麻疹病人CD_4T细胞的活化

本文作者以36名（男18，女18）麻疹患儿（平均5．0±0．9岁）为试验对象（其中1名并发肺炎）。对照组为20名健康儿童（10．04±1．3岁）。（1）淋巴细胞培养和悬浮液制备；采血肝素抗凝（10单位／ml）．并用Ficoll－paque密度梯度分离．血浆冰冻至－20℃。PBMC用Hank’s平衡盐水冲洗．并用92．5％小牛血清和7．5％二甲亚砜悬浮，液氮中冰冻备用。使用时用含10mmol／LHEPES．5％热天活小牛血清和50μg／ml庆大霉素的RPMI1640液冲洗两次，并制成5×105／ml的悬浮液、在96孔稀释板（0．2ml／孔）或12×75mm聚苯乙烯试管中（lml’管）中…     

基层常用诊疗和护理技术（1）

1青霉素皮肤过敏试验 1．1试验液配制青霉素皮肤试验液常用浓度为每毫升溶液中含青霉素200U。①用1ml注射器取每毫升含20万u的青霉素溶液0．1ml,加注射用水至1ml（含青霉素2万U）,摇匀;②取上液0．1ml,再加注射用水至1ml（含青霉素2000U）,摇匀。③取②液0．1ml,再加注射用水至1ml（含青霉素200U）,摇匀即成。     

微滴盘培养法进行阴道毛滴虫的常规检查

作者运用微滴盘培养法进行阴道分泌物的培养，来检查明道毛滴虫，结果准确、快速。1液体培养基胰蛋白陈20g，酵母浸膏10g，麦芽糖5．0g，KCl1．0g，KHCO31．0g，KH2PO41．0g，K2HPO40．5g，硫酸亚铁0．1g，维生素C1．0g，蒸馏水900ml，调pH5．8～6．0，加灭活马血清100ml，加入抗生素最终浓度为：青霉素（250XIc‘IU／L）。链霉素250ms／L），硫酸庆大霉素（40ms／L），两性霉素B（10mg／L）。2方法取一块微满盘（共90个地），在每个池内分别加入液体培养基300yi。然后每个池加一个标本（阴道分泌物），量为50pl，放37”C培养24…     

质粒DNA简单快速提取及纯化回收

质位DNA提取的方法较多，每种方法都有各自的优点及局限，由于费时仅力以及议钠等条件的限制使得实验者不甚满意．本文介绍一种简单快速提取及统化回收质位的方法．1材料与方法1．1仪器①电泳仪；②DNA回收相（南京大学生化系产）；③紫外线透射仪，④台式高速高心机．1．2试剂①LB培养基（tryl）tO。10yL，yysttX－tract5g几，NaCI109／L调PH7．4后高压灭菌），②溶液1（50mmol／Lglucose，25mmol几Tris－HCIpHS．0，10mmol／LEDTApHS．0）；③溶液！（0．2mol／LNa0H，1％SDS）④溶液三（3mol／LNaAcpH4．8）；⑤异丙四…     

青霉素皮内试验的剂量是多少？如何判断皮试结果？

答：青霉素皮内试验液的剂量，以每毫升100～500U青霉素G生理盐水溶液0．1ml（含10～50U）注入皮内为标准。皮试阴性时才能注射青霉素。更换青霉素批号时应重新皮试。     

分离粪便沙门氏菌菌种的五种培养基比较

检测粪便标本中沙门氏菌菌种，对采用的不同培养基进行了对比研究。材料与方法HE琼脂（HE）。沙门氏菌属一志贺氏菌属琼脂（SS）和亚硫酸饿琼脂（BS）根据厂方说明配制使用，SM－ID培养基（SM）为制备完毕的商品平板，新生霉素一亮续一甘露醇一乳精琼脂（NBGL）由实验室自行配制（包括胰蛋白酶、大豆、琼脂40.0g，拘檬酸铁法1．5g，硫代硫酸钠5．0g，乳精10．0g，甘油10ml，亮绿7mg，新生霉素10mg。蒸馏水100ml）。以C8-酯酶试验和氧化酶试验进行沙门氏菌筛检。将1000价连续粪便标本接种子上述五种培养基上培养，和以亚硒酸盐由汤增…     

补肾活血中药促进体外培养软骨细胞增殖和蛋白质合成的作用

目的：利用体外软骨细胞培养体系。观察中药补肾活血方含药血清对软骨细胞增殖及蛋白质合成的影响，以探讨补肾活血中药防治骨性关节炎的作用。 方法：实验于2003-05／2004—08在广州中医药大学实验动物中心完成。①4周龄新西兰兔，用于分离培养软骨细胞。②雄性SD大鼠10只。体质量250-300g，随机分为正常组和中药补肾活血方组，每组5只，用于制备含药血清。③将传一代的软骨细胞接种于96孔培养板和24孔培养板中，培养24h后细胞贴壁进行分组试验。培养孔随机分为6组。每组4孔：空白对照组（加体积分数为0．05血清DMEM）5％中药含药血清组，10％中药古药血清组，20％中药含药血清组，5％丹参注射液组，5％葛根素注射液组；用噻唑蓝法检测细胞活性和增殖，考马斯亮蓝法检测细胞总蛋白。 结果：①5％，10％，20％中药含药血清组软骨细胞增殖与空白对照组相比有显著差异[（1．10&;#177;0．04）,（1．14&;#177;0．04），（1．14&;#177;0．06），（0．66&;#177;0．07），P〈0．05]。②5％，10％，20％中药含药血清组细胞总蛋白合成与空白对照组相比有显著差异[（137．60&;#177;5．98），（135．20&;#177;9．37），（130．80&;#177;2．50）,（99．15&;#177;5．08），P〈0．05]。③5％丹参及葛根紊注射液组对软骨细胞增殖和蛋白合成无明显影响。 结论：补肾活血中药含药血清可促进软骨细胞的增殖和蛋白合成，这可能是补肾活血中药防治骨性关节炎的重要作用机制之一。     

四种妇科洗剂体外抗阴道毛滴虫的效果观察

目的观察妇炎洁、肤阴洁、艾伦和洁尔阴等四种妇科洗剂体外抗阴道毛滴虫的效果。方法培养三代后的阴道毛滴虫用培养基稀释成一定浓度的细胞悬液。实验孔：将以上四种妇科洗剂的原液用培养基稀释成不同浓度（相对浓度）,加入96孔细胞培养板中（0．1ml／孔）。对照孔：加入培养基0．1ml／孔。每孔中均加入原虫0．1ml／孔（含虫5000个）。用MTT法检测实验孔和对照孔的各孔吸光度（A）值。结果在20,10,5,2．50,1．25ml／dl的相对浓度时,对阴道毛滴虫的相对抑制率分别为：妇炎洁为72．8%,65．2%,61．6％,54．8％和53．8％;肤阴洁为48．5％,44．0％,36．7％,31．7％和24．0％;艾伦为35．0％,28．4％,28．1％,10．7％和8．4％;洁尔阴为46．1％,37．3％,31．7％,27．5％和24．0％。妇炎洁、肤阴洁与洁尔阴各浓度之间抑制率比较差异有统计学意义（P〈0．05）;艾伦各浓度之间抑制率比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论①妇炎洁、肤阴洁、艾伦和洁尔嬲等四种妇科洗剂在体外均有一定的抗历道毛滴虫的作用;抗阴道毛滴虫效果与洗剂的浓度有关;浓度越高,效果越好。②在相同的浓度时,妇炎洁的抗阴道毛滴虫效果最强,肤阴洁和洁尔阴次之,艾伦的作用最弱。     

匡氏琼脂培养基用于痰结核菌直接药敏试验的效果研究

目的 调查匡氏琼脂培养基（简称匡氏培基）用于痰结核分枝杆菌（简称结核菌）直接药敏试验的效果。方法 匡氏培基痰结核菌直接药敏试验和间接药敏试验；罗氏培基间接药敏试验。结果 580例涂阳痰标本中的438例（占75．5％）获得全部8种药敏试验结果，72例（占12．4％）获得部分药敏试验结果，平均报告结果的时间少于3周。匡氏培养基直接药敏试验与间接药敏试验的符合率＞98．7％，与罗氏培养基间接药敏试验结果的符合率在94．4％－96．6％。结论 匡氏培养基用于涂阳痰标本直接药敏试验具有操作简便、快速、结果准确的优点，有推广应用价值。     

假密环菌活性物对ConA诱导的小鼠TNF-α和IFN-γ蛋白产物表达的影响

利用刀豆蛋白A（ConA）诱发实验性小鼠肝损伤模型，研究假密环菌杂多糖Y－HW和活性蛋白对ConA诱导小鼠肿瘤坏死因子a（TNF-a）和γ-干扰素（IFN－γ）蛋白产物表达的影响。结果表明，ConA组血浆TNF－a产物含量为（15．15±1．34）×10-4mg／ml，IFN－γ为（7．155±1．43）×10－4mg／ml。而多糖组血浆TNF－a产物含量为（4．024±0．31）×10-4mg／ml，活性蛋白组为（4．934±0．45）×10－mg／ml，与ConA组比较有极显著性差异P＜0·001，多糖组IFN－γ为（5．622±1．01）×10－4mg／ml，活性蛋白组为（3．624±0．56）×10-4mg／ml，与ConA组比较P＜0．001，与正常对照组比较P＜0．05。实验结果显示：（1）假密环菌杂多糖Y－HW和活性蛋白能降低由ConA引起的实验性小鼠TNF－a蛋白产物的表达；（2）杂多糖与ConA一样可增加IFN－γ蛋白产物的表达，但活性蛋白却不能。     

阿霉素与庆大霉素外周神经阻滞治疗三叉神经痛的远期疗效比较

目的：应用阿霉素及庆大霉素外周神经阻滞治疗三叉神经痛，比较两种药物的远期治疗效果和副作用，探讨三叉神经痛治疗的适宜方法。方法：选择2002—12／2003—06于北京天坛医院疼痛中心收治，经卡马西平等药物治疗无效或难以耐受其副作用的三叉神经痛患者70例，区组随机分为2组（n=35）：①阿霉素组：将阿霉素粉剂用生理盐水稀释成5g/L的溶液，第1支注射部位为眶上孔，第Ⅱ支为眶下孔或上颁神经，第Ⅲ支根据疼痛部位选择颏孔、下牙槽神经或下颁神经阻滞。若疼痛无明显缓解，可于一两周后再次阻滞一次。②庆大霉素组：应用庆大霉素针剂（8万单位／支），阻滞方法同阿霉素组，可阻滞四或五次，1次／周，每次剂量为8万单位。治疗前应用目测类比评分（无痛时为0，最剧烈疼痛时为10）进行疼痛评估，治疗后用电话、信件随访，分别在治疗第6，12，18，24，30个月记录数字评分（评分方法同目测类比评分），同时记录治疗后镇痛有效率（≥2度，即疼痛减轻1／2及以上）以及并发症的发生率、持续时间和程度。结果：70例全部进入结果分析。①镇痛的有效率：两组患者在治疗后6个月时相似，但在第12，18，24，30个月阿霉素组明显高于庆大霉素组（68％，57％，28％，23％；3l％，20％，6％，6％，P〈0．05）。②疼痛强度变化；阿霉素组在治疗后两年半内数字评分均低于治疗前（P〈0．01），庆大霉素组仅在治疗后6，12个月时低于治疗前（4．3&;#177;1．5，5．5&;#177;1．7，7．9&;#177;1．6，P〈0．01），至1年后疼痛强度与治疗前无差异（P〉0．05），且数字评分高于相应时间点的阿霉素组评分。⑧并发症的比较：阿霉素组面部麻木和肿胀的发生率高于庆大霉素组（91％比17％；91％比28％，P〈0．01）；持续的时间和长于庆大霉素组[（122&;#177;31），（7&;#177;2）d；（66&;#177;13），（5&;#177;2）d,P〈0．011；程度重于庆大霉素组。结论：阿霉素外周神经阻滞对三叉神经痛的远期镇痛效果较庆大霉素好，其副作用相对比庆大霉素大，但是操作简单安全。     

黄芪注射液对培养神经细胞损伤的保护作用

目的：研究黄芪对体外培养的胎鼠大脑皮层神经细胞损伤的保护作用。方法：在体外培养大鼠胎鼠的大脑皮层细胞，通过去除培养液中的小牛血清造成细胞损伤，实验组每毫升培养液中加入不同剂量的黄芪（0．05－0．5g)，观察黄芪对上术损伤的作用。结果：黄芪治疗组（0.2-0.5g/ml)的神经细胞线粒体活性较单纯去血清组明显增高（P＜0．05），在0．05－0．5g/ml范围内黄芪的抗损伤作用呈剂量相关性增加。结论：黄芪对体外培养的神经细胞去血清损伤有保护作用。     

稀土化合物氯化镧对脂多糖诱导小鼠巨噬细胞分泌-一氧化氮的影响

目的探讨氯化镧（LaCl3）由对脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）刺激小鼠巨噬细胞（RAW264．7）分泌一氧化氮（nitric oxide，N01的影响。方法RAW 264．7细胞随机分成四组：空白对照组（培养基中不含LaCl3和LPS），氯化镧组（含LaCk2．5，5，10，20μmol／L培养24h）、氯化镧＋LPS组（分别以含LaCl3 2．5、5、10、20μmol／L的培养基培养24h后．更换含LPS 1mg／L的培养基继续培养24h）及LPS组（含LPS 1mg／L的培养基培养24h）。采用硝酸还原酶法测定各组细胞培养液上清一氧化氮（NO）的含量。结果LPS组培养上清NO浓度为52．82±12．60μmol／L与空白对照组（2．90±2．36μmol／L）和LaCl3组[（6．50±4．67μmol／L、9．52±4．47μmol／L、11．14±7．42μmol／L、6．74±2．00μmol／L]比较有显著性差异（P〈0．05）；LaCl3＋LPS组NO的浓度分别为26．00±5．83μmol/L（2．5μmol／L LaCl3＋LPS）、29．86±7．26μmol／L（5μmol／L LaCl3＋LPS）、34．62±6．24μmol／L （10μmol／L LaCl3＋LPS），与LPS组相比显著减少（P〈0．05），20μmol／L LaCl3＋LPS）组NO的产生为45．61±6．68μmol／L与LPS组比较无显著性差异。结论一定浓度的LaCl3可抑制LPS诱导小鼠巨噬细胞产生NO的水平。     

HEPES可延长解脲脲原体的培养存活时间

解豚豚原体（UreaplasmaUrealgticum）的人工培养因其分解尿素产生氨，致使培基的pH迅速上升，豚原体也随之自行死亡，给继续进行深入的研究和探讨带了困难。目前，国内关于这方面的解决办法还未见报道。Nanchee认为在培基P加入0．05MN－2－hydrox－yethylplperazlne－N—2—ethanesulfonlcacid（HEPES）可阻pH值上升，维持T支原体存活并保持增殖[1]。本试验以常规培养确认的解脲脲原体菌株为标本，于常规固体培基不加及加入0.05MHEPES缓冲液，在95％N2－5％CO2环境中37℃培养48～120小时，对比观察胶原体的生长情况，从其形态、…     

不同阴道准备方法在体外受精—胚胎移植术中应用的效果比较

目的比较3种阴道准备方法在体外受精－胚胎移植术（IVF—ET）术中应用的效果，以寻找最佳准备方法。方法将接受体外受精－胚胎移植术240例患者随机分三组，分别于取卵前36h进行阴道冲洗，取卵时再次阴道冲洗，A组（80例）采用0．05％碘伏＋庆大霉素16万U溶液，B组（100例）采用0．9％氯化钠溶液＋庆大霉素16万U溶液，C组（60例）采用0．9％氯化钠溶液。于阴道冲洗前和胚胎移植前分别取三组宫颈拭子送细菌室检测，比较三组细菌阳性率。结果三组细菌阳性率冲洗前分别为85．0％，86．0％，86．6％，共分离出116株细菌；移植前细菌阳性率分别为7．5％，15．0％，16．6％。结论应用0．05％碘伏＋庆大霉素冲洗效果好，细菌阳性率发生低，为体外受精—胚胎移植术首选阴道准备方法。     

臭氧对水中细菌杀灭效果的试验观察

在实验室，用臭氧水发生器（万瑞电子仪器厂产）进行了臭氧对水中细菌杀灭效果的试验观察。试验时，将大肠杆菌（8099）、金黄色葡萄球菌（ATCC6538）或枯草杆菌黑色变种（ATCC9372）芽胞的悬液0．5ml加人盛有45ml臭氧水（对照为含1％蛋白胨的磷酸盐缓冲液）的试管中，混匀。作用至预定时间，取0．5ml菌药混合液，加人盛有45ml中和剂（经预试验证明用0．5％硫代硫酸钠溶液中和浓度为1．26mg／L的臭氧水是适宜的）的试管中，混匀。中和作用10min，取该液0．5ml进行活菌计数，计算杀灭率。试验表明，在20～25℃下，浓度为1．26mg／L的臭氧…     

沙门、志贺、耶尔森和气单胞菌的快速生化筛选试验

本文介绍四种快速(4-6h)生化反应鉴定肠道分离培养基上的沙门、志贺、耶尔森氏菌和气单胞菌。一、动力-吲哚-尿素-色氨酸脱氨酶半固体培养基(MIU-TDA):含胰酶30g,KH_2PO_42g,NaC15g琼脂3g,0.2％酚红酒精溶液2ml作指示剂,L-色氨酸2g,枸橼酸铁铵0.5g,蒸馏水900ml,高压灭菌后,培基在50℃冷却,再加入100ml20％的无菌尿素溶液,然后分装4ml到13×75mm带盖的试管中。二、     

郴州市医疗单位使用中消毒液细菌污染检测

1993～1995年，对郴州市医疗单位使用中的消毒液进行了细菌污染检测。检测时，用无菌吸管取1ml消毒液加至9ml相应中和剂溶液中，混匀。取0．2ml混合液接种普通营养琼脂平板、于37℃培养72h，计数菌落。以消毒液中细菌总数＜250cfu／ml为合格。共检测2962份消毒液，合格率为85．68％。其中，2％戊二醛、含10％甲醛的醛醇合剂等高效消毒剂1179份，合格率为95．59％；75％乙醇、2％碘配等中效消毒剂1031份，合格率为87．88％；1％～5％来苏儿、0．05％～0．1％苯扎溴铵（新洁尔灭）等消毒剂752份，合格率为67．15％。按不同级医疗单位分，检测…     

一种鉴定铜绿假单胞菌的新方法

铜绿假单胞菌是临床常见的致病菌，也是引起院内感染的常见病。目前一般采用常规法培养，鉴定。我们受铝蓝法测定无机磷方法启示（朱忠勇主编．实用医学检验学．第1版，北京；人民军医出版社，1992284～285）。通过大量试验，建立了磷用蓝试验法鉴定铜绿假单胞菌。用本法进行铜绿假单胞菌鉴定，特异性好，敏感度高，现报道如下：1材料和方法1．1＠培养基KHZPO42．0g。N。CI50g，Mg－SO4，7H刃0．ig，（NH4）2SO405g，D－C6HllN8O710．0g，用蒸馏水稀释至1000ml，调节pH至7‘2～74，分装每管1．0ml，10磅（68．950kPa）20min灭菌，…     

一种细菌动力鉴定用TTC半固体培养基

目前，细菌动力鉴定多采用压滴法、悬滴法、半固体动力试验。细菌学检验中用得最多的又是半固体动力试验，由于半固体动力试验培养基在判定结果时有困难，因此，我们在动力试验培养基中加入TYTC（2，3，5一氧化三苯基四氮唑），制备成TTC半固体动力培养基，有助于检查动力，减少误差。现介绍如下：1材料和方法1．1试剂1．1．11％2，3，5一氯化王苯基四氛喷水溶液：称取l·00gTTC，溶解于100ml蒸馏水中，用微孔滤膜（膜孔径0．45Pm）滤过除菌，备用。1．1、2＊＊C半固体动力培养基；成份：胰蛋白陈IOg，氯化钠5g，琼脂5g，蒸馏水1000ml…