急性重症胰腺炎大鼠细胞凋亡的研究

目的　研究急性重症胰腺炎 (SAP)中细胞凋亡现象及bcl 2与rnkp 1基因对SAP中细胞凋亡的影响。方法　将 3 6只Wistar大鼠随机分为 6组 ,即正常对照组、SAP模型制作后 1、2、4、8、16h组。利用原位末端标记法和琼脂糖凝胶电泳检测凋亡小体及凋亡梯形。采用定量逆转录聚合酶链式反应检测凋亡调控基因bcl 2、rnkp 1基因mRNA转录水平。 结果　模型制作后 2h组即可检出凋亡小体及梯形 ,4h组凋亡小体明显增多至高峰并出现规整的凋亡梯形。胰腺组织bcl 2基因mRNA表达水平 2h组达高峰 0 .87± 0 .11,并于 8、16h组降至正常。各组中脾细胞rnkp 1基因mRNA表达水平于 8h组可见增高 0 .5 4± 0 .17,16h组达高峰 0 .63± 0 .0 9。结论　大鼠SAP的发病过程中 ,同时存在细胞坏死和凋亡。细胞凋亡现象可能具有保护与加重损害的双重作用。rnkp 1和胰蛋白酶原编码基因活性区的同源性可能是急性重症胰腺炎晚期病情不可逆转的因素之一。     

紫杉醇诱导急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞凋亡机制的研究

目的研究急性胰腺炎时紫杉醇诱导大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的机制。方法利用胆胰管内注射脱氧胆酸钠的方法建立急性胰腺炎大鼠模型 ,并向腹腔内注射紫杉醇以诱导胰腺腺泡细胞凋亡。利用免疫组化法研究胰腺腺泡细胞凋亡相关蛋白Bcl 2、Bax、Fas、FasL及 p5 3表达的变化。结果急性胰腺炎时大鼠胰腺腺泡细胞中Bax(2 5 0 6± 94 2 )、Fas(2 79± 15 0 )和 p5 3(180± 5 6 )的表达增加 ,Bcl 2 (79± 4 2 )表达无明显变化 ,而FasL只表达于急性胰腺炎时胰腺间质浸润的炎性细胞中。结论急性胰腺炎时紫杉醇诱导的大鼠胰腺腺泡细胞凋亡与Bax、Fas/FasL系统以及p5 3蛋白有关。     

急性胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡与胰腺炎症细胞的关系

目的: 探讨急性胰腺炎(AP)胰腺细胞凋亡的可能机制.方法: 胆胰管逆行加压注射4%的牛磺胆酸钠诱导大鼠AP,建立模型,应用末端脱氧核苷酸转换酶(TdT)介导的原位末端标记(TUNEL)法检测术后3h、6 h和12 h胰腺细胞凋亡情况,并对胰腺炎症细胞进行分类记教.结果: 胰腺炎组术后6 h胰腺凋亡细胞显著高于3 h和12 h(3 h P<0.05,12 h P<0.01);白细胞进行性增多,6 h巨噬细胞百分比明显高于3 h和12h(3 h P<0.05,12 h P<0.01),中性粒细胞百分比显著低于3 h和12 h(3 h P<0.05,12 h P<0.01).结论: AP胰腺细胞凋亡可能与炎症细胞的不同种类有关.     

大鼠急性胰腺炎胰腺细胞凋亡改变的实验研究

目的: 了解急性胰腺炎(AP)发病过程中胰腺腺泡细胞凋亡情况. 方法: 将48只SD大鼠随机分为两组(胰腺炎组和假手术组),每组24只.经十二直肠行胆胰管逆行加压注射4%牛磺胆酸钠,诱导大鼠AP模型,于术后3小时、6小时、12小时和24小时分批处死动物,应用末端脱氧核苷酸转换酶(TdT)介导的末端标记(TUNEL)方法检测胰腺组织中的腺泡细胞凋亡. 结果: 假手术组胰腺组织中存在极少量的凋亡细胞,数量相对恒定,与时间无关;胰腺炎组术后病变加重,胰腺凋亡细胞明显增多,3小时、6小时、12小时凋亡指数均明显高于假手术组([WTBXP<0.01),术后24小时接近假手术组水平. 结论: 急性胰腺炎胰腺存在腺泡细胞凋亡的改变,胰腺细胞凋亡可能是急性胰腺炎病变过程中的一个重要特征.     

急性胰腺炎与胰腺腺泡细胞凋亡的关系

目的：研究急性胰腺炎严重程度与胰腺泡细胞凋亡的关系。方法：建立不同严重程度的急性胰腺炎大鼠模型，通过原位末端标记法定量检测胰腺腺泡细胞凋亡率。结果：单纯水肿性胰腺炎时极少有腺泡细胞凋亡。出血坏死性胰腺炎时有腺泡细胞凋亡，且随着出血坏死程度的加重，腺泡细胞的凋亡先较快地增加后逐渐减少，细胞坏死则逐渐增多。结论：在急性单纯水肿性胰腺炎时极少有腺泡细胞凋亡。急性胰腺炎的严重程度与腺泡细胞的凋亡率在程度较轻的急性出血坏死性胰腺炎时呈正相关，而在程度较重的急性出血坏死性胰腺炎时则呈负相关。     

青蒿素诱导急性胰腺炎胰腺腺泡细胞凋亡的实验研究

目的探讨青蒿素（artemisinin）对急性胰腺炎胰腺腺泡细胞凋亡的影响,并了解是否减轻急性胰腺炎严重程度。方法腹腔内注射雨蛙素（cerulein）诱导大鼠胰腺炎模型建立,设正常对照组、胰腺炎组及青蒿素组,通过原位末端标记（TUNEL）法检测各组胰腺组织中腺泡细胞的凋亡指数,并用分光光度法检测髓过氧化物酶（MPO）活性。采用两步酶消化法分离正常大鼠胰腺腺泡细胞,离体分组培养,采用丫碇橙（AO）染色及caspase-3活性的检测,评估青蒿素对胰腺腺泡细胞凋亡的影响,并检测各组培养液中的乳酸脱氢酶（LDH）及淀粉酶（AMS）活性,评估胰腺腺泡细胞酶的释放。结果在体实验中,青蒿素组与胰腺炎组比较,胰腺腺泡细胞凋亡指数明显增高（P〈0.05）,MPO活性明显减低（P〈0.05）。体外实验中,青蒿素组胰腺腺泡细胞凋亡指数及caspase-3活性较胰腺炎组明显增高（P〈0.05）,培养液中的LDH和AMS活性也明显降低（P〈0.05）。结论青蒿素可促进大鼠急性胰腺炎胰腺腺泡细胞凋亡,减少胰酶释放及中性粒细胞激活,可减轻急性胰腺炎严重程度。     

大鼠急性胰腺炎胰腺细胞凋亡改变的实验研究的实验研究

目的 :了解急性胰腺炎 (AP)发病过程中胰腺腺泡细胞凋亡情况。方法 :将 48只SD大鼠随机分为两组 (胰腺炎组和假手术组 ) ,每组 2 4只。经十二直肠行胆胰管逆行加压注射 4%牛磺胆酸钠 ,诱导大鼠AP模型 ,于术后 3小时、6小时、12小时和 2 4小时分批处死动物 ,应用末端脱氧核苷酸转换酶 (TdT)介导的末端标记 (TUNEL)方法检测胰腺组织中的腺泡细胞凋亡。结果 :假手术组胰腺组织中存在极少量的凋亡细胞 ,数量相对恒定 ,与时间无关 ;胰腺炎组术后病变加重 ,胰腺凋亡细胞明显增多 ,3小时、6小时、12小时凋亡指数均明显高于假手术组 (P <0 .0 1) ,术后 2 4小时接近假手术组水平。结论 :急性胰腺炎胰腺存在腺泡细胞凋亡的改变 ,胰腺细胞凋亡可能是急性胰腺炎病变过程中的一个重要特征     

TNF-α介导重症急性胰腺炎肾上腺细胞的凋亡

目的观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在重症急性胰腺炎(SAP)肾上腺细胞凋亡中的作用。方法采用随机数字表法将40只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(SO组)和SAP组,SAP组又再分为3、6、12及24 h4个亚组,每组8只大鼠。采用5%牛黄胆酸钠(0.1 m L/100 g)逆行胆胰管注射法建立SAP大鼠模型,测定各组大鼠血清淀粉酶及脂肪酶水平,观察胰腺和肾上腺组织的病理学改变,并进行评分;用TUNEL法检测肾上腺细胞凋亡情况,并比较各组大鼠的凋亡指数;采用Western blot法检测肾上腺组织中TNF-α及Caspase-3蛋白的表达。结果造模术后各时间点SAP组大鼠血清淀粉酶和脂肪酶水平以及胰腺组织和肾上腺组织的病理学评分均较SO组显著升高(P0.05);随病程延长,SAP组大鼠肾上腺细胞凋亡指数也进行性升高,并均高于SO组(P0.05);SAP组大鼠肾上腺组织中TNF-α和Caspase-3蛋白的相对表达量也逐渐增高,24 h时略有下降,但均高于SO组(P0.05)。结论 TNF-α可能参与了SAP时的肾上腺损伤,可能通过激活Caspase-3在SAP肾上腺细胞凋亡中发挥重要作用。     

MyD88在重症急性胰腺炎胰腺组织中表达及意义的实验研究

目的探讨髓样细胞分化蛋白88（MyD88）在重症急性胰腺炎（SAP）发病机理的作用。方法将48只小鼠按随机数字表法随机分为SAP组（32只）与正常对照组（16只）;再将2组小鼠随机（随机数字表法）分为6、12、24及48h组,SAP组各亚组每组8只,正常对照组每亚组4只。SAP组小鼠腹腔注射20％L．精氨酸以诱导SAP模型,正常对照组小鼠仅腹腔注射生理盐水。分别于建模术后6、12、24及48h处死小鼠,取其动脉血,采用ELISA方法检测血清中白细胞介素-1β（IL-1p）、白细胞介素-10（IL-10）及肿瘤坏死因子-α（TNF-d）浓度;同时取其胰腺组织（正常对照组仅术后6h取材）,用逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测胰腺组织中MyD88mRNA和核因子-κB（NF—KB）mRNA的表达水平,并进行HE染色。结果镜下见SAP组小鼠的胰腺组织随时间进展其炎症逐渐加重。各时点SAP组小鼠的IL-1D、IL-10及TNF-α浓度均高于正常对照组（P〈0．05）;各时点SAP组与正常对照组（6h组）相比较,其胰腺组织中MyD88mRNA及NF-rBmRNA的表达水平均较高（P〈0．05）。各时点SAP组小鼠MyD88mRNA的表达水平与血清IL-1B、IL-10及TNF-α的浓度和NF-KBmRNA的表达水平均呈正相关（P〈0．01）。结论MyD88的表达对SAP的发生和发展可能均具有重要的作用。     

急性胰腺炎时胰腺组织修复机制的研究

目的探讨急性胰腺炎后胰腺修复的机制。方法实验所用动物为NIH Swiss小鼠，分两组，分别是盐水对照组、急性胰腺炎组(AP组)。急性胰腺炎诱导采用蛙皮素腹腔注射，用常规病理评价胰腺的炎症程度；流式细胞仪检测细胞增殖状态；免疫组化方法检测胶原Ⅰ的表达，蛋白酶谱检测MMP-3的表达。结果病理检测结果：蛙皮素腹腔注射可诱导小鼠急性胰腺炎。在急性胰腺炎组小鼠AP诱导后8h胰腺组织损伤最严重，至第7天时组织损伤基本恢复正常。胰腺流式细胞仪检测发现AP诱导后细胞增殖状态分三个时期：早期的增殖活跃期、中期的增殖抑制期和后期的高增殖状态。胶原Ⅰ的检测显示：盐水对照组胶原Ⅰ有少量表达，AP时胶原Ⅰ表达增强。MMP-3的检测结果：盐水对照组基本无表达，在AP时酶的活性增高。结论急性胰腺炎后，胰腺组织可进行修复。在其修复过程中，既有组织细胞的增殖修复，又存在间质纤维化修复和塑性。     

细胞凋亡在急性胰腺炎发病机制中所起作用的研究进展

细胞凋亡和细胞坏死是胰腺腺泡细胞两种完全不同的死亡方式，两者的比例将决定急性胰腺炎表现为水肿型还是出血坏死型。急性胰腺炎时不仅有胰腺腺泡细胞的凋亡同时伴有炎症因子的释放，而不同的炎症因子对于细胞凋亡的调控大都不一样。笔者就此进行综述。     

重症胰腺炎并发胰性脑病的临床分析

目的　探讨重症急性胰腺炎合并胰性脑病的发病机制、诊断与鉴别诊断以及临床防治措施。方法　对 2 0 0 0年 1月～ 2 0 0 3年 6月本中心收治的 30 1例急性重症胰腺炎中的 1 4例胰性脑病病人进行回顾性研究 ,分析其临床表现、治疗经过及预后。结果　 30 1例急性重症胰腺炎病人中 1 4例并发有胰性脑病 ,发生率为 4 .6 %。其中早期即SIRS期 9例 ,后期即感染期 5例。胰性脑病临床表现有烦躁不安、多语、定向能力障碍、嗜睡、狂躁、幻觉 ,甚至昏迷。神经系统检查发现有脑膜刺激征、颅内压增高以及脑脊髓并候群症以及脑脊液淀粉酶增高。晚期出现胰性脑病病人常并有深部真菌感染以及体液代谢紊乱。治疗上去除引起胰性脑病的各种诱因。SIRS期 9例中 3例死亡 ,均死于MOF ,感染期 5例中 1例死于严重感染并发MOF。其余病人症状缓解治愈出院。结论　胰性脑病是急性重症胰腺炎的少见的严重并发症 ,积极消除其各种诱因 ,有助于降低胰性脑病的发生率。早期发现 ,一旦发生胰性脑病积极给予脑复苏及神经营养支持治疗 ,对降低死亡率有重要意义。     

重症急性胰腺炎合并胰性脑病发病机制的研究进展

胰性脑病是重症急性胰腺炎的严重并发症之一.早期研究对于胰性脑病的认识局限于胰酶损伤所导致的中枢神经系统脱髓鞘性病变.但随着研究的不断深入,目前发现在重症急性胰腺炎发病过程中合并的脑功能障碍可能由多种因素所导致.除胰酶损伤因素之外,真菌和细菌感染、细胞因子作用、营养缺乏、代谢紊乱等均可引起脑功能障碍的发生.以上各因素协同作用于中枢神经系统,引起神经系统脱髓鞘性改变,最终导致患者出现神经精神症状.     

重症急性胰腺炎治疗模式的转变与胰性脑病

目的探讨重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）合并胰性脑病的临床预防和治疗措施。方法按不同时间段回顾性研究1987年1月至2006年12月收治的22例SAP合并胰性脑病患者的临床资料。研究分为2组,A组（1987年1月至1996年12月）13例;B组（1997年1月至2006年12月）9例,结合SAP治疗措施的差异分析胰性脑病的发生情况、临床表现、治疗过程等。结果A组中早期胰性脑病（EPE）8例,迟发性胰性脑病（DPE）5例,此期仅1例EPE存活,病死率为92．3％。B组均为EPE病例,无一例死亡。死亡病例集中在前10年,均合并多器官功能衰竭。B组胰性脑病病例集中在前5年（1997年1月至2001年12月）,近5年没有发现胰性脑病病例。结论积极消除各种诱因、治疗原发病和营养支持等有助于降低胰性脑病的发生率及病死率。     

343例重症急性胰腺炎临床治疗分析

目的探讨重症急性胰腺炎(SAP)胰腺感染的综合预防措施及治疗。方法343例SAP均先行保守治疗,应用多种措施预防胰腺感染。1995年至1999年,将胰腺感染作为手术指征并立即进行手术;1999年至2002年,加强对胰腺感染的预防,延期手术,将晚期局限性胰腺感染作为手术指征。结果343例SAP中发生胰腺感染35例(10.2%)。两个阶段的胰腺感染率分别为12.2%及7.5%。胰腺感染局限者的病死率为6.7%(1/15),低于胰腺感染未局限者的50%(10/20),P<0.05。结论积极、有效的综合性预防措施及延期手术治疗有助于降低SAP的胰腺感染率及胰腺感染的病死率。     

重症急性胰腺炎胰腺感染的综合性预防及治疗

目的 探讨重症急性胰腺炎（SAP）继发胰腺感染的综合预防措施及治疗。方法 本组223例SAP均先行非手术治疗,采取促进胃肠道功能的恢复、应用抗生素、抗休克、预防多器官组织低灌注及低氧血症等多种措施预防胰腺感染。1990～1994年,将胰腺感染作为手术指征并立即进行手术;1995～1999年,加强对胰腺感染的预防,特别注意早期促进胃肠道功能的恢复。延期手术,将晚期局限性胰腺感染作为手术指征。结果 本组223例SAP中发生胰腺感染23例（10.3%）。两个阶段的胰腺感染率分别为12.4%及8.7%。胰腺感染局限者的病死率为8%（1/13）,低于胰腺感染未局限者的50%（5/10）,P=0.035。结论 积极、有效的综合性预防措施及延期手术治疗有助于降低SAP继发性胰腺感染率及胰腺感染的病死率。     

重症急性胆管炎和重症急性胰腺炎甲状腺激素变化的意义

目的研究重症急腹症患者机体内分泌激素的变化。方法对２７例重症急性胆管炎（ＡＣＳＴ）（Ａ组）和２１例重症急性胰腺炎（ＳＡＰ）（Ｂ组）患者围手术期甲状腺激素变化进行了观测,并与１２０例胆囊结石（Ｃ组）患者对照。结果术前Ａ,Ｂ组Ｔ３水平显著低于Ｃ组（Ｐ＜０．０１）。Ａ,Ｂ组术后Ｔ３显著高于术前（Ｐ＜０．０１）。术前及术后Ａ组Ｔ３均显著低于Ｂ组（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０１）。２例死亡的ＡＣＳＴ患者,术前Ｔ３均低于０４６ｎｍｏｌ／Ｌ,术后仍低于０８５ｎｍｏｌ／Ｌ。结论甲状腺激素变化可作为判断感染程度和预后指标之一。     

Laparoscopic pancreatic necrosectomy in a child with severe acute pancreatitis

Acute pancreatitis (AP) in children usually follows a mild course but occasionally may be severally problematic. We report the case of a 12-year-old boy with severe AP who was managed with repeated laparoscopic pancreatic necrosectomy. Three weeks later he represented with a pancreatic pseudocyst that was treated with endoscopic gastrocystotomy. His abdominal pain persisted and a subsequent magnetic resonance cholangiopancreatogram showed multiple gallbladder and common bile duct (CBD) stones that were missed on previous imaging investigations. He underwent laparoscopic cholecystectomy with transcystic exploration of the CBD. The patient is currently well, more than 2 years following the definitive corrective surgery. To the best of our knowledge, this is the first case of laparoscopic pancreatic necrosectomy in a child.     

肝细胞生长因子对实验性急性胰腺炎细胞凋亡作用的研究

目的:观察外源性肝细胞生长因子(HGF)对小鼠轻症实验性急性胰腺炎的炎症反应及胰腺细胞凋亡的作用。方法:以雨蛙肽腹腔注射诱发小鼠轻症实验性急性胰腺炎。第1组以盐水腹腔注射作为对照,第2、3及4组每小时腹腔注射雨蛙肽诱发急性胰腺炎;第3组在造模前及造模中两次皮下注射重组人肝细胞生长因子(rhHGF);第4组同时皮下注射rhHGF及其单抗。观察HGF对炎症反应的干预作用及对腺泡细胞凋亡的影响。结果:炎症小鼠予每公斤体重4、20μgrhHGF时,与单纯炎症组相比,血清淀粉酶、脂肪酶下降,胰腺组织学炎症评分减少,胰腺腺泡细胞TUNEL凋亡指数增加,caspase3活性增强。予每公斤体重4或20μgrhHGF时,其效应无显著性差异。同时予rhHGF单抗的小鼠,上述指标与单纯炎症组相比差异无显著性。结论:HGF能减轻雨蛙肽诱导的小鼠轻症实验性急性胰腺炎。HGF单抗能消除HGF的生物学作用。HGF可以促进急性胰腺炎时腺泡细胞的凋亡,这可能是其保护胰腺的作用机制之一。