的活性;用Trolox等价抗氧化能力(TEAC)方法测定,显示两种提取物是ABTS· 自由基离子的清除剂,与葡萄种子提取物相比较,显示具有较强的抗氧化能力.     

栀子降尿酸有效部位研究

目的:确定栀子降尿酸作用有效部位.方法:用系统溶剂法提取分离得到4个部位,分别为石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水液部位,采用氧嗪酸钾盐诱导的小鼠急性高尿酸血症模型,研究栀子总提物和4个部位对高尿酸血症小鼠血清尿酸水平和肝脏黄嘌呤氧化酶的影响.结果:栀子总提物组、乙酸乙酯组和水组具有较好的降尿酸作用,栀子总提物组、石油醚组和水组能够较好的抑制黄嘌呤氧化酶的活性.栀子总提取物和各部位提取物对正常小鼠血清尿酸水平没有显著影响.结论:栀子乙酸乙酯提取部位和水液部位为降尿酸活性部位,其降尿酸作用部分机制是通过抑制黄嘌呤氧化酶的活性.     

卷柏中雌激素类成分的提取

目的:对不同提取方法所得的卷柏提取物进行雌激素活性筛选,探索卷柏发挥雌激素作用的活性部位。方法:采用小鼠子宫增重试验,将卷柏分别以70%乙醇回流所得总部位经聚酰胺柱分离;95%乙醇回流药渣经水提取;药渣水提物去除多糖等所得的卷柏各组分进行雌激素活性筛选。运用HPLC指纹图谱技术对卷柏95%醇提物、药渣水提物进行分析。结果:70%乙醇回流所得的卷柏总部位、药渣水提物高剂量、药渣水提物去多糖组与空白组比较,均能显著性增加小鼠子宫系数(P<0.01),卷柏其余各组与空白组相比无明显作用;HPLC指纹图谱显示卷柏95%醇提物中穗花杉双黄酮为其主要成分,而药渣水提物中基本不含穗花杉双黄酮。结论:95%乙醇回流药渣水提法与聚酰胺柱分离法相比,前者更适合于卷柏雌激素活性物质的提取分离;水溶性除多糖物质为卷柏中发挥雌激素样作用的有效部位;HPLC指纹图谱结果提示,穗花杉双黄酮不是卷柏发挥雌激素作用的成分。     

鹿茸玛咖配伍抑制单胺氧化酶活性部位筛选研究

目的从鹿茸玛咖配伍提取物中筛选抑制单胺氧化酶的活性部位。方法采用不同极性溶剂对鹿茸玛咖配伍提取物进行萃取得到各极性部位,应用酶标法测定鹿茸玛咖配伍提取物和各极性部位单胺氧化酶的抑制活性。结果鹿茸玛咖配伍提取物和各极性部位均具有单胺氧化酶抑制活性,在1.0 mg/m L浓度下各自的单胺氧化酶抑制率分别为氯仿萃取层(28.4%)、乙酸乙酯萃取层(46.2%)、正丁醇萃取层(40.6%)、鹿茸玛咖配伍提取物(34.0%)。结论鹿茸玛咖配伍提取物含有单胺氧化酶抑制剂,其中乙酸乙酯层抑制活性最强,为鹿茸玛咖配伍提取物的抑制单胺氧化酶活性部位,为鹿茸玛咖配伍提取物的深入开发提供科学依据。     

痛风宁提取物抑制黄嘌呤氧化酶的研究

目的:观察痛风宁组方提取物对黄嘌呤氧化酶(XOD)的影响.方法:采用XOD催化黄嘌呤产生尿酸的方法,分别测定各提取物对反应体系吸光度的影响.结果:土茯苓水提物和乙醇提取物抑制作用最强,车前子提取物次之,(稀)签草提取物最弱.车前子水提物对XOD以竞争性抑制作用为主,车前子醇提物的抑制作用为混合型.结论:痛风宁提取物具有较强的抑制XOD活性的作用.     

萹蓄草提取物的抗氧化和抑菌活性研究

目的:研究萹蓄草95%乙醇提取物、石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物以及正丁醇萃取物的体外抗氧化和抑菌活性。方法:通过测定清除DPPH自由基、清除羟基自由基以及总还原力试验评价了萹蓄草提取物的抗氧化活性;采用牛津杯法测定了萹蓄草提取物的抑菌活性。结果:乙酸乙酯萃取物具有较好的抗氧化活性及抑菌活性;乙酸乙酯萃取物对DPPH自由基的EC_(50)为5.932 mg/mL,对羟基自由基的EC_(50)为4.831 mg/mL。乙酸乙酯萃取物对五种受试菌的MIC为1 mg/mL。结论:萹蓄草提取物具有较好的抗氧化及抑菌活性。     

土茯苓抑制黄嘌呤氧化酶活性的物质基础研究

目的:研究土茯苓抑制黄嘌呤氧化酶活性的物质基础。方法:系统分离土茯苓氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水层4个溶剂萃取部位,分光光度法测定土茯苓及4个溶剂萃取部位对黄嘌呤氧化酶活性的影响,建立亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定土茯苓及各溶剂部位黄酮含量,超高效液相-质谱仪联用技术(UPLC-MS)分析有效部位色谱峰成分,高效液相色谱法(HPLC)比对有效部位色谱峰与对照品,分光光度法测定有效部位中成分对黄嘌呤氧化酶活性的影响。结果:土茯苓中乙酸乙酯部位为抑制黄嘌呤氧化酶活性的有效部位,主要为黄酮类成分,质量分数为92.13%,鉴定出的成分有表儿茶素、落新妇苷、新落新妇苷、异落新妇苷、新异落新妇苷、槲皮素、柚皮素,其中表儿茶素、落新妇苷、槲皮苷、柚皮素均具有较强的抑制黄嘌呤氧化酶活性作用。结论:土茯苓黄酮类成分是抑制黄嘌呤氧化酶活性的物质基础。     

22种藏药材抗氧化活性研究

目的:考察22种藏药材乙醇提取物抗氧化活性,对具有显著活性的药材进一步筛选其抗氧化活性部位。方法:取22种藏药材95%乙醇提取物,通过总抗氧化能力、抑制脂质氧化能力、清除羟基自由基能力、清除DPPH.能力四个体系筛选其抗氧化活性。对筛选到具有显著抗氧化活性的藏药材分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取得到不同极性部位后,通过上述四个体系考察其抗氧化活性部位。结果:筛选到金缕梅、美丽棱子芹、岩白菜、塔黄、刚毛杜鹃、柳兰、蕨麻、普通鹿蹄草8种藏药材乙醇提取物具有显著抗氧化活性;对这8种药材的极性部位进行抗氧化活性筛选,其中尤以岩白菜的乙酸乙酯萃取物和柳兰的正丁醇萃取物活性最强。     

土茯苓中抑制黄嘌呤氧化酶活性成分提取工艺优化及其酶动力学研究

目的 优化土茯苓中抑制黄嘌呤氧化酶活性成分提取工艺，并考察其酶动力学。方法 在单因素试验基础上，以乙醇体积分数、提取时间、提取温度为影响因素，黄嘌呤氧化酶活性抑制率为评价指标，响应面法优化提取工艺。分别通过Lineweaver-Burk图、Dixon图确定其抑制类型、抑制动力学常数K_i。结果 最佳条件为乙醇体积分数69%,提取时间89 min,提取温度82℃,黄嘌呤氧化酶活性抑制率为62.25%。抑制类型为竞争性可逆抑制，K_i为1.92 mg/mL。结论 该方法稳定可靠，可用于提取土茯苓中抑制黄嘌呤氧化酶活性成分。