P2X嘌呤受体及其调节

三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)是细胞内的组成成分和能源物质,又是一种组织中发挥生物学作用的信号分子.ATP受体在嘌呤受体分类中属于P2嘌呤受体(P2受体).随着P2X受体结构的逐步阐明和7种亚基的相继克隆,P2X受体的许多功能被发现,尤其是一些物质对它调制作用的研究是近年人们关注和研究的焦点,这些研究有可能为临床制药和一些疾病机制的研究提供新思路.     

离子型ATP受体研究进展

长期以来,人们仅视三磷酸腺苷(ATP)是体内一种储能、供能物质(通常在细胞内浓度较高),20世纪50年代,Holton 发现感觉神经兴奋时释放 ATP,并可作用于平滑肌、心肌和神经细胞等多种组织产生重要的生物效应,提示 ATP在神经兴奋传递中具有实际意义。在1972年 Burnstock 提出了“嘌呤能神经”学说,并推测存在特异性的 ATP 受体,这被后来的很多研究证实,1978年,Burnstock 正式命名“嘌呤受体”(purinoceptor),并将其分为 P1(腺苷)受体和 P2(ATP)受体两种类型。P1受体包括 A_1、A_(2A)、A_(2B)、A_3四类,     

ATP门控离子通道研究进展

ATP是细胞内组成成分和能源物质,但它也可以作为许多细胞表面P2受体的胞外配体。1972年,Geoffery首次提出嘌呤受体的概念,用来描述细胞膜腺苷受体和ATP受体。Harden等1995从分子生物学上证实ATP受体的存在。据国际药理协会的分类命名,胞外腺苷的受体叫P1,是一类G蛋白偶联受体(G-protein-coupled receptors,GPCRs),对腺苷敏感,包括A_1、A_(2A)、A_(2B)、A_34类;胞外核苷酸的受体称为P2,包括两个类别:P2X和P2Y。P2Y是GPCRs;P2X是配体ATP门控的离子通道(ligand-gated ion chennels,LGICs),当胞外ATP结合时P2X通道打开,通道允许阳离子通过。近年来,对P2X亚基的结构、分布、功能、药理特性的研究有大量工作,笔者对研究重要进展综述如下。     

P2X7受体在病理性疼痛中的研究进展

腺苷三磷酸(ATP)受体是最丰富的受体家族之一,参与细胞通讯与信号传递。P2X7受体是ATP的一种生理性、配体门控的离子通道型受体,高表达在胶质细胞上。研究表明,P2X7受体的表达及功能异常促进了病理性疼痛的发生与发展。本文就近几年P2X7受体在病理性疼痛中的研究进展进行简要综述。     

P2X2和P2X4受体的调制

ATP是细胞内组成成分和能源物质,但它也可以作为许多细胞表面P2受体的胞外配体.1972年,Burnstock首次提出嘌呤受体的概念,用来描述细胞膜腺苷受体和ATP受体.     

欧洲晕厥诊治指南介绍（5）

8.ATP试验 静脉注射三磷酸腺苷(ATP)可用于检查不明原因的晕厥.对怀疑不明原因晕厥的患者,通过强烈抑制房室结传导起到纯受体刺激作用,引起房室阻滞导致心室停搏,这可能是自发性晕厥的原因.ATP通过对腺苷快速分解和腺苷对嘌呤受体的继发作用而发挥作用.ATP和腺苷在人类作用相似.     

川芎嗪抗伤害性反应作用机制初探

目的　观察川芎嗪(TMP)对嘌呤2 X(P2 X)受体激动剂[三磷酸腺苷(ATP)和α,β-亚甲三磷酸腺苷(α,β- me ATP) ]、前列腺素E2 (PGE2 )及P物质(SP)所致大鼠足底急性伤害性反应的影响。方法　通过大鼠痛行为反应确定局部应用TMP对ATP等P2 X受体激动剂、PGE2 及SP所致大鼠足底急性伤害性反应和足底炎症水肿的影响。结果　TMP (10 mm ol/L )明显抑制ATP (1μm ol/L )或α,β- m e ATP (0 .6μm ol/L )引起的大鼠足底急性伤害性反应。TMP(10 m mol/L)可抑制PGE2 (5 μmol/L)或α,β- me ATP(0 .2 μm ol/L)加PGE2 (5 μmol/L )引起的伤害性反应。TMP (10 m mol/L )不影响α,β- me ATP (0 .2μmol/L )加SP (10μmol/L )引起的伤害性反应。TMP对PGE2 、SP或α,β- m e ATP分别加PGE2 或SP引起的大鼠足底炎症水肿无明显影响。结论　TMP主要通过抑制P2 X受体兴奋介导的伤害性信息传递产生抗伤害性反应作用。     

参与神经胶质瘤C6细胞中的钙信号——两种G—蛋白偶联核苷酸受体亚型P2Y1和P2Y2

在多种哺乳动物细胞中,细胞外腺嘌呤和尿苷核苷酸或是直接通过与细胞表面P2受体相互作用,或是通过某种代谢产物(如腺苷)与A1～A3受体相互作用而产生效应。P2受体可分为2组:细胞内离子通道P2X受体以及形成7个跨膜域与G-蛋白偶联的P2Y受体。克隆和药理研究显示,至少有5种不同的P2Y受体亚型:P2Y_1、P2Y_2、P2Y_4、P2Y_6和P2Y_(11)。所有克隆的P2Y受体均可激活PLC并刺激InsP3水平的升高。P2Y_1受体可选择性地对ADP(而不是对ATP)起反应,ATP甚至可能起到部分拮     

静脉应用川芎嗪对P2X受体激动剂引起足底伤害性反应的影响

Holton发现在刺激外周神经引起逆行性血管扩张时感觉末梢有三磷酸腺苷(ATP)释放,首次提示ATP参与感觉神经的信息传递。“嘌呤能神经”学说创立者英国科学家Burnstock于1996年提出,不同类型细胞释放的ATP作用于感觉神经末梢的嘌呤受体引发疼痛[1]。分子克隆技术显示ATP作用的P2X3受体选择性表达于与伤害性感受有关的小直径背根神经节(DRG)细胞[2];清醒鼠足底注射ATP等P2X受体激动剂引起急性伤害性反应(缩足反应)[3,4];用电离子透入法将ATP注入到健康志愿者的皮肤内引发痛反应[5]。这些实验结果均支持Burnstock提出的假设。嘌呤受…     

嘌呤受体:阿尔茨海默病治疗的潜在靶点

嘌呤受体是一个跨膜受体家族,包含P1腺苷受体和P2核苷酸受体的ATP,UTP以及其代谢产物。嘌呤受体对阿尔茨海默病(AD)的病理过程具有广泛的调节作用。咖啡因作为腺苷受体A1和A2A的拮抗剂,研究表明使用咖啡因有益于改善认知,降低PD和AD的认知障碍。P2X7受体(P2X7R)是ATP-门控离子通道,广泛分布于中枢神经系统中,在星形胶质细胞和小胶质细胞都有表达。小胶质细胞是神经炎症的主要启动因素,而抑制小胶质细胞中P2X7R可缓解AD的神经炎性反应。AD的人体组织样本实验数据表明嘌呤受体在AD的发病过程中至关重要,在体外和AD动物模型中选择性使用嘌呤受体激动剂和拮抗剂,表明嘌呤受体可以作为AD潜在的治疗靶点。     

NLRP3与NOD2受体激活对下游炎症因子表达的影响

目的 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)与核苷酸结合寡聚化结构域2(NOD2)受体被其特异性配体激活后对下游炎症因子表达的影响.方法 实验分为4组:空白对照组、TATP组、TMDP、TMDP+ATP组.用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定白细胞介素(IL)-1β及IL-18的表达,逆转录PCR测定NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)的表达情况.结果 TMDP组、TATP组、TMDP+ ATP组的IL-1β和IL-18水平均高于空白对照组(P＜0.05),且TMDP+ ATP组水平增高更显著.TMDP组、TATP组、TMDP+ATP组的NLRP3和Caspase-1表达均高于空白对照组(P＜0.05),且TMDP+ATP2水平增高更显著(P＜0.05).结论 NOD2的特异性配体胞壁酰二肽,NLRP3的特异性配体腺苷三磷酸单独刺激THP-1后NLRP3及下游炎症因子的表达很弱或无表达,联合刺激后可显著增强NLRP3及下游炎症因子的表达,二者之间存在相互促进及协同作用.     

P2X7受体与感染性疾病

P2X7受体是以三磷酸腺苷(ATP)为配体的离子门控通道,是P2X受体家族中最独特的成员,因其具有广泛的病理生理作用而备受关注.近年研究表明P2X7受体是机体对抗病原体入侵的重要组成部分,参与了机体的防御启动,以去除病原体,尤其是可被巨噬细胞吞噬的病原体.此外,P2X7受体基因的多态性与机体对细菌和寄生虫的易感性明确相关,显示了P2X7受体在感染性疾病中发挥着重要作用.本文就P2X7受体与感染性疾病的关系做一综述.     

侧脑室注射腺苷对海马痛单位的影响及其可能机制

目的 :探讨腺苷 (Ado)对海马痛单位的影响及其可能机制。方法 :采用侧脑室给药法 ,参照 Sawyer兔脑图谱 ,用 SN-2型推进器以 2μm/ s速度将玻璃微电极插入海马 P2～ 5 ,L3～ 6 ,H6～ 9处引导神经元自发放电。在 P1 L4,5 H6 处埋藏套管 ,用牙托水配牙托粉固定 ,作脑室注射用。结果 :共引导 35 8个海马放电神经元 ,选择对伤害性刺激起反应的痛单位 80个 ,侧脑室分别注射不同剂量的腺苷及腺苷非选择性受体拮抗剂 8-苯茶碱 (8- PT)、腺苷 A1 受体选择性拮抗剂 8-环戊 - 1,3-二现代在嘌呤(DPCPX)和 ATP敏感性钾通道抑制剂格列苯脲 (Gli)后 ,发现腺苷能抑制大部分海马痛单位放电活 ,且呈明显的剂量依赖性。而腺苷的上述抑制作用均被 8- PT,DPCPX所阻断。格列苯脲能翻转腺苷对海马痛单位放电的抑制作用 (P <0 .0 0 1)。结论 :腺苷能抑制海马痛神经元的放电活动 ,其人造用机制可能与腺苷作用于海马痛神经元上的 A1 受体而引起神经元细胞膜上的 ATP敏感性钾通道激活有关     

糖尿病痛性神经病变和嘌呤受体P2X的研究进展

嘌呤受体P2家族是目前发现的最复杂的受体家族之一,根据其分子结构和信号转导机制的不同可分为配体门控非选择性阳离子通道受体P2X(P2X1~P2X7)和G蛋白偶联受体P2Y(P2Y1、P2Y2、P2Y4、P2Y6、P2Y11~P2Y14)。其中,P2X受体可被其配体ATP激活,使初级传入神经元兴奋性过度增加,从而激活痛觉通路,最终导致痛觉过敏。该文简述P2受体的分类和功能以及P2X受体的分子结构,着重阐述P2X受体在糖尿病痛性神经病变中的表达变化以及潜在的调节机制。     

P2X受体介导的神经病理痛的研究进展

<正>神经病理痛是临床上常见病症,对人身心健康危害较大,其发病机制尚不清楚,目前无有效的治疗手段,加之慢性神经病理痛持续时间长,其研究成为疼痛领域的热点和重点。三磷酸腺苷(ATP)是一种重要的疼痛信号物质,ATP可作用于P2X受体产生效应。应用神经病理痛动物模型,观察到P2X受体在神经病理痛的痛觉形成、传导和调节中有着重要作用,有望成为神经病理痛治疗的新作用位点。     

P2受体与疼痛的实验研究

嘌呤与嘧啶受体(受体)分为P1和P2受体两大类。P1受体又称为腺苷受体；P2受体是ATP，UTP及其类似物激活的受体，其亚型分为P2X(离子通道型受体)和P2Y(G-蛋白偶联型受体)。P2受体通过与其内源性配体核苷酸结合，参与机体组织器官多种功能的调节，在疼痛病理状态(如神经病理性痛、急性疼痛、炎性痛及内脏痛等)，P2受体发挥着重要的介导作用。P2X3受体在感觉神经元中高度表达，通过P2X3受体基因敲除方法，P2X3受体反义寡核苷酸技术和一种新的选择性P2X3受体拮抗剂A-317491的应用，表明P2X3受体在痛觉中发挥重要作用；异聚体P2X2／3受体也涉及疼痛。P2Y受体的某些亚型在感觉神经元中高度表达及其介导的作用，也表明P2Y受体与痛觉有关。P2Y1和P2Y2受体能够引起类似于伤害性反应的细胞兴奋性，P2Y6受体可能是抗损伤。P2受体各亚型的激动剂和拮抗剂有可能为痛觉等病理状态发现新的治疗药物。     

影响P2Z受体介导慢性淋巴细胞白血病细胞凋亡的各种因素及其机理研究

目的　探讨嘌呤能 P2 Z受体介导慢性淋巴细胞白血病 (CL L )细胞凋亡的影响因素及其机理。方法　在二价阳离子—— 1.0 mm ol/L Mg2 + 、Zn2 + 、Ca2 + 、Sr2 + 、Co2 + 、Ba2 + ,不同浓度的 EDTA或 EGTA,不同温度及在含 15 0 mm ol/L胆碱的介质中 ,将表达 P2 Z受体 [P2 Z(+) ]的 CL L细胞分别同 1.0 mm ol/L三磷酸腺苷 (ATP)或 0 .1m mol/L苯甲酰苯甲酸 ATP(Bz ATP)体外培养 8小时 ,以 DNA凝胶电泳、Td T法和流式细胞分析 (FCA )检测上述条件下细胞凋亡的诱导或抑制效应。结果　 Mg2 + 或 Ca2 + 能以剂量依赖性方式促进 ATP诱导 P2 Z(+)细胞凋亡 ,而 EDTA或 EGTA却以相反的方式抑制 P2 Z(+)细胞凋亡的发生 ;1.0 mm ol/L Zn2 + 可完全阻止 ATP诱导 P2 Z(+)细胞凋亡所产生的 DNA片段 ,但其它二价阳离子包括 1.0 mm ol/L Sr2 + 、Co2 + 、Ba2 + 却不影响 ATP的诱导 ;胆碱作为磷脂酶 D(PL D)的抑制剂 ,也可部分抑制 P2 Z(+)细胞凋亡产生的 DNA片段 ;当温度低于 10℃ ,可完全阻止 ATP诱导 P2 Z(+)细胞凋亡产生 DNA片段的发生。结论　 P2 Z受体介导 CL L细胞凋亡可能与核酸内切酶 ,PL D的参与密切相关。     

ATP对小鼠的镇痛作用及其与阿片受体关系初探

目的 观察腹腔注射三磷酸腺苷（ATP）对小鼠的镇痛作用及其与阿片受体关系.方法 将昆明种小鼠按分层随机区组设计分为6组（n=8）：生理盐水（30 ml·kg-1）组（NS组）、150 mg·kg-1ATP组（ATP1组）、200 mg·kg-1ATP组（ATP2组）、纳洛酮（4 mg·kg-1）组（NL组）、150 mg·kg-1ATP＋纳洛酮（4 mg·kg-1）组（ATP1＋NL组）、200 mg·kg-1ATP＋纳洛酮（4 mg·kg-1）组（ATP2＋NL组）.用甩尾法测定各组小鼠用药前后的甩尾潜伏期.结果 ATP1组或ATP2组甩尾潜伏期较NS组明显升高;ATP1＋NL组甩尾潜伏期较ATP1组降低;ATP2＋NL组甩尾潜伏期较ATP2组降低（P＜0.05或P＜0.01）. 结论腹腔注射ATP对小鼠有镇痛作用,与阿片受体有关.     

ATP/P2X4/NLRP3信号轴在脑出血炎症损伤中的作用机制研究

目的 探讨三磷酸腺苷(ATP)/腺嘌呤核苷酸受体2X-4受体(P2X4)/NOD样受体蛋白-3(NLRP3)信号轴在脑出血炎症损伤中的作用机制,为寻找可能的干预措施提供实验依据。方法 选取48只8周龄,体重18～22 g的C57BL/6雄性小鼠,构建脑出血模型,分为模型组、5-BDBD干预组、5′-CTP组和假手术组、5-BDBD干预组、5′-CTP组分别给予腹腔注射P2X4受体阻断剂5-BDBD和激动剂5′-CPT,模型组和假手术组给予等量生理盐水,每组12只。分别于建模成功后第1、3、5、7天应用小鼠神经功能缺损评分(NDS)评估神经功能,干湿重法测量脑含水量;蛋白免疫印迹(Western blot)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定ATP、P2X4和NLRP3的蛋白和mRNA表达水平,ELISA测定各组脑组织中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-8的水平,应用反相高效液相色谱法检测ATP水平。结果 与假手术组比较,模型组第1、3、5、7天时的NDS,病灶侧含水量,IL-1β、TNF-α、IL-8、ATP水平,P2X4和NLRP3的蛋白及m...     

蛋白激酶A和蛋白激酶C对大鼠背根神经节神经元P2X3受体介导的内向电流的调节作用

目的 探讨蛋白激酶A(PKA)和蛋白激酶C(PKC)对分离培养的背根神经节(DRG)神经元ATP受体P2X3功能的调节作用.方法 分离培养大鼠DRG神经元,给予外源性ATP诱导出瞬时型内向电流,通过全细胞膜片钳记录的方法观察P2X3和P2X2/3受体特异性阻断剂TNP-ATP对这一电流的影响,在此基础上观察PKA和PKC激动剂对ATP诱导的瞬时型内向电流的调节作用.结果 在分离培养的DRG神经元上,ATP诱导的瞬时型电流可以被TNP-ATP抑制,其抑制效应呈剂量依赖性,半数有效剂量(IC50)为(21.7±7.6)nmol/L.PKA激动剂forskolin(1 μmol/L)和PKC激动剂PMA(1 μmol/L)均可以快速、可逆地抑制ATP诱导的瞬时型电流.结论 在大鼠分离培养的DRG神经元,PKA和PKC可能通过磷酸化调节抑制P2X3受体的功能,从而抑制ATP诱导的瞬时型内向电流,提示蛋白激酶对P2X3受体的调节作用可能参与痛觉的形成.