吡喹酮对不同发育期血吸虫皮层损害的扫描电镜观察

应用扫描电镜观察了吡喹酮对体外培养的不同发育期血吸虫皮层的损害。结果表明,吡喹酮对虫龄为3～14天童虫的体表皮层无或仅有轻度损害,而虫龄为3h及21～42天的童虫或成虫的皮层则可受到中度或严重的损害。这与小鼠于感染后不同时期口服吡喹酮,自其体内取虫观察的结果相仿。本文就吡喹酮对不同发育期血吸虫皮层损害的意义进行了简要的讨论。     

渗透压对角膜上皮细胞的影响及牛磺酸对高渗环境细胞的保护作用

目的观察渗透压对体外培养的兔角膜上皮细胞的影响及牛磺酸对高渗环境细胞的保护作用,为人工泪液的处方制定提供理论依据。方法采用分离培养的兔角膜上皮细胞,分为低渗组(143,229和257mOsm·L~(-1))、等渗对照组(286mOsm·L~(-1))和高渗组(315,343和429mOsm·L~(-1)),用不同渗透压的培养液作用3h后,换回正常培养液培养3d,记录作用3h及恢复培养3d时的细胞形态,并用MTT法检测作用3h、恢复培养1d和恢复培养3d后的细胞活性。在正常培养液286mOsm·L~(-1)中加入牛磺酸培养细胞24h后,换为429mOsm·L~(-1)的高渗培养液培养3h后,换回含牛磺酸的等渗培养液恢复培养1d,倒置显微镜下记录作用3h及恢复培养1d时的细胞形态,并用MTT法检测细胞活性。结果高渗环境会导致细胞活性降低,甚至死亡;低渗环境会改变细胞形态及活性。257mOsm·L~(-1)渗透压组与等渗对照组相比,在作用3h及恢复培养1和3d后细胞形态及细胞活性差异无统计学意义。含有不同浓度牛磺酸培养基的各组细胞也有轻度肿胀,高渗培养基作用3h后以及恢复正常培养基培养1d后,细胞活性差异具有显著统计学意义(P<0.05)。结论泪液高渗透压会造成眼表损伤。应用渗透压为257mOsm·L~(-1)的人工泪液,在对正常细胞无影响的条件下,可降低干眼患者泪液的高渗透压,有助于干眼病的治疗。牛磺酸作为细胞保护剂,可降低高渗透压对细胞的损害,在干眼病治疗方面,具有很好的应用前景。     

共微囊血红蛋白对大鼠胰岛细胞功能的影响

目的：探讨共微囊血红蛋白(Hb)对大鼠胰岛细胞功能的影响。方法：用琼脂糖微囊包被大鼠胰岛或共同包被Hb体外培养，硝普钠(SNP)作为一氧化氮(NO)供体，放射免疫法检测培养液中胰岛素含量，比较共微囊化(含Hb)、单纯微囊化、未微囊化胰岛细胞胰岛素分泌功能。结果：无SNP培养液中，3种胰岛细胞之间胰岛素分泌量差异无显著性；含SNP培养液中，单纯微囊化、未微囊化胰岛细胞胰岛素分泌受到明显抑制；共微囊化胰岛细胞胰岛素分泌功能良好。结论：共微囊血红蛋白可拮抗NO对微囊内胰岛的损害，有利于维持胰岛的功能。     

氟化钠对体外培养乳大鼠心肌细胞毒作用的细胞化学的定量研究

本文用细胞化学方法研究了氟化钠对体外培养乳大鼠心肌细胞内糖原，琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）和培养液中乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）的影响。结果显示：当培养液中Ｆ－的终浓度达到３．２３μｇ／ｍｌ时，即可引起细胞内糖原浓度及ＳＤＨ活性显著下降。当培养液中Ｆ－的终浓度达６．４５μｇ／ｍｌ时，培养液中ＬＤＨ漏出量显著增加，并随着Ｆ－浓度增大而显著增多。上述结果表明：氟化物严重损害心肌细胞的能量代谢和细胞膜的完整性，导致细胞停搏、死亡，并对心肌有直接毒性作用。     

氯胺酮和硝苯吡啶对培养神经元谷氨酸兴奋毒性的保护作用

以体外培养的大鼠胚胎皮层神经元为对象,以培养上清液中乳酸脱氢酶活性为指标,研究了谷氨酸兴奋毒性及药物的保护作用。结果表明,培养10d的皮层神经元置于含10或50μmol·L^-1谷氨酸和低糖(1g·L^-1)的DMEM培养液中后,随着作用时间的延长,LDH漏出逐渐增加。在谷氨酸处理前,于培养液中加入氯胺酮或硝苯吡啶,则LDH漏出量明显低于对照组。氯胺酮和硝苯吡啶并用,LDH漏出量比单独使用氯胺酮或硝苯吡啶下降更加明显。结果表明,谷氨酸对培养的神经元可产生严重损伤。氯胺酮和硝苯吡啶单用或并用均有明显的保护作用。     

周期型马来丝虫微虫蚴的体外培养

建立丝虫的体外培养系统对丝虫病的防治与监测有着重要的价值。Sawyer和Weinstein(1963)首次报道犬恶丝虫在NCTC_(109)培养液中可发育到一期。1966年Wood和Suitor利用埃及伊蚊细胞的Grece＇s细胞系培养台湾猴丝虫微丝蚴,至第19天发育到第2期幼虫。此后,体外培养受到广泛注意,并取得一定进展。1987年,姜维维用CaCl_2人工脱鞘的马来丝虫微丝蚴在HamF_(12)和RPMI_(1640)含30％小牛血清中最高有20％可发育至腊肠期。陶鸿章(1989)用CaCl_2脱鞘的马来丝虫微丝蚴在含中华按蚊细胞系的TC_(199)培养液中有25.5％发育致腊肠期,并且认为有鞘微丝虫蚴的体外培养,脱鞘是使其发育的先决条件。本文报道未经人工脱鞘及人工脱鞘的微丝蚴在各种培养液及含东乡伊蚊胸肌细胞系的培养液中发育情况。     

吡喹酮引起的日本血吸虫体表皮层的损害和宿主白细胞侵入虫体的观察

感染日本血吸虫的小鼠一次口服吡喹酮300mg/kg后0.5小时,雄虫体表皮层即有不同程度的水肿、空泡样变化和空泡破裂,继则有细絮状物或絮状团块粘附在受损的体表或抱雌沟内。给药6小时后即见有白细胞附着在受损的皮层上,12小时后则已有白细胞侵入虫体。雌虫体表皮层的损害和出现白细胞附着与侵入虫体的时间较雄虫为迟。此外,对血吸虫经吡喹酮作用后,其皮层的损害和白细胞的附着与侵入虫体的意义进行了一些讨论。     

吡喹酮引起的日本血吸虫体表皮层的损害和宿主白细胞侵入虫体的观察

感染日本血吸虫的小鼠一次口服吡喹酮300mg/kg后0.5小时,雄虫体表皮层即有不同程度的水肿、空泡样变化和空泡破裂,继则有细絮状物或絮状团块粘附在受损的体表或抱雌沟内。给药6小时后即见有白细胞附着在受损的皮层上,12小时后则已有白细胞侵入虫体。雌虫体表皮层的损害和出现白细胞附着与侵入虫体的时间较雄虫为迟。此外,对血吸虫经吡喹酮作用后,其皮层的损害和白细胞的附着与侵入虫体的意义进行了一些讨论。     

牛磺酸对原代培养大鼠肝细胞的毒性作用研究

目的利用原代培养正常大鼠肝细胞研究牛磺酸对肝细胞的毒性作用。方法用两步灌注法分离原代大鼠肝细胞;观察牛磺酸对原代大鼠肝细胞的毒性作用：MTT法测直接加牛磺酸的培养液和含牛磺酸大鼠血清的培养液对细胞生长抑制率的影响,计算IC50,并测定药物作用后培养液上清中AST、ALT和LDH活性及培养液中GSH和细胞内GSH的含量。结果MTT实验中细胞生长抑制率与剂量成正相关性,牛磺酸的IC50为24.23g/L。高浓度牛磺酸组培养液上清AST、ALT和LDH活性显著升高,培养液上清和细胞内GSH含量显著减少。结论高浓度的牛磺酸对体外培养的肝细胞有一定损伤。     

钙对心跳停止患者是有益的，还是有害的？

50年前Chambers等人发现把阿米巴虫放入只含NaCl或KCl的水中，阿米巴原虫变得行动缓慢，卷缩而逐渐死亡；如把CaCl。加到细胞外液中时，则活性恢复．然而如将CaCl：注入细胞内则胞浆固缩。在心脏也有同样的效果，细胞外少量的钙对于收缩是很重要的一面细胞内钙增多则导致心肌。     

吡喹酮对体外培养的日本血吸虫的作用

吡喹酮(Praziquantel,Embay 8440)系一种具有抗绦虫和抗血吸虫作用的广谱抗寄生虫新药。动物实验证明,该药对小鼠、家兔和犬的日本血吸虫病都有很好的疗效,且毒性低,疗程短;临床上用吡喹酮的1～2天疗法治疗日本血吸虫病,总剂量为45～90mg/kg时,治后半年的粪检虫卵转阴率达99.7％。本文报道吡喹酮对体外培养的日本血吸虫的作用。     

吡喹酮对日本血吸虫摄入与释放5-羟色胺的作用

用体内、体外方法观察了吡喹酮对血吸虫摄入与释放5-羟色胺的作用。根据试验结果分析,认为由于吡喹酮不增加虫体的内源性5-羟色胺含量,亦不增强其对外源性5-羟色胺的摄入,故吡喹酮对血吸虫的兴奋与挛缩作用可能并非通过5-羟色胺。感染家兔体内的合抱日本血吸虫5-羟色胺含量为1.59±0.44μg/g湿重;雌、雄虫的则分别为1.08±0.11和2.28±0.23μg/g湿重。感染小鼠体内的合抱血吸虫5-羟色胺含量为1.14±0.01μg/g湿重。血吸虫的内源性5-羟色胺相当稳定,在体外培养6小时后未见明显减少。培养液中的5-羟色胺浓度高达5×10^-4～1×10^-3M时,血吸虫对5-羟色胺始有较明显的摄入,且摄入后易于释放。     

Effect of artemether on glucose uptake and glycogen content in Schistosoma japonicum.

AIM: To study the effect of artemether (Art) on glucose uptake and glycogen content in schistosomes. METHODS: Schistosomes recovered from mice treated intragastrically with Art 300 mg.kg-1 for 24-48 h, were incubated in the drug-free medium containing [U-14C]glucose 11.1 MBq.L-1. The glycogen content, [U-14C]glucose uptake, and incorporation of [U-14C]glucose into worm glycogen in both male and female worms were determined. RESULTS: When above-mentioned schistosomes were exposed to drug-free medium containing [U-14C]glucose for 1-24 h, the glycogen contents of male and female worms decreased 27%-61% and 39%-78%, respectively. Only 3 out of 6 male worm groups showed 23%-35% decrease in glucose uptake, while much less glucose uptake was found in female worms in all groups with reduction rates of 18%-38%. Apart from 2 male groups no apparent change in the incorporation of [U-14C]glucose into the worm glycogen was seen. CONCLUSIONS: Art-induced glycogen reduction in schistosomes was related to an inhibition of glycolysis rather than an interference with glucose uptake.     

吡喹酮对日本血吸虫雄虫的Ca2+,Mg2+,K+与Na+的含量及45Ca2+在虫体内分布的影响

日本血吸虫雄虫在4℃或37℃的HBS及无⁴⁵Ca²⁺的HBS中经吡喹酮1或30μg/ml作用0.5～2h后,未见虫的Ca²⁺,Mg²⁺含量有明显变化,但除4℃的HBS组外,余2组虫的K⁺含量明显减少,而虫的Na⁺含量的增加则不明显。在含30 mM Mg²⁺的HBS中,雄虫经吡喹酮作用1h后,虫的Mg²⁺含量明显增加。在37℃的HBS中,血吸虫雄虫经吡喹酮1μg/ml作用5～60min后,虫的皮层胞质中的⁴⁵²⁺含量的百分比较各相应对照组的明显减少,而虫体肌肉的则相反。在4℃的HBS或无⁴⁵Ca²⁺的HBS中,吡喹酮对⁴⁵²⁺在虫体内的分布无明显影响。     

抗血吸虫药物对日本血吸虫呼吸和糖酵解的影响

在应用氧电极技术测定日本血吸虫呼吸率的基础上,观察了酒石酸锑钾和吡喹酮对血吸虫呼吸和糖酵解的影响。结果表明:酒石酸锑钾对虫的呼吸呈明显的抑制;吡喹酮对虫的呼吸先刺激,在作用1 h后则表现为轻度抑制;在对呼吸有显著影响的浓度下,对虫的糖酵解并无明显影响。此外,用巯基抑制剂双酰胺、局部麻醉药利多卡因、布比卡因对血吸虫的呼吸进行了比较观察。     

鹤草酚对体外培养的日本血吸虫的作用

鹤草酚对体外培养的日本血吸虫具有较强的直接作用。药液浓度为4～8 μg/ml时,虫体活动兴奋,持续2～3分钟后,活动逐渐减弱,终至停止活动。两性血吸虫与鹤草酚多次接触后可产生耐药性,尤以雄虫较明显。在含鹤草酚0.25 μg/ml和硝唑咪75μg/ml的培养液内,两性血吸虫存活时间较两药单用的显著为短。敌百虫引起虫体的麻痹可为鹤草酚所拮抗。     

不同条件下吡喹酮对日本血吸虫雄虫摄入钙的影响

吡喹酮仅在较短时间内增加体外培养的日本血吸虫♂虫对⁴⁵Ca²⁺的摄入量。在含30 mMMg²⁺的HBS中,吡喹酮对♂虫摄入⁴⁵Ca²⁺的量无明显影响。在4℃的HBS中,吡喹酮可使♂虫对⁴⁵Ca²⁺的摄入量至少在1小时内持续增加。此外,在无Ca²⁺的HBS中,血吸虫♂虫已摄入的⁴⁵Ca²⁺的释放量较在HBS中的显著为多。     

日本血吸虫对3H-吡喹酮的摄入与分布

感染小鼠一次口服³H-吡喹酮100mg/kg后,其体内两性血吸虫的³H含量以给药后0.5～1小时为最高,4小时后则有明显减少。体外培养的血吸虫亦能迅速摄取³H-吡喹酮,且其摄入量随药物浓度的增加而递增。体内、体外试验的结果表明,最初进入虫体的³H-吡喹酮系脂溶性,随后在体内缓慢代谢为水溶性。放射自显影的结果说明,³H主要自表皮进入虫体,分布于肌层、间充组织、生殖系统和肠壁上皮细胞,其中以雌虫的卵黄腺为最多,而以雄虫的睾丸为最少。