EBV相关胃癌中Fas/FasL的表达及其与凋亡的关系

背景与目的:大约有10%的胃癌组织EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV阳性,但EBV在胃癌发生发展中的作用尚不明确。本研究检测Fas、FasL在EBV相关胃癌(EBV-associated gastric carcinoma,EBVaGC)中的表达,及其与肿瘤细胞和肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)凋亡的相互关系。方法:采用免疫组织化学方法检测49例EBVaGC、20例EBV阴性胃癌(EBV-negative gastric carcinoma,EBVnGC)以及12例正常胃黏膜中Fas、FasL的表达,并采用TUNEL技术检测细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)。结果:12例正常胃黏膜和69例胃癌组织的Fas阳性率分别为91.7%和76.8%,FasL阳性率分别为16.7%和58.0%,差异有统计学意义(P<0.05);Fas在EBVaGC和EBVnGC组织中的阳性率分别为71.4%和90.0%,差异无统计学意义(P>0.05)。FasL在EBVaGC和EBVnGC组织中的阳性率分别为63.2%和45.0%,差异有统计学意义...     

45例胃癌P53的免疫组织化学研究

P_(53)基因的突变及其产物的异常表达在多种肿瘤中得到证实。并且肿瘤细胞核P_(53)阳性表达率与预后有关。本文选用抗P_(53)的单克隆抗体PAb1801,通过免疫组化方法对45例胃癌进行了检测,以探讨P-(53)阳性表达与肿瘤组织学类型、临床分期、胃壁浸润深度等因素的关系。     

EBV转化淋巴细胞与EBV相关细胞核基质蛋白分析

（目的）研究脐淋巴细胞与ＥＢＶ转化淋巴细胞（ＬＣＬｓ）,ＥＢＶ相关细胞核基质蛋白（ＮＭＰｓ）之间的关系,分析鉴定ＥＢＶ感染细胞后的ＮＭＰｓ特异性改变,探讨了ＮＭＰｓ与ＥＢＶ转化及肿瘤形成的关系,（方法）ＥＢＶ转化淋巴细胞,改良方法提取ＮＭＰｓ;制备ＮＭＰｓ免疫小鼠血清ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳及双波长蛋白薄层扫描方法分析ＮＭＰｓ,免疫蛋白印迹分析ＮＭＰｓ与抗ＮＭＰｓ的阳性血清之间的反应性,（结果）获得Ｅ     

P53基因在不同类型胃癌细胞内表达的研究

目的：探讨不同类型胃癌P53基因表达情况，协助进一步判断肿瘤的恶性程度。方法：用免疫组化ABC法，对不同类型胃癌进行对比检查。结果：胃肝样腺癌P53基因表达明显高于其它类型胃癌。结论：检查胃癌，尤其是胃肝样腺癌P53基因表达，给临床的治疗及判断病人预后提供了重要指标。     

P53和P21过表达与胃癌淋巴结转移呈正相关

应用Ｓ－Ｐ免疫组化方法研究Ｐ５３和Ｐ２１表达变化与胃癌肿瘤组织分型、细胞增殖和浸润深度及淋巴结转移的关系。发现Ｐ５３阳性染色率为４８．９％，Ｐ５３阳性染色与胃癌肿瘤浸润深度及癌细胞增殖活性呈正相关（Ｐｅａｒｓｏｎ列联系数分别为Ｐ＝０．３２和Ｐ＝０．３５，Ｐ＜０．０５）。同时发现Ｐ２１阳性染色率为７０．０％，Ｐ２１阳性染色与胃癌肿瘤组织分型及癌细胞增殖活性呈正相关（Ｐｅａｒｓｏｎ列联系数分别为Ｐ＝０．３３和Ｐ＝０．５２，Ｐ＜０．０５）。Ｐ５３和Ｐ２１阳性肿瘤的淋巴结转移率（９３％和８１％）分别均明显高于其阴性表达的肿瘤（６０％和５５．５％，Ｐ＜０．０５）。Ｐ５３和Ｐ２１过表达对胃癌淋巴结转移率的贡献为以Ｐ５３过表达为主的独立的联合作用。提示Ｐ５３和Ｐ２１过表达在胃癌淋巴结转移和肿瘤增殖中起重要作用。Ｐ５３过表达与肿瘤浸润有关，而Ｐ２１过表达与肿瘤组织分型有关。     

Toll样受体基因多态性与EBV感染相关胃癌的易感性

目的： 探讨Toll样受体(TLR)家族成员TLR2基因启动子区-196~-174 del和TLR4基因 Thr399Ile位点多态性与EBV相关胃癌(EBVaGC)及EBV阴性胃癌(EBVnGC)易感性的关系。方法：采用PCR技术检测52例EBVaGC,157例EBVnGC以及94例正常对照人群TLR2(-196~-174 del)基因多态性;PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RELP)技术检测50例EBVaGC,67例EBVnGC以及71例正常对照TLR4 Thr399Ile位点基因型及等位基因分布;分析2种基因多态性与EBVaGC及EBVnGC易感性的关系。结果：胃癌组与对照组比较TLR2(-196~-174 del)基因型分布无显著差异(χ2=3.180,P=0.075),胃癌组del等位基因频率明显高于对照组(χ2=4.875, P=0.027),del等位基因携带者的罹患危险性明显高于非携带者(OR=1.491,95%CI=1.045~2.126);EBVaGC组和EBVnGC组中,TLR2(-196~-174 del)3种基因型以及del等位基因频率差异无统计学意义(χ2=0.05,P=0.867)。EBVaGC组、EBVnGC组和正常对照组中均未发现TLR4基因Thr399Ile位点的多态,其基因型分布及等位基因频率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论：TLR2(-196~-174 del)等位基因可能是胃癌发病危险因素,且在EBVaGC和EBVnGC两种胃癌发生中产生相同的影响。未发现TLR2(-196~-174 del)和TLR4基因Thr399Ile基因型分布与EBVaGC的易感性相关。     

EBV转化淋巴细胞与EBV相关细胞核基质蛋白分析

［目的］研究脐淋巴细胞与ＥＢＶ转化淋巴细胞（ＬＣＩｓ）,ＥＢＶ相关细胞核基质蛋白（ＮＭＰｓ）之间的关系,分析鉴定ＥＢＶ感染细胞后的ＮＭＰｓ特异性改变,探讨ＮＭＰｓ与ＥＢＶ转化及肿瘤形成的关系。［方法］ＥＢＶ转化淋巴细胞;改良方法提取ＮＭＰｓ;制备ＮＭＰｓ免疫小鼠血清;ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳及双波长蛋白薄层扫描方法分析ＮＭＰｓ;免疫蛋白印迹分析ＮＭＰｓ与抗ＮＭＰｓ的阳性血清之间的反应性。［结果］获得ＥＢＶ转化淋巴细胞。获得五种细胞ＮＭＰｓ。各细胞间分子量相同的蛋白约占各自细胞组分的５２．１％～５９．６％。脐淋巴细胞３０ＫＤ～４０ＫＤ蛋白较多,而ＬＣＬｓ和ＥＢＶ相关淋巴细胞中,高分子量的蛋白比较多。－６４ＫＤ ＮＭＰ特异地存在于ＬＣＬｓ及ＥＢＶ相关细胞中。ＮＰＣ病人血清中能够检出抗ＬＣＬｓ的ＮＭＰｓ抗体。［结论］ＬｅｕＬｅｕ－ＯＭｅ和环孢菌素Ａ结合使用,可促进ＥＢＶ转化。低分化的脐淋巴细胞比高分化ＬＣＬｓ有更稳定的核基质网架结构。推测相同分子量ＮＭＰｓ构成核基质的结构成分;ＥＢＶ感染细胞后,ＮＭＰｓ有明显的变化。ＮＭＰｓ的特异性与ＥＢＶ感染高度相关;ＥＢＶ转化与ＮＰＣ的发生有一定关系。     

EB病毒相关胃癌研究进展

Epstien-Barr病毒(EBV)在EBV阳性胃癌的演进中有重要作用.最近的研究集中在本病的流行病学和生物学发病机制.复习近年来针对EBV相关胃癌有关的基础、临床和流行病学研究,讨论EBV在胃癌发生发展中的作用,介绍此领域最新的研究成果.     

EB病毒相关胃癌与mdm2，p53及p21基因异常的研究

 目的 探讨p53基因突变以及mdm2，p53和p21蛋白表达异常在EBV相关胃癌（EBVaGC）发生发展中的作用。方法 应用免疫组化技术检测13例EBVaGC、45例临床病理资料与之匹配的EBV阴性胃癌（EBVnGC）组织中 mdm2，p53和p21蛋白的表达；PCR-SSCP银染技术结合DNA序列分析检测p53基因exon 5~8突变；RT-PCR检测EBV相关基因的表达。结果 E-BVaGC组与EBVnGC组相比，两组间mdm2，p53和p21蛋白的阳性检出率差异无统计学意义（P = 0.830 0；P = 0.791 2；P = 0.353 1），但EBVaGC组p53蛋白过表达率（15.38 %）明显低于EBVnGC组（57.78 %），两组间差异有统计学意义（P = 0.008 5）。mdm2蛋白阳性表达与p53蛋白过表达呈显著正相关（P = 0.000 8，r = 0.439 1）；p21与p53蛋白共同表达率较高，但经计数资料相关性统计学分析表明两者无显著相关性（P = 0.2501，r = 0.202 5）。2例EBVnGC检测到p53基因突变，突变均位于exon 5，13例E-BVaGC和58例相应癌旁组织均未检测到p53基因突变。13例EBVaGC核抗原基因EBNA1均为阳性，潜伏膜蛋白基因LMP1均为阴性，即刻早期基因BZLF1，早期基因BARF1和BHRF1阳性率分别为46.15 %（6／13），46.15 %（6／13）和15.38 %（2／13），三者与EBVaGC组织中mdm2，p21和p53蛋白的表达均无显著相关性（P＞0.05）。 结论 EBV感染以及mdm2，p53和p21蛋白表达异常与胃癌发生有关； p53基因突变可能并非胃癌组织中p53蛋白异常累积的主要原因；胃癌组织中EBV感染与p53蛋白的异常表达有关，而与mdm2和p21蛋白的异常表达以及p53基因突变无显著相关性。     

抑癌基因P16在胃癌中的表达及意义

材料与方法应用免疫组织化学S—P法，对96例胃癌组织及20例癌旁正常胃粘膜中抑癌基因P16进行检测。结果胃癌组织P16阳性率35．4％，显著低于胃癌旁正常胃粘膜90％（P＜0．o1）。在各组织学类型癌中，高分化腺癌P16阳性率最高63．2％，粘液细胞癌最低20％，随着恶性程度增高而降低。P16基因低表达，胃癌更易发生淋巴结转移或穿透胃壁，而与患者年龄、性别、肿瘤大小无相关性。结论抑癌基因P16的异常改变与胃癌的发生和发展密切相关，可能是胃癌进一步恶化的标志之一，可作为胃癌生物学行为及预后评估的参考指标，为胃癌的基因治疗提供参考依据。     

中国人群结,直肠癌P53基因失活突变热点的研究

ｐ５３基因是迄今发现与人类肿瘤相关性最高的基因，野生型ｐ５３基因的丢失或失活可能是细胞转化和肿瘤产生的重要步骤。本次研究，通过对３０例结、直肠癌患者手术后活检标本的分析，探讨中国人群中结、直肠癌ｐ５３基因失活突变在不同突变位点上的分布状态，并认为ｐ５３基因的Ａｒｇ－１３５－Ｈｉｓ是失活突变热点。在此基础上，对肿瘤标本ｐ５３基因突变与切除范围以外的边缘组织进行了比较。２０例病人突变仅存在于肿瘤组织，而正常组织没有突变。有两例患者，在肿瘤组织和边缘组织中均存在突变，边缘组织突变是杂合型，提示了患者的预后不良。     

云锡矿工肺癌p53突变检测

目的：为深入探讨云锡矿工肺癌高发的发病机理,找寻早期诊断的方法和理论依据。方法：应用免疫组化方法对云锡矿工肺癌４１例（Ｍ组）、非云锡地区非矿工人群肺癌２５例（ＮＭ组）和正常肺组织１５例（Ｃ组）进行ｐ５３检测比较研究。数据用四格表确切概率法进行组间显著性测验。结果：发现ｐ５３阳性率Ｍ组为６０．９８％,ＮＭ组为３６％,Ｃ组为０,三组间差异有高度显著性（Ｐ〈０．０５）,且Ｍ组与ＮＭ组间鳞病的Ｐ５３阳性存     

Evidence that Expression of a Mutated p53 Gene Attenuates Apoptotic Cell Death in Human Gastric Intestinal-type Carcinomas in vivo

To examine in vivo the validity of the results of experiments in vitro , we analyzed the relationship between p53 gene status and apoptotic cell death of human gastric intestinal-type adenocarcinomas. Surgical specimens were classified into two categories: 18 gastric cancers with nuclear p53 protein (A), and 17 gastric cancers without nuclear p53 protein (B). Polyraerase chain reaction-single strand conformation polymorphism disclosed a shifted band that corresponded to a mutation in the p53 gene in 13 cases (72%) in category A and 3 cases (18%) in category B, the frequency being significantly higher in the former ( P <0.05). Apoptotic cells were identified from routinely stained sections and by terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling (TUNEL). The TUNEL index [TI: (the number of TUNEL-positive apoptotic cells/the total number of tumor cells) X100] was 3.8 ±1.4% in category A and 4.9 ±1.2% in category B, the value being significantly lower in the former ( P < 0.05). The proliferating cell nuclear antigen index, defined similarly to the TI, was 56.4±16.3% in category A, and it was significantly higher than that in category B ( P <0.05). The immunohistochemically detected expression of P21^CIP1/WAF1 did not differ between the two categories, while Bax-positive tumor cells were more frequently detected in category A. These results indicate that (1) expression of a mutated p53 gene attenuates apoptotic cell death of gastric cancer, in accordance with the previous in vitro finding that p53 gene mutation provides a possible selective advantage for tumor cell proliferation, and (2) apoptosis is related not only to expression of p53 and the stage of the cell cycle, but also to p53-independent and cell cycle-independent events.     

p53基因与原发性肝癌临床特征的关系

目的 探讨p53基因在原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及其与临床特征的关系.方法 应用免疫组化(PV-9000二步法)检测50例HCC组织、30例痛旁组织和10例正常肝组织中p53的表达.结果 HCC组织中p53表达阳性率为42.0%(21/50).HCC组织巾p53的阳性表达率高于癌旁组织及正常肝组织(P<0.05).p53基因的表达与肿瘤转移相关(P<0.05).结论 p53的突变可能在HCC的发生和发展中起重要作用.     

胃癌患者p53基因甲基化的研究

作者应用限制性内切酶ＨｐａⅡ和ＭｓｐⅠ酶切胃癌组织及正常胃组织ＤＮＡ，经ＰＣＲ扩增ｐ５３基因第５外显子，琼脂糖凝胶电泳分析其电泳图谱，比较胃癌组织及正常胃组织ｐ５３基因第５外显子特定序列５′－ＣＣＧＧ－３′位点甲基化差异。结果显示：１５例胃癌组织中１２例ｐ５３基因第５外显子出现高甲基化状态，而１０例正常胃组织为低甲基化状态，结果提示，ｐ５３基因高甲基化状态与胃癌发生有关。     

p16/CDKN2 Gene and p53 Gene Alterations in Japanese Non-smoking Female Lung Adenocarcinoma

Primary lung adenocarcinomas in non-smoking females are increasing in the USA and Japan. Environmental factors such as passive smoking, asbestos, domestic radon, and hormonal effects have been implicated, but the etiology is still uncertain. We therefore analyzed point mutations of p16 gene, a newly characterized tumor suppressor gene, and compared the results with alterations of p53 gene in 28 primary lung adenocarcinomas in non-smoking Japanese females. There were no cases with somatic point mutation of p16 gene, except for one case with two germline mutations (silent mutations). In contrast, six out of 16 informative cases showed loss of heterozygosity of p53 gene using a TP53 microsatellite marker and 19 out of 28 cases showed expression of oncoprotein using DO-7 immunohistochemistry. These findings suggest that p16 gene alteration is a rare event in primary lung adenocarcinomas in Japanese non-smoking females, compared with alterations of the p53 gene.     

p53与卵巢癌的基因治疗

卵巢癌是妇科恶性肿瘤的首要死亡原因,为了提高5年生存率,卵巢癌的生物治疗已经成为学者们关注的治疗方法.卵巢癌中p53的突变率最高,p53与卵巢癌密切相关.卵巢癌的p53基因治疗已兴起十余年,本文着重从体外到临床试验阐述了p53基因与卵巢癌发病相关性,以及p53基因治疗在卵巢癌的应用和仍然存在的问题.目前重组人p53腺病毒注射液作为首个基因治疗产品已经问世,在美国、欧洲等国家仍有50多个临床试验正在实施,基因治疗有望成为继手术治疗、化学治疗、放射治疗之后的又一种治疗卵巢癌的有效方法.     

hTERT和 p53蛋白在胃癌组织中表达的临床意义

目的探讨hTERT和p53蛋白在胃癌组织中表达的临床意义。方法收集胃癌手术标本98例,应用免疫组化Maxvision^TM法检测hTERT和p53蛋白在胃癌组织的表达。结果hTERT和p53蛋白表达阳性率与肿瘤细胞病理组织学类型、组织分级及肿瘤大小无关,与肿瘤组织浸润深度、淋巴结转移情况、PTNM分期相关。hTERT和p53蛋白在癌组织中表达存在良好的一致性和相关性。结论hTERT和p53蛋白表达可作为预测胃癌转移潜能和预后的生物学指标,且hTERT蛋白的表达预示胃癌具有较强的侵袭转移能力,对于临床早期干预治疗具有重要的指导意义。     

抑癌基因p53在胃癌组织的表达及临床意义

目的：探讨ｐ５３基因在胃癌的表达与临床、病理因素及预后的关系,探索ｐ５３基因异常表达在胃癌发生过程中的作用。方法：使用抗ｐ５３蛋白单克隆抗体ＤＯ－７,对９９例人胃癌组织ｐ５３的表达进行免疫组化研究。结果：４８例胃癌组织ｐ５３基因表达阳性（４９％）。ｐ５３基因表达与胃癌的大体类型、分化工、淋巴结转移等指标均无明显关系。在１０例不典型增生的癌旁组织中,２例呈阳性反应;在４例有肠上皮化生的癌旁组织中及其     

p53蛋白、PCNA在胃癌中表达及其生物学行为关系的研究

目的研究p53蛋白、PCNA在胃癌中表达及其生物学行为的关系.方法采用免疫组化技术(S-P法)对53例胃癌细胞及20例正常胃粘膜组织进行p53蛋白、PCNA检测.结果 p53蛋白、PCnA阳性表达率分别为56.6%,92.5%,PCNA强阳性表达率占64.2%.p53阳性表达率及PCNA强阳性表达率均与胃癌组织类型、浸润深度、淋巴结转移密切相关.差异具有显著性(P＜0.05).p53蛋白与PCNA强阳性表达呈正相关.结论p53蛋白及PCNA表达与胃癌生物学行为密切相关,对判断胃癌预后具有重要临床意义.