胸水细胞蜡块在肺癌诊断和EGFR 基因 检测中的应用研究

目的 探讨胸水细胞蜡块结合免疫组织化学染色技术在肺癌诊断和EGFR 基因检测中的应用 价值。方法 胸水标本常规离心、涂片后,沉渣包埋制成细胞蜡块,结合免疫组织化学染色明确诊断,应 用ARMS-PCR 法检测175 例肺腺癌EGFR 基因突变情况,并与同期活检或手术的305 例肺腺癌组织块的 EGFR 基因突变进行对比。结果 细胞蜡块结合免疫组织化学染色的癌细胞检出率高于常规涂片者（P <0.05）, 且不确定构成比低于后者（P <0.05）。用细胞蜡块与组织块检测EGFR 基因突变的阳性率及男女构成比比较, 差异无统计学意义（P >0.05）。结论 胸水细胞蜡块可作为实体瘤组织的良好替代样品,有助于明确肿瘤类型、 来源,并可用于肺癌的EGFR 基因突变检测,有效指导其分子靶向治疗。     

联合检测细胞蜡块中的napsin A和甲状腺转录因子-1有助于肺腺癌胸水的诊断

目的探讨细胞蜡块免疫组织化学napsin A和甲状腺转录因子-1（TTF-1）的检测对肺腺癌胸水的诊断价值。方法收集48
例有肺腺癌病史胸水的细胞涂片、细胞蜡块切片及对应的免疫组织化学切片,比较细胞涂片和细胞蜡块免疫组化两种方法诊断
肺腺癌阳性率;对免疫指标napsin A和TTF-1诊断肺腺癌价值进行评估。结果细胞蜡块免疫组化诊断肺腺癌阳性率高于细胞
涂片,差异具有统计学意义（84.44% vs 55.56% P<0.05）。TTF-1和napsin A在肺腺癌细胞蜡块中表达率分别为94.74%（36/38）
和78.95%（30/38）,二者在间皮反应增生中均不表达,差异均具有统计学意义（P<0.05）;联合napsin A和TTF-1检测有较高的诊
断价值,其诊断肺腺癌的灵敏度和特异度为97.37%和100%。结论细胞蜡块免疫组织化学napsin A和TTF-1检测较传统细胞
涂片有助于提高肺腺癌胸水诊断阳性率,二者联合检测对肺腺癌胸水有较高的诊断价值。
     

肺结核性及腺癌性胸水SDS-PAGE蛋白图谱分析

目的分析肺结核性及腺癌性胸水SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）图像之图谱特点及异同,为两者的鉴别诊断奠定基础。方法选用28例肺结核性胸水及36例肺腺癌性胸水,每例均以5%浓缩胶和不同浓度（6%、8%、10%、12%、15%）之分离胶行SDS-PAGE分离胸水中蛋白质,考马斯亮蓝染色,AlphaEaseFC Stand Alone图像分析软件分析10%分离胶凝胶图像。结果不同浓度（6%、8%、10%、12%、15%）的分离胶SDS-PAGE图像表明,肺结核性胸水及肺腺癌性胸水经10%SDS-PAGE分离,两者的胸水蛋白在40-200 kD范围内均可稳定分离得到10条蛋白条带。这些条带蛋白质分子量分别为200 kD、152kD、134 kD、118 kD、103 kD、98 kD、84 kD、62 kD、54 kD、43 kD。含量达60%以上的蛋白质分子量在54 kD至84 kD之间。50-60 kD区间的蛋白质含量肺结核性胸水高于肺腺癌性胸水,差异具有显著性。结论10%及12%的分离胶对胸水中的蛋白具有较好的分离效果;经10%的分离胶分离,肺结核性胸水分子量在50-60 kD区间内的蛋白含量高于肺腺癌性胸水,具有鉴别诊断价值。     

胸腹水中提高肿瘤细胞检出率方法的探讨

目的探讨胸、腹水中提高肿瘤细胞检出率的方法。方法收集本院2013年1月~2014年1月期间胸、腹水67例,其中胸水45例,腹水22例,分别进行常规涂片、细胞块连续切片以及细胞块免疫细胞化学染色三种方法的比较,分析三种方法的肿瘤细胞检出率之间的区别。结果细胞块免疫细胞化学染色的肿瘤细胞检出率要高于常规涂片和细胞块连续切片法,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胸腹水进行离心沉淀后制作细胞块,进行免疫细胞化学染色,能明显提高恶性胸腹水的肿瘤细胞检出率。     

直接涂片法与改良法对抗酸杆菌检出率的比较

目的探讨一种简单易行,提高阳性率的胸水涂片抗酸杆菌检查方法。方法采用破坏红细胞改良法和直接涂片法对96例随机采样的胸水标本进行抗酸染色镜检,其中直接涂片法只采用离心沉淀涂片,改良法采用蒸馏水破坏红细胞后取离心沉淀物涂片。结果直接涂片法抗酸染色阳性率为3.13%,破坏红细胞改良法抗酸染色阳性率为10.42%(P<0.05)。结论破坏红细胞改良法抗酸染色阳性检出率相比较直接涂片法有显著性差异,且涂片效果清晰,易于辨认,故其可作为综合性基层医院一种行之有效的检测方法推广应用。     

夹层杯集菌离心涂片法初筛肺结核患者的临床应用价值

目的探讨夹层杯集菌离心涂片法检测抗酸杆菌提高门诊肺结核患者诊断准确率的临床应用价值。方法对1 762例门诊疑似肺结核患者的痰标本同时进行直接涂片法、浓缩集菌涂片法和夹层杯集菌离心涂片法检测抗酸杆菌,比较3种方法对即时痰的阳性检出率;对145例确诊肺结核住院患者的痰标本同时进行浓缩集菌涂片法和夹层杯集菌离心涂片法检测抗酸杆菌,比较2种方法对清晨痰的阳性检出率。结果夹层杯集菌离心涂片法检测门诊即时痰标本抗酸杆菌阳性检出率为15.6%,明显高于浓缩集菌涂片法（9.2%）和直接涂片法（5.9%）（P〈0.05）;同时夹层杯集菌离心涂片法在检测确诊肺结核住院患者的清晨痰标本阳性检出率显著高于浓缩集菌涂片法（P〈0.05）。结论夹层杯集菌离心涂片法检测抗酸杆菌能够有效地提高门诊患者的确诊率,减少肺结核病的漏诊率,为临床医生的诊断治疗提供了重要参考依据。     

免疫组化在诊断胸水转移性肺腺癌的临床应用

目的:探讨免疫组化在诊断胸水转移性肺腺癌的临床应用价值。方法:先后采用常规细胞涂片法和免疫组化法对100例恶性胸腔积液的患者进行诊断,观察比较2种方法对胸水转移性肺腺癌的诊断灵敏度、特异度和准确性。结果:常规细胞涂片法诊断胸水转移性肺腺癌63例,恶性间皮瘤37例;免疫组化法诊断胸水转移性肺腺癌85例,恶性间皮瘤15例,2种方法的诊断灵敏度、特异度和准确率分别为72.4%、100%、76.0%和97.7%、100%、98.0%。2种方法诊断灵敏度和准确率比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论:免疫组化法在诊断胸水转移性肺腺癌方面优于常规细胞涂片法,可作为临床诊断胸水转移性肺腺癌的理想手段。     

支气管肺泡灌洗液腺苷脱氨酶检测对肺结核的临床诊断意义

目的探讨支气管肺泡灌洗液(BALF)中腺苷脱氨酶(ADA)检测在肺结核诊断中的临床价值。方法采用氧化酶法测定56例可疑肺结核患者支气管BALF中ADA含量。结果肺结核组BALF中的ADA浓度(29.48±7.68)U/L明显高于非结核组BALF中的ADA浓度(16.5±7.04)U/L,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 BALF中ADA检测在肺结核的诊断中具有较高的临床应用价值。     

结核性和肺腺癌性胸腔积液中肺表面活性物质相关蛋白A、D的检测分析

目的探讨胸水中肺表面活性物质相关蛋白－A、D联合对原发性肺腺癌性与结核性胸腔积液的鉴别诊断价值。方法收集36例原发性肺腺癌性和28例结核性胸腔积液患者的胸水，采用 western blotting检测胸水中肺表面活性物质相关蛋白-A、D。结果原发性肺腺癌和结核性胸膜炎患者胸水中SP A光密度值分别为265.1±141.16和180.0±64.1；原发性肺腺癌和结核性胸膜炎患者胸水中SP-D光密度值分别为299.9±140.6和206.8±86.8。36例原发性肺腺癌患者中有23例胸水中SP-A＞250，有16例SP-D＞250，而SP-A＞250和（或）SP-D＞250有29例。28例结核性胸膜炎患者胸水中SP-A、SP-D均未超过250。结论肺表面活性物质相关蛋白A对结核性胸膜炎与原发性肺腺癌所致胸腔积液鉴别诊断有临床价值,联合肺表面活性物质相关蛋白D对两者的鉴别诊断更有意义。     

夹层杯集菌离心涂片法检测抗酸杆菌对肺结核诊断的价值

目的探讨夹层杯集菌离心涂片法检测抗酸杆菌对肺结核诊断的意义。方法对614份痰标本同时进行夹层杯集菌离心涂片法与普通痰涂片法检测抗酸杆菌,比较2种方法的检出率。结果夹层杯集菌离心涂片法检测抗酸杆菌阳性率为32.28%,明显高于普通涂片法镜检法的19.87%(P<0.005)。结论夹层杯集菌离心涂片法简单省时、阳性率高,且便于进行质量控制,是一种很有推广价值的检测方法。     

肺结核患者结核抗体与痰涂片检验效果比较

目的 分析肺结核患者结核抗体和痰涂片检验效果.方法 随机抽取160例肺结核患者,分三次收集清晨深咳痰,行痰涂片检测,并采用ELISA法检测患者血清结核抗体,并抽取160例非肺结核患者,均采取痰涂片和结核抗体检验,分析患者检验结果 .结果 160例肺结核患者经痰涂片检测阳性率28.1%,结核抗体检测阳性率80.0%(P<0.01).痰涂片检测特异性为100.0%,结核抗体检测特异性为93.0%;两组对比差异无统计学意义.结论 核抗体对肺结核具有较高的诊断率,较痰涂片更具有应用价值,痰涂片特异性较强,但检出率低,依然可作为诊断肺结核的方法 ,临床应用时最好与其他方法 相结合.     

胸水细胞蜡块在肺腺癌诊断及EGFR/ALK/ROS1基因突变检测中的应用

目的：探索肺腺癌胸水细胞蜡块在肺腺癌病理诊断及EGFR /ALK /ROS1 基因突变检测中的应用价值。方法：选取2017年1月至2021年12月在温州医科大学附属第一医院诊断为肺腺癌的41例患者胸水细胞,采用常规细胞涂片与细胞蜡块切片进行病理HE染色鉴定,并采用NGS及ARMS方法进行EGFR /ALK /ROS1 基因突变检测。结果：恶性胸腔积液（MPE）细胞涂片癌细胞鉴定敏感性为90.2%,假阴性率为9.8%,MPE细胞蜡块癌细胞鉴定敏感性为100%,假阴性率为0;MPE细胞涂片样本EGFR /ALK /ROS1 总体突变率为70.7%（29/41）,其中EGFR 突变率为61.0%（25/41）,ALK 融合基因检出率为7.3%（3/41）,ROS1 融合基因检出率为14.6%（6/41）;MPE细胞蜡块样本中EGFR /ALK /ROS1 总体突变率为73.2%（30/41）,其中EGFR 突变率为68.3%（28/41）,ALK 融合基因检出率为2.4%（1/41）,ROS1 融合基因检出率为4.9%（2/41）;此外,胸水细胞涂片及细胞蜡块的基因突变阳性的肺腺癌患者较未突变肺腺癌患者具有显著增加的总生存率、无进展生存率及疾病控制率。结论：与胸水细胞涂片相比,胸水细胞蜡块肿瘤检出率及EGFR /ALK /ROS1 总体突变率相对更高,可用于指导病理诊断及分子检测的靶向治疗。     

LAMP在临床上诊断肺结核的应用评价

目的探究环介导等温扩增(LAMP)法在临床上诊断肺结核中的应用价值。方法选取2019年5月至2020年3月在本院进行检查的100例疑似肺结核症状的患者,所有患者均经临床确诊后分为肺结核组与非结核病组,各50例。所有患者均行LAMP检测、L-J培养及痰涂片检查。以痰涂片检查作为诊断肺结核金标准,比较LAMP、痰培养在结核分枝杆菌阳性检出率,并分析LAMP、L-J培养在肺结核中的诊断价值。结果50例肺结核组患者中LAMP共检出阳性50例,阳性率为100.00%;L-J培养共检出阳性39例,阳性率为78.00%,LAMP结核分枝杆菌阳性检出率高于L-J培养,差异有统计学意义(P<0.05);LAMP检查在诊断结核中灵敏度、阴性预测值均高于L-J培养,差异有统计学意义(P<0.05);LAMP检查与L-J培养诊断肺结核的特异度、准确度及阳性预测值比较差异无统计学意义。结论LAMP法在诊断肺结核中具有较高的灵敏度,且在结核分枝杆菌中阳性检出率较高,检测过程中具有操作简便、准确率高等优势,可用于结核病早期检测。     

细胞蜡块及免疫组化在肺腺癌癌性胸水诊断中的应用

目的 研究胸水沉渣包埋制成细胞蜡块联合免疫组化检测对肺腺癌癌性胸水与非癌性胸水的诊断及鉴别诊断价值.方法 选取梅州市人民医院2015年1~12月经组织病理确诊的肺原发腺癌伴有胸水的患者57例及炎症性胸水患者36例,采用胸水沉渣包埋制成细胞蜡块,并行甲状腺转录因子1(TTF1)、癌胚抗原(CEA)、天门冬氨酸蛋白酶A(NapsinA)、间皮细胞(MC)、钙结合蛋白(CR)、肾母细胞瘤1(WT1)等6种免疫标记的免疫组化检测.结果 癌性胸水细胞蜡块中肿瘤细胞TTF1、CEA、NapsinA、MC、CR、WT1的阳性表达率依次为89.47%、78.94%、92.98%、17.54%、19.30%及7.54%;炎症性胸水细胞蜡块中间皮细胞TTF1、CEA、NapsinA、MC、CR、WT1的阳性表达率依次为8.33%、13.89%、22.22%、80.56%、97.22%及52.78%.癌性胸水中肿瘤细胞与炎症性胸水中的间皮细胞的免疫组化表达率比较差异均有显著统计学意义(P<0.01).结论 胸水沉渣包埋制成细胞蜡块联合免疫组化检测对肺腺癌癌性胸水的肿瘤细胞与炎症性胸水中不典型间皮细胞的鉴别诊断有重要临床意义.     

肿瘤标志物CEA、CYFRA21-1、NSE在恶性胸水中的应用

目的:探讨胸腔积液患者血清及胸水肿瘤标志物CEA、CYFRA21-1、NSE对肺癌所致恶性胸水的临床诊断价值。方法:收集胸腔积液住院的患者共计158例为研究对象,按组织病理学诊断结果分为实验组97例,其中肺腺癌50例、肺鳞癌37例、肺小细胞癌组10例和对照组61例。检测所有研究对象血清、胸水CEA、CYFRA21-1、NSE表达水平。评估其检测结果对各种类型恶性胸腔积液的诊断价值。采用SPSS14.0软件包,应用非参数检验方法对数据进行统计处理。结果:(1)血清、胸水中三者浓度在恶性胸水中表达均高于结核性(P<0.05),进一步用Nemenyi法多重分析,腺癌、鳞癌组在血清中三者表达水平高于结核性组;而在胸水中只有CEA、CYFRA21-1的表达水平高于结核性(P<0.05)。(2)血清、胸水中三者ROC分别为(0.835、0.802、0.737)、(0.814、0.859、0.757)近似概率均为0.000,均有临床诊断价值。(3)血清与胸水中的CEA、CYFRA21-1、NSE均存在正相关关系,rs分别为0.894、0.756、0.569,差异有统计学意义(P值均<0.05)。结论:血清及胸腔积液中肿瘤标志物CEA、CYFRA21-1、NSE的检测对诊断恶性胸腔积液均具有临床诊断价值。联合检测对其临床诊断价值高于单项检测。     

胸腔积液60例C-反应蛋白及血清癌胚抗原的检测及意义

目的:探讨胸水C-反应蛋白(C-Reactive protein,CRP)、胸水及血清癌胚抗原(CEA)在鉴别诊断结核性胸腔积液及癌性胸腔积液中的价值。方法:同时检测30例结核性胸水患者(结核组)和30例癌性胸水患者(肿瘤组)的胸水CRP水平、胸水及血清CEA水平及比值,并对其结果进行对比分析。结果:结核组胸水CRP水平明显高于肿瘤组(P<0.05),肿瘤组胸水、血清CEA水平及比值明显高于结核组(P<0.05)。结论:胸腔积液CRP的检测及胸水、血清CEA及比值检测对鉴别结核性胸腔积液和癌性胸水具有较大价值。     

组织多肽特异性抗原水平检测对良恶性胸水的诊断价值

目的:探讨血清及胸水中组织多肽特异性抗原(TPS)对良恶性胸水的诊断价值。方法:用酶联免疫吸附分析法(ELISA)测定了32例肺癌患者(肺癌组)和30例结核性胸膜炎患者(对照组)血清及胸水中TPS的水平。结果:肺癌组血清中TPS水平为271.37±94.96U/L,显著高于良性对照组(145.06±77.02U/L)。肺癌组胸水中TPS水平为406.85±103.43U/L,显著高于良性对照组(206.50±157.37U/L)。非小细胞癌(NSCLC)血清TPS水平为302.49±76.09U/L,显著高于小细胞癌(SCLG)组(157.24±66.92U/L);鳞癌血清TPS水平为338.13±82.70U/L,显著高于腺癌组(272.80±57.81U/L)。NSCLC的胸水TPS水平为469.56±81.76U/L,显著高于SCLC组(273.65±123.36U/L),两组比较有极显著性差异(P<0.01)。虽然鳞癌胸水TPS水平(469.56±81.76U/L)高于腺癌胸水TPS水平(441.13±54.46U/L),但无显著性差异(P>0.05)。结论:TPS水平检测对良恶性胸水的鉴别诊断具有重要价值,同时也是鉴别小细胞肺癌和非小细胞肺癌的较好指标之一。     

血常规检验中血液涂片细胞形态学联合全自动血细胞分析仪的应用效果

目的:探讨血常规检验中血液涂片细胞形态学联合全自动血细胞分析仪的应用效果。方法:抽选收治的110例需进行血常规检验的患者作为研究对象,均给予全自动血细胞分析仪、血液涂片细胞形态学检验。比较血红蛋白、红细胞、白细胞检出率以及单核细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞在全自动血细胞分析仪单一检测和全自动血细胞分析仪、血液涂片细胞形态学联合检测中的阳性检出率。结果:全自动血细胞分析仪、血液涂片细胞形态学联合检测血红蛋白、红细胞、白细胞的检出率高于全自动血细胞分析仪单一检测,差异有统计学意义(P<0.05)。全自动血细胞分析仪、血液涂片细胞形态学联合检测单核细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞的阳性检出率高于全自动血细胞分析仪单一检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在血常规检验中,使用全自动血细胞分析仪、血液涂片细胞形态学联合检测,能准确检验患者体内各项细胞、蛋白的水平,提高临床检测准确性。     

SPG20甲基化和EGFR表达在肺腺癌中相关性及临床意义

目的 通过检测肺腺癌组织中SPG20甲基化和EGFR水平,探讨二者在肺腺癌发生过程中的相关性。方法 选取70例肺腺癌癌组织(实验组)和正常肺组织(对照组),通过焦磷酸测序法检测SPG20基因甲基化水平,采用免疫组化(SP)和Western blot法检测SPG20和EGFR蛋白表达水平;统计分析SPG20甲基化水平与EGFR相关性及其二者与临床病例特征(性别、年龄、TNM分期、肿瘤分化程度、吸烟与否、淋巴结转移与否)的相关性。结果 SPG20在癌组织甲基化阳性率为68.57%,高于癌旁正常肺组织(32.86%);免疫组化结果显示EGFR在癌组织中阳性表达为72.86%,显著高于癌旁正常组织的表达(18.57%);肺腺癌组织SPG20阳性率为31.43%,低于癌旁正常肺组织(77.14%),差异有统计学意义(P＜0.05);Western blot法实验显示EGFR在癌组织中表达为76.38%±2.67%,高于癌旁组织23.14%±1.86%;SPG20在癌组织中表达为18.42%±1.34%,高于癌旁组织65.75%±2.47%,差异均有统计学意义(P＜0.05);肺腺癌组织中SPG20甲基化和EGFR具有相关性(相关系数r=1.00,P＜0.05);SPG20甲基化和EGFR与肿瘤TNM分期、组织分化和淋巴结转移密切相关(P＜0.05)。结论 肺腺癌中SPG20甲基化与EGFR具有明显的相关,二者可能共同促进了肺腺癌的发生和发展。     

肺结核患者血清透明质酸测定

目的:探讨肺结核患者血清中透明质酸(HA)的含量变化。方法:采用放射免疫法测定80例肺结核患者和同期健康对照组20例的血清中透明质酸的含量。结果:结核性性胸胰炎浸润型肺结核活动期及慢性纤维空洞型肺结核血清中HA的含量分别为(108.6±82.0)ng/mL、(250.3±125.5)ng/mL和(412.2±201.5)ng/mL明显高于健康对照组的(56.2±12.7)ng/mL(P<0.05或P<0.01);浸润型肺结核稳定期的HA含量为(70.1±24.0)ng/mL与对照组接近,两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:肺结核患者中的HA含量明显高于健康人群,血清HA变化对评价肺结核患者肺组织损害,继发肺间质纤维化具有重要的参考价值。