一氧化氮在大白鼠杆硬变门静脉高压症中的作用

为探讨一氧化氮在肝硬变形成过程中的作用，我们通过观察一氧化氮合成酶在正常鼠和肝硬变、门静脉高压症大鼠肝脏的分布，同时测定了门静脉血亚硝酸盐／硝酸盐离子水平，并监测两组动物的血液动力学指标。结果提示：一氧化氮在肝细胞的损伤及肝硬变门静脉高压的血液动力学改变中起重要作用。     

诱生型一氧化氮合成酶基因mRNA在肝硬变门静脉高压症大鼠胃粘膜中的表达

一些文献报道ＮＯ与肝硬变门静脉高压症（ＣＰＨ）高动力循环有关,但诱生型一氧化氮合成酶（ｉＮＯＳ）基因ｍＲＮＡ在ＣＰＨ胃粘膜中的表达情况及酶的活性变化尚不十分清楚,为此我们进行了该方面研究,结果报道如下。 材料和方法 １．动物模型和标本的采集 雄性ＳＤ大鼠３０只,体重１７５～２２０ｇ,平均１９１ｇ。２０只用于制备ＣＰＨ模型,皮下注射６０％ＣＣｌ油性溶液（６０％ＣＣｌ、４０％中性茶油）０．３ｍｌ／１００ｇ体重（首次剂量０．５ｍｌ／１００ｇ体重）,每周注射两次,共注射８周,常温下饲养（１８～２２℃）, １…     

一氧化氮在大鼠肝硬变门静脉高压症形成中的作用及其对血液动力学 …

目的 探讨一氧化氮（ＮＯ）在肝硬变门静脉高压症（ＰＨＴ）形成过程中的作用。方法 采用比色法和鲎试验改良基质显色法,对大鼠肝硬变ＰＨＴ形成过程中,外周血ＮＯ、内毒素浓度和血液动力学的变化进行检测,观察了ＮＯ合成酶抑制剂Ｌ－ＮＭＭＡ对ＰＨＴ大鼠血液动力学的影响。 结果 （１）在大鼠肝硬变ＰＨＴ形成过程的早、中、晚三期,血浆ＮＯ和内毒素水平显著升高。（２）在肝硬变形成各期门静脉阻力（ＰＶＲ）和门静脉压力     

酚妥拉明对肝硬变门静脉高压症患者门静脉压力的影响

作者观察了１４例经病理确诊为坏死后肝硬变门静脉高压症患者及７例无肝脏疾病及肝脏转移的大肠癌患者周围静脉输入α肾上腺受体拮抗剂酚妥拉明前后肝静脉楔入压（ＷＨＶＰ）和门静脉压（ＰＶＰ）的变化情况。结果显示酚妥拉明能够有效地降低肝硬变门静脉高压症患者的ＷＨＶＰ和ＰＶＰ，（０．５６～０．６３ｋＰａ，０．４２～０．５０ｋＰａ，Ｐ＜０．０１），但同时对动脉舒张压和心率有一定影响（动脉舒张压下降０．９４～１．２７ｋＰａ，心率上升８．６７～１０．６７次／分），酚妥拉明对没有肝脏疾病和门静脉高压症的患者没有降低门静脉压力的作用。     

肝硬变门静脉高压症外科治疗的今日思考

在以往的时日里，对于肝硬变门静脉高压症的治疗常常争论于是以内科治疗为主还是外科治疗为主；若进行外科治疗，是以断流还是分流手术为首选，抑或联合手术；若选定了某种术式，是行预防性干预还是不得已而为之的急诊干预，凡此种种，尚可举之。但是时至今日，该领域在观念和技术上已经有了很大的变革与进步。对此，我们的关注及思考也随之发生变化，现不揣冒昧，敞开所想，予以探讨。     

肝硬变门静脉高压症患者肝体积测量研究及其临床意义

目的探讨用个人电脑及自行开发的软件对肝脏CT断层图像进行三维重建和测量及其在肝硬变门静脉高压症患者中的临床意义.方法术前对46例行原位肝移植的肝硬变门静脉高压症患者和30例正常对照者的肝脏CT断层图像进行三维重建和测量,术后与肝硬变门静脉高压症患者切除的受体实测肝体积进行对比分析.结果46例肝硬变门静脉高压症患者用本方法测得平均肝脏体积为(983.33±206.11)cm3,同组实测平均肝脏体积为(904.93±209.56)cm3,二者之间呈高度正相关(r=0.969,P＜0.01),本方法测定值的平均误差为8.66%.正常对照组用本方法测得平均肝脏体积为(1 287.00±96.18)cm3,与其身高、体重和体表面积之间均存在着正相关关系(r值分别为0.845、0.833和0.932,P＜0.01).肝硬变门静脉高压症患者肝脏体积与Child-Pugh分级有关,C级患者肝脏体积明显小于B级者;也与血浆白蛋白水平呈显著正相关(r=0.496,P＜0.01),与总胆红素水平(r=-0.493,P＜0.01)及凝血酶原时间(r=-0.517,P＜0.01)呈显著负相关,与ALT值(r=0.206,P＞0.05)、门静脉压力(r=-0.093,P=0.539)及门体自然分流指数(r=0.044,P=0.769)无明显相关关系.结论运用该方法对肝脏CT断层图像进行三维重建和测量准确性较高.肝脏体积大小与肝功能有密切关系,肝脏体积可较敏感地反映肝脏储备功能状况.     

肝硬变门静脉高压症时胃壁血管免疫复合物在胃粘膜病变机制中的作用

目的:探讨肝硬变门静脉高压症时胃壁血管免疫复合物在胃粘膜病变机制中的作用.方法:采用免疫组化技术,辅以形态学观察,研究门静脉高压症猪粘膜C_3,C_4,IgG,IgE,5-HT的表达,分布及胃壁血管病变.结果:门静脉高压症猪胃粘膜的微血管壁有C_3、C_4,IgG,IgE及5-HT阳性或强阳性反应物伴明显的胃粘膜损伤,正常猪为阴性或弱阳性.结论:门静脉高压症时胃粘膜的微血管有免疫复合物的沉积,可引起免疫复合物性损伤,可能是门静脉高压性胃粘膜病变的发病机制之一.     

一氧化氮降低肝硬化门静脉高压症血管收缩反应性的实验研究

目的 探讨NO在肝硬化门静脉高压症血管收缩反应中发挥作用的机制,特别是NO与RhoA/ROCK通路间的相互作用机制.方法 分别测定正常大鼠(正常对照组,5只)、CCl4诱导的肝硬化门静脉高压症大鼠(实验对照组,6只)和经L-NAME处理的门静脉高压症大鼠(L-NAME处理组,6只)外周血和肠系膜动脉NO含量;利用血管灌流系统测定上述3组大鼠肠系膜微动脉对去甲肾上腺素的反应;Westernblot分别检测3组大鼠肠系膜动脉NO-cGMP-PKG通路和RhoA/ROCK相关蛋白表达水平的变化.多组间均数比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验,肠系膜微动脉对去甲肾上腺素反应性的变化通过量-效曲线表示,运用非线性回归法,计算出EC50值.结果 (1)正常对照组、实验对照组和L-NAME处理组大鼠平均门静脉压力分别为(6.2±0.9)mm Hg(1mm Hg =0.133 kPa)、(13.9±1.7)mm Hg和(16.6±1.3)mm Hg,3组比较,差异有统计学意义(F=94.4,P＜0.05).(2)正常对照组、实验对照组和L-NAME处理组大鼠平均血清NO浓度分别为(43±5)μmol/L、(82±16) μmol/L和(45±9)μmol/L,3组比较,差异有统计学意义(F =24.77,P＜0.05);L-NAME处理组大鼠平均NO浓度明显低于实验对照组(P＜0.05).(3)正常对照组、实验对照组和L-NAME处理组大鼠肠系膜动脉平均NO含量分别为(236±41) μmol/g、(407±82) μmol/g和(216 ±42) μmol/g,3组比较,差异有统计学意义(F =20.29,P＜0.05);L-NAME处理组大鼠肠系膜动脉平均NO含量明显低于实验对照组(P＜0.05).(4)与实验对照组大鼠比较,L-NAME处理组大鼠的离体肠系膜微动脉对去甲肾上腺素剂量反应曲线左移,但未达到正常对照组大鼠反应曲线水平,正常对照组、实验对照组和L-NAME处理组大鼠EC50分别为6.458×10-7 mol、9.546×10-7 mol和7.494×10-7 mol,L-NAME处理组与其余两组比较,差异有统计学意义(=2.726,3.112,P＜0.05).(5)与正常对照组比较,实验对照组大鼠肠系膜动脉eNOS蛋白和p-VASP蛋白表达水平明显增高(P＜0.05),但L-NAME处理组eNOS和p-VASP蛋白表达水平显著降低,但仍高于正常对照组(P＜0.05).3组大鼠肠系膜动脉PKG-1、ROCK-1和p-moesin蛋白表达水平无明显变化(P＞0.05).(6)去甲肾上腺素刺激后,正常对照组和L-NAME处理组大鼠肠系膜动脉ROCK-1的活性显著上升,而实验对照组无变化.结论 CCl4致肝硬化门静脉高压症大鼠肠系膜动脉NO含量增高,影响缩血管物质诱导ROCK激活;L-NAME降低肠系膜动脉壁内NO的含量,改善了RhoA/ROCK信号通路传递障碍,促使缩血管物质诱导ROCK激活,但不影响ROCK蛋白表达水平的变化.     

抑制NO生物合成对肝硬变大鼠血流动力学的影响

目的 探讨NO在肝硬变门脉高压血流动力学中的作用。方法 用SD大鼠制备肝硬变门脉高压(CPH)模型,正常鼠做为对照组。每一组实验动物再分成三个亚组：NO生物合成抑制剂L-NMMA组、L-NMMA+NO生物合成底物L-arginine组和生理盐水安慰剂组。血流动力学研究用放射性微球检测技术。结果 CPH鼠出现心输出量和内脏血流量增加,平均动脉压、外周和内脏血管阻力降低等高血流动力学特征。L-NMMA可以纠正CPH鼠的高血流动力学状态,各指标达到正常鼠基础水平。先给予L-arginine,则L-NMMA对CPH鼠的作用消失。结论 肝硬变门脉高压中NO过量形成在高动力循环中起重要作用。     

脾切除对肝前性门静脉高压大鼠肝脏种植型肿瘤的诱导型一氧化氮合酶mRNA表达和肿瘤微血管密度的影响

目的 观察脾切除对肝前性门静脉高压大鼠肝脏种植型肿瘤组织的诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达和肿瘤微血管密度(MVD)的影响.方法 采用门静脉部分结扎的方法 建立20只肝前性门静脉高压大鼠的模型,3周后将其随机分为2组:施行脾切除手术组(A组)、不施行脾切除手术组(B组),脾切除1周后在A、B组大鼠的肝脏上种植Walker256瘤株,2周后肿瘤组织取材.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法 测定各组肿瘤组织标本的诱导型iNOS mRNA的表达量;免疫组织化学方法 染色进行肿瘤微血管计数;测定A、B组大鼠肝脏种植肿瘤的最长、最短径,计算肿瘤体积.结果 A、B两组iNOS mRNA表达量分别为2.32±0.24、2.98±0.28(P<0.05),A、B两组的肿瘤MVD分别为(18.76±1.21)/HP、(19.98±1.28)/HP(P<0.05),iNOS mRNA的表达量及肿瘤MVD的变化呈正相关(r=0.4751,P<0.05).结论 施行脾切除术可以降低肝前性门静脉高压大鼠肝脏种植型肿瘤iNOS mRNA的表达,导致一氧化氮(NO)的合成、释放减少,削弱了肿瘤血管生成的促进因素,使肿瘤组织MVD降低.该手术有助于降低肝脏肿瘤的侵袭能力.     

先天性心脏病合并肺动脉高压患者肺组织一氧化氮合酶的表达

目的：通过观察先天性心脏病合并肺动脉高压患者肺组织内皮型一氧化屡合酶（eNOS)的表达，了解其肺血管内皮细胞功能有否异常。方法：32例先天性心脏病患者分为2组，组I：合并肺动脉高压患者（n=16);组Ⅱ：未合并肺动脉高压患者（n=16)。在心内直视术下，取少许右肺中叶组织，利用免疫组织化学和逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）技术，对eNOS进行半定量分析。结果：组Ⅱ患者肺血管内皮细胞内eNOS免疫染色比组I明显增强（F＝93．98，P＜0．01）；组Ⅱ患者肺血管内皮细胞内eNOSmRNA表达比组I明显增高（F＝58．76，P＜0．01）。结论：先天性心脏病合并肺动脉高压患者的eNOS表达减少，造成内源性一氧化氮（NO）生成不足，为该类患者吸入NO治疗肺动脉高压提供了理论依据。     

肝硬化门脉高压鼠血浆内皮素变化

目的研究门脉高压时血浆内皮素（ＥＴ）变化的可能机制。方法测定ＳＤ、ＩＨＰＨ、ＰＣＳ组大鼠平均动脉压（ＭＡＰ）、门静脉压（ＦＰＰ）以及腹主动脉、门静脉、肝静脉血中内皮素（ＥＴ）和一氧化氮（ＮＤ）含量。结果与ＳＯ鼠相比，ＰＣＳ鼠和ＩＨＰＨ鼠血浆内皮素水平明显下降（Ｐ＜０．０５），但ＰＣＳ鼠与ＩＨＰＨ鼠间的差异无显著性意义。血浆ＥＴ水平与ＮＯ水平呈显著负相关（ｒ＝－０．５７２３，ｎ＝２９，Ｐ＜０．０１）。结论肝硬化门静脉高压大鼠血中ＥＴ浓度下降主要是肝内血管内皮细胞和肝窦内皮细胞减少，使ＥＴ合成减少所致。此外，ＮＯ升高可能抑制ＥＴ产生，这也是导致ＥＴ减少的原因。【关键词】##4大鼠;;肝硬化;;门静脉高压症;;内皮素;;一氧化氮     

脑出血患者一氧化氮、一氧化氮合酶的变化及临床意义

目的 探讨一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)与脑出血的关系。方法 测定76例脑出血患者及66例健康人血浆NO、NOS含量，分析上述指标在出血后3个时期的变化以及与患者颅内血肿量、是否合并蛛网膜下腔出血和临床预后的关系。结果 与对照组相比，脑出血1～3d组NO、NOS含量明显高于4～7d组、14d组和对照组，NO、NOS变化与颅内血肿量和／或合并蛛网膜下腔出血有一定关系。结论 NO、NOS参与了脑出血病理生理过程，其变化对病情的预后有一定的意义。     

门奇断流术治疗肝硬化合并门静脉高压及脾亢的疗效分析

目的总结和分析脾切除加门奇断流术对肝硬化合并门静脉高压及脾亢的疗效。方法回顾性分析2000年1月至2004年6月间中山大学附属第一医院74例肝硬化门静脉高压脾亢病人采用脾切除加门奇断流术的资料,探讨其疗效。结果全组并发症发生率51.3%(38/74),1例死于全身感染及呼吸衰竭,其余病例经治疗后恢复良好。结论脾切除加门奇断流术治疗门静脉高压效果好。为提高手术疗效,应合理掌握手术适应证及手术时机,彻底断流,熟练掌握手术的技术要点,防止并发症的发生。     

Overexpression of inducible nitric oxide synthase in gastric mucosa of rats with portal hypertension: correlation with gastric mucosal damage

BACKGROUND: An increased biosynthesis of nitric oxide (NO) has been implicated in the hyperdynamic circulation and development of collaterals of portal hypertension (PHT) because of its potent vasodilatory effects. NO is synthesized from L-arginine by three different isozymes of nitric oxide synthase (nNOS, iNOS and eNOS). Thus, the expression of inducible NOS (iNOS) might account for NO overproduction in PHT. However, in previous investigations, the role of iNOS in the pathogenesis of PHT gastropathy remained controversial. Our current study was in both molecular and protein levels to determine whether the expression of iNOS is responsible for PHT gastropathy. MATERIALS AND METHODS: PHT was induced experimentally by partial ligation of the portal vein. Fourteen days after partial ligation of the portal vein, the rats were randomly assigned to receive either vehicle or L-NAME (NOS inhibitor) at doses of 5 mg/kg/day, 10 mg/kg/day, or 25 mg/kg/day by gastric lavage twice a day for 1 week. Sham operated rats served as controls. Northern hybridization and in situ hybridization are used to compare the expression of gastric mucosa iNOS mRNA in the PHT rats and the controls. NO was measured by the Griess method after reduction of nitrate to nitrite with nitrate reductase. Immunohistochemical staining was carried out to detect the iNOS protein. In addition, the severity of gross gastric mucosal lesions was evaluated macroscopically by a gross ulcer index. RESULTS: The iNOS expression at both mRNA and protein was prominently increased in PHT rats, accompanied with the enhanced NO production. The gastric mucosa iNOS mRNA and serum NO levels were significantly decreased after L-NAME administration (P < 0.05). However, the markedly reduced gastric mucosal damage in PHT rats was observed only at high does of L-NAME (25 mg/kg/day) administration. CONCLUSION: PHT triggers overexpression of iNOS mRNA and proteins in rat gastric mucosa, but that this alone does not account for PHT gastropathy.     

内皮型一氧化氮合酶、内皮素-1、蛋白激酶C、核因子-κB在门静脉高压血管内皮细胞的表达及意义

目的 探讨门静脉局部内皮源性血管活性物质异常与内皮细胞应力信号转导通路激活的关系.方法 用免疫组织化学和免疫荧光激光扫描共聚焦显微镜技术检测18例门静脉高压症、10例外伤性脾破裂患者脾静脉和15例门静脉高压、10例对照组大鼠门静脉内皮细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、内皮素-1(ET-1)、蛋白激酶C(PKC)、核因子-κB(NF-κB)的表达,探讨门静脉高压时其血管内皮细胞eNOS、ET-1表达改变与信息分子PKC、NF-κB的关系.结果 实验组内皮细胞PKC表达呈阳性或强阳性,对照组则呈阴性或弱阳性表达.其平均吸光度分别为实验组0.068 2±0.009 2(人)/0.059 3±0.005 7(鼠),对照组0.025 7±0.008 2(人)/0.022 4±0.006 5(鼠),差异有统计学意义(P＜0.01).eNOS、ET-1与NF-κB在门静脉高压患者脾静脉和实验组大鼠模型门静脉内皮的荧光信号强度均显著高于对照组ET-1107.359±30.147比56.441±18.874,P＜0.01(人);91.017±32.517比51.065±19.018,P＜0.01(鼠).eNOS95.610±28.333比57.872±27.374,P＜0.01(人);88.712±28.159比50.897±16.546,P＜0.01(鼠).NF-κB90.098±30.964(人)/90.348±32.852(鼠)比48.358±19.326(人)/48.070±19.065(鼠),P＜0.01(人)/P＜0.01(鼠).脾/门静脉内皮细胞ET-1、eNOS的表达与PKC、NF-κB的表达呈正相关(P＜0.05).结论 门静脉血中ET-1和NO的增高是由于门静脉系统内皮细胞合成增多所致,内皮细胞合成NO的增多与其eNOS表达上调有关.门静脉高压时其血管内皮细胞的机械应力信号通路被激活,内皮细胞ET-1和eNOS表达上调与该通路激活有关.     

诱导型一氧化氮合成酶在迟发性血管痉挛中的作用

目的　以大鼠迟发性脑血管痉挛模型为基础研究诱导型一氧化氮合成酶 (iNOS)在迟发性血管痉挛发展中的作用。方法　 3 2只雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组 ,实验组枕大池二次注血诱导迟发性脑血管痉挛 ,对照组枕大池注射生理盐水。第 8天行脑血管造影 ,枕大池抽取脑脊液测一氧化氮 (NO)浓度。逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR )法和免疫组织化学法测定并评价iNOSmRNA和蛋白质在基底动脉、大脑中动脉和皮质中的表达。结果　颅内动脉血管减影提示对照组颈内动脉颅内段、大脑中动脉 (MCA)明显变细 ,大脑中动脉中段直径 (MD)与镫骨动脉中段直径 (SD)之比衡量大脑中动脉的管径显示实验组MCA管径较对照组MCA管径减少 3 0 %。对照组脑脊液中NO浓度为 (11.70± 2 .62 ) μmol/L ,实验组脑脊液中NO的浓度为(5 5 .67± 12 .84)μmol/L。iNOSmRNA和蛋白质表达于基底动脉、大脑中动脉和皮质 ,其中基底动脉表达最强。 结论　iNOS作为迟发性脑血管痉挛发展中的关键因素参与血管壁的迟发性损伤。