慢性牙周炎患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞表达

目的探讨外周血单个核细胞CD4~+CD25~+调节性T细胞(Tregulatory, Treg)在慢性牙周炎患者中的表达。方法慢性牙周炎患者40例,其中轻中度组22例和重度组18例;同期31例牙周健康者为对照组。采用流式细胞术检测3组CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg、CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg表达;采用ELISA法测定3组血浆转化生长因子-β(transforming grow factor-β, TGF-β)水平;Pearson法分析CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg与CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg,CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg、CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg与牙周袋探诊深度的相关性。结果轻中度组、重度组CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg[(2.88±1.50)%、(2.52±1.03)%]、CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg表达[(4.42±1.49)%、(3.85±1.02)%]、血浆TGF-β水平[(1 054.18±370.35)、(1 003.78±398.76)ng/L]低于对照组[(3.57±1.11)%、(6.27±1.67)%、(1 296.60±303.17)ng/L](P0.05),轻中度组与重度组比较差异无统计学意义(P0.05);Pearson线性相关分析结果显示,CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg与CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg表达呈正相关(r=0.776,P0.001),CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg、CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg均与牙周袋探诊深度呈负相关(r=-0.333,P=0.005;r=-0.551,P0.001)。结论慢性牙周炎CD4~+CD25~+Treg介导的免疫应答减弱,可能促进疾病的发生、发展。     

调节性T细胞的新标记CD4~+CD25~+CD127~(low/-)在类风湿性关节炎中的应用

目的选择用膜表面标志CD4+CD25+CD127low/-作为检测调节性T(Treg)细胞的指标,探讨其在类风湿性关节炎(RA)中的可能临床应用价值。方法用流式细胞术检测正常人及RA患者外周血CD4+CD25high、CD4+CD25+FoxP3+和CD4+CD25+CD127low/-T细胞占CD4+T细胞的比例,分析CD4+CD25+CD127low/-与CD4+CD25+FoxP3+2群细胞比例之间的相关性。结果正常人及RA患者外周血CD4+CD25+CD127low/-T细胞比例与CD4+CD25+FoxP3+T细胞比例之间呈显著正相关(r=0.694、0.768,P均<0.01)。RA患者外周血CD4+CD25high、CD4+CD25+FoxP3+及CD4+CD25+CD127low/-T细胞比例均显著低于正常人(P均<0.01)。结论膜表面标志CD4+CD25+CD127low/-可以用来鉴定Treg细胞,RA患者外周血CD4+CD25+CD127low/-T细胞的明显减少可能是RA的发病机制之一。     

不明原因反复自然流产患者免疫治疗前后外周血CD4~+CD25~+CD127~(low)T细胞百分率的分析

目的探讨不明原因反复自然流产(URSA)患者外周血调节性T细胞(Treg)中CD4~+CD25~+CD127~(low)T细胞的表达情况及经配偶淋巴细胞免疫治疗后的妊娠结局改变,判断其作为流产指标的可能性。方法用流式细胞术检测73例URSA患者治疗前、76例正常早孕者(正常早孕组)及69名正常未孕体检者(正常未孕组)外周血中CD4~+CD25~+CD127~(low)T细胞百分率,分析经配偶淋巴细胞免疫方法治疗2~3个疗程后的51例URSA患者外周血CD4~+CD25~+CD127~(low)T细胞百分率的变化情况。结果 URSA组治疗前外周血CD4~+CD25~+CD127~(low)T细胞百分率(2.73%±0.56%)明显低于正常未孕组(2.93%±0.60%)和正常早孕组(4.36%±1.07%)(P0.05)。51例URSA患者治疗后外周血CD4~+CD25~+CD127~(low)T细胞百分率(3.72%±1.15%)明显高于治疗前(P0.05),其中42例患者治疗后妊娠结局较好,有9例失败。结论 URSA患者外周血CD4~+CD25~+CD127~(low)T细胞表达明显降低,其有可能作为判断URSA的指标之一。体外配偶淋巴细胞免疫治疗与妊娠结局改善有关。     

CD4~+CD25~+CDl27~(low)调节性T细胞、TGF-β及Notch1基因在特发性血小板减少性紫癜发病机制中作用研究

目的:探讨CD4~+CD25~+CDl27lowTreg、TGF-β及Notch1 mRNA在特发性血小板减少性紫癜(ITP)发病机制中作用。方法:收集30例初发ITP患者治疗前及治疗后和20例正常对照组的外周血,采用流式细胞术检测CD4~+CD25~+Treg和CD4~+CD25~+CDl27lowTreg数量;ELISA法检测TGF-β浓度;实时荧光定量PCR检测Notch1基因相对表达量。结果:ITP初治组外周血中CD4~+CD25~+CDl27low Treg和CD4~+CD25~+Treg比例均明显低于对照组,治疗后为(5.17%±0.74%)和(4.16%±0.68%),较初治组显著增高;初治组外周血中TGF-β浓度明显低于对照组,治疗后为(961.53±60.10 ng/l),较初治组显著增高;初治组外周血中Notch1 mRNA表达量明显低于对照组,治疗后为(1.35±0.10),较初治组显著增高。经治疗后,显效组Treg比例、TGF-β水平及Notch1 mRNA表达水平明显高于良效组和改善组、无效组,其差异均有统计学意义(P0.01)。TGF-β、Notch1表达均与CD4~+CD25~+CDl27lowTreg比例呈正相关性关系(P0.01)。结论:ITP患者中CD4~+CD25~+CDl27lowTreg、TGF-β及Notch1明显低于正常对照组,预示ITP患者存在明显细胞免疫调控异常;CD4~+CD25~+CDl27lowTreg与Notch1表达存在正相关性,提示Notch信号可能参与了Treg细胞免疫抑制作用途径,此结果为临床治疗提供新的思路。     

三氧化二砷上调重型再生障碍性贫血患者外周血中CD4~+ CD25~+ CD127~(low)调节性T细胞比例

目的:探究三氧化二砷(ATO)对重型再生障碍性贫血(severe aplastic anemia,SAA)患者外周血调节性T细胞(Treg)比例的影响。方法:选取20名初诊重型再生障碍性贫血患者,采集外周血并提取外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMNC)。PBMNC经不同浓度ATO(0、1、2.5和5μmol/L)处理96 h后流式细胞术检测CD4~+ CD25~+ CD127~(low) Treg比例,RT-PCR检测Foxp3 mRNA表达水平,ELISA检测IFN-γ、IL-4、IL-17、TGF-β1细胞因子水平。结果:2.5和5μmol/L ATO能明显上调Treg比例(P0.01),且随ATO浓度的增加,Treg比例上升幅度增大(r=0.616)。在ATO浓度为1μmol/L时,Treg比例增加,但结果无统计学意义(P0.05)。1、2.5和5μmol/L ATO均能明显上调Foxp3 mRNA表达水平(P0.05,P0.01,P0.01),且Foxp3 mRNA表达水平的增加与Treg比例的增加呈线性正相关(r=0.523),总体相关系数95%置信区间为(0.37,0.67)。1、2.5和5μmol/L ATO均能显著降低IFN-γ水平(P0.01);2.5和5μmol/L ATO能显著降低IL-4(P0.01,P0.01)和IL-17(P0.05,P0.01)水平;1和2.5μmol/L ATO对TGF-β1水平均无明显影响,5μmol/L ATO能显著降低TGF-β1水平(P0.05)。结论:ATO能够通过上调再障患者外周血Treg细胞比例介导免疫调节作用,并不同程度降低IFN-γ、IL-4、IL-17水平。     

外周血CD4~+CD25~+CD127~(low)调节性T细胞在恶性肿瘤患者免疫功能评估中的作用

目的观察恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+CD127low调节性T细胞(CD4+CD25+CD127lowTreg)的数量变化,探讨外周血CD4+CD25+CD127lowTreg检测在恶性肿瘤患者免疫功能评估中的作用。方法以35例正常人作为对照组,采用流式细胞术检测74例肿瘤患者外周血CD4+CD25+CD127lowTreg在CD4+T细胞的比例,分析不同TNM分期恶性肿瘤患者外周血中CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T细胞的百分比,采用实时荧光定量RT-PCR技术检测PBMC转录因子Foxp3表达水平。结果肿瘤患者外周血中CD4+CD25+CD127low Treg占CD4+T细胞百分比为(6.19±1.82)%,明显高于对照组(3.12±1.16)%,差异具有统计学意义(P0.05)。其中Ⅲ、Ⅳ期患者外周血CD4+CD25+CD127lowTreg百分比分别为(6.08±2.14)%、(6.88±2.65)%,明显高于Ⅰ-Ⅱ期患者(5.65±1.86)%,P0.05;病理分型为低分化者CD4+CD25+CD127lowTreg百分比为(6.72±2.60)%,明显高于高分化者(5.94±2.11)%,P0.05;有淋巴结转移者CD4+CD25+CD127lowTreg百分比为(6.95±3.12)%,明显高于无淋巴结转移者(5.02±2.09)%,P0.05。结论恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T细胞的比例明显升高,监测CD4+CD25+CD127lowTreg有利于评估肿瘤患者的免疫功能和辅助判断肿瘤患者的病情进展及预后。     

外周血CD4~+CD25~(high) Treg比例变化对ALL预后判断的价值

目的探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患者治疗前、后外周血CD4~+CD25~(high)调节性T细胞(Treg)比例的变化。方法采用流式细胞术检测22例ALL患者治疗前及用长春新碱+柔红霉素+环磷酰胺+泼尼松(VDCP)方案治疗后的外周血CD4~+CD25~(high)Treg比例。对所有患者随访5年,将13例持续完全缓解(CR)者作为CR组,将9例未缓解(NR)或缓解后5年内复发者作为NR组,以20名体检健康者作为正常对照组。结果与正常对照组比较,ALL组治疗前、后外周血CD4~+CD25~(high )Treg比例均升高(P0.05),CR组治疗前外周血CD4~+CD25~(high)Treg比例明显升高(P0.001),NR组治疗前则差异无统计学意义(P0.05)。ALL组治疗后外周血CD4~+CD25~(high)Treg比例稍低于治疗前,但差异无统计学意义(P0.05)。CR组治疗后外周血CD4~+CD25~(high)Treg比例明显低于治疗前(P0.01),接近于正常对照组(P0.05)。NR组治疗后外周血CD4~+CD25~(high)Treg比例明显高于治疗前(P0.01),且明显高于正常对照组(P0.001)。结论外周血CD4~+CD25~(high)Treg或许可作为ALL患者疗效监测的指标。     

移植患者CD4+CD25+CD127low调节性T细胞、TGF-β1及IL-10的表达

目的观察肝肾移植患者外周血中调节性T细胞(Treg细胞)的百分比与转化生长因子β1(TGF-β1)及白细胞介素10(IL-10)水平的表达情况及其相关性。方法15例移植患者的外周静脉血,采用流式细胞术检测CD4^+CD25^+CD127^low Treg细胞的百分比,并以20例体检健康者为对照组;用酶联免疫吸附试验法检测移植患者血清中细胞因子TGF-β1、IL-10的水平,分析这2种细胞因子水平与CD4^+CD25^+CD127^low Treg细胞百分比的关系及移植前后TGF-β1、IL-10水平的差异。结果与对照组比较,移植患者移植前CD4^+CD25^+CD127^low Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);肝肾移植后CD4^+CD25^+CD127^low Treg细胞百分比下降为0。肝肾移植前CD4^+CD25^+CD127^low Treg细胞百分比与TGF-β1、IL-10的水平呈正相关(P<0.05)。TGF-β1、IL-10的水平移植后低于移植前,差异无统计学意义(P>0.05)。结论CD4^+CD25^+CD127^low Treg的百分比与TGF-β1、IL-10的水平存在一定相关性;移植后CD4^+CD25^+CD127^low Tre细胞百分比下降为0,可能与应用大量免疫抑制剂有关。     

转化生长因子β和调节性T细胞在急性脑出血患者外周血中的变化及相关性研究

目的探讨CD4~+CD25~+CD127~(low/-)调节性T细胞和转化生长因子β在急性脑出血患者外周血中的表达及其相关性。方法采用流式细胞术检测33例试验组急性脑出血患者和30例健康对照者的外周血CD4~+CD25~+CD127~(low/-)调节性T细胞百分率,同时采用酶联免疫吸附试验检测63例研究对象的血清转化生长因子β(TGF-β)表达水平,将所得数据进行统计分析。结果试验组CD4+CD25+T细胞百分率、CD4~+CD25~+CD127~(low/-)调节性T细胞百分率均显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。试验组TGF-β表达水平与对照组相比显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。分析急性脑出血患者的调节性T细胞数量、TGF-β表达水平与临床指标,发现其与体温、白细胞相关性不大,与空腹血糖和血压具有明显的相关性。结论急性脑出血患者CD4~+CD25~+CD127~(low/-)调节性T细胞数量异常减少可能与其免疫功能紊乱相关。     

胃癌区域淋巴结中CD4~+CD25~+Foxp3~+T水平与细胞因子相关性分析

目的观察胃癌区域淋巴结中CD4~+CD25~+Foxp3~+T细胞(Treg细胞)分布及与外周血白介素(IL)-10和转化生长因子(TGF)-β_1的关系。方法采用流式细胞术检测48例胃癌患者(淋巴结转移26例,无转移22例)区域引流淋巴结中Treg细胞频数;ELISA方法检测外周血血清TGF-β_1和IL-10水平。分析Treg细胞与TGF-β_1、IL-10相关性。结果 Treg细胞在淋巴结转移患者阳性淋巴结中水平为(18.16±2.51)%,显著高于阴性淋巴结[(13.51±2.48)%],差异有统计学意义(P0.05),且阴性淋巴结Treg细胞比例显著高于无转移患者淋巴结[(9.27±2.16)%],差异有统计学意义(P0.05)。ELISA结果提示淋巴结转移患者外周血TGF-β_1和IL-10水平显著高于无转移患者,差异有统计学意义(P0.05)。胃癌患者引流区淋巴结Treg细胞分布比例与外周血血清TGF-β_1(r=0.73,P0.01)和IL-10水平(r=0.81,P0.01)呈明显正相关。结论胃癌患者区域引流淋巴结中Treg细胞分布与淋巴结转移密切相关,Treg细胞可能通过分泌TGF-β_1和IL-10导致胃癌淋巴结微环境发生免疫抑制,是胃癌发生淋巴结转移的重要因素之一。     

调节性T细胞和转化生长因子β与初发类风湿性关节炎相关性研究

目的:探讨CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞和转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF β)在初发活动性类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血中的表达及其在RA发病机制中作用.方法:采用流式细胞术检测40例初发活动性RA患者(RA组)和35例正常对照者(对照组)外周血CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞阳性率,采用酶联免疫吸附试验检测其血清中TGF-β水平,并进行统计分析.结果:RA组CD4+CD25+T细胞百分率明显低于对照组(P＜0.05);CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞百分率低于对照组,但差异无统计学意义(P＞0.05).2组CD4+CD25+T细胞与CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞百分率比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).同组CD4+CD25+T细胞与CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞表达水平均有相关性(P＜0.05).RA组TGF-β水平明显高于对照组(P＜0.01);2组CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25+CD127low/-T细胞水平与其血清TGF-β表达水平无相关性(P＞0.05);三者表达水平均与RA活动指标无相关性(P＞0.05).结论:RA患者CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞数量减少可能与RA的细胞免疫功能紊乱有关.     

CD127用于特异性识别调节性T淋巴细胞的方法建立及临床应用评价

目的 建立用膜表面标志CD4+ CD25high CD-/low127界定调节性T淋巴细胞的方法,并评价其临床应用意义.方法 五色流式细胞术以Foxp3-FITC/CD127-PE/CD4-PerCP/CD25-APC/CD3-PC7抗体组合鉴定调节性T淋巴细胞,分选CD4+CD25highCD-/low127细胞鉴定Foxp3 mRNA和蛋白水平的表达情况,比较CD-/low127与Foxp3+界定调节性T淋巴细胞的相关性.用该膜表面标志分析20名健康对照者外周血及35例胃癌患者不同部位CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(Treg)细胞的分布特点及意义.结果 用CD4+CD25highCD-/low127界定调节性T淋巴细胞的Foxp3蛋白表达率为87.1%,Foxp3 mRNA高表达.用膜表面抗原CD4+CD25highCD-/low127界定调节性T淋巴细胞与CD4+CD25highFoxp3+具有相关性(r=0.985,P＜0.01).胃癌患者外周血CD25highCD-/low127调节性T淋巴细胞占CD4+T淋巴细胞的比例为(8.67 ±3.52)%,高于健康对照组[(5.12±2.46)%,t=2.542,P＜0.05].胃癌患者腹腔积液、肿瘤浸润性淋巴细胞、癌旁淋巴结中CD4+CD25highCD-/low127调节性T淋巴细胞占CD4+T淋巴细胞比例均高于外周血(分别为t=2.357,P＜0.05;t=6.174,P＜0.01;t=5.481,P＜0.01).胃癌Ⅰ期+Ⅱ期患者外周血CD25high CD-/low127Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的比例为(6.04±2.31)%,Ⅲ期+Ⅳ期患者为(10.16±2.29)%,其分期差异具有显著统计学意义(t=2.473,P＜0.05).结论 CD4+CD25highCD-/low127抗体组合可用于鉴定调节性T淋巴细胞.胃癌患者CD4+CD25highCD-/low127调节性T淋巴细胞的比例升高,且增高程度与肿瘤临床分期相关.     

调节性T细胞的新标记CD4+CD25+CD127low/-在类风湿性关节炎中的应用

目的 选择用膜表面标志CD4+CD25+CD127low/-作为检测调节性T(Treg)细胞的指标,探讨其在类风湿性关节炎(RA)中的可能临床应用价值.方法 用流式细胞术检测正常人及RA患者外周血CD4+CD25high、CD4+ CD25+ FoxP3+ 和CD4+CD25+CD127low/- T细胞占CD4+T细胞的比例,分析CD4+CD25+CD127low/-与CD4+ CD25+ FoxP3+ 2群细胞比例之间的相关性.结果 正常人及RA患者外周血CD4+CD25+CD127low/-T细胞比例与CD4+ CD25+ FoxP3+T细胞比例之间呈显著正相关(r=0.694、0.768,P均＜0.01).RA患者外周血CD4+CD25high、CD4+ CD25+ FoxP3+及CD4+CD25+CD127low/-T细胞比例均显著低于正常人(P均＜0.01).结论 膜表面标志CD4+CD25+CD127low/-可以用来鉴定Treg细胞,RA患者外周血CD4+CD25+CD127low/-T细胞的明显减少可能是RA的发病机制之一.     

再生障碍性贫血患者CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞及Notch1表达水平的变化

目的 测定再生障碍性贫血(AA)患者治疗前后外周血CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞(Treg)的数量及叉头翼状螺旋转录因子(FOXP3)mRNA、Notch1 mRNA的表达水平,探讨Treg在AA发病中的作用及其机制.方法 流式细胞术检测29例初发AA患者、14例环孢素(CsA)治疗后恢复期及11例治疗后未恢复期患者外周血中CD4+ CD25+ CD127low T细胞、CD4+ CD25+ T细胞的数量,并与正常对照比较;采用RT-PCR检测FOXP3 mRNA和Notch1 mRNA的表达水平,分析两者相关性.结果AA初发组及治疗后未恢复组患者外周血中活化CD4+ CD25+ T细胞占CD4+ T细胞比例分别为(4.3±0.7)%、(4.2±0.6)%,明显高于正常对照组[(2.4±0.8)%](P＜0.05).CsA治疗后恢复组患者比例下降为(2.6±0.7)%(P＜0.05),与对照组比较差异无统计学意义.AA初发组及未恢复组CD4+ CD25+ CD127low T细胞在CD4+ T细胞中的比例分别为(2.4±1.2)%、(2.5±1.1)%,较正常对照组[(7.1±2.7)%]及恢复组[(5.3±1.0)%]明显降低(P值均＜0.01);但后两组比较差异无统计学意义.AA初发组患者FOXP3 mRNA及Notch1 mRNA分别为(0.260±0.011)和(0.018±0.005),较正常对照[(1.307±0.011)和(0.308±0.028)]表达明显下调(P值均＜0.01),治疗后分别为(1.287±0.012)和(0.281±0.013),表达较初发组显著提高(P值均＜0.01),与对照组比较差异无统计学意义(P值均＞0.05).AA患者CD4+ CD25+ CD127low T细胞、FOXP3均与Notch1表达呈正相关性(P值均＜0.01).结论AA患者外周血CD4+ CD25+ CD127low Treg减少,其抑制作用减弱,导致自身反应性T细胞过度活化,抑制造血.其作用机制之一可能与靶细胞表面Notch1分子表达降低相关.     

SLE患者外周血中CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞水平分析

目的分析系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中调节性T细胞(Treg)表达情况,初步探讨其在SLE患者细胞免疫失调中的意义。方法采用流式细胞术检测50例SLE患者和31例健康人对照组外周血中CD4+CD25+CD127low/-Treg细胞百分率,并分析其与CD4+CD25+和CD4+CD25high细胞的相关性,以及各种Treg细胞与SLE患者及SLE疾病活动性指数(SLEDAI)的相关性。结果 SLE活动期外周血CD4+CD25high细胞百分数为(11.65±5.53)%,显著高于SLE稳定期的(8.52±3.15)%和健康人对照组的(6.85±1.63)%,F=23.287,P<0.01。SLE患者Treg细胞与CD4+CD25high和CD4+CD25+细胞百分数均呈正相关(r分别为0.819,0.711,P均<0.05),SLEDAI与CD4+CD25+CD127low/-、CD4+CD25+、CD4+CD25high细胞水平呈正相关(r分别为0.410,0.394,0.348,P均<0.05)。结论 SLE活动期外周血中Treg细胞表达增加,且与SLEDAI相关,SLE患者免疫异常可能与Treg细胞的异常水平有关。     

CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞增龄性变化及其与老年肺癌的关系

目的探讨CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的增龄性变化及其与老年肺癌发生、发展的关系。方法肺癌患者70例和体检健康者60例,分别按年龄(青年18~45岁、中年45~60岁、老年60岁)分为青年肺癌组21例、中年肺癌组25例、老年肺癌组24例和青年健康组20例、中年健康组20例、老年健康组20例。采用流式细胞分析法测定各组外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg占CD4~+T细胞的百分率,采用实时荧光定量PCR法测定功能基因Foxp3 mRNA的相对表达量;分析肺癌患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞百分率与临床特征的关系。结果老年肺癌组外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞百分率[(11.81±2.40)%]及Foxp3 mRNA相对表达量(3.14±1.30)高于中年肺癌组[(11.25±1.84)%、2.53±1.16]和青年肺癌组[(9.05±2.14)%、2.28±1.21],中年肺癌组高于青年肺癌组(P0.05);老年健康组外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞百分率[(9.82±1.19)%]及Foxp3mRNA相对表达量(2.67±0.99)高于中年健康组[(7.81±1.16)%、1.76±0.80]和青年健康组[(6.23±0.91)%、1.17±0.51],中年健康组高于青年健康组(P0.05);相同年龄段,各肺癌组中CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞百分率及Foxp3 mRNA相对表达量均明显高于各健康组(P0.05);肺癌患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞百分率在肺癌分期、有无淋巴结转移上差异有统计学意义(F=28.660,P=0.002;t=21.084,P0.001),在不同性别、病理类型上差异无统计学意义(t=2.330,P=0.120;F=0.020,P=0.980)。结论 CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞的增龄性变化可能是导致老年肺癌发生、发展的原因之一。     

小鼠调节性T细胞的CD4+ CD25+ CD127low/-标记分析

新的特异性细胞表面标记的发现是提高调节性T细胞(Treg)测量和分选技术的重要环节,Foxp3是公认的天然Treg的标记,却不能作为分选细胞的标记,CD127是新发现低表达于Treg细胞表面的标记。本实验测定CD4+CD25+CD127low/-和CD4+CD25+Foxp3+标记的小鼠外周血及脾脏Treg细胞的数量,并测定CD4+CD25+CD127low/-细胞内Foxp3转录因子的表达水平,分析CD4+CD25+CD127low/-标记在小鼠Treg细胞测定及分选的价值。收集BALB/c小鼠外周血及制备脾细胞悬液,分别三重荧光染色CD4、CD25、CD127及CD4、CD25、Foxp3后应用流式细胞仪检测,得出CD4+CD25+CD127low/-、CD4+CD25+Foxp3+这两种标记的小鼠外周血和脾脏Treg细胞的比例;再在CD4、CD25、Foxp3基础上加CD127染色(四重荧光染色),检测CD4+CD25+CD127low/-细胞Foxp3转录因子的表达情况。结果显示:①BALB/c小鼠外周血CD4+T细胞的分布:在总T细胞中CD4+TCD4+CD25+T细胞的中位表达水平分别为39.02%、5.35%;在CD4+T细胞中CD4+CD25+CD127low/-、CD4+CD25+Foxp3+细胞的中位表达水平分别为7.13%、3.97%;②BALB/c小鼠脾脏CD4+T细胞的分布:在总T细胞中CD4+T、CD4+CD25+T细胞的中位表达水平分别为23.49%、3.86%;在CD4+T细胞中CD4+CD25+CD127low/-、CD4+CD25+Foxp3+细胞的中位表达水平分别为12.8%、8.23%;③BALB/c小鼠外周血和脾脏CD4+CD25+CD127low/-细胞比例高于CD4+CD25+Foxp3+细胞,以脾脏更为明显(P<0.01);④小鼠外周血及脾脏CD4+CD25+CD127low/-细胞高表达Foxp3转录因子,CD4+CD25+Foxp3+细胞低表达CD127。结论:BALB/c小鼠外周血和脾脏CD4+CD25+CD127low/-较CD4+CD25+Foxp3+能定量更多的Treg细胞;CD127low/-作为CD4+CD25+Treg细胞表面的特征性标志,在细胞分选时受其他细胞的干扰最小,是定量和纯化小鼠Treg细胞的更好标记选择。     

标准化屋尘螨特异性免疫治疗对变应性鼻炎患者外周血CD4~+CD25~+CD127~(low/-)调节性T细胞的影响

目的观察屋尘螨性变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)患者在标准化屋尘螨特异性免疫治疗(specific immunotherapy,SIT)前、后外周血CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞(T regular cell,Treg)比率变化。方法 45例屋尘螨性AR患者随机分为治疗组30例和对照组15例,治疗组接受标准化屋尘螨SIT 6个月,对照组15例接受安慰剂治疗6个月,以CD4+、CD25+、CD127low/-作为标志物,应用流式细胞术检测2组治疗前、后外周血CD4+CD25+CD127low/-Treg细胞比例变化,并与20例体检健康者(正常组)进行比较,记录治疗组和对照组治疗前、后视觉模拟量表(visual analogue scale,VAS)评分变化。结果正常组CD4+CD25+CD127low/-Treg细胞比例((5.319±1.034)%)高于治疗组治疗前((3.644±1.444)%)和对照组治疗前(4.739±2.475)%)(P0.05);治疗组、对照组治疗后CD4+CD25+CD127low/-Treg细胞比例分别为(6.943±1.514)%、(5.576±1.514)%,均较治疗前增高(P0.05);治疗组治疗后VAS评分(3.050±2.098)低于治疗前(7.263±1.591)(P0.05),对照组治疗前、后VAS评分(5.827±2.736、4.236±3.057)比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论屋尘螨性AR患者行标准化SIT治疗后外周血中CD4+CD25+CD127low/-Treg细胞增加,患者症状好转。     

卵巢癌患者CD4+T细胞中调节性T细胞相关分子标志物的表达特点及临床意义

目的:探讨卵巢癌患者外周血和肿瘤组织CD4+调节T细胞中性T细胞相关分子标志物(Foxp3、CD25、CD127、CTLA-4及GITR)的表达特点及其临床意义。方法 :流式细胞术检测31例卵巢癌患者,26例卵巢良性肿瘤患者和20例健康对照者的外周血,以及14例卵巢癌组织和12例卵巢良性肿瘤组织CD4+T细胞中Foxp3、CD25、CD127、CTLA-4及GITR的表达水平。结果:卵巢癌组织CD4+T细胞中的Foxp3、CD25、CTLA-4及GITR的表达水平显著高于卵巢良性肿瘤组织(P<0.05);CD127在卵巢癌组织CD4+T细胞中所占的比例显著低于卵巢良性肿瘤组织(P<0.01);卵巢癌患者外周血CD4+T细胞中Foxp3、CD25、CTLA-4及GITR的表达水平均显著高于卵巢良性肿瘤患者和健康对照者(P<0.01),CD127的表达水平显著低于卵巢良性肿瘤患者和健康对照者(P<0.01);Ⅲ/Ⅳ期卵巢癌患者外周血CD4+T细胞中Foxp3的表达水平显著高于Ⅰ/Ⅱ期患者(P<0.05);Ⅲ/Ⅳ期卵巢癌患者外周血CD4+T细胞中CD127的表达水平显著低于Ⅰ/Ⅱ期患者(P<0.05)。结论:卵巢癌患者外周血及肿瘤组织中CD4+Treg细胞的表达水平显著高于卵巢良性肿瘤组和健康对照组,Foxp3和CD127的表达水平与肿瘤分期有关,提示这两种标志物可作为判断卵巢癌疾病进展的重要指标。     

甲状腺乳头状癌患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞及T-钙粘蛋白的检测及临床意义

目的研究CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞(Treg)与T-钙黏蛋白在甲状腺乳头状癌(PTC)外周血中的水平及临床意义。方法采用回顾性研究方法,选取PTC患者40例(观察组)以及甲状腺腺瘤患者40例(对照组)。对比两组患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞比率及T-钙黏蛋白水平;对比不同病理特征下CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞比率及T-钙黏蛋白水平有无差异。结果 PTC组患者CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞比率及T-钙黏蛋白水平均明显高于对照组(P0.05),TNMⅢ、Ⅳ期与存在颈部淋巴结转移的PTC患者CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞与T-钙黏蛋白水平均明显升高(P0.05)。结论 CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞与T-钙黏蛋白可以作为PTC的标志物,同时与患者临床分期以及淋巴结转移有密切的相关性。