肠道微生态对三硝基苯磺酸诱导大鼠结肠炎基质金属蛋白酶-3调控作用的研究

目的探讨肠道微生态对三硝基苯磺酸（TNBS）诱导大鼠结肠炎基质金属蛋白酶-3（MMP3）基因表达的调控作用。方法将动物随机分为正常组、模型组、金双歧组3组。采用TNBS法制备大鼠结肠炎模型。造模后金双歧组予以金双歧2g/d经口灌服,1次/d,于第8天评价各组大鼠疾病活动指数（DA1）和组织学损伤评分;ELISA法检测结肠组织TNF-α、IL-10含量;免疫组织化学法检测NF-κB p65的表达;实时荧光定量PCR（RT-PCR）法测定MMP3-mRNA的表达。结果相比模型组,金双歧组大鼠结肠粘膜DAI[（5.90±1.67）比（9.20±1.75）]和组织学损伤评分[（4.80±1.25）比（7.10±0.99）],TNF-α含量[（503.98±126.63）pg/m1比（657.54±149.60）pg/ml],NF-κB p65的表达[（3.90±2.02）比（6.10±1.79）],MMP3-mPNA的表达[（3.56±2.13）比（16.53±13.80）]均降低（P均〈0.01或P〈0.05）,而IL-10含量[（95.57±27.71）pg/ml比（42.92±23.74）pg/ml]增高（P〈0.01）;NF-κBp65的表达与MMP3-mRNA表达呈显著正相关（相关系数γ=0.669,P〈0.05）。结论金双歧对TNBS诱导大鼠实验性结肠炎有明显的抗炎效果,其作用机制可能是通过下调MMP3-mRNA的表达、抑制NF-κB活性、平衡细胞因子网络等实现的。     

白头翁醇提物对三硝基苯磺酸诱导大鼠结肠炎细胞免疫调节的研究

目的探讨白头翁醇提取物对三硝基苯磺酸（TNBS）诱导大鼠结肠炎的抗炎效果和对细胞免疫的调节。方法SD雄性大鼠28只,随机分成白头翁组（n-10）,模型组（n-10）,对照组（n-8）。白头翁组（n-10）和模型组建立TNBS大鼠结肠炎模型。白头翁组和模型组大鼠,用舍30mgTNBS的TNBS50％乙醇溶液0．85m1灌肠,对照组给予等量生理盐水灌肠。造模后白头翁组大鼠用白头翁醇提物灌肠,每天1次,模型组和对照组以等量生理盐水灌肠。造模后第8天断颈处死大鼠,进行疾病活动指数（DAI）和组织学损伤评分,ELISA法测定结肠组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）水平。免疫组化学法检测结肠及脾脏组织CD4^＋T细胞、CD8^＋T细胞的表达。结果白头翁组DAI和组织学损伤评分较模型组低（P〈0．01）。结肠组织TNF-α、IL-6水平白头翁组低于模型组（P〈0．05或P〈0．01）。白头翁组结肠组织CD4^＋T细胞表达低于模型组（P〈0．05）,而CD8^＋T细胞表达高于模型组（P〈0．05）。白头翁组脾脏组织CD8^＋T细胞表达高于模型组（P〈0．05）。结论白头翁醇提物对TNBS诱导大鼠结肠炎有抗炎作用,可能是通过对CD4^＋T、CD8^＋T细胞的免疫调节,促使细胞因子和炎症介质水平降低,而达到抗炎效果。     

慢性肾衰竭大鼠主动脉NF-κB的表达变化

目的探讨尿毒症时主动脉局部炎症信号NF-κB表达变化。方法采用单肾切除、对侧肾动脉部分结扎法建立慢性肾衰竭模型，RT-PCR检测NF-κB p65亚基、I-κB mRNA表达水平，免疫组织化学检测p65亚基蛋白表达，凝胶迁移率法测定NF-κB活性，并用图像分析定量。结果与正常大鼠比较，慢性肾衰竭大鼠主动脉NF-κB p65亚基mRNA表达水平显著升高（P〈0．01），而I-κB mRNA表达水平显著降低（P〈0．01），NF-κB p65亚基蛋白表达和活性也显著增加（P〈0．01），并随病程延长而进一步上升。蛋白酶体抑制剂MG-132可明显抑制慢性肾衰竭大鼠主动脉NF-κB组分表达和活性升高。结论慢性肾衰竭大鼠主动脉NF-κB炎症信号通路存在显著活化。     

核因子-κB在重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织中的表达

目的探讨核因子-κB在重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）发病中的影响及作用。方法36只SD大鼠随机分成SAP组、假手术组。动态观察各组大鼠血清淀粉酶、胰腺组织中NF-κB的表达及胰腺组织病理变化。结果SAP组大鼠血清淀粉酶、胰腺组织学病评分比假手术组明显升高（P〈0．01）；术后3h起，SAP组胰腺组织中NF-κB p65即持续上调，呈时间依赖性，12h与3h比较差异显著（P〈0．01），假手术组无明显表达（P〈0．01）。结论NF-κB的活化作为始动因子参与急性胰腺炎的炎症反应．NF-κB表达与胰腺组织损伤呈正相关，抑制NF-κB的表达有可能减轻胰腺炎症。     

核因子-κB在大鼠重症急性胰腺炎中的作用

目的探讨核因子-κB（NF-κB）在重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）发病中的作用及机制。方法90只SD大鼠随机分成假手术组、SAP组、吡格列酮预处理组。利用Schmidt法并加以改良（逆行胰胆内加压注射5％牛磺胆酸钠0．1mL／100g）复制SAP模型，动态观察各组大鼠血清淀粉酶、腹水淀粉酶，同时行病理切片进行姨隙病理评分，应用Western blot法榆浸4胰腺组织NF-κB表达，运用ELISA法检测IL-6的变化。结果大鼠血清淀粉酶、腹水淀粉酶、胰腺病理评分在相对应的时间点SAP组比假手术组明显升高（P均〈0．01）．吡格列酮预处理组较SAP组明显降低。造模3h后，SAP组胰腺组织中NFnκB p65持续上调。呈时间依赖性，6h与3h比较差异届著（P〈0．01），12h与6h比较差异显著（P〈0．01）；假手术组NF-κB p65表达很低；吡格列酮预处理组NF-κB也有表达，但是在相对廊的时间点明显弱于SAP组（P〈0．01）。IL-6的表达SAP组明显增加，吡格列酮预处理组在相对应的时间点均降低（P〈0．01）。结论NF-κB的活化作为始动因子参与大鼠重症急性胰腺炎的炎症反应，NF-κB表达与大鼠胰腺组织损伤呈正相关；抑制NF-κB的表达，下调炎症介质的表达，可减轻胰腺炎症。     

核因子-κB对糖尿病大鼠肾组织P-选择素表达的影响

目的研究糖尿病大鼠肾组织核因子-κB（NF-κB）和P-选择素（P-selectin）的表达,以及NF-κB抑制剂吡咯烷二硫基甲酸酯（PDTC）对其表达的影响。方法30只雄性Wistar大鼠随机分为三组：正常对照组（NC组）、糖尿病组（DM组）、吡咯烷二硫基甲酸酯干预组（DP组）,每组10只。喂养8周末检测血糖、糖化血红蛋白、肾重指数及尿白蛋白排泄率。采用免疫组织化学染色技术检测肾组织P—selectin及NF-κB表达。结果8周末,DM组大鼠肾组织中NF-κB和P—selectin表达明显高于NC组（P〈0．01）,DP组的表达显著低于DM组,高于NC组（P〈0．01）;P—selectin表达与NF-κB呈正相关（r=0．954,P〈0．01）。结论NF-κB及P—selectin表达在糖尿病大鼠肾组织中明显增加,抑制NF-κB表达可减少P—selectin的表达。     

尼膜同对脑出血大鼠血肿周围核转录因子-κB表达的影响

目的：研究尼膜同对大鼠脑出血后核转录因子．KB（NF-κB）表达的影响。方法：将SD大鼠随机分成正常组、假手术组、脑出血模型组、尼膜同治疗组。采用Ⅶ型胶原酶注入到大鼠右侧苍白球制备脑出血模型，每组分别在术后6、24、48、96h4个时间点收取脑组织标本．免疫组化检测NF-κBP65蛋白表达，同时测量脑组织含水量。结果：与正常组和假手术组比较，大鼠脑出血后脑组织NF-κB P65表达以及脑组织含水量显著增高（P〈0．01）；与脑出血模型组比较，尼膜同治疗组NF-κB P65水平及脑组织含水量均显著降低（6h，P〈0．05；24、48、96h，P〈0．01）。结论：屉莫通可以抑制脑出血后NF-κB表达，这可能是尼膜同减轻脑出血后脑水肿的机制之一。     

NBD多肽治疗实验性溃疡性结肠炎的实验研究

目的观察核困子κB必需分子（NF-κB essential modulator,NEMO）结合的小分子多肽（micromolecule polypeptide combining with NEMO-binding domain,NBD多肽）对实验性大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用。方法60只SD大鼠随机分成治疗组、对照组各30只,采用三硝基苯磺酸（TNBS）灌肠法制作溃疡性结肠炎大鼠模型,治疗组予腹腔注射1．3mg／100g体质量的NBD多肽,对照组予等量生理盐水,评估炎症活动指数（IAI）,给药后7d处死相应组的动物取结肠,肉眼观察结肠黏膜病变且按损伤情况积分,行病理切片、苏木素伊红（hematoxylin eosin,HE）染色,光镜下评估组织损伤;取病变结肠组织切片行免疫组化检测核因子κB（NF—κB）表达,检测髓过氧化物酶（MPO）、丙二醛（MDA）。结果治疗组大体形态损伤、组织学损伤评分、IAI评分分别为2．41±0．43、4．80±0．82、6,02±0．59,明显低于对照组（3．50±0．51、6．90±1．13、3．05±0．51）（P〈0．05）;治疗组MDA、MPO及NF—κB表达均低于对照组（P〈0．05）。结论NBD多肽对于溃疡性结肠炎大鼠模型有较好的治疗作用,其作用与其抑制NF—κB表达有关。     

清肠败毒饮对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜组织NF-κB水平的影响

目的：观察中药清肠败毒饮对实验性溃疡性结肠炎（UC）大鼠的治疗作用，并探讨其可能的作用机制。方法：用三硝基苯磺酸（TNBs）法复制大鼠实验性溃疡性结肠炎模型，分别给予清肠败毒饮和柳氮磺吡啶（SASP）治疗，14d后处死．观察结肠黏膜形态学和病理组织学变化，用免疫组化法测定大鼠结肠黏膜组织NF-κB的表达情况。结果：清肠败毒饮可显著改善实验性UC大鼠结肠黏膜病变，降低NF-κB的表达，与模型组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：清肠败毒饮能减轻实验性UC大鼠结肠黏膜损伤，促进炎症吸收和组织修复，推测其作用机制可能是与降低NF-κB表达水平有关。     

5-氨基水杨酸通过PPARγ在鼠结肠炎中发挥抗炎作用

目的探讨5-氨基水杨酸是否通过过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)途径在三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的结肠炎模型大鼠中发挥抗炎作用。方法40只♂SD大鼠,随机分为5组,每组8只。设立空白对照组,另4组利用TNBS/乙醇制备大鼠结肠炎模型后,设模型组、GW9662组、柳氮磺吡啶(SASP)组、GW9662 SASP组。造模后第2天起每日灌胃、腹腔注射给药,连续2周。结肠炎症的评价包括炎症活动指数、结肠大体及组织学评分,血中白细胞介素(IL)2、IL-10水平,结肠PPARγ、NF-κBp65表达。结果与结肠炎模型组比,SASP组能明显降低DAI评分,改善结肠大体、组织病理学损伤,血IL-2降低,IL-10升高,结肠内PPARγ表达增加,NF-κBp65表达减少,差异有显著性(P<0.05),且模型组大鼠结肠黏膜PPARγ表达与NF-κBp65表达呈负相关;而GW9662 SASP组大鼠DAI、结肠大体、组织病理学损伤,较模型组及SASP组无改善,PPARγ表达增加(P<0.05),但NF-κBp65无明显变化。结论5-氨基水杨酸可能通过PPARγ途径,负性调节NF-κB的表达,从而减少促炎介质(IL-2)、增加抑炎介质(IL-10)的释放,在TNBS诱导的结肠炎模型大鼠中发挥抗炎作用。     

白头翁醇提物对葡聚糖硫酸钠诱导大鼠结肠炎肥大细胞致炎作用的抑制研究

目的　研究白头翁醇提物对葡聚糖硫酸钠 (DSS)诱导结肠炎肠粘膜肥大细胞 (IMMC)致炎作用的抑制效果。方法　建立 DSS诱导的大鼠结肠炎模型 :SD大鼠 2 8只 ,随机分为三组 :白头翁治疗组 (1 0只 ) 1 - 7天用白头翁醇提物2 g/ kg/ d用蒸馏水配制成 1 ml溶液每天灌肠一次 ,自由饮用 3%DSS溶液 ;模型组 (1 0只 ) 1 - 7天用等同的蒸馏水 1 ml每天灌肠一次 ,自由饮用 3%DSS溶液 ;对照组 (8只 ) 1 - 7天用等同的蒸溜水 1 ml每天灌肠 1次 ,自由饮水。观察大鼠的腹泻、便血症状及结肠组织学改变。分别用莹光法测定结肠组织组胺浓度 ,EL ISA测定结肠组织肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)和前列腺素 E2 (PGE2 )水平。组织化学法 IMMC染色并记 IMMC数。结果　白头翁治疗组与模型组比较 ,治疗组大鼠的症状减轻结肠粘膜组织损伤显著改善 (P<0 .0 5 ) ,结肠组织组胺水平升高 ,TNFa和 PGE2显著降低 (P<0 .0 1 )。 IMMC计数减少 (P<0 .0 5 )脱颗粒现象减弱。结论　白头翁醇提物具有明显的抗炎作用 ,其机制是通过抑制 IMMC的活化和组胺的释放 ,终止肥大细胞 -细胞因子级联反应 ,降低 TNFa和 PGE2生成 ,从而减轻结肠炎性损伤和腹泻、便血等症状。     

苦李根对乙醇诱导肝损害的保护作用研究

目的研究苦李根提取物对乙醇诱导肝损害的保护作用.方法建立乙醇诱导的小鼠实验性肝损害模型,分为生理盐水组、乙醇组、苦李根提取物 乙醇组、苦李根提取物组四组,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和肝内丙二醛(MDA)含量.结果苦李根提取物可显著降低乙醇诱导的ALT、AST、MDA升高.结论苦李根提取物对乙醇诱导的肝损害有保护作用.     

总状绿绒蒿醇提物对人白血病K562细胞DNA损伤及细胞周期的影响

目的：探讨传统藏药总状绿绒蒿体外对人慢性髓系白血病细胞株K562细胞增殖活性的影响,并阐明其相关作用机制。方法：不同浓度（30、60、90、120和150 mg•L^-1）总状绿绒蒿醇提物作用于体外培养的白血病K562细胞,同时设置空白对照组, MTT法检测各组细胞增殖抑制率,倒置显微镜观察细胞形态学改变,单细胞凝胶电泳检测细胞DNA损伤,流式细胞术检测细胞周期时相变化。结果：作用于K562细胞24、48和72 h后,不同浓度总状绿绒蒿醇提物组K562细胞生长受到明显抑制,与空白对照组比较,其增殖抑制率明显增加(P＜0.05),并呈浓度和时间依赖性。倒置显微镜下观察,随着总状绿绒蒿醇提物浓度增加,K562细胞数量减少,细胞形态不规则,轮廓模糊,细胞碎片增多。单细胞凝胶电泳（SCGE）检测,与空白对照组比较,60、90和120 mg•L^-1总状绿绒蒿醇提物组K562细核内DNA片段化、TailDNA%升高,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)。细胞周期检测,60、90和120 mg•L^-1总状绿绒蒿醇提物作用于K562细胞24 h后,G0/G1期、S期细胞所占比例逐渐下降,G2/M期细胞所占比例逐渐升高,分别为（1.88±0.30）%、（5.46±0.57）%和（19.80±1.03）%,各浓度组与空白对照组［(1.10±0.12) %］比较差异均有统计学意义（P＜0.05）,总状绿绒蒿醇提物组K562细胞周期发生了G2/M期阻滞。结论：总状绿绒蒿醇提物对K562细胞有显著
的增殖抑制作用,其机制可能与诱导DNA损伤引发G2/M期阻滞有关联。
     

牡蛎肉与黄芪防治去卵巢大鼠脑衰老协同作用的研究

目的观察牡蛎肉与黄芪防治去卵巢大鼠脑衰老的协同作用。方法采用4月龄的雌性大鼠行双侧卵巢摘除术后,分别给予牡蛎肉、黄芪和牡蛎肉加黄芪水提液灌胃3个月,测定大鼠脑组织生化指标和形态计量学。结果牡芪水提液组大鼠较牡蛎肉和黄芪水提液组的超氧化物歧化酶活性增强而丙二醛含量下降,纹状皮质分子层厚度增加,分子层厚度和皮层总厚度的比值下降,海马CA_1区单位面积大锥体细胞数增多。结论黄芪能够增强牡蛎肉水提液延缓去卵巢大鼠脑衰老的作用。     

怀地黄的降压镇静抗炎作用及有效部分分析

目的探讨怀地黄降压、镇静、抗炎作用的有效部分。方法用怀地黄的乙醚、乙醇、水提取物分别进行动物实验，以观察其药理作用，将水提取物分离得到中性、酸性、碱性提取物，分析其有效部分。结果怀地黄的水提取物有显著降压、镇静、抗炎作用（Ｐ＜０．０１），而乙醚、乙醇提取物无这种作用。怀地黄水提取物的酸性部分有上述药理作用（Ｐ＜０．０５），而中性、碱性部分作用不显著。水提取物酸性部分主要含甙类、生物碱类及磷酸等成分。结论怀地黄的降压、镇静、抗炎作用的有效成分存在于水提取物中。     

拟黑多刺蚁醇提取物对荷瘤鼠免疫功能的影响

目的：研究拟黑多刺蚁(PVR)醇提取物对荷瘤鼠免疫功能的影响,从免疫学角度探讨其抑瘤机理。方法：随机将小鼠分为对照组,PVR醇提液高、中、低实验组。各组小鼠腋下接种S₁₈₀小鼠腹水肉瘤细胞,建立肿瘤动物模型。对照组用蒸馏水灌胃,实验组分别以0.5、1.0和1.5 g•kg^-1 PVR醇提液灌胃,连续10 d,以肿瘤重量、抑瘤率,脾脏指数,白细胞介素2（IL-2）,NK和LAK细胞活性及T、B淋巴细胞增殖为评价指标。结果：PVR明显抑制荷瘤鼠肿瘤细胞的生长,促进脾细胞增殖反应和IL-2分泌,增强LAK和NK细胞的活性。结论：PVR体内抑瘤作用与其增强机体抗肿瘤免疫功能有关。     

杜仲醇提物和水提物对小鼠免疫性肝损伤保护作用的研究

①目的 研究杜仲醇提物和水提物对卡介苗-脂多糖(BCG-LPS)所致小鼠免疫性肝损伤的保护作用.②方法 小鼠90只,雌雄各半,随机分为9组,每组10只,即正常对照组、模型对照组、阳性对照组、醇提组和水提组的低、中、高剂量组(40.95、81.90、163.80g生药/kg).观察杜仲提取物对小鼠肝脏组织病理学的影响.各组每天灌胃,给药容量为20mL/(kg·d),连续10天.正常组和模型组给予蒸馏水,阳性组给予联苯双酯0.60g/kg,醇提和水提组分别给予杜仲醇提物或水提物163.80、81.90、40.95g生药/kg.采用BCG-LPS造成小鼠急性肝损伤,10天后取血检测ALT、AST、SOD的活性和MDA、GSH的水平.③结果 杜仲醇提物和水提物能明显降低BCG-LPS所致的肝损伤小鼠肝脾指数的升高(P＜0.05)和血清中ALT、AST活性的升高(P＜0.05),亦能降低肝组织中MDA 的水平,增加肝组织中SOD的活性和GSH-PX的水平(P＜0.05).肝脏组织病理学也显示联苯双酯和杜仲提取物能明显的对抗肝细胞的损伤,但杜仲水提物不如醇提物(P＜0.05).④结论 杜仲醇提物具有显著的抗免疫性肝损伤的作用.     

不同黄芩提取物制备工艺研究

日的制备不同黄芩苷含量的黄芩提取物。方法以正交试验优选较佳提取工艺,提取液采用酸沉碱溶处理,以乙醇沉淀使乙醇含量分别达到10％、20％、30％、40％、47．5％,乙醇液加盐酸沉淀得到提取物。结果得到不同纯度的黄芩提取物。结论研究结果可得到收率和转移率较高的差异化提取物。     

党参多糖的提取工艺研究

目的：确定党参多糖的最佳提取工艺。方法：以多糖提取率为指标,用正交实验法确定党参多糖的最佳提取工艺和醇沉条件。结果：最佳提取工艺料液比为1∶10,提取1.0 h,提取3次;醇沉条件为：提取液浓缩至1 g/mL,加入乙醇至醇沉浓度为80%,醇沉时间为12 h。结论：该工艺简便、稳定、准确,可用于党参多糖的提取。