HRP逆行示踪对人工组织神经移植物辅加NRF修复大鼠坐骨神经缺损的评价

目的：用HRP逆行示踪法评价人工组织神经移植物辅加神经再生素修复大鼠周围神经缺损的效果。方法：壳聚糖套管和聚乙醇酸纤维组成人工组织神经移植物并辅加神经再生素，修复大鼠的坐骨神经缺损（10mm)。术后24周时，进行大鼠HRP逆行示踪试验。结果：脊髓及背根神经节中均出现数量不等的被HRP标记的神经元胞体。结论：人工组织神经移植物辅加神经再生素对缺损的神经修复具有良好的桥梁作用和促神经生长作用。     

人工组织神经修复狗坐骨神经缺损后的电生理学检测

目的：利用电生理学指标评价人工组织神经修复狗坐骨神经缺损后的效果。方法：以狗作为实验对象用人工组织神经辅加神经再生素、或自体神经桥接坐骨神经30mm缺损；在术后6个月时，采用在体引导坐骨神经干复合动作电位方法及肌电图的检测。结果：人工组织神经移植和自体神经移植相比再生的坐骨神经干复合动作电位传导速度或肌电图均无显著性差异（P＞0．05）。结论：人工组织神经具有良好的神经再生桥梁作用。     

人工组织神经移植物桥接狗缺损坐骨神经后腓肠肌内琥珀酸脱氢酶表达含量的变化

目的：了解人工骨组织神经移植植物辅加神经再生索桥接狗坐骨神经缺损后相应腓肠肌形态与酶的变化。方法:人工组织神经桥接修复狗的坐骨神经30mm缺损为实验组，自体神经桥接或神经缺损的为对照组I或II.术后6个月时取腓肠肌，按Nitro-BT法显示琥珀酸脱氢酶光镜标本。图像分析仪分析琥珀酸脱氢酶（SDH）染色后灰度值及腓肠肌截面积。结果：实验组腓肠肌SDH的灰度值及截面积均与对照组II有明显差别，而与对照组I无明显差别。结论：人工组织神经修复缺损神经后，重新支配靶器官，使腓肠肌萎缩明显减弱，琥珀酸脱氢酶活性的下降也明显减轻。     

人工组织神经移植物桥接狗坐骨神经缺损后的机体免疫功能反应

目的：观察机体免疫系统对人工组织神经移植物的反应。方法：将人工组织神经移植物桥接到狗的坐骨神经缺损处，并在术前和术后6个月时分别取血，进行淋巴细胞转化试验、E花环试验，同时光镜观察术后6个月时再生神经中白细胞浸润的情况。结果：人工组织神经移植物植入后未见排斥反应产生。结论：人工组织神经移植具有较好的生物相容性。     

PLGA导管修复大鼠坐骨神经缺损的实验研究

目的观察多孔PLGA[poly（1actide-CO-glycolide）]导管修复大鼠坐骨神经缺损的效果。方法健康成年SD大鼠12只，分为自体神经移植组和PLGA导管组。两组动物分别人工造成右侧10mm的坐骨神经缺损后，PLGA导管组采用聚乳酸（polylactic acid，PLA）和聚羟基乙酸（polyglycolic acid，PGA）按75：25的比例制成多孔PLGA管修复坐骨神经缺损。自体神经移植组采用坐骨神经进行桥接。术后4、8、12周，分别行坐骨神经功能指数检测，术后12周行快蓝（Fast Blue）逆行示踪观察背根神经节（dorsal root ganglion，DRG）和脊髓神经元数目及行胫前肌湿质量测量；半薄和超薄切片观察再生纤维数目、直径及髓鞘厚度。结果坐骨神经功能指数比较，术后4周无显著性差异（P〉0．05），但8周和12周有显著性差异（P〈0．05），自体神经组优于PLGA管组。PLGA组DRG及脊髓中快蓝标记的神经元数目及胫前肌湿质量均不及自体神经组，差异有统计学意义（P〈0．05）；单位面积再生有髓纤维数目、直径和髓鞘厚度在PLGA管组与自体神经组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论单用PLGA导管对坐骨神经缺损有一定的修复效果，但不及自体神经。     

羊膜包裹的自体神经-肌复合移植物桥接大鼠坐骨神经缺损

目的： 探讨羊膜包裹的自体神经-变性骨骼肌复合移植物桥接修复大鼠坐骨神经缺损的可行性。方法：Wistar大鼠54只,分别以羊膜包裹的“神经-肌”并联桥（A组）、自体神经 (B组)和变性骨骼肌桥（C组）,桥接10 mm右侧坐骨神经缺损。术后行Fast Blue逆行示踪,神经丝（NF）免疫组织化学和胫前肌湿重、再生纤维数目、直径及髓鞘厚度等检测。结果： A和B组脊髓和背根节荧光标记细胞均多于C组; C组再生神经丝排列稀疏、紊乱,而A和B组稠密、整齐;胫前肌湿重、单位面积再生有髓纤维数目、直径和髓鞘厚度在A与B组比较,差异无显著性(P>0.05);与C组相比,差异均有显著性(P<0.05)。结论：羊膜包裹的自体神经-肌复合移植物能很好地桥接修复大鼠坐骨神经缺损。     

不同损伤模型背根节内p75NTR的表达及其意义

目的：探讨不同损伤模型中背根神经节（dorsal root ganglion，DRG）神经元和胶质细胞中p75NTR免疫产物的变化及其意义。方法：建立单纯坐骨神经损伤、单纯脊髓背索损伤以及合并损伤（脊髓背索损伤前1周损伤坐骨神经）模型，动物被随机分成正常组、单纯坐骨神经损伤组、单纯脊髓损伤组、合并损伤组。从脊髓损伤处嘴侧5mm处注入快蓝（fastblue，FB）以逆行标记DRG中感觉神经元，用免疫荧光组织化学方法观察不同模型中p75NTR在背根节神经元和胶质细胞的阳性产物，并结合FB逆行示踪观察FB阳性神经元中p75NTR的表达。结果：单纯坐骨神经损伤组背根节中胶质细胞源性p75NTR免疫阳性产物较正常组增加，神经元中p75NTR阳性产物较正常组低；单纯脊髓损伤组胶质细胞源性p75NTR免疫阳性产物较单纯坐骨神经损伤组和合并损伤组明显降低；坐骨神经损伤合并脊髓损伤组p75NTR的表达与单纯坐骨神经损伤组相似，在胶质细胞内上调，在神经元内降低，大多数FB标记的感觉神经元p75NTR表达呈阴性，但被p75NTR免疫阳性胶质细胞围绕。结论：不同损伤模型DRG中，p75NTR阳性产物在神经元和胶质细胞中具有明显差异，胶质细胞源性p75NTR可能参与了脊髓损伤后上行传导束的再生。     

胚胎脊髓移植修复周围神经缺损的超微结构及神经通路研究

目的 对胚胎脊髓移植修复周围神经缺损进行可行性研究。方法 手术造成兔双侧坐骨神经缺损,左侧选用胎兔脊髓桥接,右侧为自体神经桥接。分别于术后1、2、3个月部分动物行辣根过氧化物酶（HRP）逆行示踪,其余取移植段组织标本在透射电子显微镜下观察。结果 3组均在脊髓前角发现被标记的神经元细胞;扫描电镜下可胚胎脊髓移植段有大量的正常神经纤维,经统计学处理,其轴突直径、髓鞘厚度与对照侧无显著差异（P＞0．05）。结论 胚胎脊髓移植修复周围神经缺损是可行的。     

自体骨髓间充质干细胞组织工程化神经修复坐骨神经缺损的研究

目的:研究医用人工组织神经移植物与自体骨髓间充质干细胞构建成的组织工程化神经桥接修复周围神经缺损的能力。方法:采用自体骨髓间充质干细胞组织工程化神经桥接毕格犬5cm缺损的坐骨神经,桥接组n=5,缺损组n=5。术后定期观察术肢运动功能情况。术后6月,进行电生理学检测,并对再生神经和靶肌进行形态学观察。结果:桥接组术后6月,组织工程化神经移植物已完全降解,再生神经组织修复了坐骨神经5cm缺损,动物术肢承重能力恢复较好,行走、奔跑或上下楼梯时两后肢比较协调;而缺损组动物术肢难以承重,两后肢运动极不协调。神经三色染色显示,桥接段再生神经纤维密集,形成大量的再生单位。电生理学检测,桥接组术侧均记录到了复合肌动作电位(CMAPs),而缺损组未记录到CMAPs。桥接组腓肠肌无明显萎缩,肌肉三色染色显示胶原纤维增生不明显。缺损组腓肠肌明显萎缩,胶原纤维增生明显。结论:自体骨髓间充质干细胞组织工程化神经桥接5cm坐骨神经缺损术后6月,再生神经修复了缺损,并在形态和生理功能上都得到了明显的恢复,靶肌实现了神经的重支配,动物术肢的运动功能取得了明显恢复。     

BDNF在脱细胞同种异体神经移植物修复神经缺损后不同组织中的表达

目的探讨脱细胞同种异体神经移植物(ANA)修复大鼠坐骨神经缺损后促神经再生的分子作用机制。方法将36只Wistar大鼠随机分成6组:正常对照组,自体移植组,桥接2,4,8,12周组,每组6只,分别观测患侧L4脊髓及胫前肌内脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白及mRNA表达。结果ANA桥接大鼠坐骨神经缺损后2周患侧脊髓内BDNF表达增高,4周时达高峰,持续到8周,然后逐渐降低,12周时仍显著高于正常对照组,与自体移植组相比无差异。而患侧胫前肌最初4周内逐渐降低,然后逐渐升高,12周时达到正常水平,与自体移植组相比无差异。BDNF mRNA的表达基本与蛋白表达一致。结论ANA具有良好的组织相容性,也许可替代自体神经修复大鼠坐骨神经长距离缺损,此作用可能与上调脊髓BDNF蛋白及mRNA表达有关。     

狗坐骨神经荧光素及辣根过氧化物酶逆行追踪实验研究

目的：确定狗周围神经逆行示踪试验的最佳示踪剂及示踪时间。方法：用快蓝（ＦＢ）、碘化丙啶（ＰＩ）及辣根过氧化物酶（ＧＲＰ）注射于正常狗坐骨神经,选择不同时间观察脊髓及相应脊神经背根神经节的神经元。结果：１４天时神经元胞体开始出现ＦＢ,随后荧光逐渐加强和阳性标记细胞逐渐增多;而ＰＩ及ＨＲＰ追踪组,仅少量胞体中出现很细的ＨＲＰ未能观察到ＰＩ。结论：狗的周围神经逆行示踪试验最好选择易溶解、激发波长较短的荧     

神经再生素对神经细胞生长影响的实验研究

目的：探讨神经再生素（NRF）对离体培养的PC12细胞、背根神经节细胞、大脑皮层细胞生长影响的分子生物学机制。方法：采用细胞体外培养、半定量RT-PCR、Western blot方法，观察和比较NRF组（添加NRF）、NGF组（添加NGF）和空白对照组（基础培养基）中细胞生存状况及相关基因mRNA及其蛋白水平的表达变化。结果：NRF作用于离体培养的PC12细胞，可促使其分化；作用于背根神经节细胞，GAP-43和NF-L mRNA表达在不同时间呈不同程度的上调；作用于大脑皮层细胞，GAP-43和NF蛋白亦比对照组表达量为高。结论：NRF具有维持细胞生存和促进神经细胞突起生长的作用，并可使神经元GAP-43和NF mRNA表达及其蛋白合成上调。     

HRP法对几丁质桥接周围神经缺损的评价

作者首次应用几丁质作为一种新型生物材料桥接大白鼠坐骨神经缺损的实验研究,采用HRP 逆行示踪法对桥接术后8周大白鼠进行了鉴定,结果表明,几丁质桥接的大白鼠坐骨神经缺损在术后8周近侧端的再生神经纤维通过几丁质再生室长入远端的神经干中,比肌桥提前了4周。     

β1,4-GalT I在大鼠坐骨神经损伤后脊髓和背根神经节中的表达

目的:观察β1,4-GalTImRNA在坐骨神经损伤后相应节段脊髓和背根神经节中的表达变化。方法:采用real-timePCR方法,分析β1,4-GalTImRNA在大鼠坐骨神经损伤后相应脊髓和背根神经节中的表达变化。运用原位杂交检测β1,4-GalTI在脊髓和背根神经节中的定位情况。结果:Real-timePCR显示,与正常脊髓和背根神经节相比,β1,4-GalTI在坐骨神经损伤后发生表达变化。原位杂交结果显示β1,4-GalTI在正常脊髓中的表达较弱,主要表达于脊髓灰质中,而损伤后在灰质和白质中均可见有大量的阳性信号。β1,4-GalTI在背根神经节中则主要定位于神经元。结论:本实验发现β1,4-GalTI在正常脊髓和背根神经节中有表达,并在坐骨神经损伤后发生表达变化。提示β1,4-GalTI在周围神经损伤后再生和退变过程中可能发挥一定的作用。     

交变磁场对大鼠坐骨神经再生的影响

为研究交变磁场对大鼠坐骨神经横断损伤后再生修复的影响，切除２４只大鼠双侧坐骨神经股部的一部分，用硅管桥接神经两断端，其间距６ｍｍ，术后将大鼠随机分为实验组和对照组。实验组大鼠置于强度为０．５ｍＴ的交变磁场中饲养，分别于术后２、４、１６周观察神经再生状况。结果显示，术后２周可测出实验组再生神经冲动传导潜速率；用ＣＢ－ＨＲＰ逆行示踪在相应脊髓节段能标记出神经元胞体；术后４周和１６周，实验组大鼠坐骨神经传导潜速率明显快于对照组（Ｐ＜０．００１）。图像分析显示，实验组的再生神经轴突直径、髓鞘厚度和再生神经血管面积明显优于对照组；电镜下见实验组再生神经比对照组有较多的微丝、微管和线粒体。表明交变磁场可促进大鼠缺损的坐骨神经再生     

枸杞多糖对大鼠坐骨神经离断后神经生长因子表达的影响

目的研究枸杞多糖对大鼠坐骨神经离断后神经生长因子（NGF）表达的影响。方法雌性SD大鼠72只,随机分成空白对照组、模型组与枸杞多糖（LBP）组,每组24只,后两组切除右侧坐骨神经2cm,LBP组腹腔注射枸杞多糖10mg/（kg.d）,模型组给予相同剂量生理盐水,分别于给药后第7、14、21和28d取坐骨神经离断的近端神经及相连背根神经节和相对应的脊髓（每组6只）,应用免疫组织化学方法分析神经生长因子表达的变化。利用Image-proplus6.0图像分析系统进行半定量分析。结果模型组和LBP组的坐骨神经及相连背根神经节和相应的脊髓NGF免疫组化平均光密度高于空白对照组,LBP组坐骨神经、脊神经节及脊髓中的NGF免疫组化平均光密度在术后第7、14、21、28d均低于模型组组（P〈0.05）。结论枸杞多糖可抑制大鼠坐骨神经离断后近端及相应的节段神经节和脊髓组织中的神经生长因子量的表达。     

神经损伤与再生中GAP-43mRNA表达和蛋白合成的实验研究

目的：研究周围神经损伤与再生过程中生长相关蛋白（Growth-associated protein,GAP-43)mRNA表达和蛋白质合成的变化规律。方法：建立大鼠坐骨神经中段钳夹损伤模型，用原位杂交和免疫组化技术观察大鼠腰髓和背根神经节的GAP－43mRNA表达和蛋白质合成变化。结果：大鼠坐骨神经损伤后，腰髓腹角运动神经元和感觉神经元GAP－43mRNA表达和蛋白质合成增强。结论：周围神经损伤与再生中GAP-43mRNA表达显著增强，神经再生完成后表达减弱，表明GAP－43在神经再生过程中起重要作用。