Periostin对人牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的：研究小鼠重组Periostin对牙周膜细胞（PDL细胞）增殖及碱性磷酸酶（ALP）活性的影响。方法：采用MTT比色试验及酶动力学方法。测定PDL细胞的增殖和ALP活性。结果：Periostin仅在浓度为40μg/ml时,可显著促进PLD细胞的增殖（P＜0．01）,其余浓度则无作用,而其浓度在10μg/ml-80μg/ml范围中时,均可显著提高PDL细胞ALP活性水平（P＜0．05）。结论：小鼠重组Periostin对PDL细胞的增殖及ALP活性均有促进作用,但其在这两方面的作用存在着异,对此还需深入研究。     

Periostin对人牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的 :研究小鼠重组Periostin对牙周膜细胞 (PDL细胞 )增殖及碱性磷酸酶 (ALP)活性的影响。方法 :采用MTT比色试验及酶动力学方法 ,测定PDL细胞的增殖和ALP活性。结果 :Periostin仅在浓度为 40 μg/ml时 ,可显著促进PDL细胞的增殖 (P <0 .0 1) ,其余浓度则无作用 ,而其浓度在 10 μg/ml～ 80 μg/ml范围中时 ,均可显著提高PDL细胞ALP活性水平 (P <0 .0 5 )。结论 :小鼠重组Periostin对PDL细胞的增殖及ALP活性均有促进作用 ,但其在这两方面的作用存在差异 ,对此还需深入研究     

牙周优势菌内毒素对人牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的：研究牙周优势菌牙龈卟啉菌、中间普氏菌、具核梭杆菌的内毒素对人牙周膜细胞（PDL细胞）增殖和碱性磷酸酶活性（ALP）的影响。方法：采用MTT比色试验及酶动力学方法，测定PDL细胞的增殖和ALP活性。结果：内毒素在10μg/mL、100μg/mL高浓度时，可显著抑制PDL细胞增殖，而在0.01μg/mL、0.1μg/mL低浓度时，则促进PDL细胞增殖；在10μg/mL、100μg/mL可呈浓度依赖性方式抑制PDL细胞ALP活性。结论：内毒素对牙周膜细胞的抑制作用主要和其浓度有关，不同来源内毒素差异并不显著；内毒素可能通过影响PDL细胞功能而影响牙周组织的代谢和修复过程。     

釉基质蛋白对牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的：探讨釉基质蛋白对于牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶（ALP）活性的影响。方法：采用细胞培养技术,噻唑盐比色测定（MTT）法和酶动力学方法,观察釉基质蛋白对牙周膜细胞的作用。结果：釉基质蛋白组的牙周膜细胞,其增殖活性显著提高,以50mg/L浓度为最佳;其ALP活性也较对照组明显增加,以200mg/L浓度的效果最佳。具有一个合适的剂量范围。结论：釉基质蛋白可促进人牙周膜细胞的增殖和ALP活性。     

纤维蛋白粘合胶对人牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的：探讨纤维蛋白粘合胶（FG）对牙周膜细胞（PDLCs）增殖和碱性磷酸酶（ALP）活性的影响。方法：应用细胞培养技术,噻唑盐比色测定法（MTT法）和酶动力学方法,观察FG对PDLCs的增殖作用和时间效应以及ALP活性的作用。结果：FG组的PDLCs增值和ALP活性较对照组均有显著升高,且在作用的第1天就显著促进了细胞的增殖。结论：FG可促进PDLCs的增殖和ALP活性。     

乏氧对人牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性表达的影响

目的: 探讨不同氧张力对牙周膜细胞的增殖碱性磷酸酶活性(alkaline phosphatase activity,ALP)影响.方法:采用组织块法体外培养人牙周膜细胞,取第5代培养细胞分别在210 mL/L(对照组)和10mL/LO2浓度(乏氧组)下培养1～3 d,复氧组在相同的乏氧环境下培养1 d和2 d后分别移到常氧条件下继续培养1～2 d后检测牙周膜细胞增殖能力与分泌碱性磷酸酶情况.结果:所有组别的细胞增殖率随培养时间呈依赖性的增高.乏氧组乏氧第2,3 d与对照组有统计学差异.所有组别细胞的ALP活性随时间而降低,但乏氧第1,2,3天和复氧1 d与对照组相比明显降低,差别具有统计学意义.结论:乏氧对牙周膜细胞的生物学有较大的影响,提示临床牙周炎及正畸所导致的缺氧环境对牙周膜细胞活性与功能有一定的影响.     

骨形成蛋白对牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的：了解骨形成蛋白（ＢＭＰ）剂量变化对人牙周膜细胞（ＰＤＬＣ）增殖和碱性磷酸酶（ＡＬＰａｓｅ）活性的影响。方法：应用细胞培养技术、噻唑盐比色测定（ＭＴＴ）和酶动力学方法。结果：ＢＭＰ作用后的实验组ＰＤＬＣ的增殖和ＡＬＰａｓｅ活性较对照组均有明显的升高；且有一个合适的剂量范围。ＰＤＬＣ的增殖和ＡＬＰａｓｅ活性受ＢＭＰ浓度梯度影响的变化幅度并不完全一致，表现在所需ＢＭＰ用量不同。结论：可以认为ＢＭＰ能够促进人ＰＤＬＣ的增殖和ＡＬＰａｓｅ活性功能，但各自的影响机制可能还有所差异。     

碱性成纤维细胞生长因子对人牙周膜细胞增殖与ALP活性表达的影响

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）以人牙周膜细胞的增殖与碱性磷酸酶（ALP）活性表达的影响,为bFGF应用于牙周组织的再生与修复提供实验依据。方法：采用MTT和ALP活性检测法,观察不同浓度（0．1－10ng/ml)的bFGF第24、48和72小时对5％和10％胎牛血清（FBS）体外培养的第3代人牙周膜细胞（PDLCs）的作用。结果：与对照组比较,①10％FBS,5ng／ml和10ng／ml的bFGF在第24、48、72小时,可显著促进PDLCs的增殖（P＜0．01－0．05）,5％,10ng／ml的bFGF在24、48小时,5ng／ml的bFGF在24小时对PDLCs有显著促增殖作用（P＜0．01）。②10％FBS,1ng／ml的bFGF在48、72小时,5ng／ml的bFGF在24、48、72小时,10ng／mlbFGF在48小时对PDLCs有显著增强ALP活性的作用P＜0．01－0．05）;5％FBS,10ng／ml的bFGF在24、72小时对PDLCs有显著增强ALP活性的作用（P＜0．05）。结论：以上结果提示：在一定的作用时间内一定条件下,5ng／ml和10ng／ml的bFGF可促进人PDLCs的生长和分化。     

缺氧对人牙周膜成纤维细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的:观察不同程度缺氧对人牙周膜成纤维细胞(HPLFS)增殖、分化的影响.方法:随机将HPLFS分为4组;210mL/LO2对照组、100、50、20mL/LO2缺氧组(轻中重缺氧组),用MTT法、碱性磷酸酶试剂盒分别检测HPLFS的增殖和碱性磷酸酶(ALP)的活性.结果:第24小时,重度缺氧可促进HPLFS细胞增殖,第48、72小时,重度缺氧则明显抑制r细胞增殖;中、重度缺氧对细胞碱性磷酸酶活性表达随缺氧时间则明显受到抑制.结论:缺氧时间、程度对HPDLFs增殖和ALP活性表达存在效应关系,长期中、重度缺氧不利HPLFS的生长及向成骨分化能力,提示牙周组织改建修复功能降低.     

Emdogain和辛伐他汀联合应用对人牙周膜细胞碱性磷酸酶活性的影响

目的观察Emdogain、辛伐他汀联合应用对人牙周膜细胞碱性磷酸酶活性的影响。方法取培养至第五代的人牙周膜细胞,分别用含50μg/mL Emdogain、含0.125μmol/L辛伐他汀、同时含50μg/mL Emdogain和0.125μmol/L辛伐他汀以及不含上述药物的4组无血清DMEM培养液培养,3 d后酶标仪检测各组细胞的碱性磷酸酶活性。结果仅含Emdogain、仅含辛伐他汀以及不含上述药物的培养液培养的人牙周膜细胞碱性磷酸酶光密度值分别为0.193±0.002、0.197±0.003及0.166±0.002。同时含Emdogain和辛伐他汀的培养液培养的细胞碱性磷酸酶光密度值为0.325±0.002,与其他3组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 Emdogain和辛伐他汀联合应用对牙周膜细胞碱性磷酸酶活性有促进作用,提示可能有利于牙周组织的再生。     

IGF-1对人牙周膜干细胞增殖能力的影响

目的：探讨IGF-1是否影响牙周膜干细胞的增殖。方法：分离、培养牙周膜干细胞,细胞增殖检测（MTT、克隆形成能力及细胞周期分析）。结果：实验组细胞克隆形成能力,S＋G2M期明显高于对照组。结论：IGF-1影响牙周膜干细胞在体外的增殖能力。     

粒/巨噬细胞集落刺激因子对培养人牙周膜成纤维细胞生物学特性的影响

目的 :了解粒 /巨噬细胞集落刺激因子 (GM-CSF)对体外培养的人牙周膜成纤维细胞 (PDLFs)生物学活性的影响。方法 :利用体外培养人PDLFs的方法 ,观察不同浓度的GM-CSF对PDLFs的增殖、碱性磷酸酶活性、蛋白质合成量的影响。结果 :GM-CSF在较低浓度时即对PDLFs的增殖、碱性磷酸酶活性、蛋白质合成量有促进作用 ,它们的变化与浓度变化呈一定的相关性。结论 :提示GM-CSF可能通过PDLFs在牙周膜细胞参与牙槽骨改建的过程中起一定的作用。     

低分子釉原蛋白的纯化及其对人牙髓细胞和牙周膜细胞作用的研究

目的：纯化低分子猪釉原蛋白（LMWPA）,并观察其对人牙髓细胞（HDPCs）和牙周膜细胞（HPLCs）增殖及碱性磷酸酶（ALP）活性的影响。方法：取六月龄猪第二磨牙牙胚牙釉质,用液相色谱法分离纯化LMWPA,分别采用MTT法和酶动力学方法测定LMWPA对HDPCs和HPLCs的体外作用。结果：得到的LMWPA是分子量约为5.0KDa的单一组分;在50和100μg/mL时,能的显著促进HDPCs和HPLCs的增殖,ALP活性上调（P〈0.01）;而在≥150μg/mL时,能显著抑制细胞的增殖,ALP活性下调（P〈0.01）。结论：LMWPA影响HDPCs和HPLCs的增殖和碱性磷酸酶活性,并存在剂量和时间依赖性。     

内皮素促人牙周膜成纤维细胞生长作用的体外研究

目的:探讨不同浓度内皮素-1(ET-1)对人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblastcells,HPLFs)增殖和分化的影响,为进一步探讨正畸牙齿移动的生物学机制奠定基础。方法:采用HPLFs体外培养技术和四唑盐(MTT)显色分光光度法及生化检测法观察ET-1对人牙周膜成纤维细胞增殖和分化的影响。结果:与对照组相比,10-8mol/L组ET-1对HPLFs具有显著的促增殖作用(P<0.01),10-6mol/L组ET-1对HPLFs的增殖具有明显的抑制作用(P<0.01)。ET-1对HPLFs的分化没有影响。结论:ET-1为促HPLFs生长因子,但是对细胞分化不产生影响,可能在正畸过程中牙周组织的改建中发挥作用。     

雌激素及压力对髁突软骨细胞增殖与碱性磷酸酶活性联合效应的研究

目的:探讨雌激素及压力对髁突软骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性的联合刺激效应.方法:体外培养髁突软骨细胞分为对照、90kPa/1 h刺激、高、中、低浓度雌激素刺激及压力与各实验浓度雌激素联合刺激组,采用MTT法检测细胞增殖、酶动力学方法检测细胞ALP活性.结果:压力与雌激素都可促进MCCs的增殖与ALP活性,压力的存在并不影响外源性雌激素的促细胞增殖作用,但外源性雌激素可对压力的促增殖作用产生明显的抑制效应,双因素联合作用对ALP活性的促进作用最强.结论:雌激素与压力联合作用对髁突软骨细胞的增殖并不产生叠加效应,但对ALP活性显示出明显的叠加刺激效应.     

人牙周膜细胞不同分离培养方法的比较研究

目的探讨组织块法、酶解组织块法和酶消化法体外分离培养人牙周膜细胞的优缺点。方法分别应用组织块法、酶解组织块法及酶消化法进行人牙周膜细胞分离培养,鉴定细胞来源,利用倒置显微镜观察细胞生长状况。结果应用组织块法从24块人牙周膜组织中成功分离培养出人牙周膜细胞,成功率96%（24/25）,细胞生长状态良好;应用酶解组织块法成功率80%（16/20）;应用酶消化法成功率75%（12/16）。结论组织块法原代培养人牙周膜细胞方法简单且成功率较高。     

中药黄芩苷对人牙周膜细胞增殖和总蛋白含量的影响

目的 :探讨在不同浓度的黄芩苷作用下 ,人牙周膜细胞增殖和总蛋白含量的变化。方法 :运用细胞生物学方法 ,MTT法和考马斯亮蓝染色法 ,观察黄芩苷对人牙周膜细胞增殖和总蛋白含量的影响。结果 :黄芩苷浓度在 1× 10 -5～ 1μg/ml,明显促进人牙周膜细胞增殖 ,且 1× 10 -2 μg/ml作用效应最大。黄芩苷浓度在 1× 10 -3 ～ 1μg/ml,明显增加人牙周膜细胞总蛋白的合成 ,且 1× 10 -1μg/ml作用效应最大。黄芩苷的作用显示出一个明显的浓度依赖效应和时间依赖效应。结论 :黄芩苷明显促进牙周膜细胞增殖及增加细胞总蛋白 ,作为一种中药有效成分 ,有望用于辅助牙周病的防治     

人牙周膜细胞在矿化液作用下的增殖、成骨分化与相关基因表达

目的：分离培养人牙周膜细胞（PDLCs）,观察矿化液对PDI。Cs细胞增殖和成骨分化的影响。方法：酶解组织块后获得人PDLCs,矿化液处理后观察对细胞影响。采用MTT法检测对细胞增殖;流式细胞分析细胞周期改变;分别通过碱性磷酸酶（ALP）染色、茜素红染色,RT—PCR观察矿化液诱导成骨分化的效果。结果：矿化液对人PDI．Cs的增殖无显著影响,高浓度地塞米松（Dex）的矿化液有一定抑制作用。含Dex的矿化液可促进成骨分化,包括ALP活性提高,矿化结节形成,以及成骨基因的表达上调。$100A4和PLAP-1是相对特异的牙周膜标志,也参与矿化液诱导的成骨分化的调控过程。结论：含地塞米松的矿化液可有效促进人PDLCs的成骨分化,对细胞增殖影响较小。PDI,Cs是一种新型的种子细胞,可应用于骨组织工程。     

人牙周膜干细胞的分离培养及体外诱导分化研究

目的:从成体人牙周组织中分离培养牙周膜干细胞,研究其生物学特性并进行诱导分化,为牙周组织工程提供可靠的种子细胞来源.方法:选取12～20岁的年轻患者因正畸拔除的健康牙齿,采用酶消化组织块培养法得到牙周膜细胞,待细胞达一定量后用有限元稀释法进行单细胞克隆,筛选牙周膜干细胞( PDLSCs).计算细胞克隆形成率(CFU- ...     

富血小板血浆对牙周膜成纤维细胞在病变牙根表面胶原形成的影响

目的：研究不同浓度的富血小板血浆（platelet-rich plasma,PRP）对牙周膜成纤维细胞（peridontal fibro—blasts,PDLFs）在脱矿的病变牙根表面形成胶原的影响。以进一步探讨富血小板血浆在促牙周组织再生中的作用。方法：采用组织块培养法培养原代人牙周膜成纤维细胞,取5～8代细胞用于实验。富血小板血浆的制备采用二步密度梯度离心法,获取PRP待用,取因重度牙周病拔除的病牙,制取牙根片,收集的根片经高压处理后留存待用。观察富血小板血浆对牙周膜成纤维细胞在脱矿的病变牙根表面胶原的形成,用天狼星红组织特染的方法进一步观察病变根片表面胶原形成的情况。结果：MTT结果和天狼星红特异性染色结果：实验组与对照组均有阳性染色,用Histogram功能来分析统计胶原所占面积的百分数,取其平均值,实验组与对照组差异有显著性（P〈0．05）。结论：浓度为20％PRP为促进PDLFs在脱矿处理的病变牙根表面附着的最佳浓度,并能促进其在处理的脱矿的病变牙根表面胶原的形成。推测PRP和根面脱矿处理在牙周再生中起重要作用。