法舒地尔对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的影响

目的 观察特异性Rho激酶抑制剂法舒地尔对载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块进展的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 8周龄ApoE-/-小鼠高脂饲料喂养12周后给予法舒地尔干预,12周后结束实验.将ApoE-/-小鼠随机分为三组(n=10):对照组(饮用水)、法舒地尔低剂量组(30 mg·kg-1·d-1)和法舒地尔高剂量组(100 mg·kg-1·d-1).在实验结束时,测量小鼠体质量、血压及血脂水平;对头臂干动脉粥样硬化病变进行病理学检查;化学发光法及组织荧光法检测小鼠胸主动脉超氧阴离子和活性氧(ROS).结果 法舒地尔干预对ApoE-/-小鼠体质量、收缩压及血脂水平均无明显影响.与对照组相比,法舒地尔高剂量组头臂干动脉粥样硬化斑块面积和动脉内-中膜厚度(IMT)分别减少54%(P<0.01)和42%(P<0.05).法舒地尔干预使ApoE-/-小鼠胸主动脉原位ROS的生成较对照组明显减少(P<0.01);法舒地尔高剂量组胸主动脉的超氧阴离子产量低于对照组(P<0.05).结论 阻断Rho激酶可抑制ApoE-/-小鼠头臂干动脉粥样硬化斑块的进展,其作用独立于血压和血脂水平,可能与抗氧化应激有关.     

法舒地尔对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的影响

目的 观察特异性Rho激酶抑制剂法舒地尔对载脂蛋白E基因敲除（ApoE-/-）小鼠动脉粥样硬化斑块进展的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 8周龄ApoE-/-小鼠高脂饲料喂养12周后给予法舒地尔干预,12周后结束实验。将ApoE-/-小鼠随机分为三组（n=10）：对照组（饮用水）、法舒地尔低剂量组（30 mg•kg-1•d-1）和法舒地尔高剂量组（100 mg•kg-1•d-1）。在实验结束时,测量小鼠体质量、血压及血脂水平;对头臂干动脉粥样硬化病变进行病理学检查;化学发光法及组织荧光法检测小鼠胸主动脉超氧阴离子和活性氧（ROS）。结果 法舒地尔干预对ApoE-/-小鼠体质量、收缩压及血脂水平均无明显影响。与对照组相比,法舒地尔高剂量组头臂干动脉粥样硬化斑块面积和动脉内—中膜厚度（IMT）分别减少54%（P<0.01）和42%（P<0.05）。法舒地尔干预使ApoE-/-小鼠胸主动脉原位ROS的生成较对照组明显减少（P<0.01）;法舒地尔高剂量组胸主动脉的超氧阴离子产量低于对照组（P<0.05）。结论 阻断Rho激酶可抑制ApoE-/-小鼠头臂干动脉粥样硬化斑块的进展,其作用独立于血压和血脂水平,可能与抗氧化应激有关。     

芍药苷对ApoE~(-/-)小鼠血脂及主动脉斑块的影响

[目的]观察芍药苷对ApoE-/-小鼠血脂及主动脉斑块形成的影响。[方法]6周龄ApoE-/-雄性小鼠经普通饲料饲养4周,髙脂饲料饲养12周后,随机分为ApoE-/-模型组及芍药苷60 mg/kg、30 mg/kg剂量组,相同遗传背景的同龄正常C57BL/6J小鼠作为空白对照组。药物干预12周后,检测血脂的变化,并测量主动脉弓部、胸段、腹段斑块面积。[结果]ApoE-/-模型组甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)显著高于C57BL/6J组(P0.01),芍药苷60 mg/kg、30 mg/kg组的血脂水平显著低于ApoE-/-模型组(P0.05,P0.01),并且不同程度减小主动脉各段斑块的面积。[结论]芍药苷具有降脂和抑制主动脉斑块形成的作用,表明芍药苷具有抗动脉粥样硬化作用。     

DFMG调节血管新生对APOE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块稳定性的影响

目的 探讨7-二氟亚甲基-5,4'-二甲烷氧基异黄酮(7-difluoromethoxy-5,4'-dimethoxygenistein,DFMG)对载脂蛋白E基因敲除(apolipoprotein E knockout,ApoE-/-)动脉粥样硬化模型小鼠血管新生的影响,及其对动脉粥样硬化斑块稳定性的作用.方法 将20只动脉粥样硬化模型ApoE-/-小鼠分为4组(每组5只):模型组、溶剂组、DFMG组和洛伐他汀组,在高脂饲养的同时,DFMG组添加DFMG10 mg/(kg·d),洛伐他汀组添加洛伐他汀5 mg/(kg·d),溶剂组添加DMSO10 mg/(kg·d);另取5只C57BL/6小鼠普通饮食喂养作为空白组.喂养16周后,取血清检测小鼠血脂,胸主动脉大体标本油红O染色,组织HE染色检测脂质斑块、Masson染色检测斑块稳定性、免疫组化观察血管新生情况以及Western blot检测TLR4蛋白表达情况.结果 DFMG降低主动脉粥样斑块与血管腔内径比值(P＜0.05),降低血浆血脂LDL、VLDL、TG、CHOL水平(P＜0.05),减少胸主动脉油红0染色脂质斑块面积(P＜0.05),增加斑块胶原纤维含量(P＜0.05),降低胸主动脉VEGF、vWF和TLR4蛋白表达(P＜0.05).结论 DFMG可抑制动脉粥样硬化ApoE-/-小鼠血管新生,维持小鼠动脉粥样硬化斑块稳定性.     

三七总皂甙对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的作用及机制

目的探究三七总皂甙(Panax notoginseng saponins,PNS)对ApoE基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠动脉粥样硬化(Atherosclerosis, AS)的作用及其相关分子机制。方法 8周龄雄性C57BL/6J-ApoE~(-/-)小鼠(用含21%脂肪、19.5%酪蛋白和1.25%胆固醇的饲料喂养)随机分成:PNS组(10只,每天用200 mg/kg PNS灌胃)和模型组(10只,每天用相同体积的生理盐水灌胃),4周后处死小鼠,两组小鼠头臂干动脉MOVAT染色评估动脉粥样硬化斑块面积;免疫组化染色评估斑块内巨噬细胞数量;电镜观察斑块内巨噬细胞的状态;Western Blot(WB)检测两组小鼠斑块内白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、细胞间黏附分子-1(Intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)、单核细胞趋化蛋白-1(Monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、脂蛋白相关的磷脂酶A2(Lipoprotein associated phospholipase A2,Lp-PLA2)的表达情况。结果与模型组相比,PNS组小鼠头臂干动脉粥样硬化病变范围变小,差异有统计学意义(t=8.65,P0.05);巨噬细胞数量变少,差异有统计学意义(t=5.46,P0.05);电镜下观察到,模型组小鼠头臂干动脉中血管受损明显,而PNS组头臂干动脉中血管受损程度较轻,表面较模型组相对光滑且排列相对规则;PNS组小鼠头臂干动脉粥样硬化斑块中IL-6(t=2.32,P0.01)、ICAM-1(t=2.48,P0.01)、MCP-1(t=1.96,P0.05)、Lp-PLA2(t=2.72,P0.01)蛋白的表达均下降,差异有统计学意义。结论 PNS对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块的发展产生了抑制作用,其机制可能与下调IL-6、Lp-PLA2、MCP-1和ICAM-1蛋白的表达有关。     

血清淀粉样P蛋白缺失对小鼠动脉粥样硬化斑块形成的影响

目的观察血清淀粉样P蛋白(serum amyloid P component,SAP)缺失对小鼠动脉粥样硬化形成的影响。方法构建载脂蛋白E(Apolipoprotein E)和SAP双基因敲除小鼠(ApoE-/-;SAP-/-)作为实验组,ApoE-/-小鼠作为对照组。2组小鼠各12只,组内雄雌小鼠各半。在小鼠第8周龄时,体质量约20 g,此时开始同时给予2组小鼠高脂饮食,于第16周龄时获取小鼠全血分离得到血清进行血脂分析,处死小鼠后获取其心脏,胸腹主动脉进行油红O染色并进行病理统计。结果双基因敲除小鼠组的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显高于对照小鼠(P<0.01),低密度脂蛋白和高密度脂蛋白的比值和动脉粥样硬化指数(AI)小于对照组小鼠且差异显著(P<0.01),而总胆固醇(TC),甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)浓度无显著性差异(P>0.05);主动脉根部切片和胸腹主动脉的油红O染色结果表明SAP缺失明显减轻了小鼠动脉粥样硬化斑块面积(P<0.01)。结论 AP缺失可能通过上调HDL从而抑制ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块形成。     

红杉醇抗ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的作用及机制探讨

目的红杉醇是天然植物红豆杉的主要有效成分,已有研究表明红杉醇有改善血管内皮的功能,但具体机制尚不明确。本文拟通过观察红杉醇对ApoE-/-小鼠血脂及血管内皮的影响,探讨红杉醇抗ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的作用及机制。方法 36只8周龄雄性ApoE-/-小鼠随机分三组:普通饮食组、高脂组和红杉醇组,灌胃法给予红杉醇,喂养12周后处死小鼠,眼眶静脉采血,全自动生化分析仪检测小鼠血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)和三酰甘油(TG)的浓度,ELISA法检测细胞间黏附因子(ICAM-1)和单核细胞趋化蛋白(MCP-1),油红O染色统计分析主动脉弓动脉粥样硬化斑块面积和百分比。结果高脂饮食组和红杉醇组ApoE-/-小鼠血清中TG、TC、LDL-C的浓度比普通饮食组明显升高,而HDL-C则明显降低(P0.05),并且红杉醇组TG、TC、LDL-C的血清浓度明显低于高脂饮食组(P0.05)。高脂饮食组用高脂高胆固醇饲料喂养12周后,出现明显主动脉弓动脉粥样硬化变化,红杉醇治疗组斑块面积减小,ICAM-1和MCP-1表达水平下降,其结果有统计学意义(P 0.05)。结论红杉醇对ApoE-/-小鼠有降低血脂作用,并可以通过调节ICAM-1和MCP-1水平改善内皮功能,并减小动脉粥样硬化斑块面积,对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的形成有缓解作用。     

针刺对ApoE~(-/-)小鼠主动脉窦斑块病理变化因素的影响

目的观察针刺干预ApoE-/-小鼠后主动脉窦斑块的形态和斑块部位PPARγ蛋白的表达变化以及各组小鼠间血清氧化低密度脂蛋白和载脂蛋白B含量的差异,探讨针刺改善ApoE-/-小鼠主动脉窦斑块病理因素的影响机制。方法将6周龄34只ApoE-/-小鼠喂食高脂饲料14周后,随机处死4只,取主动脉窦,苏木精-伊红(HE)染色光镜下观察,判断动脉粥样硬化(AS)造模是否成功,其余30只小鼠被随机分为10只模型对照组、10只药物对照组、10只针灸治疗组,另将喂食普通饲料的4只C57BL/6J雄性小鼠作为空白组。药物治疗组辛伐他汀灌胃治疗,40mg/(kg·d),针灸治疗组针刺"内关、神门、后三里(足三里)、三阴交"治疗。治疗11周后,采血检测氧化低密度脂蛋白和载脂蛋白B含量,并取小鼠主动脉窦行HE染色和免疫组化染色,观察比较各组小鼠间血清氧化低密度脂蛋白和载脂蛋白B含量的差异以及主动脉窦斑块的形态和斑块部位PPARγ表达的变化。结果针刺治疗能保护血管内膜,明显抑制斑块的发展,疗效好于药物治疗。结论针刺治疗能通过调节脂质和能量代谢、抗氧化等途径达到抑制斑块的发展,起到健脾益气,化痰逐瘀的功效。     

三七总皂苷对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块的影响

目的研究三七总皂苷对高脂饮食(15.00%脂肪,0.25%胆固醇,84.75%基础饲料)诱导的载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠主动脉组织动脉粥样硬化斑块的影响。方法以高脂饮食喂养ApoE-/-小鼠12周制作动脉粥样硬化模型,然后随机分为3组(模型组、三七总皂苷组和辛伐他汀组),并以野生型C57BL/6J小鼠作为对照组,ApoE-/-小鼠继续高脂喂养并灌胃给药8周后,取血及主动脉根部组织,采用ELISA检测血清中MMP-9和TIMP-1水平,油红O染色观察主动脉组织脂质沉积情况,HE染色测量血管壁内中膜厚度及斑块的面积。结果高脂诱导的模型组小鼠血清中MMP-9、TIMP-1显著升高,主动脉组织油红O阳性染色细胞显著增多,斑块脂质沉积明显,可见较明显的点状或斑片状斑块突向管腔,管腔狭窄明显,HE染色显示主动脉血管内可见明显粥样斑块沉积,管腔狭窄,斑块面积显著增大,主动脉血管内膜明显增厚。与模型组比较,三七总皂苷组和辛伐他汀组小鼠血清中MMP-9、TIMP-1均显著降低,但TIMP-1较对照组显著升高,主动脉组织中油红O阳性染色细胞明显减少,斑块脂质沉积减少,面积减小,凸向管腔程度明显降低,HE染色显示主动脉粥样斑块沉积明显减少,斑块面积明显缩小,血管壁内中膜厚度显著减少。结论三七总皂苷可以抑制动脉组织脂质沉积,调节MMP-9和TIMP-1的表达,进而起到稳定斑块的作用。     

从心论治方改善ApoE--/--小鼠动脉粥样硬化及上调ACE2蛋白表达

目的 探讨从心论治方（CXLZF）对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化（AS）损伤的作用机制。方法 采用高脂饮食喂养ApoE-/-小鼠12周建立AS模型,随机分为模型组,CXLZF低（4.5 g·kg-1·d-1）、中（9 g·kg-1·d-1）、高（18 g·kg-1·d-1）剂量组,辛伐他汀（5 mg·kg-1·d-1） 组,同时以普通饮食喂养C57BL/6小鼠作为对照组,6只/组。各组小鼠给予相应药物灌胃,对照组、模型组灌胃等体积生理盐水,干预12周。分别采用油红O、Masson、HE染色法观察斑块及肝脏病变情况,检测血脂、血糖及肝功指标;Western blotting法检测血管紧张素转换酶2（ACE2）、E-选择素（E-selectin）蛋白表达,免疫荧光法对ACE2蛋白表达进行定位。在体外,以CXLZF灌胃SD大鼠制作含药血清、生理盐水灌胃大鼠制作对照血清后,采用100 μg/m L ox-LDL干预人脐静脉内皮细胞（HUVECs）建立细胞损伤模型,CXLZF含药血清（5%、10%、20%）干预人脐静脉内皮细胞,对照组、模型组细胞给予10%对照血清。检测细胞ACE2表达。结果 CXLZF低、中、高剂量干预均有效缩小AS小鼠主动脉斑块面积,增加斑块稳定性;同时,CXLZF干预显著降低AS小鼠血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平（P<0.05）,高剂量组降脂效果最佳;CXLZF干预还可降低AS小鼠血清天门冬氨酸转氨酶和丙氨酸转氨酶含量（P<0.05）、改善肝脏脂肪变性。CXLZF干预显著上调AS小鼠主动脉ACE2、下调E-selectin表达（P<0.05）。细胞实验中,CXLZF含药血清（5%、10%、20%）显著上调氧化低密度脂蛋白干预人脐静脉内皮细胞的ACE2表达（P<0.05）。结论 CXLZF可有效减轻小鼠AS损伤,可能与调控ACE2蛋白有关。     

TIPE2和炎性细胞因子在鼠动脉硬化斑块形成中的表达及其相互关系

目的 探讨新的免疫负调控分子TIPE2和炎性细胞因子在ApoE基因敲除鼠（ApoE-/-小鼠）动脉粥样硬化斑块形成中的表达及其相互关系，分析其在动脉粥样硬化中的作用。 方法 应用ApoE-/-小鼠构建动脉血管粥样硬化模型，普通C57野生型小鼠为对照组，通过对动脉血管HE染色及油红O染色判定斑块进展情况，并用RT-PCR的方法检测斑块局部TIPE2及白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-12p40（IL-12p40）、转化生长因子-β（TGF-β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达，定量后分析其直线相关关系。结果 8周龄ApoE-/-小鼠高脂喂养至16周后，动脉已形成明显粥样硬化斑块，同周龄野生型C57小鼠血管壁内未见斑块形成；TIPE2在ApoE-/-小鼠无斑块期（8周）、斑块早期（16周）及斑块中晚期（24周）主动脉中表达均明显高于C57对照组；IL 6在ApoE-/-小鼠主动脉斑块各时期表达与C57小鼠相比均无明显变化；而在无斑块期IL 12p40、TGF-β及TNF-α表达较C57小鼠已明显升高（P<0.05）；在斑块早期时， TGF-β及TNF-α表达仍然高于对照组（P<0.05）；但斑块进展到中晚期，仅有TGF-β较同周龄C57小鼠表达量高（P<0.05）。进一步分析发现，TIPE2的表达和TNF-α呈正相关，相关系数为0.757（P=0.007），但与IL-6、IL-12p40和TGF-β表达无明显相关性。 结论 TIPE2在ApoE-/-小鼠的表达较C57对照组明显升高，且与TNF-α正相关, 提示TIPE2可能在动脉粥样硬化的发生中发挥作用。     

CTLA-4Ig融合蛋白对ApoE基因缺陷小鼠动脉粥样 硬化的抑制作用

 【目的】 探讨CTLA-4Ig融合蛋白对高脂饮食饲养的载脂蛋白E基因缺陷小鼠(ApoE-/-)动脉粥样硬化病变的抑制作用&#65377;【方法】 25只10周龄ApoE-/-小鼠,高脂饮食饲养4周后,随机取5只验证AS病变(对照组);剩余20只随机分为4组(每组5只),继续高脂饮食饲养,分别采用CTLA-4Ig&#65380;PBS&#65380;IgG1腹腔注射,第4组不予处理;8周后取小鼠主动脉进行病理学检查,检测AS相关指标,包括斑块面积/管腔面积比&#65380;血管内膜/中膜厚度比,斑块内脂质&#65380;胶原和平滑肌细胞含量&#65377;【结果】 高脂饮食饲养4周后,出现明显AS病变&#65377;继续高脂饮食饲养8周,形成典型AS斑块,CTLA-4Ig组&#65380;PBS组&#65380;IgG1组和空白组的斑块面积/管腔面积比分别为0.27 ± 0.08&#65380;0.40 ± 0.08&#65380;0.43 ± 0.08和0.46 ± 0.10,较4周时(0.05 ± 0.01)明显增加(P < 0.05),4组的血管内膜/中膜厚度比分别为2.6 ± 0.6&#65380;6.0 ± 0.9&#65380;5.7 ± 0.8和5.9 ± 0.6,高于对照组(0.5 ± 0.1,P < 0.05),4组斑块内脂质含量(%)分别为26.0 ± 3.0&#65380;40.8 ± 5.7&#65380;40.6 ± 3.0和43.2 ± 5.7较4周时明显增加(7.2 ± 1.4,P < 0.05 )&#65377;采用CTLA-4Ig进行干预后,其斑块面积/管腔面积比&#65380;血管内膜/中膜厚度比和斑块内脂质含量显著低于PBS&#65380;IgG1和空白处理组(P < 0.05),而后3组间上述指标的差异无统计学意义(P > 0.05);CTLA-4Ig组斑块内胶原含量(16.0 ± 1.1)% 高于其他3组[(8.6 ± 1.2)%&#65380;(9.2 ± 1.5)%和(9.0 ± 1.3)%,P < 0.05)],其斑块内平滑肌细胞含量(11.8 ± 1.0)%明显高于其他3组[(7.8 ± 0.8)%&#65380;(7.5 ± 0.9)%和(7.3 ± 0.7)%,P < 0.05)],另外3组间上述指标的差异无统计学意义(P > 0.05)&#65377;【结论】 CTLA-4Ig融合蛋白能够阻抑高脂饮食饲养的ApoE-/- 小鼠动脉粥样硬化进程, 其增加斑块内血管平滑肌细胞生成胶原作用有助增加AS斑块的稳定性&#65377;     

哌唑嗪对ApoE－／－小鼠动脉粥样硬化斑块内MMP-1和 TIMP-1表达的影响

目的：观察哌唑嗪对ApoE基因敲除（ApoE－／－）小鼠动脉粥样硬化斑块中基质金属蛋白酶‐1（MMP‐1）及基质金属蛋白酶组织抑制剂‐1（TIMP‐1）表达的影响,探讨哌唑嗪的抗动脉粥样硬化作用及其机制。方法将24只8周龄ApoE－／－小鼠随机分为正常饮食组、高脂饮食组、哌唑嗪组,各8只,正常饮食组给予普通饲料喂养,高脂饮食组与哌唑嗪组均给予高脂饮食;于实验第2周开始,哌唑嗪组在高脂饮食基础上每日灌胃盐酸哌唑嗪（1 mg／kg ）,正常饮食组与高脂饮食组每日灌胃等体积生理盐水。12周后,腹主静脉取血检测各组血脂水平,另取主动脉标本采用免疫组织化学法测定MMP‐1与 TIMP‐1表达水平,并进行比较分析。结果与高脂饮食组比较,哌唑嗪组血清总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）及低密度脂蛋白胆固醇（LDL‐C）水平均降低,高密度脂蛋白胆固醇（HDL‐C）水平升高,差异均有统计学意义（P＜0．05）;高脂饮食组小鼠主动脉内膜粥样斑块面积和内膜厚度均较正常饮食组明显增加,而哌拉唑嗪明显抑制斑块形成和内膜增生;与正常饮食组比较,高脂饮食组、哌唑嗪组MMP‐1蛋白表达水平升高,TIMP‐1蛋白表达水平降低,且哌唑嗪组MMP‐1蛋白表达水平低于高脂饮食组,TIMP‐1蛋白表达水平高于高脂饮食组,差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论哌唑嗪能够降低TC、LDL‐C水平,升高 HDL‐C水平,具有一定的抗动脉粥样硬化作用,且其机制可能还与降低斑块内MMP‐1表达水平,增加TIMP‐1表达水平有关。     

调肝导浊方对apoE-/-小鼠血脂及主动脉斑块面积的影响

[目的] 观察调肝导浊方对apoE^-/-小鼠血脂及主动脉斑块的影响。[方法] 将apoE^-/-小鼠随机分成模型组和调肝导浊组并予以高脂饮食12周,C57BL/6L小鼠作为对照组给予普通饮食,12周后,检测各组小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C)的水平;油红O染色评估主动脉斑块的范围;小动物超声仪检测主动脉的斑块面积及狭窄程度。[结果] 模型组与对照组相比,TC、TG、HDL-C、LDL-C均升高(P<0.05或P<0.01);调肝导浊组与模型组相比,LDL-C水平降低(P<0.05),TC、TG、HDL-C无明显差异。油红O染色显示模型组的斑块范围最大,其次是调肝导浊组,最后是对照组。B超结果显示与对照组相比,模型组主动脉的斑块面积及狭窄程度明显增大(P<0.01);调肝导浊方干预后,斑块面积减小(P<0.05),狭窄程度明显减轻(P<0.01)。[结论] 调肝导浊方可以降低apoE^-/-小鼠的血清LDL-C水平,减少主动脉的斑块面积,并改善血管的狭窄程度。     

不同周龄ApoE-/-雄性小鼠离体胸主动脉内皮依赖性舒张作用研究

目的:研究不同周龄ApoE~(-/-)雄性小鼠离体胸主动脉内皮依赖性舒张功能的变化。方法:采用不同周龄(18~44周)ApoE~(-/-)雄性小鼠,分离其胸主动脉,以不同浓度的乙酰胆碱(Ach)分别评价其内皮的完整性,并绘制浓度-舒张曲线,观察不同周龄ApoE~(-/-)小鼠胸主动脉内皮的依赖性舒张作用;胸主动脉行油红O染色,以评价不同周龄ApoE~(-/-)小鼠胸主动脉脂质沉积、斑块面积大小。结果:不同周龄ApoE~(-/-)小鼠离体胸主动脉在浓度为10-5mol/L的Ach作用下,其舒张率均80%,且随着周龄的增加,舒张率呈逐渐降低趋势;与24周相比,48周ApoE~(-/-)雄性小鼠离体胸主动脉在不同浓度Ach下,其舒张率均显著降低;与24周和36周ApoE~(-/-)小鼠相比,48周ApoE~(-/-)小鼠其斑块面积/血管剖面面积显著增加。不同周龄ApoE~(-/-)小鼠血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)差异均无统计学意义(P0.05)。ApoE~(-/-)雄性小鼠胸主动脉内皮完整性、血管舒张功能与周龄呈负相关关系(P0.05),同时与脂质沉积、斑块面积也呈负相关关系(P0.05)。结论:ApoE~(-/-)雄性小鼠血管内皮依赖性舒张率随着周龄及斑块面积/血管剖面面积的增加而降低,其胸主动脉血管内皮依赖性舒张功能与周龄、斑块面积/血管剖面面积呈负相关关系。     

Red Yeast Rice Prevents Atherosclerosis through Regulating Inflammatory Signaling Pathways

Objective: To observe the effects of red yeast rice(RYR) on blood lipid levels, aortic atherosclerosis(AS), and plaque stability in apolipoprotein E gene knockout(Apo E-/-) mice. Methods: Twentyfour Apo E-/-mice were fed with a high-fat diet starting from 6 weeks of age. Mice were randomized into three groups(n = 8 in each group): model group(Apo E-/-group), RYR group(Apo E-/-+ RYR group), and simvastatin group(Apo E-/-+ simvastatin group). Eight 6-week-old C57BL/6 mice were assigned as the control group and fed with a basic diet. After 36 weeks, plasma lipids and inflammatory factors were measured. Aortic atherosclerotic lesions by microscope, scanning electron microscope and transmission electron microscope were observed. Plasma levels of interleukin-6(IL-6) and tumor necrosis factor-α(TNF-α) were measured with enzymelinked immunosorbent assay. The level of high sensitivity C-reaction protein(Hs-CRP) was detected by the scattering immunoturbidimetric assay. Protein expression of matrix metalloproteinase-9(MMP-9) and nuclear factor κB(NF-κB) in aorta were tested by immunohistochemistry. Results: Compared with the model group, treatment with RYR significantly decreased the levels of total cholesterol, triglyceride, low-density lipoprotein cholesterol, lipoprotein(a), and apolipoprotein B100 in Apo E-/-mice(P0.01). Compared with the model group, treatment with RYR decreased the levels of Hs-CRP, IL-6, and TNF-α(P0.01). RYR also reduced the protein levels of NF-κB and MMP-9 of the aorta. Conclusions: RYR has the anti-atherosclerotic and stabilizing unstable plaque effects. The mechanism might be related to the inflammatory signaling pathways.     

牙龈卟啉单胞菌感染对载脂蛋白e基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

目的: 探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P. gingivalis)引起的炎症和氧化应激反应对动脉粥样硬化的影响及作用机制。方法: 采用8周龄载脂蛋白e基因敲除(ApoE knockout,ApoE-/-)小鼠建立动脉粥样硬化动物模型,将小鼠随机分为两组:(1)磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)健康对照组:8只ApoE-/-小鼠,普通饮食+PBS鼠尾静脉注射;(2)P. gingivalis感染组:8只ApoE-/-小鼠,普通饮食+P. gingivalis鼠尾静脉注射。1周3次,隔天1次,共10次。4周后处死,取心脏组织进行油红O染色,血清进行酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),主动脉进行实时荧光定量PCR以及Western blot检测。结果: P. gingivalis 感染组较PBS健康对照组可以显著加重ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的形成,增加血清中炎症介质,如白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)以及氧化应激介质8-羟脱氧鸟苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OHDG)表达,增加主动脉组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、NADPH 氧化酶(NADPH oxidase,NOX)-2和NOX-4基因的mRNA水平。P. gingivalis感染后在主动脉组织中观察到核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)表达有增高趋势。结论: P.gingivalis感染会加速ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化进程,诱导氧化应激和炎症反应;NF-κB信号通路可能是P. gingivalis加速动脉粥样硬化形成的重要作用机制。     

牙龈卟啉单胞菌感染对载脂蛋白e基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

目的: 探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P. gingivalis)引起的炎症和氧化应激反应对动脉粥样硬化的影响及作用机制。方法: 采用8周龄载脂蛋白e基因敲除(ApoE knockout,ApoE-/-)小鼠建立动脉粥样硬化动物模型,将小鼠随机分为两组:(1)磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)健康对照组:8只ApoE-/-小鼠,普通饮食+PBS鼠尾静脉注射;(2)P. gingivalis感染组:8只ApoE-/-小鼠,普通饮食+P. gingivalis鼠尾静脉注射。1周3次,隔天1次,共10次。4周后处死,取心脏组织进行油红O染色,血清进行酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),主动脉进行实时荧光定量PCR以及Western blot检测。结果: P. gingivalis 感染组较PBS健康对照组可以显著加重ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的形成,增加血清中炎症介质,如白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)以及氧化应激介质8-羟脱氧鸟苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OHDG)表达,增加主动脉组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、NADPH 氧化酶(NADPH oxidase,NOX)-2和NOX-4基因的mRNA水平。P. gingivalis感染后在主动脉组织中观察到核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)表达有增高趋势。结论: P.gingivalis感染会加速ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化进程,诱导氧化应激和炎症反应;NF-κB信号通路可能是P. gingivalis加速动脉粥样硬化形成的重要作用机制。