EB病毒相关胃癌与mdm2，p53及p21基因异常的研究

 目的 探讨p53基因突变以及mdm2，p53和p21蛋白表达异常在EBV相关胃癌（EBVaGC）发生发展中的作用。方法 应用免疫组化技术检测13例EBVaGC、45例临床病理资料与之匹配的EBV阴性胃癌（EBVnGC）组织中 mdm2，p53和p21蛋白的表达；PCR-SSCP银染技术结合DNA序列分析检测p53基因exon 5~8突变；RT-PCR检测EBV相关基因的表达。结果 E-BVaGC组与EBVnGC组相比，两组间mdm2，p53和p21蛋白的阳性检出率差异无统计学意义（P = 0.830 0；P = 0.791 2；P = 0.353 1），但EBVaGC组p53蛋白过表达率（15.38 %）明显低于EBVnGC组（57.78 %），两组间差异有统计学意义（P = 0.008 5）。mdm2蛋白阳性表达与p53蛋白过表达呈显著正相关（P = 0.000 8，r = 0.439 1）；p21与p53蛋白共同表达率较高，但经计数资料相关性统计学分析表明两者无显著相关性（P = 0.2501，r = 0.202 5）。2例EBVnGC检测到p53基因突变，突变均位于exon 5，13例E-BVaGC和58例相应癌旁组织均未检测到p53基因突变。13例EBVaGC核抗原基因EBNA1均为阳性，潜伏膜蛋白基因LMP1均为阴性，即刻早期基因BZLF1，早期基因BARF1和BHRF1阳性率分别为46.15 %（6／13），46.15 %（6／13）和15.38 %（2／13），三者与EBVaGC组织中mdm2，p21和p53蛋白的表达均无显著相关性（P＞0.05）。 结论 EBV感染以及mdm2，p53和p21蛋白表达异常与胃癌发生有关； p53基因突变可能并非胃癌组织中p53蛋白异常累积的主要原因；胃癌组织中EBV感染与p53蛋白的异常表达有关，而与mdm2和p21蛋白的异常表达以及p53基因突变无显著相关性。     

胃癌组织中p53基因突变及p53和mdm2蛋白表达的研究

目的探讨mdm2和p53基因异常在胃癌发生发展中的作用以及两者相关性。方法应用免疫组化技术检测58例胃癌组织以及相应癌旁组织中mdm2和p53蛋白的表达;PCR-SSCP银染技术检测p53基因exon5~8突变情况。结果胃癌组p53和mdm2蛋白阳性率分别为86·21%(50/58)和29·31%(17/58),癌旁组织组p53和mdm2蛋白均为阴性,胃癌组p53和mdm2蛋白阳性率明显高于癌旁组织组,两两间差异有统计学意义,P=0·0000、P=0·0001。胃癌组织中p53和mdm2蛋白表达率与肿瘤大小、组织学类型、分化程度、淋巴结转移以及患者年龄等无显著相关性,P>0·05。mdm2蛋白阳性表达与p53蛋白过表达呈显著正相关,χ2=11·1839,P=0·0008,r=0·4391。2例胃癌组织检测到p53基因突变,突变均位于exon5,58例相应癌旁组织均未检测到p53基因突变。结论mdm2和p53蛋白异常表达与胃癌发生有关,p53基因突变可能并非胃癌组织中p53蛋白异常累积的主要原因,mdm2蛋白在胃癌发生发展中的作用可能与p53蛋白密切相关。     

EBV相关性胃癌罕见p53基因突变的可能机制与意义

2014年癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas,TCGA）首次将胃癌从分子水平分为四型,其中EB病毒（Epstein-Barr virus,EBV）感染型即EBV相关性胃癌（EBV-associated gastric cancer,EBVaGC）患者,可能是免疫治疗的适宜群体。在包括胃癌在内的大部分肿瘤中p53基因突变率最高,但在EBVaGC中p53基因突变率却远低于EBV阴性胃癌（EBV-negative gastric cancer,EBVnGC）。可能机制为:EBV感染是EBVaGC形成的早期事件;野生型p53蛋白与病毒即刻早期蛋白BZLF1（Z）相互作用,维持EBV潜伏感染状态和早期复制;病毒复制后期,野生型p53蛋白可在病毒产物的作用下通过泛素化等途径被降解,以上或可表明p53基因野生型对EBVaGC形成的重要性。而EBV感染诱导炎症反应,肿瘤组织中大量淋巴细胞浸润,基因组高突变率及PD-L1扩增的特征使其可能成为免疫治疗的适宜群体,也说明免疫微环境在肿瘤发生发展中的重要作用。而在EBVnGC中,多种因素导致p53基因突变率较高,使其失去正常的抑癌功能而导致肿瘤发生。本文就EBVaGC中罕见p53基因突变这一现象的可能机制进行综述。      

胃癌组织中p53基因突变及p53和mdm2蛋白表达的研究

目的：探讨mdm2和p53基因异常在胃癌发生发展中的作用以及两者相关性。方法：应用免疫组化技术检测58例胃癌组织以及相应癌旁组织中mdm2和p53蛋白的表达；PCR-SSCP银染技术检测p53基因exon5～8突变情况。结果：胃癌组p53和mdm2蛋白阳性率分别为86．21％（50／58）和29．31％（17／58），癌旁组织组p53和mdm2蛋白均为阴性，胃癌组p53和mdm2蛋白阳性率明显高于癌旁组织组，两两间差异有统计学意义，P=0．0000、P=0．0001。胃癌组织中p53和mdm2蛋白表达率与肿瘤大小、组织学类型、分化程度、淋巴结转移以及患者年龄等无显著相关性，P〉0．05。mdm2蛋白阳性表达与p53蛋白过表达呈显著正相关,X^2=11．1839，P=0．0008，r=0．4391。2例胃癌组织检测到p53基因突变，突变均位于exon5，58例相应癌旁组织均禾检测到p53基因突变。结论：mdm2和p53蛋白异常表达与胃癌发生有关，p53基因突变可能并非胃癌组织中p53蛋白异常累积的主要原因，mdm2蛋白在胃癌发生发展中的作用可能与p53蛋白密切相关。     

EBV相关胃癌中Fas/FasL的表达及其与凋亡的关系

背景与目的:大约有10%的胃癌组织EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV阳性,但EBV在胃癌发生发展中的作用尚不明确。本研究检测Fas、FasL在EBV相关胃癌(EBV-associated gastric carcinoma,EBVaGC)中的表达,及其与肿瘤细胞和肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)凋亡的相互关系。方法:采用免疫组织化学方法检测49例EBVaGC、20例EBV阴性胃癌(EBV-negative gastric carcinoma,EBVnGC)以及12例正常胃黏膜中Fas、FasL的表达,并采用TUNEL技术检测细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)。结果:12例正常胃黏膜和69例胃癌组织的Fas阳性率分别为91.7%和76.8%,FasL阳性率分别为16.7%和58.0%,差异有统计学意义(P<0.05);Fas在EBVaGC和EBVnGC组织中的阳性率分别为71.4%和90.0%,差异无统计学意义(P>0.05)。FasL在EBVaGC和EBVnGC组织中的阳性率分别为63.2%和45.0%,差异有统计学意义...     

宫颈鳞癌组织中p53和mdm2蛋白异常表达研究

[目的]探讨p53和mdm2基因异常在宫颈癌发生发展中的作用以及两者间的相互关系.[方法]应用PCR-SSCP和免疫组化技术检测12例宫颈原位癌、45例宫颈癌和20例正常宫颈组织中p53基因突变以及p53和mdm2蛋白表达.[结果]①45例宫颈癌标本中测得exon 5和exon 7突变各1例,合计突变率为4.44%,宫颈原位癌和正常宫颈组织中均未检测到p53基因突变.②宫颈原位癌组织中p53和mdm2蛋白阳性率分别为25.00%和41.67%;宫颈癌组织中p53和mdm2蛋白阳性率分别为42.22%和53.33%.宫颈原位癌和宫颈癌组织中p53和mdm2蛋白的阳性率明显高于正常宫颈组织(P均<0.05).③p53蛋白的表达与宫颈癌临床分期有显著相关性(P=0.042).④22例p53蛋白阳性宫颈原位癌和宫颈癌组织中有17例同时检测到mdm2的表达,两者间有显著相关性(X2=9.988,P=0.0016).[结论]宫颈癌组织中p53基因突变率较低,提示p53基因突变并非宫颈癌组织中p53蛋白异常表达的主要原因.p53蛋白异常表达的宫颈原位癌和宫颈癌组织中多伴有mdm2表达,推测mdm2蛋白可能通过干扰p53的功能参与宫颈癌的发生.     

肝细胞癌中PTEN、p73蛋白表达及临床意义

[目的]研究肝细胞癌中PTEN、p73蛋白的表达及相互关系,探讨它们在肝细胞癌的发生发展中的生物学意义.[方法]应用Elivision免疫组化方法检测53例肝细胞癌及癌旁肝组织中PTEN、p73蛋白表达.[结果]53例肝细胞癌组织中PTEN蛋白表达的阳性率(56.6%)明显低于癌旁肝组织(96.2%)(x2=20.94,P＜0.01),p73蛋白表达的阳性率(54.7%)高于癌旁肝组织(5.7%)(x2=26.33,P＜0.01).PTEN蛋白表达与肿瘤大小、TNM分期、伴肝硬化无相关性(P＞0.05),与组织分化程度、有无侵袭性显著相关(P＜0.01).p73蛋白表达与肿瘤大小、组织分化程度、TNM分期、伴肝硬化无相关性(P＞0.05),与肝细胞癌有无侵袭性显著相关(P＜0.05).PTEN蛋白表达与p73蛋白表达无相关性.[结论]PTEN、p73蛋白在肝细胞癌的发生发展中发挥重要作用.联合检测PTEN、p73蛋白对判断肝细胞癌预后有参考价值.     

TLR3和TLR4基因多态性与EBV相关胃癌易感性的关系

目的 探讨TLR3c.1377和TLR4Asp299Gly基因多态性与EBV感染在EBV相关胃癌（EBVassociated gastric carcinoma, EBVaGC）发生中的相关性。方法 选用41例EBVaGC组织、62例EBV阴性胃癌（EBV-negative gastric carcinoma, EBVnGC）组织以及64例健康人群血标本作为研究对象,采用PCR结合限制性长度多态性分析（reaction-restriction fragment length polymorphism, RFLP)技术检测TLR3c.1377 和TLR4 Asp299Gly基因多态性,并对实验结果进行统计分析。结果 （1）胃癌组与对照组比较TLR3c.1377基因型频率差异有统计学意义（P=0.025）,胃癌组T等位基因频率明显高于对照组（45.6% vs. 29.7%,P=0.004),T等位基因携带者的患病风险明显高于非携带者(OR=2.435,P=0.008）;（2）EBVaGC、EBVnGC以及对照组间TLR3c.1377基因型、等位基因频率差异无统计学意义（P>0.05）。（3）EBVaGC组,EBVnGC组以及正常对照组所有个体TLR4 Asp299Gly基因型均为Asp/Asp纯合子（P>0.05）。结论 TLR3c.1377基因多态性与胃癌易感性有关,T等位基因为胃癌的危险因子,而C等位基因为一保护基因;TLR3c.1377基因多态性与EBVaGC易感性无明显相关。     

P-gp、p53过表达与胃癌及乳腺癌转移的关系

目的研究胃癌和乳腺癌组织P-耐药糖蛋白(P-gp),p53蛋白表达及临床意义.方法应用免疫组化SABC法检测93例胃腺癌组织及60例乳腺癌组织中p-gp、p53蛋白的表达.结果乳腺癌组织中P-gp阳性率为38.3%,p53阳性率为56.7%;胃腺癌组织中P-gp阳性率为55.9%,p53阳性率为44.1%;P-gp、p53蛋白表达均与淋巴结转移有关(P＜0.05)P-gp表达与p53表达有显著的协同性(P＜0.05).结论p53突变蛋白和P-gp过表达在胃癌和乳腺癌淋巴结转移中起重要作用.p53基因突变对于多药耐药基因(mdr-1)编码产物P-gp表达增高有一定影响,早期进行p53蛋白和P-gp检测有重要的临床意义.     

胃癌组织p73基因突变与p21waf2蛋白的检测分析

[目的]探讨胃癌组织中p73基因突变与p21waf2蛋白表达的相关性及其在胃癌发生、发展中的作用.[方法]采用PCR_SSCP及免疫组织化学法,检测60例胃癌新鲜手术标本中癌组织和相应的胃正常粘膜组织p73突变及p21waf2蛋白的表达.[结果]p73突变检出率,在60例胃癌组织中为53.33%(32/60),在相应的胃正常粘膜组织中为1.67%(1/60),差异有显著性(P<0.01);其中25例有淋巴结转移者,p73突变检出率为92.00%(23/25),无淋巴结转移者为25.71%(9/35),差异有非常显著性(P<0.005).p21waf2蛋白检测阳性率,在60例胃癌组织中为33.33%(20/60),在相应的胃正常粘膜组织中为86.67%(52/60),有显著性差异(P<0.01);其中25例有淋巴结转移者,p21waf2蛋白阳性率为4.00%(1/25),无淋巴结转移者为53.45%(19/35),差异有显著性(P<0.01).[结论]胃癌组织中,p73基因突变与p21waf2蛋白低表达有显著的相关性,并与胃癌的发生和胃周淋巴结转移相关,其临床意义值得进一步探讨.