流式细胞术在多发性骨髓瘤中的应用

多发性骨髓瘤(MM)是以骨髓中克隆性浆细胞恶性增殖和异常积聚为特征的肿瘤,以浆细胞恶性增殖、溶骨破坏为特征,表现为M蛋白、骨骼破坏、贫血、肾功能受损和免疫功能异常.流式细胞术(FCM)是血液系统疾病的常用检测手段,其在辅助诊断、评估预后以及监测微小残留病灶方面的作用越来越受到关注.     

流式细胞术在多发性骨髓瘤诊断中的应用

目的探讨流式细胞术免疫分型在多发性骨髓瘤（MM）诊断中的价值。方法应用多参数流式细胞仪检测35例MM和10例继发性单克隆免疫球蛋白血症骨髓细胞免疫表型。结果 35例MM患者表达CD38、CD138强阳性,平均荧光强度（MFI）分别为695.2±120.69、56.23±436.2。CD45阴性或弱阳性。33例MM患者CD19阴性。32例MM患者表达CD56强阳性,MFI为779.9±241.0。10例继发性单克隆免疫球蛋白血症患者表达CD38、CD138强阳性,MFI分别为621.3±82.8、549.6±132.7。CD45表达均阳性。8例患者CD19阳性。CD56均阴性,MFI为24.61±13.1。MM患者CD44表达荧光强度明显高于继发性单克隆免疫球蛋白血症（P〈0.01）。结论应用多参数流式细胞仪检测细胞表面CD38、CD138、CD19、CD56、CD45、CD44抗原表达情况,可方便区分骨髓瘤和良性浆细胞,是MM的重要诊断依据。     

多参数流式细胞术测定多发性骨髓瘤细胞免疫标记的研究

本研究探讨多发性骨髓瘤(MM)的免疫表型特征及其意义。采用多参数流式细胞术直接免疫荧光技术,CD38/SSC设门,对33例MM患者及12例浆细胞反应性增多症患者的骨髓标本进行免疫分型检测,并辅以瘤细胞的形态学检查。结果表明:形态学检查观察到瘤细胞比例为6.0%-76.0%;流式细胞术CD38/SSC设门后可见到一群CD38强阳性细胞,比例为0.99%-57.54%;多数MM细胞表型为CD38st+CD138+CD19-CD56+(78.8%),部分患者伴有CD20(12.1%)、CD33(15.2%)、CD117(30.3%)、HLA-DR(9.1%)抗原表达,其余抗原表达均为阴性;27例(81.8%)MM患者检测到cκ或cλ的单克隆限制性,其余cκ及cλ均为阴性。结论:利用CD38/SSC设门方法的流式细胞术对MM进行免疫分型,根据细胞表面抗原的异质性,可鉴别良性或恶性浆细胞,为判断预后及靶向治疗提供依据。     

多参数流式细胞术检测多发性骨髓瘤免疫表型及意义

流式细胞术是研究细胞生物学的重要工具，具有快速、灵敏、客观和重复性好等特点。利用多参数流式细胞术可对多发性骨髓瘤进行细胞免疫表型检测，以及微小残留病的监测等，有助于多发性骨髓瘤的诊断、分型、预后判断及病情监测。     

多参数流式细胞术在多发性骨髓瘤及其微小残留疾病的免疫表型分析

目的探讨多参数流式细胞术(MFC)在多发性骨髓瘤患者初诊和微小残留疾病的检测意义。方法采用多参数流式细胞技术,通过CD138或CD38抗原标记识别74例多发性骨髓瘤患者的浆细胞,联合CD45、CD56、CD19、CD20、CD117表面抗原标记及胞浆Kappa和Lambda轻链鉴别异常骨髓瘤细胞。结果 44例初诊病例中,CD138在可检测的病例中均呈阳性表达,同时CD19阴性,42例病例(95%)CD45阴性或弱阳性,其他表面抗原标记CD38、CD56、CD20、CD117的检测率分别为98%、93%、45%、41%,胞浆Kappa和Lambda轻链均呈限制性克隆型表达。14例病例用于评估初诊及治疗过程中免疫表型的变化,其中11例病例(79%)出现至少1个及以上异常表型的变化,4例(29%)病例化疗后抗原标记荧光强度显著增加,7例(50%)病例荧光强度显著降低。CD45、CD19、胞浆免疫球蛋白轻链为最稳定的标记,未见显著抗原标记的变化,2例CD38(14%)、7例CD56(50%)、4例CD20(29%)及2例CD117(14%)病例呈现显著的抗原密度的变化。30例已治疗病例用于评估MRD的免疫表型,其中25例检测出异常的瘤细胞,5例病例未见显著的限制性轻链克隆型表达,Kappa与Lambda比值在0.5~2,认定MRD阴性。结论流式细胞术用于多发性骨髓瘤的诊断疗效及预后的判断具有重要意义,采用胞浆免疫球蛋轻链的检测可提升微小残留检测的正确性。     

应用流式细胞术评估多发性骨髓瘤预后的研究进展

流式细胞术在多发性骨髓瘤方面的临床应用很为广泛,例如可以应用于与反应性浆细胞增多的区别诊断、疾病进展的监测、疾病预后的评估、微小残留病的监测等等.以流式细胞术为基础的免疫表型克隆分析,促进了更严格的诊断和随访技术的发展.本综述主要是介绍最新的骨髓瘤的恶性浆细胞的免疫表型、最广泛的抗原（如CD19,CD33,CD28,CD45,CD56及CD117）在正常的和恶性的浆细胞的表达的差别.本综述还着重介绍了恶性浆细胞表型和染色体异常之间的相关性,明确多发性骨髓瘤的预后因素.     

30例多发性骨髓瘤的流式细胞分析

目的探讨流式细胞术免疫表面分型在多发性骨髓瘤诊断中的应用。方法采用流式细胞分析的方法,对2005-2011年在南昌大学第一附属医院住院治疗的30例多发性骨髓瘤患者的骨髓标本进行免疫表面分型,实验仪器采用BD三色流式细胞仪。结果 30例患者的骨髓样本中:CD38、CD138、CD19、CD34、CD117、CD56及CD16的阳性检出率依次为96.67%、93.33%、16.67%、26.67%、43.33%、20.00%及30.00%,分析CD38/CD138为双阳性细胞。结论流式细胞分析术可将多发性骨髓瘤细胞准确有效的分型,是多发性骨髓瘤的重要诊断依据。此外多发性骨髓瘤细胞的分型还有助于监测疾病的预后情况。     

多发性骨髓瘤免疫表型流式细胞术研究新进展

多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是一种常见的血液系统恶性肿瘤,以浆细胞恶性增殖、溶骨破坏为特征,表现为M蛋白、骨骼破坏、贫血、肾功能受损和免疫功能异常.通过流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测其免疫表型特点,已经作为血液系统疾病的常用检测手段,在辅助诊断、评估预后以及监测微小残留病灶方面的价值,已经被越来越多的学者认同.本文就将免疫表型分析在MM中的应用进展方面作一个综述,包括流式细胞术在MM中的应用和MM中流式免疫表型的特点.     

多参数流式细胞术检测多发性骨髓瘤免疫表型及意义

流式细胞术是研究细胞生物学的重要工具,具有快速、灵敏、客观和重复性好等特点。利用多参数流式细胞术可对多发性骨髓瘤进行细胞免疫表型检测,以及微小残留病的监测等,有助于多发性骨髓瘤的诊断、分型、预后判断及病情监测。     

应用流式细胞术研究多发性骨髓瘤相关预后因素

应用流式细胞术对多发性骨髓瘤患者外周血中内皮祖细胞、循环内皮细胞、循环骨髓瘤浆细胞以及骨髓中恶性浆细胞相关的多项指标(抗凋亡因子MCL-1、CD45、CD56、CD138)等进行检测,并评估其对多发性骨髓瘤诊断、疗效判断和预后的影响。     

多发性骨髓瘤流式细胞术免疫表型及微量残留病研究

目的 探讨MM细胞免疫表型特征及MRD检测的临床意义.方法 应用多参数流式细胞术检测16名健康对照者和172例MM患者的免疫表型.32例MM患者缓解后作MRD分析,同时进行跟踪随访,分析MRD阳性和阴性对MM患者的复发率和无病生存时间是否存在影响.结果 流式细胞术检测结果显示,16名健康对照者正常浆细胞CD38、CD 138、CD19、CD45均阳性,172例MM患者骨髓瘤细胞主要免疫表型为CD+38 172例(100.0%)、CD+138172例(100.0%)、CD-19 167例(97.1%)、CD+56 152例(88.4%)、CD-45 166例(96.5%),骨髓瘤细胞具有显著的特征性表型,即CD+38、CD+138、CD+56、CD-19、CD-45.32例MM患者缓解后进行MRD检测,其中14例MRD阴性,18例MRD阳性.随访2～16个月后,MRD阴性组4例复发(28.6%),MRD阳性组13例复发(72.2%),两组复发率比较,差异有统计学意义(χ2=6.03,P＜0.05).MRD阴性组累积无病生存时间中位数16.23(10.37～21.62)个月,明显长于MRD阳性组的10.07(3.79～16.20)个月,两组比较差异有统计学意义(χ2=7.53,P＜0.05).结论 MM患者骨髓瘤细胞主要免疫表型特征是CD+38、CD+138、CD1-19、CD-45、CD+56.多发性骨髓瘤MRD检测可以作为临床预后的参考指标.

Abstract：

Objective To investigate the characteristics of immunophenotyping and clinical significance of MRD analysis in MM patients. Methods Multi-parameter flow cytometry was applied to analyze the immunophenotyping of malignant plasma cells from 172 MM patients, and normal plasma cells from 16 healthy individuals. MRD was analyzed in 32 MM patients with remission. Meanwhile, the effects of MRD status on the disease relapse and patient disease free survival ( DFS ) time was evaluated by following up patients. Results The immunophenotyping of normal plasma cells were CD38, CD138, CD19 and CD45 positive, while the predominant phenotype of MM cells were CD+38( 100.0% ), CD+138( 100.0% ), CD-19 ( 167/172, 97. 1% ), CD+56( 152/172, 88.4% ) and CD-45( 166/172, 96. 5% ). The characteristic markers for MM cells were CD+38, CD-138, CD-19, CD-45 and CD+56. MRD analysis revealed that, among 32 MM patients with remission, 14 patients were MRD negative and 18 patients were MRD positive. During follow-up of 2 to 16 months, the relapse rate in MRD negative patients was significantly lower ( 4/14, 28.6% ) than that of MRD positive patients ( 13/18, 72. 2% ;χ2 =6. 03, P ＜0. 05 ). Furthermore, the DFS time was significantly longer in MRD negative patients[ 16. 23( 10. 37-21.62 )months ] than that of the MRD positive patients [ 10. 07( 3. 79-16. 20 )months,χ2 =7. 53,P ＜0. 05 ]. Conclusions CD+38, CD+138, CD-19, CD-45 and CD+56 are the characteristic markers of MM cells compared to those of the normal plasma cells. MRD analysis is a valuable prognostic factor for MM patients.     

树突状细胞在多发性骨髓瘤治疗中的应用前景

利用树突状细胞（ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ,ＤＣ）治疗多发性骨髓瘤（ＭＭ）,从理论和临床实践上具有可能性与可行性。当ＭＭ处于进展期、肿瘤负荷很大时,单用ＤＣ恐难奏效,但对于经过大剂量化疗和外周血造血干细胞移植后的微小残留病灶（ＭＲＤ）,以ＤＣ为基础的免疫治疗可能有很好的临床应用前景。     

3种设门方法在多发性骨髓瘤免疫表型分析中的应用比较

目的探讨CD45/SSC、CD38/SSC及CD45/CD38 3种设门方法在多发性骨髓瘤(MM)免疫表型分析中的应用价值,并分析不同免疫表型与反映MM疾病进展的实验室指标的相关性。方法采用CD45/SSC、CD38/SSC、CD45/CD38 3种设门方法的多色流式细胞术,对20例初诊MM患者浆细胞表面CD138、CD56、CD117、CD13、CD19等的表达情况进行检测,比较不同检测方法间的差异。另仅使用CD38/SSC设门术,对44例初诊MM患者及12例对照组患者浆细胞进行免疫表型检测,分析浆细胞表面各CD抗原表达与反映MM疾病进展指标血红蛋白(Hb)、清蛋白(Alb)、肌酐(Cr)、β2-微球蛋白(β2-MG)、C-反应蛋白(CRP)及乳酸脱氢酶(LDH)的相关性。结果 CD38/SSC、CD38/CD45设门组CD56、CD138表达率均明显高于CD45/SSC组(P0.05),CD38/SSC与CD38/CD45设门间各CD抗原表达率差异无统计学意义(P0.05)。CD138阳性率在CD45/SSC设门组明显低于CD38/SSC及CD45/CD38组(P0.05),余各组间CD抗原阳性率差异无统计学意义(P0.05)。使用CD38/SSC设门术时,MM组与对照组CD56阳性率(70.5%和8.3%)及CD19阳性率(13.6%和100%)间差异有统计学意义(P均0.01)。MM浆细胞典型免疫表型为CD38++CD138+CD56+CD19-,而正常浆细胞为CD38++CD138+CD56-CD19+。CD56+MM患者清蛋白降低的发生率明显高于CD56-MM患者(71.0%vs 38.5%,P0.05),CD13+MM患者比CD13-患者更易出现LDH异常增高(50.0%vs 13.9%,P0.05)。Spearman相关性分析显示,MM患者CD56表达率与Cr水平呈负相关(r=-0.353,P0.05),CD13表达率与LDH水平呈正相关(r=0.359,P0.05),其他CD抗原表达与Hb、Alb、Cr、β2-MG、CRP及LDH水平无明显相关性(P0.05)。结论流式细胞术中采用不同设门方法圈定浆细胞的有效性不同,CD38/SSC及CD45/CD38设门明显优于CD45/SSC设门,常规临床检测可使用CD38/SSC设门技术。MM具有独特的免疫表型特征,选用恰当方法进行免疫表型分析对MM的辅助诊断及预后判断有重要价值。     

流式细胞术在冠心病患者诊疗中的作用研究进展

正冠心病是危害人类健康与生命的心血管疾病,其基本病理变化是冠状动脉血管发生动脉粥样硬化病变而引起血管腔狭窄或阻塞,造成心肌缺血、缺氧或坏死。世界卫生组织将冠心病分为5大类:无症状心肌缺血(隐匿性冠心病)、心绞痛、心肌梗死、缺血性心力衰竭(缺血性心脏病)和猝死5种。临床上又     

CD28表达在初诊多发性骨髓瘤中的临床意义

目的：探讨CD28在多发性骨髓瘤中的表达及其与肿瘤负荷、临床预后的相关性。方法：用流式细胞术对91例新诊断的多发性骨髓瘤患者骨髓标本进行免疫表型分析。根据CD28表达将患者分为CD28+组与CD28-组,比较两组在临床特征、遗传学异常、治疗反应等方面的差异。根据国际分期系统（ISS）进行分期。结果：91例初诊患者中,CD28+组患者31例,CD28-组患者60例;CD28+组ISS-Ⅲ期患者比例为70.97%,高于CD28-组的50.00%(P<0.05);CD28+组患者骨髓浆细胞中位数为41.78(2.00-77.00),高于CD28-组患者的26.92(2.00-92.00)(P<0.05);CD28+组患者β2-微球蛋白水平为6.53(2.11-36.50)mg/L,高于CD28-组患者的5.76(2.00-31.34)mg/L(P<0.05);CD28+组患者不良核型阳性率为70.00%(21/30),高于CD28-组患者的45.00%(27/60)(P=0.025);化疗4个周期后,CD28-组总有效率为86.27%,高于CD28+组的60.00%(P&l...     

3种实验技术在多发性骨髓瘤检测中的应用

目的评估形态学、免疫组化和流式细胞检测技术在多发性骨髓瘤(MM)检测中的应用价值。方法收集新乡医学院第一附属医院2013年9月至2014年5月MM患者30例,采用免疫组化和流式细胞术分析骨髓瘤细胞免疫表型,探讨其表达率与骨髓瘤细胞形态特征及相关检测指标的关系。3种检测方法组间差异采用配对样本t检验,率的比较用χ2检验。结果形态学检测瘤细胞比例在6.00%~95.00%,免疫组化检测瘤细胞比例在9.00%~88.00%,流式细胞检测瘤细胞比例在4.07%~87.42%。形态学与免疫组化、形态学与流式细胞之间差异有统计学意义(P0.05),免疫组化与流式细胞之间差异无统计学意义(P0.05)。结论流式细胞术、免疫组化与形态学3种技术相结合,更有助于MM的诊断及预后判断。     

CD138/Syndecan-1在多发性骨髓瘤免疫表型中的意义

为了建立多发性骨髓瘤（MM）免疫分型的测定方法,分析各种抗原的表达特点,并分选高纯度原代骨髓瘤细胞,应用CD45/侧向角（SSC）设门的三色免疫荧光流式细胞术（FCM）测定18例MM患者、20例急性白血病（AL）患者和7例正常人骨髓免疫分型特点;应用抗CD138和免疫磁珠从MM患者的骨髓中分选骨髓瘤细胞.结果表明：骨髓瘤细胞CD45阴性或弱阳性,SSC介于有核红细胞和中性粒细胞之间,CD138和CD38均阳性,T、B细胞及髓系抗原多为阴性,CD56阳性率为83.3%,HLA-DR阳性率为44.4%.与MM患者相比,AL患者CD138均阴性,而CD38为100%阳性,CD56阳性率为25%.正常人CD138和CD56均为阴性.磁珠分选获得的原代骨髓瘤细胞纯度在73%-95%之间,平均为86%.结论：CD45/SSC设门的三色免疫荧光FCM是测定MM免疫分型的稳定可靠方法,CD138是骨髓瘤细胞表面较为特异的抗原标志,应用抗CD138和免疫磁珠可以获得高度富集的原代骨髓瘤细胞.     

多发性骨髓瘤循环肿瘤浆细胞的免疫表型特征及其临床意义

目的 研究分析多发性骨髓瘤(MM)患者循环肿瘤浆细胞(CTPC)的免疫表型特征及其临床意义.方法 回顾性分析本院75例MM初诊患者的临床资料,采用十色流式细胞术对患者外周血(PB)和骨髓(BM)标本进行免疫表型以及数量相关性检测,将患者分为CTPC阳性组(CTPC+)与CTPC阴性组(CTPC-).结果 CTPC+组C...     

流式细胞术在急性白血病诊断中的应用

流式细胞术(flow cytometry FCM)是一种对处在液体中的细胞或其他生物微粒逐个进行多参数快速定量分析和分选的技术。近十年来流式细胞术已被我国各级医院较广泛采用，主要作用之一是测定血液恶性肿瘤的免疫表型，流式细胞术的免疫分型(FCM—IM)是国际上公认的诊断血液系统恶性疾病一项不可缺少的标准，还可提供指导治疗的相关信息。本就FCM在急性白血病诊断的免疫学基础，急性白血病的免疫分型诊断以及急性白血病微小残留病检测作一综述。