抗原致敏DC联合CTL细胞对小细胞肺癌NCI-H209细胞移植瘤裸鼠的疗效观察

目的 探讨小细胞肺癌NCI-H209细胞裂解物致敏树突细胞(DC)与同源细胞毒性T淋巴细胞(CTL)共培养后的DC-CTL细胞对裸鼠小细胞肺癌移植瘤治疗的有效性.方法 建立BALB/c裸鼠小细胞肺癌移植瘤模型,并随机分模型组、CTL组、未致敏DC-CTL组、抗原致敏DC-CTL组,每3天治疗1次,连续6次.观察肿瘤生长...     

脐血移植的人鼠嵌合裸鼠模型的建立

目的用BALB/c裸鼠建立脐血移植的人鼠嵌合裸鼠模型。方法将30只BALB/c裸鼠随机分成实验组和对照组,每组各15只,实验组再根据输注有核细胞数的不同分成A、B、C三组。采用~(60)Co治疗仪γ-射线对实验组和对照组进行亚致死剂量照射,照射后实验组经裸鼠尾静脉输入分离的人新鲜脐血有核细胞(NC),A、B、C3组分别输入NC1.0×107个/只、2.0×107个/只、3.0×107个/只,对照组经尾静脉注入等体积无菌生理盐水。移植后分别检测实验组和对照组外周血白细胞和外周血人源性CD34 和CD45 细胞水平。结果1脐血移植前及移植后第8周实验各组与对照组之间WBC数差异无统计学意义(P>0.05);移植后第1、2、3、4周实验各组与对照组之间WBC数不全相同(P<0.05)。各时间点WBC水平与移植前相比,移植后实验各组与对照组WBC均下降,第1周WBC数最低,但随时间的延长WBC逐渐增加,到第4周实验各组WBC已恢复至移植前水平,而对照组WBC水平仍较低(P=0.000),第8周恢复正常。2外周血中的人源性CD34 细胞和CD45 细胞在第4周时均已出现,但总体水平较低。实验组A的CD34 和CD45 细胞数水平各个时段均较实验组B和实验组C低(P<0.05);而实验组B和实验组C的人源性CD34 和CD45 细胞数水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论利用BALB/c裸鼠能成功建立脐血移植的人鼠嵌合动物模型。     

携带野生型PTEN基因的重组腺病毒治疗子宫内膜癌的体内研究

目的:探讨携带野生型PTEN基因的重组腺病毒(Ad-PTEN)进行子宫内膜癌基因治疗的可行性.方法:BALB/c裸鼠随机分3组,每组8只, 以空载体Ad-CMV转染或未转染作为对照组,观察Ad-PTEN体外转染后体内接种对子宫内膜癌细胞致瘤能力的影响.应用LacZ 作为报告基因,X-gal染色检测Ad-PTEN 体内转染效率.皮下荷人子宫内膜癌BALB/c裸鼠15只,随机分为对照组、Ad-CMV组及Ad-PTEN治疗组,每组5只,每只裸鼠皮下有2个移植瘤.待皮下移植瘤长至4～5 mm时,治疗组Ad-PTEN肿瘤内注射,每个移植瘤5×108 pfu/100 μl,隔日1次,共3次,观察裸鼠肿瘤体积的变化及有无不良反应,最后1次治疗后15 d处死裸鼠,取肿瘤组织及治疗组裸鼠肝脏病理检查.结果:Ad-PTEN体外转染子宫内膜癌RL 95-2细胞,子宫内膜癌细胞致瘤能力完全抑制,裸鼠成瘤率为0;而空载体转染组和PBS对照组裸鼠成瘤率均为100%.重组腺病毒在裸鼠体内具有较高的转染效率,Ad-CMV-LacZ肿瘤内注射后96 h,转染效率可达到80%. Ad-PTEN肿瘤内注射可使裸鼠皮下移植瘤生长速度显著减慢,肿瘤体积较对照组明显缩小(P<0.05),Ad-PTEN基因治疗未发现明显不良反应. 结论:PTEN基因治疗有可能成为子宫内膜癌非手术治疗的一个新方法,具有潜在的应用价值.     

人源性肝癌细胞小鼠原位移植瘤模型的建立及特点的比较研究

目的选择3株人源性肝癌细胞,原位接种于4种不同免疫功能缺陷的小鼠肝组织内,建立人源性肝癌细胞原位移植瘤模型并进行比较。方法将人Hep G2、HUH-7和QGY-7703细胞悬液,分别接种于不同免疫功能缺陷的小鼠(BALB/c裸鼠、NOD SCID小鼠、NOG小鼠和NPG小鼠)肝组织内。最终统计模型小鼠死亡时间、死亡率、肝重量,应用B超以及组织学检查等方法,分析比较不同免疫功能缺陷小鼠肝癌模型的特点。结果 B超和大体解剖观察结果显示各实验组小鼠均可见肝组织内有肿瘤结节形成;肝接种Hep G2细胞悬液的各组动物于实验20 d左右全部死亡,NOG和NPG小鼠生存时间显著低于BALB/c裸鼠和NOD SCID小鼠(P 0. 001); HUH-7和QGY-7703接种肝的各实验组动物分别于实验第92天和104天进行解剖,发现NOG和NPG模型小鼠肝体积显著增大并形成巨大肿瘤团块,而BALB/c裸鼠和NOD SCID小鼠仅可见肝组织出现较小的肿瘤结节; HUH-7及QGY-7703接种肝的NOG和NPG小鼠肝重量显著高于BALB/c裸鼠和NOD SCID小鼠(P 0. 05);组织学检查可见各组动物肝组织内均出现肿瘤细胞生长伴大面积坏死,部分动物肺组织发生肿瘤细胞转移。结论与BALB/c裸鼠和NOD SCID小鼠比较,肝癌细胞在NOG和NPG小鼠肝组织内生长更为迅速,最终表现为生存期短,肝体积大,重量增加。NOG和NPG小鼠可以在较短时间内完成人源性肝癌细胞的恶性增殖,缩短模型研究周期,因此NOG和NPG小鼠人源性肝细胞原位移植瘤是抗肝癌药物的研发的较为理想的模型。     

金黄色葡萄球菌感染对鼻咽癌裸鼠移植瘤增殖活性的影响

目的探讨金黄色葡萄球菌感染对鼻咽癌裸鼠移植瘤细胞增殖活性的影响及其可能机制。方法 24只BALB/c雌性裸鼠接种人鼻咽癌细胞HNE2,建立鼻咽癌裸鼠移植瘤模型。随机分成移植瘤模型对照组、移植瘤感染组和移植瘤治疗组,再从感染组裸鼠尾静脉注射金黄色葡萄球菌,制备鼻咽癌裸鼠移植瘤感染模型。造模后,每3天测量肿瘤大小,绘制生长曲线,15天后处死裸鼠,处死后称量瘤体重量,并对瘤体进行HE染色、增殖细胞核抗原(PCNA)及细胞凋亡检测。结果感染组裸鼠感染金黄色葡萄球菌后,瘤体迅速增大,重量明显增加,瘤体内增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞数明显增多,增殖指数(PI)升高。同时发现金黄色葡萄球菌感染鼠的瘤体内细胞凋亡指数明显下降。结论金黄色葡萄球菌感染能增强鼻咽癌裸鼠移植瘤增殖活性。     

Genistein对乳腺癌异种移植瘤的抑制作用及其与uPA表达变化的关系

目的探讨三羟异黄酮(genistein)对原癌基因HER-2/neu高表达乳腺癌异种移植瘤的抑制作用及其与尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂(urokinase type plasminogen activator, uPA)表达变化的关系.方法应用基因转染技术建立HER-2/neu高表达的乳腺癌MCF-7细胞(MCF-7/HER-2).BALB/c裸鼠皮下接种MCF-7和MCF-7/HER-2细胞,其中接种MCF-7/HER-2细胞的裸鼠随机分为3组:对照组、genistein处理组、HER-2/neu抗体处理组.应用免疫组化法观察移植瘤细胞生长能力,应用Western blot 法观察移植瘤uPA的表达变化.结果 MCF-7/HER-2移植瘤与MCF-7移植瘤相比细胞增殖能力较强且uPA表达增加,而MCF-7/HER-2移植瘤经genistein和HER-2/neu抗体处理后,移植瘤细胞增殖能力减弱,其uPA表达降低.结论 Genistein能有效抑制HER-2/neu高表达乳腺癌异种移植瘤细胞的增殖能力,且这种作用与uPA的表达有关.     

人颅咽管瘤裸鼠皮下移植瘤模型的初步建立

目的初步建立人颅咽管瘤(CP)的裸鼠皮下移植瘤模型。方法采用胰蛋白酶消化法将新鲜颅咽管瘤组织进行原代细胞培养,然后将纯化的第3代颅咽管瘤细胞接种于到BALB/c裸小鼠背部皮下。观察接种成瘤后瘤组织生长情况和特点,明确肿瘤性质。结果 CP细胞可以在裸鼠皮下存活,接种后8d可见有移植瘤形成,成瘤率为33.3%,病理切片显示肿瘤样鳞状上皮细胞团增生。结论利用颅咽管瘤细胞初步建立了人颅咽管瘤裸鼠皮下移植瘤模型,为进一步研究颅咽管瘤的生长特性奠定了基础。     

环磷酰胺对人腺泡状横纹肌肉瘤细胞裸鼠移植瘤生长和形态结构的影响

目的 检测环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)对人腺泡状横纹肌肉瘤细胞株PLA-802裸鼠移植瘤生长和形态结构的影响.方法 16只裸鼠右腋皮下接种PLA-802移植瘤细胞悬液后分成空白对照组(5只)、生理盐水对照组(5只)和20 mg/kg CTX治疗组(6只).接种后第7天开始,经腹腔注射给药,隔日1次,共注射10次.每2天测量1次肿瘤大小绘制移植瘤生长曲线.接种后第26天杀鼠摘取移植瘤称重,组织经制片染色后用光镜和电镜检查.结果 ①CTX治疗组移植瘤生长被明显抑制(P＜0.05),抑瘤率85.55%.②治疗后瘤细胞疏松排列成腺泡状,由纤维间质分隔,血管稀少;瘤细胞椭圆形、网拍状或短梭形;核椭圆或类圆形,大小不一;核分裂相减少.电镜见瘤细胞质内有不等量肌(微)丝,甚至有横纹肌肌原纤维结构形成.结论 CTX对人腺泡状横纹肌肉瘤PLA-802移植瘤生长具有一定程度的抑制作用,治疗后瘤组织形态结构改变.     

BALB/c-nu/nu裸鼠造血微环境损伤模型的建立

目的 构建适合移植使用的BALB/c-nu/nu裸鼠造血微环境损伤模型.方法 分别用3.0、4.0、5.0、6.0、7.0Gv剂量辐照BALB/c-nu/nu裸鼠,检测照射后1、3、5、7、14、21 d血象变化,检测照射后1、7、14、21 d基质细胞集落形成单位(CFU-F)和巨核细胞计数,观察照射后骨髓组织活检变化情况.结果 7.0 Gy辐照剂量照射后裸鼠全部死亡;6.0 Gy组照射后出现明显骨髓抑制,至照射后21 d不能恢复至照射前水平,且部分裸鼠照射后死亡;3.0、4.0 Gy照射后裸鼠仅出现轻度骨髓抑制;5.0 Gy组照射后出现明显骨髓抑制,未做特殊处理于照射后21 d自行恢复至照射前水平.不同剂量放射线照射后裸鼠CFU-F计数变化不同.3.0 Gy和4.0 Gy组CFU-F在照射后7～14 d 出现轻度减少,6.0 Gy组照射后CFU-F明显减少,至照射后21 d不能恢复,5.0 Gy组照射后CFU-F也出现了较明显减少,但在照射后21 d恢复至照射前水平.结论 5.0 Gy是BALB、/c-nu/nu裸鼠造血微环境损伤模型的适宜照射剂量.     

人眼眶横纹肌肉瘤动物模型的建立

目的:探讨建立人眼眶横纹肌肉瘤动物模型的方法. 方法:培养人胚胎型横纹肌肉瘤细胞株RD细胞,取对数生长期细胞分别接种于4周龄SCID鼠和60Co照射 (1 Gy) 后1 d 的BALB/c裸小鼠;选用成瘤BALB/c裸小鼠的瘤块移植入另一批4周龄BALB/c裸小鼠胁部皮下(组织块接种法).观察各组动物肿瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线;肿瘤组织行常规病理H-E染色并镜检. 结果:60Co照射后1 d裸小鼠成瘤时间约6～8周,SCID鼠组约3～4周,组织块接种法移植2周后裸小鼠瘤体较明显,3组动物的成瘤率均为100%;成功绘制出肿瘤生长曲线,肿瘤均呈进行性生长;病理检查示各组移植性横纹肌肉瘤与人体肿瘤标本所见类似.结论:成功建立了裸小鼠和SCID鼠人眼眶横纹肌肉瘤模型,组织块接种法可以缩短BALB/c裸小鼠成瘤时间,为进一步研究人眼眶横纹肌肉瘤奠定了基础.     

多西紫杉醇联合伽马刀对肝癌细胞裸鼠皮下移植瘤凋亡作用的影响

目的 探讨多西紫杉醇联合伽马刀对肝癌细胞株裸鼠皮下移植瘤细胞凋亡作用的影响.方法 成功建立:SMMC-7721肝癌细胞株裸鼠皮下移植瘤模型,分2组,每组各10只裸鼠,即多西紫杉醇联合伽马刀组及肿瘤对照组.实验组先用注射多西紫杉醇处,剂量为60[μg/(0.3 m L·只)],每3天注射1次,连续注射6次,隔天伽马刀照射1次,连续伽马刀照射6次.(室温下用137Cs放射源照射局部肿瘤,照射按分割照射每次分别给予5 Gy总剂量为10 Gy).对照组注射生理盐水,剂量同前.观察2组的肿瘤生长情况.30 d后切取瘤样组织,用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡率.结果 实验组的肿瘤生长速率明显减慢,实验组的凋亡指数(35.03±1.51)%明显高于对照组(0.87±0.39)%,两者间差异有统计学意义(P<0.05).结论 多西紫杉醇联合伽马刀具有促进肿瘤细胞凋亡进而抑制肝细胞癌裸鼠移植瘤生长作用.     

索拉菲尼对人肾癌裸鼠移植肿瘤生长的抑制作用

目的 建立人肾癌裸鼠移植肿瘤模型,观察不同剂量索拉菲尼对移植肿瘤生长的抑制作用.方法 BALB/c裸鼠经皮下接种人肾透明细胞癌皮肤转移细胞(Caki-1)建立荷Caki-1裸鼠肿瘤模型.细胞接种1周后,采用小动物18氟-氟代脱氧葡萄糖正电子发射断层显像/X线计算机体层扫描(18F-FDG PET/CT)技术评价实体肿瘤模型.选取肿瘤生长情况接近的荷瘤裸鼠18只,随机分为对照组和索拉菲尼低、高剂量组(n=6),于细胞接种后第35天处死动物,测量各组荷瘤裸鼠的体质量及肿瘤体积和质量,观察移植肿瘤的组织学改变.另选取肿瘤生长情况接近的荷瘤裸鼠15只进行如上分组(n=5),预设观察期100 d,比较存活率.结果 荷瘤裸鼠肿瘤组织18F-FDG吸收代谢水平高于正常组织.与对照组比较,索拉菲尼低、高剂量组荷瘤裸鼠的肿瘤生长均被明显抑制,各组间肿瘤体积和质量比较差异均有统计学意义(P＜0.05).索拉菲尼高剂量组裸鼠的体质量显著低于对照组和索拉菲尼低剂量组(P＜0.05).索拉菲尼低、高剂量组荷瘤裸鼠的存活率显著高于对照组(P＜0.05).结论 小动物18F-FDG PET/CT可用于评价肾癌细胞在宿主体内的生长状况,索拉菲尼对人肾癌裸鼠皮下移植肿瘤模型中肾癌细胞的生长具有显著抑制作用.     

不同接种量荧光素酶标记小鼠乳腺癌细胞4T1在小鼠体内生长及肺转移的比较

目的采用活体成像技术比较四种剂量荧光素酶标记肿瘤细胞在小鼠体内生长及肺转移情况,为光学标记肿瘤模型的药物筛选或机制研究提供参考资料。方法以荧光素酶作为报告基因导入小鼠乳腺癌细胞4T1中,经G418筛选获得稳定表达荧光素酶的细胞克隆并扩大培养。标记细胞稀释成1×10⁷ 细胞/mL, 2×10⁷细胞/mL, 5×10⁷细胞/mL和1×10⁸细胞/mL四种剂量,取0.1 mL接种于BALB/c小鼠右侧第二对乳腺脂肪垫内,制作小鼠原位乳腺癌模型,比较肿瘤细胞在小鼠体内生长及肺转移情况。结果获得稳定表达荧光素酶基因的细胞克隆,在致瘤性方面和亲代细胞无明显差别,四种剂量细胞接种BALB/c小鼠后,均有肿瘤生长,接种第28天时,四种剂量接种的原位移植瘤大小没有明显差别,但接种两个高剂量肿瘤细胞的小鼠组各有2只小鼠死亡;接种后31 d,发现四种剂量接种的原位移植瘤均发生不同程度的转移,随着观察天数的增加,转移程度逐渐严重,接种后42 d,小鼠陆续发生死亡。结论根据转移和死亡情况,确定接种1×10⁶个细胞/只不仅肺转移明显,而且存活时间一般超过45 d,比高剂量接种存活时间长,为最佳肺转移剂量。     

人γδT细胞、CD3AK细胞和NK细胞对裸鼠移植人结肠癌的抑制作用及对肿瘤细胞凋亡的影响

目的 探讨人γδT细胞、CD3AK细胞和NK细胞对裸鼠移植人结肠癌的抑制作用及对肿瘤细胞凋亡的影响.方法 将人结肠癌细胞株(SW-116)接种于BALC /c裸鼠皮下,建立结肠癌裸鼠模型,随机分为4组,每组6只.设定建立模型为第1天,分别于第1天、第4天、第7天每组给予相应的治疗.A组:尾静脉注射RPMI 1640培养液;B组:注射NK细胞+γδT细胞;C组:注射NK细胞+CD3AK细胞;D组:注射NK细胞+CD3AK细胞+γδT细胞.并于第10天处死裸鼠,测量肿瘤体积,用Tunel法检测肿瘤细胞凋亡率.结果 24只裸鼠接种5×106结肠癌细胞后第4天,在接种部位均有肿瘤形成,皮下结节最大径为2～3 mm,成瘤率为100%.治疗组肿瘤体积增加小于对照组,第1次治疗后10天时测A、B、C、D组平均肿瘤体积分别为(86.78±7.19)、(52.80±5.59)、(54.05±6.53)、(43.16±7.40)mm3,各治疗组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),B、C组组间无显著差异(P>0.05),D组与B、C组相比有显著差异(P<0.05).Tunel检测结果显示,与对照组相比,治疗组肿瘤细胞的凋亡率升高(P<0.05),以D组为甚.结论 人的γδT细胞、CD3AK细胞和NK细胞能不同程度延缓裸鼠移植的人结肠癌瘤体生长,免疫治疗能提高肿瘤细胞的凋亡率.     

细胞注射法及组织块移植法在构建异位妊娠动物模型比较

目的:比较滋养细胞悬液注射法与绒毛组织块移植法在异位妊娠动物模型中的可行性。方法:收集新鲜宫内妊娠绒毛标本30例,其中20例培养成滋养层细胞,并将传代细胞分别植入BALB/c裸鼠腹部皮下(A组)、腹壁下(B组)、宫角(C组);另外10例绒毛组织块分别植入裸鼠盆腔内(D组),每组6只。观察种植后第7天、第15天肿块大小的变化;第7天,各组随机选取2只成瘤裸鼠处死,解剖、切取瘤体,形态学检测并免疫组化检测;第15天处死全部裸鼠,解剖、切取瘤体,形态学检测并免疫组化检测。结果:第7天:(1)瘤体观察:A组有2只裸鼠未见瘤体形成;B组有1只未见瘤体形成;C组全部未见瘤体形成;D组全部见瘤体,组织块瘤体与机体部分融合。(2)形态学检测:A组:皮下囊肿,包膜完整,内部可见移植的细胞;B组:皮下可见移植的细胞;C组:未见种植细胞;D组:边缘绒毛滋养细胞细胞核清晰。(3)免疫组化:A组:CK18在滋养细胞胞浆呈阳性表达,滋养细胞细胞核不清或消失;B组:CK18在滋养细胞胞浆中呈阳性表达,滋养细胞细胞核不清或消失;C组:未见种植细胞;D组:CK18在滋养细胞胞浆呈阳性表达,边缘绒毛滋养细胞细胞核清晰。第15天:(1)瘤体观察:A组:有2只分别在第8天、第10天死亡,剩余2只,未见瘤体形成;B组:有1只在第8天死亡,剩余3只,有1只未见瘤体形成,另2只瘤体较前增大;C组:剩余4只,全部未见瘤体形成;D组:剩余4只,全部见瘤体,组织块瘤体增大明显;(2)形态学检测:A组:未见移植的细胞;B组:皮下可见移植的细胞;C组:未见种植细胞;D组:边缘绒毛滋养细胞细胞核清晰;(3)免疫组化:A组:未见种植细胞;B组:CK18在滋养细胞胞浆中呈阳性表达,滋养细胞细胞核不清或消失;C组:未见种植细胞;D组:CK18在滋养细胞胞浆呈阳性表达,边缘绒毛滋养细胞细胞核清晰。结论:细胞注射法难以建立可靠、稳定的异位妊娠动物模型;组织块移植法可以建立较可靠的动物模型。     

细胞注射法和组织块移植法在构建血管瘤动物模型中的比较

目的比较原代细胞注射法和组织块植入法在血管瘤动物模型建立中的可行性。方法收集新鲜增殖期婴幼儿血管瘤标本,取50%组织块植入12只BALB/c裸鼠双侧腋下为组织块组,另外50%组织块培养血管瘤内皮细胞,并将传代细胞植入12只BALB/c裸鼠双侧腋下为细胞组,观察不同生长时期瘤体变化,观察至第7、30、60天分别切取移植瘤组织,HE染色并进行病理学检查。结果第7天,细胞组瘤体小,质软,镜下细胞增殖旺盛,有少量血管生成。组织块组瘤体与机体融合,质软,镜下有大量小血管;第30天,细胞组瘤体体积变大,质稍硬,镜下细胞继续增殖,大量血管生成。组织块组瘤体体积未变化,质硬,有大量的炎细胞,仅残存少量血管;第60天,细胞组瘤体变小,质硬,镜下血管开始萎缩、减少。组织块组瘤体变小,质软,镜下大部分已脂肪化,仅血管周围有少量移植物残留。结论组织块移植法难以建立可靠、稳定的血管瘤模型;原代血管瘤内皮细胞裸鼠皮下注射可以建立可靠的血管瘤模型。     

黄连汤与加味黄连汤对小鼠胰腺癌移植瘤的抑制作用

目的 观察黄连汤、加味黄连汤对胰腺癌移植瘤模型小鼠体质量、游泳时间、肿瘤体积、肿瘤抑制率的影响.方法 将小鼠胰腺癌细胞接种于BALB/c小鼠右前肢腋窝下,构建胰腺癌移植瘤模型.造模后将84只小鼠随机分为7组:模型对照组(0.01 mL/g),黄连汤中剂量组(5.98 mg/g)、黄连汤高剂量组(11.96 mg/g)、...     

抗蝮蛇抗栓酶单克隆抗体制备中小鼠死亡原因的初步分析

蝮蛇抗栓酶是从蝮蛇毒中提取的一种酶制剂，具有抗凝、 溶栓、扩张血管等多种功效，尤其在增强纤溶系统活性方面作用更明显。本文作者着眼于 抗栓酶抗体的制备，利用亲和层析的原理和方法对蝮蛇抗栓酶大量提纯，首先获得了产生抗 蝮蛇抗栓酶单克隆抗体的杂交瘤4E1和7B3细胞株，但在制备腹水时意外地出现了大批小 鼠死亡的现象，现分析报道如下。 　　1　材料与方法 　　1.1　细胞融合　用精制蝮蛇抗栓酶分别对5只BALB/c小鼠进行免疫注射 ，剂量为1 U/只；经三阶段免疫后，取免疫鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞NS-1进行细胞融合 ； 用显微镜下挑选单个克隆的克隆化方法进行克隆化［1］；用ELISA检测法筛选产生蝮 蛇抗栓酶单克隆抗体的杂交瘤细胞株，获得了强阳性的4E1细胞株。 　　1.2　腹水的制备　将杂交瘤细胞株4E1扩大培养，按4组不同的细胞 数 腹腔接种BALB/c小鼠40只；同时用ELISA法检测阴性的杂交瘤细胞与上述相同的细胞数接种B ALB/c小鼠。 　　2　结　果 　　2.1　ELISA法对4E1培养上清液的检测结果　包被液分别为粗蛇毒和B SA。4E1培养上清液在400、800、1 600和3 200倍稀释时与粗蛇毒呈现“”和“”的 阳性反应，在6 400倍稀释时仍然呈现肉眼可见的“+”阳性反应，而BSA包被组仅在400和80 0倍稀释时出现“+”的假阳性结果，当稀释倍数增大到1 600倍和1 600倍以上时呈明显 阴性。 　　2.2　小鼠意外死亡　接种细胞为5×106/只时，小鼠在接种后第4天 、第5天死亡；接种细胞数降低为1×106/只、5×105/只和1×105/只时，小鼠分别在 接 种后第5、6和7天相继死亡。活检发现，每只死亡鼠血管内有大量凝血块。而接种ELISA法检 测阴性的杂交瘤细胞的BALB/c小鼠无死亡。     

肺癌转移瘤动物模型的建立

目的 通过尾静脉注射,建立一种符合临床特征的人肺腺癌转移瘤动物模型,为下一步的肺腺癌转移机制的研究提供可靠的实验造模方法。方法 取对数生长期的A549细胞,11只SPF级、4~6周龄BALB/c裸鼠,分别以1?0^6个细胞/只注射入裸鼠尾静脉。接种后每天观察小鼠状态。分别于接种肿瘤细胞后第4、5、6、7周随机处死2只,余3只小鼠处于濒死状态时处死。解剖小鼠,观察肺部有无转移、转移结节的数目及全身其他器官的转移情况,并做病理取材,HE染色观察。结果 注射过程中小鼠均存活。未处死的3只分别于第11、13、14周出现恶液质。第4周肺部未见转移结节;第5周出现镜下肺部转移结节;第6周肉眼可见肺部转移结节;第7周转移结节数增多;第11、13、14周出现肺部结构大量破坏,弥漫性的肿瘤细胞浸润,出现淋巴结浸润,病理证实为腺癌。结论 通过尾静脉注射A549细胞可以成功建立人肺腺癌转移瘤模型。     

大蒜素联合5-FU对腺样囊性癌ACC-M裸鼠移植瘤的抑制作用

目的：探讨大蒜素联合5-FU对腺样囊性癌ACC-M裸鼠移植瘤的抑制作用。方法建立ACC-M细胞Balb/c裸鼠肩胛下移植瘤模型30只。造模2周后挑选24只肿瘤大小较均匀的裸鼠随机分为实验组(大蒜素组、5-FU组和大蒜素联合5-FU组)和对照组,各6只。实验组按照体质量0.01 mL/g腹腔注射大蒜素和5-FU浓度均为20μg/mL,对照组注射0.9%PBS液,每两天一次,共3次,末次注射1周后处死动物。测量移植瘤的体积变化,HE染色观察移植瘤的病理学改变。结果移植瘤体积变化比较结果：各实验组移植瘤体积明显缩小,5-FU组体积小于大蒜素组,大蒜素联合5-FU组与大蒜素组、5-FU组比较差异有显著统计学意义(P<0.01);镜下见对照组的癌细胞生长旺盛,异型率高,而各实验组的肿瘤细胞出现不同程度减少,间质增加,大蒜素联合5-FU组最为明显。结论大蒜素和5-FU均能有效抑制ACC-M细胞Balb/c裸鼠移植瘤的生长,且大蒜素联合5-FU的抑制作用明显强于大蒜素或5-FU单独使用。