分泌抗MCG单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

分泌抗ＭＣＧ单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立周昌奎蓝兰张云峰＊＊（福建省计划生育科学技术研究所，福州３５００１１＊福建省立医院生物治疗中心＊＊福建省福港生物工程研究中心）谢弘王放（中国科学院上海细胞生物学研究所，上海２０００３１）以苯甲酸－丙酮一步法，从...     

分泌抗加压素单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

加压素(VP)是由下丘脑视上核和室旁核神经元合成,经下丘脑-垂体束转运至垂体后 叶分泌的九肽激素,除具有抗利尿和升压作用外,在中枢神经系统内亦有广泛的分布和具有重要的生理功能。Hou-Yu等(1982)最早将单克隆抗体(McAb)技术应用于VP的免疫细胞化学研究。基于深入研究VP在体内的作用的需要,本文初步报导作者在建立分泌抗VpMcAb杂交瘤细胞株方面的工作。     

分泌抗沙眼衣原体单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

沙眼衣原体除引起沙眼外,近年来认识到它还是性传染的泌尿生殖道感染的重要病原之一。为利用单克隆抗体技术作沙眼衣原体的快速诊断,我们制备并获得了一株分泌抗沙眼衣原体的杂交瘤细胞株。我国分离的沙眼衣原体TE_(55)株,在55     

分泌抗精氨酸加压素单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

本文报道利用杂交瘤技术制备了抗精氨酸加压素单克隆抗体,通过鉴定,证明所得抗体稳定性好,对精氨酸加压素有较强的特异性结合,对赖氨酸加压素和催产素基本无反应。用免疫双扩散技术还证明所得抗体属小鼠IgM类。     

分泌抗蛇毒磷酸二酯酶单克隆抗体的杂交瘤细胞株的建立

<正> 从本校蛇园饲养的浙江产蝮蛇中挤压毒腺采毒,经冰冻真空干燥,然后经离子交换,凝胶过滤收集磷酸二酯酶活性峰的中央部份,经浓缩,冰冻干燥成纯化的蝮蛇毒磷酸二酯酶,再经盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳检查抗原的纯度,结果表现出一条十分明显的蛋白区带,而未经提纯的抗原有11条区带,用     

分泌抗脲酶单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步应用

脲酶是一种植物蛋白酶,可催化其底物中的脲素分解产氨,使底物溶液的pH值升高,溶液中的溴甲酚紫指示剂由黄色转变为紫色。脲酶的另一特点是活性不受叠氮钠抑制,由于人和动物的组织细胞无内源性脲酶存在,在检测细胞表面抗原时,不存在类似内源性过氧化物酶形成的非特异性染色。但脲酶标记抗体的过程繁杂,对酶的活性有影响,我们应用淋巴细胞杂交瘤技术,获得6株分泌抗脲酶单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞,将抗脲酶McAb应用于非标记脲酶酶免疫实验中,获得了满意结果。现将实验程序及结果报告如下。     

分泌抗人C反应蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

<正> C反应蛋白(CRP)在正常人血清中含量甚微(1～3μg),而在许多感染性疾病、风湿热、风湿性关节炎、急性心肌梗塞、恶性肿瘤及严重外伤患者的血清中可升高数百、甚至上千倍。为了检测CRP阳性血清及对CRP进行多方面研究,我们建立了分泌抗CRP单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株。     

分泌抗-LSP单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立(摘要)

应用成人肝提取的肝脏特异性膜脂蛋白(LSP)免疫BALB/c小鼠,小鼠免疫脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞在PEG1000介导下融合,采用ABC-ELISA筛选抗-LSP阳性孔,细胞融合率为305/384(79.2％),抗体阳性孔数为8/305(2.62％),经过三次克隆化后筛选出5株杂交瘤细胞系(1A3、2E5、2D7、3G8、4F1).培养上清抗体效价在1∶100～1∶     

分泌抗脲酶单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立和初步应用

用脲酶(Urease)免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞用PEG融合。ELISA法筛选分泌抗脲酶单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞,建立起6株杂交瘤细胞。细胞分泌抗体滴度高、亲和力强、特异性好,长期传代稳定。     

分泌抗HBeAg单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立和初步应用

应用血清纯化的HBeAg免疫BALB/c小鼠,其脾细胞与Sp 2/0骨髓瘤细胞融合,获得两株分泌抗HBe的杂交瘤细胞株(HE_(20)IB_8、HE_(21)IIG_(11))。接种同系小鼠腹腔诱生的腹水中用ELISA测定抗HBe效价达3.2～6.4×10~6。因相捕捉HBeAg、HBsAg和HBcAg特异性试验以及中和试验证明是针对HBeAg的特异性抗体。临床应用作为ELISA检测HBeAg和抗HBe试剂中的包被抗体配合人抗HBe-HRP与Abbott试剂结果非常一致。     

分泌抗人B型红细胞单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

我们用正常人B型红细胞为抗原,免疫BALB/c,取其脾脏与小鼠骨髓瘤Sp2/0进行杂交,建立了抗人B型红细胞单克隆抗体85/1-15细胞株,此株经3次克隆化培养和体外103d的传代培养和反复冻存复苏,至今数年,生长良好,继续分泌抗B型红细胞单克隆抗体。此株经特异性测定,只与人B型红细胞抗原反应,而与A至O型红细胞     

分泌抗人角蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定

角蛋白（keratin）作为一组相对分子质量（M）为40000－70000不溶于水的细胞结构蛋白，在上皮细胞的发生、分化成熟过程中逐渐形成，是所有哺乳动物细胞骨架的中间丝之一，其组成因不同上皮而异。近年来，随着分子生物学技术的推广和应用，角蛋白的基础研究得到了不断深化；同时采用多种特异性抗角蛋白的mAb进行皮肤病的临床研究，也取得很大的进展。本实验选用从剥脱性皮炎型药疹患者皮屑中提取的角蛋白免疫动物，制备出3株抗人角蛋白的mAb，并对其进行了鉴定。l材料和方法1．l角蛋自的提取取剥脱性皮炎型药疹患者的皮屑，按常规方法提取…     

抗AKP单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

本文采用SP2/0骨髓瘤细胞与碱性磷酸酶(AKP)(美国Sigma公司,批号21F—0270)免疫的小鼠的脾细胞进行细胞融合,建立了分泌抗AKP的单克隆细胞系。 一、小鼠免疫:AKP0.1mg加福氏佐刺0.1ml,腹腔注射0.2ml/只;四周后同剂量腹腔追加一次;再过2周后单纯抗原0.1mg,0.1ml/只,尾静脉注射,三天后取脾细胞融合。     

分泌高效价抗催产素单抗杂交瘤细胞系的建立

为进一步研究催产素分子的生理功能及空间结构 ,制备识别其特有表位的单抗。用改良的碳二亚胺二步法交联催产素和牛甲状腺球蛋白 ,用常规方法制备针对催产素分子的单抗 ,测定了抗体的亚类、亚型和相对亲和力 ,并采用竞争ELISA法 ,检测各株细胞分泌的单抗和几种催产素的拟似物的交叉反应程度。结果制备出了 3株分泌高效价抗体的杂交瘤细胞 4G11、 2B11和 3F1,其亚类均为IgG1,亚型均为κ型 ,相对亲和力均较高。 3株中 4G11和 2B11可以特异性地和催产素反应 ,而 3F1与AVP、VAS及ASU有较强的交叉反应。催产素单抗可用于阻断催产素的生物学功能等研究     

分泌抗斯氏肺吸虫代谢抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

<正> 本文用斯氏肺吸虫代谢抗原免疫的BALB/c小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,首次成功地获得了2株分泌抗斯氏肺吸虫代谢抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞B_1-3B_4和C_2-3C。 在培养皿中收集斯氏肺吸虫代谢产物,经透析、     

分泌抗hCG全分子单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立和应用

本文报道应用杂交瘤技术,获得5株能持续分泌抗hCG单克隆抗体(MAb)的细胞株。这5株细胞经4～5次克隆化后,分别接种于BALB/c鼠腹腔。腹水MAb效价有的高达4×10~5,培养上清液MAb效价高达4×10~2,抗体能特异地被hCG中和吸收。我们发现每株细胞所分泌抗体的能力,性质及效价是有较大差异的。5株杂交瘤细胞中只有HB_9、HD_(12)株分泌的MAb能单一地与胶乳滴配作为妊娠诊断试剂。 用此MAb作胶乳凝集抑制试验,检测了262例疑为早孕尿液标本和173例临床尿液标本,并与市售“妊娠试剂”对照,结果优于对照试剂。特别是我们用杂交瘤细胞培养上清液即可直接用作妊娠诊断试剂,且敏感性和特异性均很好,这在国内尚未见报道。     

分泌抗斯氏肺吸虫代谢抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

<正> 本文用斯氏肺吸虫代谢抗原免疫的BALB/c小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,首次成功地获得了2株分泌抗斯氏肺吸虫代谢抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞D_1—3B_4和G_2—3C_4。 在培养皿中收集斯氏肺吸虫代谢产物,经透析、浓缩,测蛋白含量为2.4mg/ml。用此抗原(0.1ml)与等量福氏完全佐剂经腹腔及皮下免疫BALB/c小鼠,每隔3周一次,共三次。末次免疫后10天用单纯代谢抗原0.1ml注入尾静脉一次,融合前3天再从尾静脉加强免疫一次。取对数生长期的SP2/0小鼠骨髓瘤细胞和免疫小鼠脾细胞以1:5比例混合,用     

持久稳定分泌抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株的建立

杂交瘤技术创立以来,在生物、医学各领域已广泛应用,各地陆续报导建立了分泌抗白细胞抗原、肿瘤抗原和微生物抗原的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株。但在内分泌免疫病方面,有关报导还不多。内分泌免疫病是免疫介导性疾病中尤为复杂的一组疾病,单克隆抗体技术为诊断和深入细致研究其发病机制提供了有力工具。我们选择了     

分泌抗超氧化物歧化酶单克隆抗体细胞株的建立

本文报告了人红细胞内超氧化物歧化酶的提取及纯化。按常规免疫BALB/c小鼠与Sp 2/0细胞融合,经四次克隆和筛选稳定一株,分泌抗人铜、锌超氧化物歧化酶抗体,其腹水纯化后制备。 分别制备了R-PnA及EIA试剂盒应用于临床检测血清内SOD含量。     

两种分泌抗PrP单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其初步鉴定

目的 制备具有广谱种属反应性的PrP单克隆抗体(McAb)，用于可传播性海绵样脑病(TSE)的诊断及致病机制研究。方法 分别将对应于牛PrP29-48(BoP1)、PrP89-108(BoP2)的两种多肽与匙孔碱血蓝蛋白(KLH)偶联，免疫BALB／c小鼠，经细胞融合后获得分泌针对上述两种多肽的杂交瘤细胞株，用Western-blot方法检测这些细胞株分泌的McAb与牛(Bo)、人(Hu)和仓鼠(Ha)PrP蛋白的反应性。结果 通过细胞融合和2-3轮克隆化，用ELISA筛选出分泌抗BoPl和BoP2抗体的杂交瘤细胞株D11和D8。Western blot显示，获得的McAb均能分别与重组BoPrP(25-242)、重组HuPrP(23-231)和HaPrP(23-231)反应。结论 获得了可与牛、人和仓鼠PrP反应的两种McAb，可用于哺乳类PrP检测及TSE致病机制研究。