维生素A对Hela细胞凋亡的影响

目的研究维生素A对Hela细胞凋亡的影响。方法应用光学显微镜、电子显微镜观察维生素A对Hela细胞凋亡形态的影响;分别应用细胞DNA琼脂糖凝胶电泳法及流式细胞仪分析维生素A诱导Hela细胞凋亡的生物化学特征、细胞特征及凋亡细胞百分率。结果光学显微镜下可见凋亡小体;电子显微镜下可见细胞固缩,核膜扭曲,核染色体聚集成块并靠近核膜等凋亡细胞特征;在琼脂糖凝胶电泳中由于细胞DNA被降解而呈现典型的“阶梯状”图谱;流式细胞仪检测结果显示二倍体核型的特征,在DNA直方图上,G1峰左侧出现亚二倍体细胞群的峰型;维生素A诱导Hela细胞凋亡具有时间依赖性。结论维生素A可诱导Hela细胞凋亡。     

慢性碘过量对大鼠甲状腺细胞凋亡的影响

目的 探讨慢性轻中度碘过量对甲状腺细胞凋亡的影响,观察限碘后的恢复情况.方法 将Wistar大鼠分入4组:对照组、1.5倍、3倍和6倍高碘组,每日给碘量分别为4、6、12和24 μg,于实验1至8个月分批处死动物.部分高碘8个月大鼠限碘3个月(4μg/d).采用砷铈催化分光光度法测定尿碘浓度,应用Annexin V染色流式细胞术和电镜对甲状腺细胞凋亡定量定性,碘化丙碇染色流式细胞术测定细胞周期,分子探针(DCFH-DA)荧光定量细胞内活性氧簇(ROS)水平.应用流式细胞术和免疫组织化学方法检测凋亡相关蛋白的表达.结果 3倍和6倍高碘组4个月和8个月时,甲状腺细胞凋亡率和ROS水平显著高于对照(均P<0.05),限碘后恢复正常.6倍碘组4个月和8个月时,甲状腺增殖期细胞比例著升高(5%和6% vs 3%,均P<0.05),静止期细胞比例显著下降(64%和67% vs 80%,均P<0.05).3倍和6倍碘组8个月时,Fas、FasL、TRAIL蛋白表达水平比对照组高2-4倍,限碘后未恢复.Bcl-2和Bax蛋白的表达不变.6倍碘组8个月时,细胞凋亡率、ROS水平及给碘量三者之间显著正相关(r=0.637～0.790,P<0.01).结论 慢性碘过最能增加甲状腺细胞凋亡,ROS过多产生可能涉及其机制.     

维生素A对高碘小鼠甲状腺形态结构的影响

目的观察维生素A（VA）对高碘小鼠甲状腺形态结构的影响。方法将昆明种小鼠分为4组：正常对照（NI）组、高碘（HI）组、高碘＋VA1（HI＋VA1）组和高碘＋VA2（HI＋VA2）组。90d后，测定小鼠体质量和甲状腺质量，光镜和电镜下观察甲状腺形态结构的改变。结果HI组小鼠体质量明显高于NI组（q=2．93，P〈0．05），甲状腺质量明显增加（q=4．72，P〈0．01），HI＋VA1、HI＋VA2组与NI组比较，甲状腺质量也明显增加（q=3．21、2．89，P〈0．05），与HI组相比有降低趋势，但差异无统计学意义（P〉0．05）；HI组光镜下出现胶质潴留性甲状腺肿（甲肿）现象，而随着补充VA的增高，高碘甲肿率有减少趋势；电镜下HI组甲状腺滤泡细胞呈现损伤表现．HI＋VA1、HI＋VA2组与HI组相似，未见明显改善作用。结论高碘可以引起小鼠甲状腺胶质潴留性肿大．并造成甲状腺滤泡上皮细胞损伤，而补充VA可能具有部分拈抗高碘性甲状腺肿发生的作用。     

碘过量与维生素A交互作用对垂体-甲状腺轴形态学变化的影响

目的观察碘过量与维生素A交互作用对垂体-甲状腺轴形态结构变化的影响。方法将昆明种小鼠分为5组：对照组（NI）;高碘组（HI）;低维生素A组（LVA）;高碘低维生素A组（HI＋LVA）;高碘补维生素A组（HI＋VA）。在实验3个月、6个月时,测定小鼠甲状腺绝对质量与相对质量,观察甲状腺组织形态变化及甲状腺和脑垂体超微结构的变化。结果3个月、6个月时HI组小鼠甲状腺绝对质量和相对质量显著高于对照组（P〈0．05）;HI＋VA组小鼠的绝对质量和相对质量6个月时显著低于HI＋LVA组（P〈0．05）,略轻于HI组。光镜下甲状腺肿发生比率3个月时,HI组、HI＋LVA组、HI＋VA组均高于NI组,差异有统计学意义（P〈0．05）;6个月时,除LVA组,其余各组均高于NI组,差异有统计学意义（P〈0．05）。光镜结果显示3个月时HI组已经出现高碘性甲状腺肿,电镜下呈现甲状腺滤泡上皮细胞损伤,HI＋VA组这种状况有所改善。结论维生素A对甲状腺形态有一定的保护作用;补充适量的维生素A能使高碘小鼠的甲状腺质量和甲肿率降低,但不足以恢复到适碘组水平,说明补充维生素A可以部分拮抗高碘造成的影响。     

维生素A对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响

目的观察维生素A对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响。方法采用MTT法检测5、7．5、10、15μg／ml维生素A处理后的人宫颈癌Caski细胞的增殖抑制率;采用流式细胞术检测维生素A处理后的Caski、Siha、Hela细胞的细胞周期,荧光酶标仪检测细胞线粒体膜电位;TUNEL法检测维生素A处理后Caski细胞的凋亡情况。结果5、7．5、10、15μg／ml维生素A处理24h后的Caski细胞增殖抑制率分别为32．1％±2．6％、47．3％±1．1％、66．4％±2．1％、70．8％±2．7％,处理48h后分别为38．3％±2．8％、52．6％±3．1％、72．5％±2．4％、80．0％±4．9％,其增殖抑制作用呈时间和浓度依赖性（P均〈0．05）;维生素A处理后,Caski、Siha、Hela细胞G0／G1和G2／M期细胞数量明显减少,S期细胞增多,细胞内线粒体电位分别为2．21±0．29、2．05±0．35、2．38±0．22,与处理前的0．32±0．08、0．24±0．15、0．41±0．06相比,P均〈0．05;维生素A处理后Caski细胞发生凋亡。结论维生素A可抑制宫颈癌细胞增殖,并诱导其凋亡。     

中、轻度碘过量对大鼠甲状腺滤泡上皮凋亡及Fas/FasL表达的影响

目的探讨中、轻度碘过量对碘缺乏和非碘缺乏Wistar大鼠甲状腺滤泡上皮细胞凋亡及Fas/FasL表达的影响。方法碘缺乏大鼠以饲过氯酸钾制备饲料,随机分成3个组,补碘量分别为0、840、1680μg/L。非碘缺乏大鼠随机分成补碘量分别为0、280、560、840、1680、2800和5600μg/L组。脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导原位缺口末端标记(TUNEL)确定细胞凋亡数。免疫组化和原位杂交法观察Fas/FasL表达。结果①碘缺乏大鼠:与补碘0μg/L组相比,饮水碘840μg/L组7d和90d时Fas表达明显降低,P分别<0.01和0.001。FasL的表达也下降,但差异无统计学意义。细胞凋亡数在补碘21d和90d有显著降低,P均<0.05。补碘90d时Fas鄄mRNA和FasL鄄mRNA表达明显低于0μg/L组,P<0.001。②非碘缺乏大鼠:补碘90d时,840、1680、2800、5600μg/L组Fas和FasL表达明显高于280和560μg/L组,P<0.001。840、2800和5600μg/L补碘组细胞凋亡数明显高于280和560μg/L组,P<0.001。补碘组Fas鄄mRNA表达明显高于碘0μg/L组,P<0.001,FasL鄄mRNA表达与0μg/L组相比差异无统计学意义。结论过量碘(尿碘中位数>300μg/L)补碘90d,使碘缺乏机体甲状腺滤泡上皮细胞凋亡数和Fas表达明显减少,非碘缺乏机体甲状腺滤泡上皮细胞凋亡数、Fas和FasL的表达均明显增加。     

维生素A和4HPR对Hela细胞增殖与凋亡的影响

目的 研究维生素A、N-(4-羟基苯基)维生素甲酰胺(4HPR)对Hela细胞增殖与凋亡的影响.方法 通过集落形成试验和裸鼠致瘤试验观察维生素A和4HPR对Hela细胞增殖的影响;通过电子显微镜及细胞DNA琼脂糖凝胶电泳法观察维生素A和4HPR对Hela细胞凋亡形态的影响及生物化学特征.结果 维生素A和4HPR对Hela细胞集落形成有明显抑制作用,并可抑制Hela细胞对裸鼠的致瘤作用(P<0.01);维生素A的抑瘤作用强于4HPR(P<0.01);电镜下可见细胞固缩,核膜扭曲,核染色体聚集成块并靠近核膜等凋亡细胞特征;细胞DNA被降解,在琼脂糖凝胶电泳中呈现典型的"阶梯状"图谱.结论 维生素 A和4HPR可抑制Hela细胞增殖,诱导Hela细胞凋亡.     

维生素A对高碘小鼠甲状腺功能和抗氧化能力的影响

目的研究维生素A(VA)对碘过量小鼠甲状腺功能和抗氧化能力的影响及在高碘性甲状腺肿发病中的作用。方法将昆明种小鼠分为4组:正常对照(NI)组、高碘(HI)组、高碘补充VA1(HI VA1)组和高碘补充VA2(HI VA2)组,喂养90d,观察小鼠甲状腺功能和抗氧化能力。结果HI组小鼠甲状腺质量(41.75±4.53)g高于NI组(38.50±5.12)g,HI VA1组与HI VA2组甲状腺质量与HI组和NI组比较,差异无统计学意义;各组间T3、T4比较,差异无统计学意义;HI组、HI VA1组超氧化物歧化酶(SOD)[(130.59±38.79)kU/L、(125.40±52.01)kU/L]明显高于NI组[(99.92±19.01)kU/L],HI VA2组SOD[(116.39±28.09)kU/L)]与NI组差异无统计学意义;HI组谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)[(1951.42±433.95)kU/L]与NI组[(2252.69±595.00)kU/L]比较,差异无统计学意义,HI VA1组[(2482.24±601.86)kU/L]和HI VA2组[(2490.15±409.11)kU/L]与HI组比较差异有统计学意义。结论高碘可以造成小鼠甲状腺肿大及抗氧化能力变化,补充适量的VA可以部分拮抗高碘造成的影响。     

碘对人甲状腺细胞凋亡的影响

目的：研究碘对人甲状腺细胞亡的影响,探讨其在甲状腺疾病发病机制中的作用和意义。方法：分别以不同浓度Nal刺激单层培养的人正常甲状腺上皮细胞,采用流式细胞术,Western印迹和半定量RT－PCR等方法分别检测刺激前后细胞凋亡率,凋亡相关蛋白Fas,Bcl-2和Bak以及Fas,可溶性Fas(sFas)mRNA表达的变化。并以ELISA法检测细胞培养液中sFas的含量。结果：（1）低浓度NaI(10^-8mol/L)明显抑制细胞凋亡（P＜0．05）,中,高浓度（10^-6-10^-4mol/L)时显著增加细胞凋亡（P＜0．05）;（2）低浓度NaI显著促进sFas蛋白及mRNA的表达（P＜．05）,不影响Fas蛋白及mRNA的表达;（3）中、高浓度NaI则明显增加Fas蛋白及mRNA表达,但抑制sFas蛋白及mRNA表达（P＜0．05）;（4）在10^-8-10^-4mol/L浓度范围内,NaI剂量依赖性地抑制甲状腺上皮细胞表达Bcl-2蛋白,但显著增加Bak蛋白的表达（P＜0．05）,结论：碘可通过调节Fas,sFas,Bcl-2及Bak的表达,影响甲状腺细胞凋亡的发生,其中低浓度碘可抑制凋亡,而中,高浓度碘则促进细胞凋亡。     

低碘和高碘对大鼠甲状腺细胞凋亡的影响

目的 研究低碘和高碘对大鼠甲状腺细胞凋亡的影响。方法 利用病区的低碘粮食喂养大鼠，同时饮用不同质量浓度的加碘水，复制低碘和高碘动物模型，于20周后在光、电镜下观察甲状腺形态结构改变，原位末端标记方法对甲状腺细胞凋亡进行检测。结果 与对照组相比，低碘和高碘组甲状腺凋亡细胞数明显增多。结论 低碘和高碘均诱发大鼠甲状腺细胞凋亡，进而调节甲状腺的形态结构和功能。其中以低碘组作用明显，提示细胞凋亡过度是引起低碘和高碘性甲状腺功能低下的重要原因。     

酪蛋白对高碘小鼠甲状腺细胞凋亡的影响

目的观察酪蛋白（CA）对高碘小鼠甲状腺细胞凋亡的影响。方法将昆明种小鼠随机分为4组：对照（NI）组、高碘（HI）组、高碘＋CA1（HI＋CA1）组、高碘＋CA2（HI＋CA2）组，喂养12个月，ELISA法检测血清白细胞介素1β（IL—1β），RT-PCR法检测甲状腺组织Fas、FasLmRNA表达水平，TUNEL法检测甲状腺细胞凋亡。结果与NI组比较，HI组小鼠血清IL-1β水平和甲状腺组织FasmRNA表达均明显增高（P〈0．05或〈0．01），且甲状腺滤泡上皮凋亡细胞数也明显增多（P〈0．01），而高碘小鼠随着CA摄入量增高，上述改变程度明显降低。结论高碘可通过提高机体IL-1β水平，诱发凋亡调控基因Fas／FasL系统表达改变，促进大鼠甲状腺细胞凋亡。而CA摄入可以部分拮抗高碘引起的上述改变，对滤泡上皮细胞具有一定的保护作用。     

维生素A缺乏与补充对高碘小鼠甲状腺功能和抗氧化能力影响的动态研究

目的动态研究维生素A缺乏与补充对高碘小鼠甲状腺功能和抗氧化能力的影响。方法将小鼠按体重随机分为六组：（1）正常对照组；（2）高碘组；（3）低维A组；（4）高碘低维A组；（5）高碘补维A1组；（6）高碘补维A2组。分别喂养1、3、6个月后，测定小鼠体质量与甲状腺质量，血清甲状腺激素水平和抗氧化能力的改变。结果3个月末、6个月末时高碘组小鼠甲状腺绝对质量和相对质量显著高于对照组；高碘补维A组小鼠的绝对质量和相对质量6个月时显著低于高碘低维A组，略轻于高碘组。1个月末时，高碘组血清T3水平升高，与对照组相比差异有统计学意义；6个月末时，高碘补维A组低于高碘组和高碘低维A组，相比较差异均有统计学意义。小鼠血清GSH-Px活性各组相比差异无统计学意义。高碘组SOD活性3、6个月末时显著高于对照组；高碘补维A组6个月时显著低于高碘组。6个月末时高碘组、高碘低维A组的MDA含量显著高于对照组；高碘补维A组显著低于高碘组、高碘低维A组，接近对照组水平。结论维生素A缺乏对高碘性甲状腺肿的形成有一定的协同作用，补充适量的维生素A对甲状腺肿的复原，以及抗氧化能力的提高都有一定的功效，但在甲状腺激素水平的改善上作用较弱。     

沉默Bcl-2基因对A549细胞的影响

目的 探讨Bcl-2基因在抑制细胞凋亡的作用.方法 利用RNA干扰技术,通过向人非小细胞肺癌A549细胞中导入siRNA表达载体,抑制Bcl-2基因表达,诱导细胞凋亡.结果 Bel-2基因沉默导致A549细胞发生凋亡.结论 Bcl-2家族成员之间相互拮抗的关系及由此产生的A549细胞凋亡,为治疗肿瘤提供了一条新的途径.     

Bcl-2、Fas和Bax凋亡调控基因在限食和脑老化小鼠海马神经元中的表达

目的 通过细胞凋亡调控基因Bcl-2、Fas和Bax在限食及脑老化小鼠海马神经元中的表达,研究限食与脑老化的关系.方法 3月龄ICR雄性小鼠40只,随机分为4组:脑老化模型组、脑老化模型限食组、限食对照组、对照组,每组10只.10 w后进行为期7 d Morris水迷宫实验,实验完毕后进行Bcl-2、Fas和Bax免疫组织化学染色.结果 ①Fas、Bax阳性神经元数目脑老化模型组显著高于脑老化模型限食组、限食对照组显著低于对照组;与此相反,Bcl-2阳性神经元数目在脑老化模型限食组显著高于脑老化模型组,限食对照组显著高于对照组.②Morris水迷宫实验测试:脑老化模型组逃避潜伏期显著大于其他各组;撤台后小鼠的记忆性搜台游泳路程结果各组小鼠间均无显著差异.结论 限食可明显降低脑内凋亡相关基因Fas、Bax的表达,同时上调抗凋亡相关基因Bcl-2的表达,从而发挥抗脑细胞凋亡及防止脑老化性学习能力下降的作用.     

不同碘负荷对小鼠甲状腺钠碘转运体基因表达的影响

目的 旨在探讨不同碘负荷状态下钠碘转运体(NIS)基因表达的变化及其在甲状腺自身调节中的作用.方法 取断乳1月龄的Babl/c小鼠按碘摄入量不同分为低碘绀、正常碘组、5倍碘组、10倍碘组和50倍碘组,饲养3个月、6个月后处死动物.采用实时荧光定量PCR和免疫组化检测NIS mRNA和蛋白表达水平,采用过硫酸铵消化砷-铈催化分光光度法测定甲状腺组织碘含量,采用竞争结合放射免疫分析方法检测甲状腺组织激素水平.结果 与正常碘组比较.各月龄低碘组小鼠NIS mRNA和蛋白表达显著上调,NIS主要定位于细胞膜.具有运碘功能,甲状腺摄碘功能增强,但长期严重碘缺乏最终导致甲状腺组织中碘含量和甲状腺组织激素水平明显降低;各高碘组NIS mRNA和蛋白表达有所下降,呈现随碘摄入量增加表达逐渐减低的趋势,且NIS主要分布于胞浆内,不具备跨膜转运碘的能力.甲状腺摄碘能力显著下降,甲状腺组织中碘含量虽有所升高,但小与碘摄人成平行关系.结论 不同碘负荷状态下 NIS基因表达的调控可发生在转录、翻译和翻译后水平,NIS基因表达及其活性的调节是机体适应低碘、耐受高碘的一种重要保护机制,是甲状腺自身调节的关键所在.     

不同碘负荷对小鼠甲状腺钠碘转运体基因表达的影响

目的 旨在探讨不同碘负荷状态下钠碘转运体(NIS)基因表达的变化及其在甲状腺自身调节中的作用.方法 取断乳1月龄的Babl/c小鼠按碘摄入量不同分为低碘绀、正常碘组、5倍碘组、10倍碘组和50倍碘组,饲养3个月、6个月后处死动物.采用实时荧光定量PCR和免疫组化检测NIS mRNA和蛋白表达水平,采用过硫酸铵消化砷-铈催化分光光度法测定甲状腺组织碘含量,采用竞争结合放射免疫分析方法检测甲状腺组织激素水平.结果 与正常碘组比较.各月龄低碘组小鼠NIS mRNA和蛋白表达显著上调,NIS主要定位于细胞膜.具有运碘功能,甲状腺摄碘功能增强,但长期严重碘缺乏最终导致甲状腺组织中碘含量和甲状腺组织激素水平明显降低;各高碘组NIS mRNA和蛋白表达有所下降,呈现随碘摄入量增加表达逐渐减低的趋势,且NIS主要分布于胞浆内,不具备跨膜转运碘的能力.甲状腺摄碘能力显著下降,甲状腺组织中碘含量虽有所升高,但小与碘摄人成平行关系.结论 不同碘负荷状态下 NIS基因表达的调控可发生在转录、翻译和翻译后水平,NIS基因表达及其活性的调节是机体适应低碘、耐受高碘的一种重要保护机制,是甲状腺自身调节的关键所在.     

不同碘负荷对小鼠甲状腺钠碘转运体基因表达的影响

目的 旨在探讨不同碘负荷状态下钠碘转运体(NIS)基因表达的变化及其在甲状腺自身调节中的作用.方法 取断乳1月龄的Babl/c小鼠按碘摄入量不同分为低碘绀、正常碘组、5倍碘组、10倍碘组和50倍碘组,饲养3个月、6个月后处死动物.采用实时荧光定量PCR和免疫组化检测NIS mRNA和蛋白表达水平,采用过硫酸铵消化砷-铈催化分光光度法测定甲状腺组织碘含量,采用竞争结合放射免疫分析方法检测甲状腺组织激素水平.结果 与正常碘组比较.各月龄低碘组小鼠NIS mRNA和蛋白表达显著上调,NIS主要定位于细胞膜.具有运碘功能,甲状腺摄碘功能增强,但长期严重碘缺乏最终导致甲状腺组织中碘含量和甲状腺组织激素水平明显降低;各高碘组NIS mRNA和蛋白表达有所下降,呈现随碘摄入量增加表达逐渐减低的趋势,且NIS主要分布于胞浆内,不具备跨膜转运碘的能力.甲状腺摄碘能力显著下降,甲状腺组织中碘含量虽有所升高,但小与碘摄人成平行关系.结论 不同碘负荷状态下 NIS基因表达的调控可发生在转录、翻译和翻译后水平,NIS基因表达及其活性的调节是机体适应低碘、耐受高碘的一种重要保护机制,是甲状腺自身调节的关键所在.