食品中金黄色葡萄球菌致病性研究进展

目的了解市售生鲜肉中金黄色葡萄球菌的污染、群体遗传多样性和毒素基因携带规律,为金黄色葡萄球菌的污染防控提供依据。方法按照GB4789.10—2016对金黄色葡萄球菌进行分离鉴定,采用多位点序列分型方法(MLST)进行分子分型,利用PCR方法检测11种毒素基因的携带情况。结果148份样品中有56份检出金黄色葡萄球菌,污染率为30.1%,分离到56株菌。56株菌可分成11种序列型(STs),其中ST7(28.6%)是主要流行的序列型,其他优势序列型分别为ST188(23.2%),ST1(8.93%)和ST88(8.93%)。6种毒素基因在27株菌(48.2%)中检出阳性结果,其中杀白细胞素基因pvl(26.8%)检出率最高,其次为肠毒素基因sec(12.5%),seh(10.7%),sea(7.1%)和sed(5.4%)。结论金黄色葡萄球菌在市售生鲜肉中具有较高的污染率,丰富的遗传多样性表明菌株污染来源广泛,与食物中毒和临床感染相关的毒素基因具有较高的分布比例,应加强对生鲜食品中金黄色葡萄球菌的监控。     

金黄色葡萄球菌肠毒素基因的检测与分型

目的:了解不同来源的金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)分离株产肠毒素的情况,以及主要肠毒素SEA、SEB、SEC、SED、SEE基因携带状况。方法:采用小型VIDAS全自动荧光酶标免疫法对46株分别从医院消毒监测样品、公共场所监测样品、食品监测样品以及食物中毒病人粪便和呕吐物中分离到的SA菌株进行肠毒素检测,再采用PCR技术对产肠毒素的菌株进行基因分型。结果:46株SA菌株中,携带肠毒素的为22株,检出率为47.83%。其中以SEA、SEB检出率较高,分别为31.82%和27.27%。不同来源SA分离株携带肠毒素基因的比例不同,24株来自医院消毒监测样品分离株中检出率为41.67%(10/24);4株来自公共场所监测样品分离株中检出率为50.00%(2/4);12株来自食品监测样品分离株中检出率为33.33%(4/12);6株食物中毒样本分离株中检出率为100%(6/6)。结论:46株SA分离株中产肠毒素为22株,比例较高,而且携带肠毒素基因的类型较多。试验表明,VIDAS与PCR技术应用于检测SA分离株中肠毒素基因简单、快速,适合基层疾控部门应用。     

中国15个地区分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因分型研究

目的 研究中国2006年耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)流行株的来源和遗传背景.方法 收集2006年1-12月15个地区17家医院连续分离的非重复MRSA 302株,通过多重PCR对MRSA进行染色体mec(SCCmec)分型,葡萄球菌A蛋白(Spa)分型和多位点序列分型(MLST).结果 SCCmec分型Ⅲ型为76.8%,不能分型为7.9%.从广州地区分离株中发现2株Ⅳ型,Ⅱ型为14.6%;而大连地区分离株中Ⅱ型为75.0%,与其他地区菌株分型的差异存在统计学意义(P<0.005).MLST共有4种分型,其中序列分型(ST)239(46.7%)、ST5(44.4%)、ST59(6.7%)、ST88(2.2%).Spa分型共有14种,其中t30(52.6%)、t37(27.2%)、t2(12.9%)、t632(2.3%)、t437(1.3%)和t570、t601(各0.7%)及t377、t459、t796、t899、t1152、t2649(各0.3%),未分型占0.3%.未检出pvl以基因.结论 调查的15个地区MRSA主要克隆株为ST239-MRSA-SCCmecⅢ-t30和ST5-MRSA-SCCmecⅡ-t2,具有独特的地理分布.     

杭州市公共交通场所金黄色葡萄球菌耐药性及其多位点序列分型分析

目的 分析杭州市公共交通场所金黄色葡萄球菌耐药性及对耐药菌株进行多位点序列分型(MLST)。方法 以杭州市主要医院、老年社区和小学为对象,于2020年3月—2021年3月选取其周围地铁站、公交站和(或)共享单车作为采样点,对所采样本进行细菌鉴定和耐药基因检测,分别采用全自动微生物鉴定仪和MLST法进行药敏试验和菌株分型。结果 共采集样本1 045份,分离16株金黄色葡萄球菌(1.53%,16/1 045),检测到多种耐药基因;细菌对多种类抗生素产生耐药,但均对万古霉素、替加环素、利福平和复方新诺明敏感。根据耐药基因和药敏试验结果,16株细菌中共发现5株MRSA(31.25%,5/16);在MLST分型中,金黄色葡萄球菌共分7个ST型,其中ST5和ST2631占比最高(均为26.67%),其次为ST22和ST398(均为13.33%)。结论 2020年3月—2021年3月杭州市公共交通场所金黄色葡萄球菌多个耐药基因阳性,存在多重耐药MRSA和多个ST型。     

tst基因阳性金黄色葡萄球菌的流行及基因分型

目的:检测金黄色葡萄球菌染色体上编码中毒休克综合征毒素-I(TSST-I)的tst基因,研究tst基因携带情况以及临床感染特点。方法:应用PCR方法对临床分离的金黄色葡萄球菌mecA基因和tst基因进行体外扩增;多重PCR对tst基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)进行SCCmec基因分型。结果:460株金黄色葡萄球菌检测出mecA基因阳性180株,阳性率为39.1%(180/460);tst基因阳性菌株105株,阳性率为22.8%(105/460)。105株tst基因阳性菌株中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)53株,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)52株,分别占29.4%和18.6%,MRSA较MSSA tst基因检出率高,差异有统计学意义(P<0.05)。tst基因阳性MRSASCCmec基因分型以SCCmecII和SCCmecIII为主,分别占30.2%(16/53)、60.4%(32/53),另有5株未分型。结论:tst基因阳性菌株在临床分离的MRSA中占有较高比例,SCCmec基因分型以SCCmecII和SCCmecIII为主,临床医生应予以足够重视。     

金黄色葡萄球菌随机引物扩增DNA分型与药敏结果分析

目的 了解本地区金黄色葡萄球菌耐药性以及MRSA菌株分子生物学的流行病学特点。方法 广州地区3所医院分离到金黄色葡萄球菌在进行细菌药物敏感试验的同时进行随机引物扩增DNA（RAPD-DNA）多态性分型研究分析。结果 β-内酰胺酶阳性率为94.4%，MRSA阳性率为56.9%；进行RAPD-DNA多态性分型；可扩增出1-条带，共分为37个基因型；32株或2株以上具有相同基因型的细菌组合有14个，其中有10个组合细菌是分别来自同一所医院的同为医院感染的菌株或同为社区感染的菌株。结论 广州地区金黄色葡萄球菌的β-内酰胺酶阳性率，MRSA发生率与国内同期相近；医院感染株无论是β-内酰胺酶阳性率，MRSA的发生率还是对其他抗生素的耐药率均明显高于社区感染株，在进行抗感染株，在进行抗感染治疗时应区别对待医院感染与社区感染，分别采取不同的用药对策；结合RAPD-DNA多态性分型分析表明：在同一所医院内存在着同源菌的流行趋势，这种趋势与医院感染有关，但细菌的基因表型与耐药性之间没有明显的因果关系；加强细菌实验室的培养检测工作，严格病区的消毒隔离制度，是降低金黄色葡萄球菌医院感染的有效措施。     

血流感染金黄色葡萄球菌耐药性变化及其流行趋势

目的 收集上海交通大学医学院附属新华医院2011-2019十年间分离自血培养标本中的金黄色葡萄球菌,进行耐药性分析及流行病学分析。方法 利用Whonet 5.6软件对十年间分离自血培养的金黄色葡萄球菌进行耐药分析,计算成人和儿童的甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率。对十年间收集的部分菌株进行DNA提取,并进行多位点序列分型(MLST)分析,了解金黄色葡萄球菌在医院的流行趋势。结果 十年间分离自血培养标本的金黄色葡萄球菌共320株,分离自儿童的菌株占35.0%,分离自成人的菌株占65.0%,MRSA的总检出率为47.5%,儿童MRSA的检出率为45.5%,成人MRSA的检出率为48.5%。对其中250株金黄色葡萄球菌进行MLST分型,MRSA的主要型别是ST5(35.4%),甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)的主要型别是ST188(16.7%),分离自儿童的菌株主要型别是ST59(17.9%),分离自成人的菌株主要型别是ST5(26.2%)。结论 分离自成人和儿童的金黄色葡萄球菌耐药性存在差异,成人MRSA检出率略高于儿童,流行的ST型也存在明显差异,提示临床医生应该针对不...     

老年患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌流行病学及多位点序列分型研究

目的研究老年患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的流行病学及多位点序列分型。方法随机选取医院检验科2016年5月-2017年5月间收集老年患者临床样本分离MRSA菌株30株,分别进行药敏鉴定试验,建立多位点序列分型(MLST)方法并检测染色体7个管家基因,测序结果与MLST数据库网站已有序列比对,进行聚类分析,统计克隆系及ST菌株亲缘关系发育树,并分析MLST耐药性影响因素。结果 MRSA菌株分2大集群A和B,A群由USA100和USA800型组成,B群由USA300和USA700型菌株组成;所有分离菌株均为耐苯唑西林、阿莫西林/克拉维酸菌株;10株耐药菌对万古霉素的最低抑菌浓度(MIC)>1μg/mL;Logistic回归分析结果显示,PVL阳性与万古霉素MIC增加存在显著相关性(P<0.05)。结论本研究数据表明老年患者MRSA分离株均为耐苯唑西林、阿莫西林/克拉维酸菌,针对老年患者临床用药时,需考虑相关影响因素进行防控。     

重症监护病房分离金黄色葡萄球菌的分子流行特征

目的了解某三甲医院重症监护病房(ICU)患者分离金黄色葡萄球菌的分子流行特点及其同源性,为有效控制医院感染的发生提供实验室依据。方法收集该院2013年3—8月ICU患者各类感染标本分离的62株金黄色葡萄球菌,采用PCR方法扩增7个管家基因并进行测序分析,采用多位点序列分型(MLST)技术获得菌株ST分型,对ST分型进行亲缘关系分析。结果 62株金黄色葡萄球菌均可以扩增出7个管家基因的特异性产物;共分为10个ST基因型,其中2个基因型为新发现的ST型(STn1和STn2),1个为国内新发现的ST型(ST675)。ST239是ICU患者分离的金黄色葡萄球菌主要ST型别,占74.20%,分布于6个ICU,分布范围最广;其次为ST5,分布于3个ICU。62株菌株在系统进化树上形成7个主要分支,检出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)55株,占88.71%。结论医院ICU分离的金黄色葡萄球菌具有一定的同源性,并且少数型别表现出集中分布趋势。     

金黄色葡萄球菌耐药相关基因及SCCmec分型研究

摘要:目的　对郑州地区分离的金黄色葡萄球菌进行耐药性研究,了解其耐药基因携带情况,为临床抗感染治疗提供依据。方法　对2013年7月-2014年7月郑州某三甲医院分离的86株金黄色葡萄球菌,测定25种药物敏感性,应用普通PCR测定10种耐药基因,同时采用多重PCR方法对28株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin Resistant S. Aureus,MRSA）进行葡萄球菌染色体mec基因盒（Staphyloccoccal Cassette Chromosome mec,SCCmec）分型。结果　菌株对抗菌药物呈多重耐药,其中青霉素耐药率最高,为95.3%。有11种抗生素的耐药率大于50%;10种耐药相关基因检测结果显示acc（6'）/aph（2"）、aph（3'）-III、ant（4',4"）、ermA、ermB、ermC、msrA、tetM、tetK阳性率分别为100%、72.1%、86.0%、95.3%、79.1%、93.0%、58.1%、97.7%、81.4%,未检测出blaTEM;28株MRSA中14株为SCCmecⅢ型,8株为SCCmecⅠ型,4株为SCCmecⅣE型,2株未能分型。结论　郑州地区分离的金黄色葡萄球菌呈多重耐药,携带较多耐药基因,本地区MRSA以SCCmecⅢ型为主。     

分离自环境与临床患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的基因分型

目的：对分离白环境与临床患者的6株MRSA通过多种方法进行基因分型。方法：应用多重PCR方法检测该6株金葡菌是否MRSA，然后通过SCCmectyping，MIST，spaAtyping，coatyping，AP-PCR，RAPD和ERIC-PCR等多种方法进行基因分型。结果：6株金葡菌均为MRSA，均携带Ⅲ型SCCmec，序列型为ST239，spaA型为GKAOUQ，coa型为HIJKL，AP-PCR，RAPD和ERIC-PCR的指纹图谱均显示其带型一致，来源于同一克隆系，病原上具有高度同源性。结论：MRSA可能通过环境与患者之间传播而引起感染，并且如果该克隆的MRSA携带上毒素基因，则可能爆发非常严重和危险的院内感染。     

金黄色葡萄球菌婴幼儿分离株黏附毒素与细胞毒素编码基因研究

目的调查金黄色葡萄球菌婴幼儿分离株的黏附毒素与细胞毒素编码基因携带状况。方法收集儿童医院2013年10-12月金黄色葡萄球菌婴幼儿分离株20株,采用聚合酶链反应(PCR)的方法分析9种黏附毒素编码基因、9种细胞毒素编码基因及2种荚膜抗原编码基因。结果 20株金黄色葡萄球菌共检出7种黏附毒素编码基因,5种细胞毒素编码基因,荚膜抗原编码基因cap5占15.0%、cap8占85.0%;黏附毒素、细胞毒素及荚膜抗原3类编码基因每一株均有阳性检出;阳性基因可分为7种模式,携带≥10种基因的菌株占大多数。结论黏附毒素和细胞毒素编码基因的高检出率是该组金黄色葡萄球菌在患儿皮肤软组织和病灶部定植和感染的重要原因,对金黄色葡萄球菌婴幼儿分离株进行9种黏附毒素编码基因、9种细胞毒素编码基因及2种荚膜抗原编码基因检测研究尚为国内外首次。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌暴发流行菌株的基因分型研究

目的研究急诊重症监护病房(EICU)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)暴发流行菌株的分子流行病学特征,以追踪传染源、了解传播途径,确定预防流行的策略。方法采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术,对我院EICU在2004年12月临床患者感染部位分离的MRSA暴发流行株及暴发期间分离自环境和患者、医务人员携带的MRSA作同源性分析。结果17例患者中有6例感染MRSA,共分离出7株病原菌(其中有两株来自同一患者的不同部位);分别从一患者鼻腔、换药室台面、一护士的手、一病床床栏和病区的空气分离出5株MRSA;12株MRSA的PFGE分型结果显示共有4个型:所有患者感染部位分离的7个菌株和患者鼻腔及护士手上分离的两个菌株都是A型,为暴发菌株;换药室台面、病床床栏和空气中分离的菌株分别为B型、C型和D型。结论基因分型阐明了本次MRSA暴发流行的来源和传播途径,其可能是患者鼻腔携带的MRSA经由医护人员的手在病区中传播。     

地震患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因分型及同源性比较研究

目的 了解从地震受伤患者分离到的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)基因特征,并与同期非灾区患者分离的MRSA进行比较.方法 用葡萄球菌盒式染色体(SCCmec)多重PCR分型技术进行基因分型,并检测其杀白细胞毒素基因(PVL),采用Diversilab进行同源性比较,并进行药敏分析.结果 地震受伤患者与非灾区患者分离到的MRSA均表现为SCCmecⅢ型,PVL阴性;同源性分析显示,分离到的MRSA与社区获得性MRSA代表株中MLST分型ST8型同源性相对较好.结论 医院获得性MRSA与社区获得性MRSA可能存在交叉传播,在灾后急救现场及当地医院要加强无菌观念,高度警惕医源性交叉感染的传播.     

烧伤患者分离金黄色葡萄球菌耐药性与耐药基因研究

目的了解烧伤病房患者分离金黄色葡萄球菌的耐药性及耐药基因分布,探讨烧伤患者易感染金黄色葡萄球菌的原因。方法收集2013年7-12月医院烧伤病房患者的金黄色葡萄球菌,菌种鉴定采用法国生物梅里埃公司VITEK-2Compact细菌鉴定仪,并进一步作spa基因PCR检测,药敏试验采用法国生物梅里埃公司VITEK-2Compact系统进行,通过PCR方法分析其耐药基因mecA、aac6′/aph2″、aph3′-Ⅲ、ant4′、ermA、ermB、ermC、mphC、msrA、tetM、tetK、qacA、bsa的表达。结果共收集金黄色葡萄球菌20株,其中19株来源于创面、1株来源于留置导管;金黄色葡萄球菌对青霉素G的耐药率为100.0%,对万古霉素、替考拉宁、利福平等耐药率均为0;mecA和bsa基因检测阳性率均为55.0%,aac6′/aph2″、aph 3′-Ⅲ基因检测阳性率分别为50.0%和45.0%。结论烧伤患者分离的20株金黄色葡萄球菌中mecA及bsa基因检出率较高,是烧伤患者易于感染金黄色葡萄球菌的原因,耐药基因检测提示其对季胺类消毒剂消毒皮肤效果可能欠佳。     

医院感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因分型

目的分析广东省人民医院不同科室来源的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株基因分型同源性,为控制MRSA医院感染流行提供科学依据。方法使用细菌基因组重复序列聚合酶链式反应(Rep-PCR)技术以及高级微生物基因分型系统(DiversiLab)细菌同源性分析技术对50株医院感染的MRSA进行基因分型。结果50株MR-SA分为19个基因型,其中A型20株,为主要流行型别,主要来自于重症监护室(ICU)、呼吸科、康复科、神经外科、心外科等11个病区;B型7株,D型和J型各3株,H型和L型各2株,其余均为1株。结论该院存在着以A型MRSA为主的感染流行,该型菌株可能以克隆株的形式播散。     

Antimicrobial susceptibility of Staphylococcus aureus and characterization of methicillin-resistant Staphylococcus aureus isolated from bovine mastitis in Korea

A total of 402 Staphylococcus aureus isolates from bovine mastitis milk collected during 2003-2009 in Korea were tested for susceptibility to 20 antimicrobial agents. All S. aureus isolates were susceptible to 11 of 20 antimicrobials tested; no resistance was observed against pirlimycin, telithromycin, novobiocin, penicillin/novobiocin, quinupristin/dalfopristin, clindamycin, rifampin, ciprofloxacin, trimethprim/sulfamethoxazol, vancomycin, and linezolid. Over 66% of the S. aureus isolates were resistant to penicillin. Resistance was also seen for gentamicin (11.9%), erythromycin (7.7%), methicillin (oxacillin and cefoxitin, 6.2%), and tetracycline (4.2%). No noticeable change was observed in penicillin, gentamicin, and erythromycin resistance over the 7-year period. Tetracycline resistance appeared to decrease consistently, whereas methicillin resistance was observed from 2005. About 2.7% (11/402) were resistant to three or more antimicrobials. Genotyping of the 17 methicillin-resistant S. aureus (MRSA) isolated from each cow revealed two staphylococcal cassette chromosome mec (SCCmec) types (IV and IVa), three spa types (t286, t324, and untypable), and two sequence types (ST1 and ST72). Eleven of 17 (64.7%) MRSA strains belonged to SCCmec IVa-t324-ST72. The rest of strains belonged to SCCmec IVa-t286-ST1 (n?=?3) and SCCmec IV-untypable-ST72 (n?=?3). None of the MRSA carried the Panton-Valentine leukocidin gene. These characteristics are the same as those found in community-acquired (CA) MRSA strains prevalent in humans in Korea. Three pulsed-field gel electrophoresis types (A-C) were observed among the 17 MRSA strains examined, and 14 strains belonged to the same pulsed-field gel electrophoresis pattern regardless of their geographical origin and year of isolation. The results of this study provide evidence of CA-MRSA infection in dairy cattle for the first time in Korea.     

金黄色葡萄球菌食品和病人分离株肠毒素基因和耐药性比较

目的：对金黄色葡萄球菌食品（不含生牛奶）分离株和病人分离株的肠毒素基因进行分型和耐药性检测,比较两种分离菌株的肠毒素基因分布和耐药性差异。方法：用国标方法分离鉴定金黄色葡萄球菌,VITEK32生化验证,PCR检测金黄色葡萄球菌肠毒素基因（肠毒素SEA-SEJ基因）,VITEK32测定分离菌株抗生素的耐药性。结果：从病人分离的80株金黄色葡萄球菌检测到9种基因。肠毒素基因携带率为85.0%,同时携带2种及以上毒素基因的菌株占76.3%,含传统肠毒素基因（SEA-SEE）的菌株占43.8%,有新发现肠毒素基因（SEG-SEJ）的菌株占71.3%。从食品中分离的51株金黄色葡萄球菌检测到7种肠毒素基因。肠毒素基因携带率为68.7%,同时携带2种及以上毒素基因的菌株占21.6%。有SEA基因的占27.5%,含其它传统的毒素基因类型（SEB-SEE）基因的菌株占23.5%,携带新发现的毒素基因SEG、SEH、SEI的菌株只占9.8%。金黄色葡萄球菌病人分离株与食品分离株的耐药谱和耐药率有较大差异。结论：金黄色葡萄球菌食品分离株和病人分离株的肠毒素基因分布不同,其耐药性有明显区别。     

Prevalence of enterotoxin and toxic shock syndrome toxin genes in Staphylococcus aureus isolated from milk of cows with mastitis

Staphylococcus aureus isolated from milk of cows with mastitis were evaluated for the prevalence of 16 enterotoxin genes (sea-see and seg-seq) and toxic shock syndrome toxin gene (tsst-1). Of 78 S. aureus examined, 73 (93.6%) were positive for one or more enterotoxin genes and these were divided into 36 groups by the presence of different enterotoxin genes. Enterotoxin genes including sen (84.6%), sem (71.8%), sei (60.3%) and sed (52.6%) were found frequently, while seg (24.4%), seq (16.7%), seo (12.8%), and seb (1.3%) were found at lower frequencies. Toxic shock syndrome toxin (tsst-1) gene was detected in 20 (25.6%) isolates and was always found in combination with other enterotoxin genes. The majority (88.5%) harbored more than one enterotoxin gene in different combinations. Eight S. aureus isolates (10.3%) were positive for sed, sei, sem, and sen; six (7.7%) possessed sed, seg, sei, sem, sen, and tsst-1; five (6.4%) had sei, sem, and sen; and four (5.1%) had sei, and sen. One isolate was positive for seb along with other SE genes including sed, seh, sem, sen, seq, and tsst-1. None of the isolates carried other enterotoxin genes (sea, sec, see, sej, sek, sel, and sep). PFGE profiles revealed 15 distinct pulsotypes among the 78 S. aureus isolates evaluated. PFGE and enterotoxin gene profiles did not match with each other because a single pulsotype carried different combinations of enterotoxin genes. The majority of S. aureus isolated from milk of mastitic cows carried newly described SE genes sem, sen and sei along with classical SE genes, sed and tsst-1. This is the first report describing the high prevalence of newly described enterotoxin genes, sem and sen in S. aureus from bovine mastitis. The high prevalence of enterotoxin genes and tsst-1 in S. aureus may be important as it is relevant to udder pathogenicity and food hygiene.