3种设门方法在多发性骨髓瘤免疫表型分析中的应用比较

目的探讨CD45/SSC、CD38/SSC及CD45/CD38 3种设门方法在多发性骨髓瘤(MM)免疫表型分析中的应用价值,并分析不同免疫表型与反映MM疾病进展的实验室指标的相关性。方法采用CD45/SSC、CD38/SSC、CD45/CD38 3种设门方法的多色流式细胞术,对20例初诊MM患者浆细胞表面CD138、CD56、CD117、CD13、CD19等的表达情况进行检测,比较不同检测方法间的差异。另仅使用CD38/SSC设门术,对44例初诊MM患者及12例对照组患者浆细胞进行免疫表型检测,分析浆细胞表面各CD抗原表达与反映MM疾病进展指标血红蛋白(Hb)、清蛋白(Alb)、肌酐(Cr)、β2-微球蛋白(β2-MG)、C-反应蛋白(CRP)及乳酸脱氢酶(LDH)的相关性。结果 CD38/SSC、CD38/CD45设门组CD56、CD138表达率均明显高于CD45/SSC组(P0.05),CD38/SSC与CD38/CD45设门间各CD抗原表达率差异无统计学意义(P0.05)。CD138阳性率在CD45/SSC设门组明显低于CD38/SSC及CD45/CD38组(P0.05),余各组间CD抗原阳性率差异无统计学意义(P0.05)。使用CD38/SSC设门术时,MM组与对照组CD56阳性率(70.5%和8.3%)及CD19阳性率(13.6%和100%)间差异有统计学意义(P均0.01)。MM浆细胞典型免疫表型为CD38++CD138+CD56+CD19-,而正常浆细胞为CD38++CD138+CD56-CD19+。CD56+MM患者清蛋白降低的发生率明显高于CD56-MM患者(71.0%vs 38.5%,P0.05),CD13+MM患者比CD13-患者更易出现LDH异常增高(50.0%vs 13.9%,P0.05)。Spearman相关性分析显示,MM患者CD56表达率与Cr水平呈负相关(r=-0.353,P0.05),CD13表达率与LDH水平呈正相关(r=0.359,P0.05),其他CD抗原表达与Hb、Alb、Cr、β2-MG、CRP及LDH水平无明显相关性(P0.05)。结论流式细胞术中采用不同设门方法圈定浆细胞的有效性不同,CD38/SSC及CD45/CD38设门明显优于CD45/SSC设门,常规临床检测可使用CD38/SSC设门技术。MM具有独特的免疫表型特征,选用恰当方法进行免疫表型分析对MM的辅助诊断及预后判断有重要价值。     

CD27抗原在多发性骨髓瘤诊断中的价值

目的:探讨CD27抗原在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)中的表达及其在临床诊断中的价值,以及CD27抗原与患者的临床特征及遗传学异常的相关性。方法:采用8色流式细胞术(FCM)检测123例M M患者骨髓细胞免疫表型,以51例正常的或反应性浆细胞增生患者作为对照。抗体组合包括ckappa-FITC/clambda-PE/CD38-ECD/CD45-PERCP/CD19-PC7/CD27-APC/CD138-BV421/CD56-BV510,采用CD138/CD38设门出浆细胞群后进一步分析CD56、CD19、ckappa、clambda以及CD45的表达,区分异常浆细胞和正常的或反应性浆细胞后,进一步分析CD27的表达率和平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI),阳性率判断标准:≥20%为阳性。同时分析107例MM患者的实验室检查资料并采用荧光原位杂交(FISH)技术检测34例患者1q21扩增、13q14缺失、p53缺失、IGH重排,比较CD27~-M M患者与CD27~+M M患者的临床特征及遗传学异常特点。结果:MM患者中异常浆细胞的CD27~+率为48%(59/123),MFI为31.3±35.6;而正常的或反应性浆细胞CD27~+率为100%(51/51),MFI为93.7±6.3。MM患者中异常浆细胞CD27~+率及MFI明显低于正常的或浆细胞反应性增生的患者(P0.001)。对58例CD27-和49例CD27~+M M患者进行实验室检查发现,反映疾病进展指标如血红蛋白、白蛋白、血清钙、血肌酐及预后相关因素β2-微球蛋白、LDH水平两组比较均无明显差异(P0.05)。同时17例CD27-及17例CD27~+M M患者的1q21扩增、13q14缺失、p53缺失、IGH重排结果亦无显著差异(P0.05)。结论:CD27~-或弱表达高度提示为MM。采用8色流式细胞术,能为良恶性浆细胞疾病的诊断和鉴别诊断提供可靠依据。     

CD319和CD269在多发性骨髓瘤患者免疫分型及微小残留病检测中的意义

目的:探讨CD319和CD269在多发性骨髓瘤(MM)浆细胞中的表达,以及采用CD319替代CD38作为免疫分型和微小残留病(MRD)检测的设门抗原的可行性。方法:使用8色流式细胞仪,CD38/CD138设门检测387例次MM患者骨髓单克隆性浆细胞中CD319和CD269抗原的表达水平,分析抗原表达的稳定性,并比较CD319/CD138和CD38/CD138不同的设门策略对浆细胞比例定量的敏感性及相关性。对照组为同期年龄性别匹配的非恶性血液病患者骨髓53例。结果:387例次MM患者中303例次可检测到单克隆浆细胞,这303例次患者中CD269+者277例次(91.42%),全部CD319+表达(100%)。新诊断(NDMM)和复发进展(RRMM)患者单克隆性浆细胞中CD269的表达水平分别为97.53%(0-99.92%)和94.96%(0.22%-99.99%),CD319的表达水平分别为99.90%(87.77%-100%)和99.78%(63.12%-100%)。对照组正常浆细胞中CD269和CD319的表达水平分别为97.00%(77.00%-100%)和100%(89.00%-100%)。NDMM、RRMM与对照组3组之间CD269和CD319的表达水平均无明显差异。将取得疗效的患者分为完全缓解、非常好的部分缓解和部分缓解3组,对3组患者进行MRD检测,以CD38/CD138设门,完全缓解组、非常好的部分缓解组和部分缓解组MRD分别为0.76%(0-1.88%)、0.77%(0-4.96%)和1.75%(0.09%-10.90%);以CD319/CD138设门,3组MRD分别为0.57%(0.18%-1.96%)、1.07%(0.12%-4.85%)和1.77%(0.08%-8.22%),两种设门策略检测MRD时浆细胞比例无明显差异,并且所得结果具有较好的相关性(r=0.808,P0.05)。另对4例应用CD38单克隆抗体(DARA)治疗的患者,观察到治疗后CD38表达水平均出现下调甚至转阴,当MRD极低水平时采用CD38/CD138设门可出现MRD假阴性,而以CD319/CD138设门则均检测出MRD+。结论:CD319和CD269稳定而持续表达于不同疾病阶段MM患者浆细胞中,CD319可作为替代设门抗原用于免疫分型及MRD检测,尤其适合于DARA治疗后MRD检测,CD269适合于BCMA-CART治疗前检查。     

多发性骨髓瘤患者免疫表型特征分析

目的:探讨初诊多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者免疫表型特征在诊断中及预后的应用价值。方法:采用流式细胞仪多参数直接免疫荧光技术,CD45/SSC设门,对34例初诊多发性骨髓瘤患者的浆细胞表面CD38、CD138、CD19、CD20、CD28、CD56、CD117及胞内抗原c Kappa、c Lambda进行检测。同时对10例对照组浆细胞反应性增多患者的浆细胞进行免疫表型检测。比较异常浆细胞和正常浆细胞免疫表型情况。根据临床检测β2-微球蛋白(β2-MG)及血清白蛋白(Alb)进行分期,经预后分期,比较Ⅱ期、Ⅲ期MM患者的抗原免疫表型情况。分析浆细胞表面CD56表达与反映MM疾病进展指标β2-微球蛋白(β2-MG)、乳酸脱氢酶(LDH)、血清白蛋白(Alb)、肌酐(Cr)、血钙(Ca2+)、血红蛋白(Hb)、血小板计数(PLT)的相关性。结果:异常浆细胞高表达CD38(100%)、CD138(94.1%),而CD56+(67.6%)、CD117+(29.4%)、CD19+(5.8%)、CD20+(14.7%)、CD28+(17.6%)、CD45+(14.7%)及单克隆轻链表达(97%)相对常见。MM组与对照组CD56阳性率(67.6%vs10%)、CD19阳性率(5.8%vs 100%)及CD45阳性率(14.7%vs 100%)间差异有统计学意义(P均0.01)。MM浆细胞典型免疫表型为CD38++CD138+CD56+CD19-CD45-/dim,而正常浆细胞为CD38++CD138+CD56-CD19+CD45+。经预后分期,Ⅱ期、Ⅲ期患者抗原CD45、CD38、CD138、CD56、CD19、CD117、CD20、CD28表达间差异均无统计学意义(P均0.05)。MM患者CD56阳性率与LDH水平呈负相关(P0.01);与血小板计数(PLT)水平呈正相关(P0.01)。结论:MM具有独特的免疫表型特征,通过流式细胞术进行免疫表型分析对MM的诊断及预后判断有重要价值。     

37例CD45阳性的多发性骨髓瘤浆细胞免疫学表型特征

目的通过分析CD45阳性(CD45~+)多发性骨髓瘤(MM)浆细胞的免疫表型特征及其与CD45阴性(CD45-)MM浆细胞免疫表型的区别,探讨CD45表达与MM临床特征的相关性。方法回顾性分析192例初诊MM患者浆细胞的免疫表型,收集2个组的相关临床信息及实验室数据进行比对研究。结果根据浆细胞CD45的表达情况将192例MM患者分为CD45~+MM组(37例,浆细胞的CD45平均表达荧光强度102)和CD45-MM组(155例)。CD45~+MM组浆细胞CD138、CD38、CD19、CD56、CD20、CD71、CD117、CD33的阳性率分别为83.8%、97.3%、32.4%、64.9%、21.6%、51.4%、35.1%、24.3%;胞浆κ轻链和λ轻链的阳性率均为45.9%,有8.2%不表达轻链。2个组浆细胞CD19、CD71和CD138的阳性率差异有统计学意义(P0.05);其他抗原的阳性率及胞浆轻链的表达差异均无统计学意义(P0.05)。结论 CD45~+MM患者浆细胞CD19和CD71阳性率明显升高,而CD138阳性率明显降低,推测其分化阶段可能处于浆细胞的偏早期。     

流式细胞术在多发性骨髓瘤诊断中的应用

目的探讨流式细胞术免疫分型在多发性骨髓瘤（MM）诊断中的价值。方法应用多参数流式细胞仪检测35例MM和10例继发性单克隆免疫球蛋白血症骨髓细胞免疫表型。结果 35例MM患者表达CD38、CD138强阳性,平均荧光强度（MFI）分别为695.2±120.69、56.23±436.2。CD45阴性或弱阳性。33例MM患者CD19阴性。32例MM患者表达CD56强阳性,MFI为779.9±241.0。10例继发性单克隆免疫球蛋白血症患者表达CD38、CD138强阳性,MFI分别为621.3±82.8、549.6±132.7。CD45表达均阳性。8例患者CD19阳性。CD56均阴性,MFI为24.61±13.1。MM患者CD44表达荧光强度明显高于继发性单克隆免疫球蛋白血症（P〈0.01）。结论应用多参数流式细胞仪检测细胞表面CD38、CD138、CD19、CD56、CD45、CD44抗原表达情况,可方便区分骨髓瘤和良性浆细胞,是MM的重要诊断依据。     

多参数流式细胞术测定多发性骨髓瘤细胞免疫标记的研究

本研究探讨多发性骨髓瘤(MM)的免疫表型特征及其意义。采用多参数流式细胞术直接免疫荧光技术,CD38/SSC设门,对33例MM患者及12例浆细胞反应性增多症患者的骨髓标本进行免疫分型检测,并辅以瘤细胞的形态学检查。结果表明:形态学检查观察到瘤细胞比例为6.0%-76.0%;流式细胞术CD38/SSC设门后可见到一群CD38强阳性细胞,比例为0.99%-57.54%;多数MM细胞表型为CD38st+CD138+CD19-CD56+(78.8%),部分患者伴有CD20(12.1%)、CD33(15.2%)、CD117(30.3%)、HLA-DR(9.1%)抗原表达,其余抗原表达均为阴性;27例(81.8%)MM患者检测到cκ或cλ的单克隆限制性,其余cκ及cλ均为阴性。结论:利用CD38/SSC设门方法的流式细胞术对MM进行免疫分型,根据细胞表面抗原的异质性,可鉴别良性或恶性浆细胞,为判断预后及靶向治疗提供依据。     

多发性骨髓瘤流式细胞术免疫表型及微量残留病研究

目的 探讨MM细胞免疫表型特征及MRD检测的临床意义.方法 应用多参数流式细胞术检测16名健康对照者和172例MM患者的免疫表型.32例MM患者缓解后作MRD分析,同时进行跟踪随访,分析MRD阳性和阴性对MM患者的复发率和无病生存时间是否存在影响.结果 流式细胞术检测结果显示,16名健康对照者正常浆细胞CD38、CD 138、CD19、CD45均阳性,172例MM患者骨髓瘤细胞主要免疫表型为CD+38 172例(100.0%)、CD+138172例(100.0%)、CD-19 167例(97.1%)、CD+56 152例(88.4%)、CD-45 166例(96.5%),骨髓瘤细胞具有显著的特征性表型,即CD+38、CD+138、CD+56、CD-19、CD-45.32例MM患者缓解后进行MRD检测,其中14例MRD阴性,18例MRD阳性.随访2～16个月后,MRD阴性组4例复发(28.6%),MRD阳性组13例复发(72.2%),两组复发率比较,差异有统计学意义(χ2=6.03,P＜0.05).MRD阴性组累积无病生存时间中位数16.23(10.37～21.62)个月,明显长于MRD阳性组的10.07(3.79～16.20)个月,两组比较差异有统计学意义(χ2=7.53,P＜0.05).结论 MM患者骨髓瘤细胞主要免疫表型特征是CD+38、CD+138、CD1-19、CD-45、CD+56.多发性骨髓瘤MRD检测可以作为临床预后的参考指标.

Abstract：

Objective To investigate the characteristics of immunophenotyping and clinical significance of MRD analysis in MM patients. Methods Multi-parameter flow cytometry was applied to analyze the immunophenotyping of malignant plasma cells from 172 MM patients, and normal plasma cells from 16 healthy individuals. MRD was analyzed in 32 MM patients with remission. Meanwhile, the effects of MRD status on the disease relapse and patient disease free survival ( DFS ) time was evaluated by following up patients. Results The immunophenotyping of normal plasma cells were CD38, CD138, CD19 and CD45 positive, while the predominant phenotype of MM cells were CD+38( 100.0% ), CD+138( 100.0% ), CD-19 ( 167/172, 97. 1% ), CD+56( 152/172, 88.4% ) and CD-45( 166/172, 96. 5% ). The characteristic markers for MM cells were CD+38, CD-138, CD-19, CD-45 and CD+56. MRD analysis revealed that, among 32 MM patients with remission, 14 patients were MRD negative and 18 patients were MRD positive. During follow-up of 2 to 16 months, the relapse rate in MRD negative patients was significantly lower ( 4/14, 28.6% ) than that of MRD positive patients ( 13/18, 72. 2% ;χ2 =6. 03, P ＜0. 05 ). Furthermore, the DFS time was significantly longer in MRD negative patients[ 16. 23( 10. 37-21.62 )months ] than that of the MRD positive patients [ 10. 07( 3. 79-16. 20 )months,χ2 =7. 53,P ＜0. 05 ]. Conclusions CD+38, CD+138, CD-19, CD-45 and CD+56 are the characteristic markers of MM cells compared to those of the normal plasma cells. MRD analysis is a valuable prognostic factor for MM patients.     

单核细胞HLA-DR和CD16检测在炎症性疾病中的应用价值

目的探讨单核细胞人白细胞抗原-DR (HLA-DR)和CD16检测在炎症性疾病中的应用价值。方法选取炎症性疾病患者56例,以体检健康者40名作为正常对照组。采用流式细胞术检测所有对象外周血单核细胞HLA-DR和CD16表达量[HLA-DR平均荧光强度(MFI)、CD16 MFI]、阳性细胞百分比(HLA-DR+%、CD16+%)及阳性分子的MFI(HLA-DR+MFI、CD16+MFI),并分析单核细胞HLA-DR、CD16表达与白细胞各项指标[中性粒细胞绝对数(NEUT#)、中性粒细胞百分数(NEUT%)、淋巴细胞绝对数(LYMPH#)、淋巴细胞百分数(LYMPH%)、单核细胞绝对数(MO#)、单核细胞百分数(MO%)及中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)]之间的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估单核细胞HLA-DR、CD16诊断炎症性疾病的价值。结果炎症性疾病组NEUT#、NEUT%、MO#及NLR均明显高于正常对照组(P0.01),而LYMPH#和LYMPH%均明显低于正常对照组(P0.01)。炎症性疾病组单核细胞HLA-DR MFI、HLA-DR+%及HLA-DR+MFI均明显低于正常对照组(P0.01),而单核细胞CD16 MFI、CD16+%及CD16+MFI均明显高于正常对照组(P0.01)。单核细胞HLA-DR+%、HLA-DR MFI、HLA-DR+MFI、CD16 MFI和CD16+MFI与NEUT#、NEUT%、LYMPH#、LYMPH%、NLR、MO#均相关(P0.01),与MO%无相关性(P0.05);单核细胞CD16+%与NEUT#、LYMPH#、LYMPH%、NLR、MO#、MO%相关(P0.05),与NEUT%无相关性(P0.05)。ROC曲线分析显示,单核细胞HLA-DR+%、HLA-DR MFI、HLA-DR+MFI、CD16+%、CD16 MFI和CD16+MFI诊断炎症性疾病的曲线下面积(AUC)分别为0.944、0.944、0.924、0.722、0.911、0.979。结论单核细胞HLA-DR和CD16可用于炎症性疾病的诊断,还可作为辅助评估炎症反应程度及监测机体免疫状态的指标。     

CD138/Syndecan-1在多发性骨髓瘤免疫表型中的意义

为了建立多发性骨髓瘤（MM）免疫分型的测定方法,分析各种抗原的表达特点,并分选高纯度原代骨髓瘤细胞,应用CD45/侧向角（SSC）设门的三色免疫荧光流式细胞术（FCM）测定18例MM患者、20例急性白血病（AL）患者和7例正常人骨髓免疫分型特点;应用抗CD138和免疫磁珠从MM患者的骨髓中分选骨髓瘤细胞.结果表明：骨髓瘤细胞CD45阴性或弱阳性,SSC介于有核红细胞和中性粒细胞之间,CD138和CD38均阳性,T、B细胞及髓系抗原多为阴性,CD56阳性率为83.3%,HLA-DR阳性率为44.4%.与MM患者相比,AL患者CD138均阴性,而CD38为100%阳性,CD56阳性率为25%.正常人CD138和CD56均为阴性.磁珠分选获得的原代骨髓瘤细胞纯度在73%-95%之间,平均为86%.结论：CD45/SSC设门的三色免疫荧光FCM是测定MM免疫分型的稳定可靠方法,CD138是骨髓瘤细胞表面较为特异的抗原标志,应用抗CD138和免疫磁珠可以获得高度富集的原代骨髓瘤细胞.     

艾滋病相关淋巴结病中浆细胞的变化与分析

目的 探讨艾滋病相关淋巴结病中浆细胞的变化与艾滋病患者机体免疫和病理发展变化的关系.方法 采用免疫组织化学法检测10 例艾滋病相关淋巴结病患者淋巴结组织中CD138、CD21、Ki-67 的表达情况.结果 (1)艾滋病相关淋巴结病中,CD138 +浆细胞在淋巴结各区域广泛表达,HIV+组高于HIV-组(P ＜0.05).(2)CD138 +浆细胞在艾滋病相关淋巴结病各个时期呈倒"V"字形发展变化过程.(3)艾滋病相关淋巴结病中CD138 +浆细胞数与CD4 数呈显著负相关(r ＝-0.77,P ＝0.009).(4)在艾滋病相关淋巴结病中有5%的CD138 +浆细胞表达Ki-67.结论 浆细胞与艾滋病相关淋巴结病的发生发展密切相关.     

52例多发性骨髓瘤患者细胞免疫表型分析

目的探讨52例多发性骨髓瘤患者细胞免疫表型的特点。方法采用流式细胞仪,以CD45/SSC配合CD38+/CD138+联合设门,对52例多发性骨髓瘤患者的骨髓细胞进行CD38、CD138、CD19、CD56、CD117、CD200标记检测,并进行骨髓细胞形态学检查。结果流式细胞术检测多发性骨髓瘤患者骨髓细胞中骨髓瘤细胞比例为0.2%～52.9%,而在细胞形态学检查中,发现骨髓瘤细胞比例为2.0%～85.5%,但两种方法检测结果之间具有良好的相关性(R2=0.686 4,P0.05)。多发性骨髓瘤细胞各免疫表型阳性率如下:CD38为100.00%(52/52),CD138为100.00%(52/52),CD19为9.62%(5/52),CD56为80.77%(42/52),CD117为40.38%(21/52),CD200为26.92%(14/52)。其中CD56在两种轻链型和不同类型免疫球蛋白中的表达差异均有统计学意义(P0.05)。结论κ链型患者CD56的阳性率比λ链型低,CD56的阳性率在IgM型中最低。在筛选细胞方面,流式细胞术比细胞形态学更灵敏,但细胞形态学检查的骨髓瘤细胞结果比流式细胞术结果更准确。     

多发性骨髓瘤原代细胞异种移植小鼠模型的建立

目的 利用人多发性骨髓瘤(MM)原代细胞在非肥胖糖尿病/重症联合免疫缺陷(NOD/SCID)小鼠中建立人MM异种移植模型.方法 将2例MM终末期患者骨髓或外周血单个核细胞(MNC)悬液通过尾静脉分别输注给3只NOD/SCID小鼠.每周称量体重,移植2周后以流式细胞术(FCM)检测小鼠外周血中CD45+细胞百分比.当小鼠出现苍白、竖毛、精神萎靡或体重下降20％时,取小鼠脾脏及肝脏行组织病理学检查,FCM检测外周血、骨髓、脾脏和淋巴结细胞悬液中CD45+ CD38+细胞的百分比.结果 来源于病例1和病例2的MNC移植小鼠的平均体重分别自输注MM原代细胞第7周和第5周后开始下降;以对照组小鼠的单个核细胞做阴性设门,分别于移植(26±4)d和(16±4)d后,在病例1细胞来源组和病例2细胞来源组的小鼠外周血中检测到人CD45+ CD38+细胞,且其比例随时间延长而逐渐增高,实验终点时分别达(16.2±3.0)％和(31.3±3.5)％;组织病理大体形态观察发现小鼠脾脏、肝脏及淋巴结均不同程度增大,镜下可见典型的恶性浆细胞浸润;FCM检查骨髓、淋巴结和脾脏细胞表面标志,均发现一群人源CD45+ CD38+细胞.结论 成功建立了人MM原代细胞异种移植的免疫缺陷小鼠模型.     

多发性骨髓瘤免疫表型特征及其临床意义

目的探讨流式细胞术检测多发性骨髓瘤(MM)的免疫表型特征及其临床意义。方法应用多参数流式细胞术(MP-FCM),采用CD138/CD45/SSC设门,检测40例MM患者和20例正常献髓者骨髓细胞免疫表型。结果 MM患者抗原异常表达率由高到低分别为CD45~(dim+/-)(95%)、CD81~(dim+/-)(80%)、CD56~+(70%)、CD27~(dim+/-)(50%)、CD200~(++)(48%)、CD33~+(40%)、CD28~(++)(35%)、CD117~+(18%)、CD19~+(5%)和CD20~+(3%)。CD56+、CD200~(dim+)、CD28~(dim+)在正常浆细胞的表达率分别为10%、10%和5%。结论应用MP-FCM检测MM细胞免疫表型,可准确地鉴别良恶性浆细胞,有助于MM的诊断、预后判断及靶向治疗。     

T淋巴细胞亚群失衡与全身型重症肌无力临床症状加重及缓解的相关性研究

目的:观察全身型重症肌无力(myasthenia gravis, MG)患者血中T淋巴细胞亚群百分比的变化,分析其与患者症状加重或缓解间的关系。方法:采用流式细胞术分别检测51例全身型MG患者在病情加重及缓解的不同时期外周血中T淋巴细胞亚群百分比的变化,分析其与症状波动之间的关系,另设30名健康体检者为对照组。结果:加重期MG患者血中的CD4+CD25+CD127low/-调节性T淋巴细胞和CD4+CD45RA+原始T淋巴细胞百分比均明显低于对照组(5.54%±1.88%比7.95%±3.45%,P0.05;11.42%±6.97%比24.98%±7.86%,P0.05);而MG患者加重期血中的CD4~+CD45RO~+T淋巴细胞百分比高于缓解期及对照组(35.06%±8.78%比30.82%±8.43%;35.06%±8.78%比30.09%±7.53%,P均0.05)。采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)分析淋巴细胞百分比在MG诊断中的价值,患者血中的CD4~+CD25~+CD127~(low/-)调节性T淋巴细胞和CD4+CD45RA+T淋巴细胞诊断全身型MG发病的ROC曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.713和0.900(P0.05);CD4~+CD45RO~+T淋巴细胞诊断MG症状加重的AUC为0.675,其最佳临界值为32.06%。结论:检测调节性T淋巴细胞和CD4~+CD45RA~+T淋巴细胞百分比对全身型MG的发病具有一定诊断价值,而CD4~+CD45RO~+T淋巴细胞百分比与全身型MG患者的症状波动相关,有可能成为衡量其病情变化的标志物。     

逻辑设门方法在B-ALL免疫表型检测中的作用

目的评价逻辑设门白血病细胞方法在B-ALL免疫表型检测中的应用。方法采用FSC-SSC和CD45-SSC逻辑设门方法识B-ALL患者白血病细胞,分析其免疫表型,并与CD45-SSC设门方法进行比较。结果逻辑设门法检测白血病细胞阳性细胞百分率高于CD45-SSC设门法,两种设门方法结果有显著性差异。18例B-ALL患者中(阳性标本数/总标本数)CD19+100%、CD19+CD10+88.9%、CD34+94.4%、HLA-DR+88.9%。B系伴CD13+变异型33.3%,伴CD33+变异型11.1%。结论逻辑设门方法在B-ALL免疫表型分析中优于CD45-SSC法。     

逻辑设门方法在B-ALL免疫表型检测中的作用

目的评价逻辑设门白血病细胞方法在B-ALL免疫表型检测中的应用.方法采用FSC-SSC和CD45-SSC逻辑设门方法识B-ALL患者白血病细胞,分析其免疫表型,并与CD45-SSC设门方法进行比较.结果逻辑设门法检测白血病细胞阳性细胞百分率高于CD45-SSC设门法,两种设门方法结果有显著性差异.18例B-ALL患者中(阳性标本数/总标本数)CD19+100%、CD19+CD10+88.9%、CD34+94.4%、HLA-DR+88.9%.B系伴CD13+变异型33.3%,伴CD33+变异型11.1%. 结论逻辑设门方法在B-ALL免疫表型分析中优于CD45-SSC法.     

CD7和(或)CD56阳性急性髓系白血病患者干细胞表型分析及在微量残留病检测中的意义

目的 探讨CD7和(或)CD56阳性急性髓系白血病(AML)干细胞免疫表型特点及微量残留病(MRD)与白血病干细胞LSC的关系.方法 采用四色流式细胞术,以4～6组四色抗体组合检测51例CD7+和(或)CD56+及CD34+CD38+初治AML患者(除外M3)白血病细胞免疫表型,并检测CD34+CD38-Lin-LSC中CD123、CD90、CD117、CD7和CD56的表达.以28名正常人骨髓作为对照,以CD34+CD38+细胞同时表达CD7和CD56作为白血病细胞标志,对26例CD7+和(或)CD56+AML患者的53份标本进行MRD监测.结果 CD7+和(或)CD56+初治AML患者CD34+CD38+细胞和CD34+CD38-Lin-干细胞中,CD7+细胞相对比例分别为(77.39±20.71)%,(44.57±22.70)%,CD56+细胞分别为(56.71±32.56)%,(33.51±29.64)%,均明显高于正常对照(P＜0.01和P＜0.05).CD34+CD38-Lin-干细胞中低表达CD90(P＜0.01),高表达CD123(P＜0.01);CD117的表达和正常对照相比差异无统计学意义(P＞0.05).在随访的CD7+和(或)CD56+患者中,MRD阳性组CD34+CD38-Lin-亚群中CD7和(或)CD56表达的相对比例和实际比例增高的患者比例明显高于MRD阴性组,CD7+细胞实际比例增高的患者分别为71%(21例中15例)与16%(25例中4例)(P=0.001),相对比例增高的患者分别为81%(21例中17例)与24%(25例中6例)(P=0.000).CD56+细胞实际比例增高的患者分别为100%(4例)与12%(25例中3例)(P=0.001),相对比例增高的患者分别为75%(4例中3例)与20%(25例中5例)(P=0.031).CD7+AML患者中初治时CD7+CD34+CD38-Lin-细胞亚群实际比例高的患者治疗后较易出现MRD(P＜0.05).结论 CD7和CD56在AML患者的异常表达发生在AML细胞分化的早期阶段,治疗后CD34+CD38-Lin-干细胞中CD7+和CD56+细胞比例高的患者易出现MRD.     

不同预后分层的多发性骨髓瘤患者免疫表型特征分析

本研究探讨不同预后分层的初诊多发性骨髓瘤患者的免疫表型特点。采用流式细胞仪多参数直接免疫荧光技术,CD45/SSC和CD38/SSC联合设门,对62例初诊的多发性骨髓瘤患者骨髓标本标记CD45、CD38、CD138、CD56、CD19、CD117、CD13、CD20、CD22、CD34、Kappa和Lambda进行检测,并通过ISS分期及细胞遗传学特征进行预后分层,分析和比较不同预后分组患者的免疫表型特点。结果显示：异常浆细胞均表达CD138（100%）及CD38（100%）,而CD19^＋（6.5%）,CD45^＋（22.6%）,CD56^＋（59.6%）及单克隆轻链抗原表达（82%）相对常见,其他CD117^＋（27.4%）,CD13^＋（17.7%）,CD20^＋（16.1%）存在个体差异;经预后分层后显示,标高、高危组CD56表达率低于低危组（P=0.02）,而CD117表达率高于低危组（P=0.011）。结论：多发性骨髓瘤免疫表型具有异质性,在初诊的中、高危患者中CD56表达较低,而CD117表达较高,这可能与不良预后相关。     

多发性骨髓瘤免疫表型特征及其意义

本研究探讨多发性骨髓瘤细胞的免疫表型特征及其意义。采用流式细胞仪多参数直接免疫荧光技术、CD45/SSC设门,对31例多发性骨髓瘤患者骨髓瘤细胞标记CD138、CD38、CD56、CD117、HLA-DR、CD3、CD7、CD13、CD33、CD19、CD20、CD22、CD34进行检测,并辅以瘤细胞的形态学检查。结果表明:形态学检查观察到瘤细胞比例为10%-68%,CD45/SSC设门证实可疑瘤细胞比例为9.72%-67.77%;抗原阳性表达比例分别为CD13861.29%,CD38 100%,CD56 46.15%,CD13 70.00%,CD33 29.03%,HLA-DR74.19%,CD117 33.33%,其余抗原均为阴性表达。结论:CD45/SSC设门技术可以较准确地设定需要分析的多发性骨髓瘤细胞群,与形态学分类瘤细胞的比例相接近;瘤细胞以表达CD138、CD38、CD56抗原为主,部分患者可伴有髓系抗原CD13、CD33、CD117表达,有关这些抗原表达的生物学意义尚待进一步研究。