雷公藤多苷对小鼠腹腔激活巨噬细胞杀伤活性和NO分泌影响的实验研究

雷公藤多苷可以作为免疫抑制剂用于自身免疫性疾病的治疗，如子宫内膜异位症、哮喘、肝炎等，既可以抑制细胞免疫又可以抑制体液免疫。目的：探讨雷公藤多苷(TWP)对小鼠腹腔活化巨噬细胞杀伤活性和NO分泌的影响。方法：分离小鼠腹腔巨噬细胞，用脂多糖(LPS)激活，给予雷公藤多甙(TWP)进行共同孵育；分别以间接MTT法和Griess试剂检测巨噬细胞的杀伤活性和上清NO的含量变化。结果：雷公藤多苷能有效抑制小鼠腹腔激活巨噬细胞的杀伤活性以及NO的生成。     

雷公藤甲素对小鼠腹腔巨噬细胞杀伤活性的影响

目的 :观察雷公藤甲素 (TP)对小鼠腹腔巨噬细胞 (M)杀伤活性的影响。方法 :分离、纯化巨噬细胞 ,给予不同浓度TP进行不同时间共培养 ,以MTT法检测M杀伤活性。结果 :TP在浓度 1～ 10 μg/L范围内、时间 4～ 2 4h范围内对静止及活化的M杀伤活性具有显著抑制作用 (P <0 0 1) ,且分别呈剂量和时间依赖关系。结论 :TP可以抑制M杀伤活性     

雷公藤多甙抑制EM患者腹腔巨噬细胞及相应细胞模型分泌TNF-α的实验研究

目的观察雷公藤多甙(TWP)对子宫内膜异位症(EM)患者腹腔巨噬细胞和小鼠腹腔活化巨噬细胞释放TNF-α的影响,以探讨TWP用于临床治疗EM的机制并建立细胞模型,为后续研究做准备。方法收集16例经腹腔镜检查确诊为EM患者腹腔液分离纯化巨噬细胞,并给予不同剂量的TWP进行共同孵育;同时分离纯化小鼠腹腔巨噬细胞,用脂多糖(LPS)激活以获得细胞模型,同样予TWP进行共同孵育。分别以间接MTT法和RT-PCR法在蛋白质水平和基因水平检测该药物影响激活状态巨噬细胞分泌TNF-α含量的变化。结果 EM患者腹腔液中TNF-α含量显著高于非EM妇女,在4～24 h后TWP(6.25～100μg/L)显著抑制了TNF-α的分泌。结论 TWP在蛋白质和基因水平均能有效抑制激活巨噬细胞分泌TNF-α。     

雷公藤多苷联合孕三烯酮对子宫内膜异位症及血清细胞因子表达的临床研究

为了研究雷公藤多苷联合孕三烯酮对子宫内膜异位症(EMS)及血清细胞因子表达的影响,将135例EMS患者随机分为观察组(n=69)与对照组(n=68),观察组采用口服雷公藤多苷片20 mg/次,3次/d,连续治疗4周,然后减量至10 mg/次,3次/d。联合孕三烯酮胶囊,在月经周期的第1,4天各服2.5 mg,以后每周2次,3个月为一疗程。对照组单纯用孕三烯酮胶囊(用法同上)。治疗前后测定血清相关细胞因子水平,并观察临床效果。结果显示,观察组总有效率89.71%,明显高于对照组74.63%,差异有统计学意义(P0.05)。2组痛经评分治疗后有不同程度的降低,但观察组评分更低,效果更好(P0.01)。治疗前2组TGF-β,IL-10和IL-4水平无明显差异,治疗后上述细胞因子水平均降低,但观察组明显低于对照组(P0.01)。血清IL-17水平2组治疗前后比较无显著性差异。该研究表明,中西医结合治疗子宫内膜异位症具有明显的临床疗效,其机制可能与有效调节相关细胞因子水平有关。     

雷公藤内酯醇对小鼠腹腔激活巨噬细胞释放一氧化氮的影响

目的探讨雷公藤内酯醇(TP)抗炎及免疫抑制作用的机制。方法以 Criess 试剂检测 TP 对小鼠腹腔激活巨噬细胞在不同剂量和不同时间段一氧化氮(NO)分泌的影响。结果在1～10μg/ml 范围内,TP 对腹腔激活巨噬细胞 NO 产生具有明显抑制作用(P<0.01),呈剂量和时间依赖性,且无细胞毒性。结论 TP 能有效抑制小鼠腹腔液中激活巨噬细胞 NO 生成,提示 TP 的抗炎及免疫抑制作用与抑制 NO 的生成有关。     

雷公藤多苷对小鼠细胞免疫功能的影响

目的研究雷公藤多苷对正常小鼠细胞免疫功能的影响。方法用流式细胞仪及T淋巴细胞增殖试验分别测定雷公藤多苷对正常小鼠外周血T淋巴细胞亚群及T淋巴细胞增殖能力的影响。结果与空白对照组比较,雷公藤多苷可显著降低成熟淋巴细胞（CD3＋）、T辅助性及T诱导性淋巴细胞亚群（CD4＋）百分比以及T淋巴细胞增殖能力,也可显著升高T抑制淋巴细胞亚群（CD8＋）百分比。结论雷公藤多苷具有一定的细胞免疫抑制作用。     

复方雷公藤多苷的毒性研究

通过检测复方雷公藤多苷的急性和慢性毒性指标,来判定复方雷公藤多苷和雷公藤多苷二者的毒性大小。同时测定单纯复方中药的最大耐受量,并以此判定复方雷公藤多苷的毒性来源。     

雷公藤多苷三萜类成分的研究

 目的：对雷公藤多苷的三萜化合物进行分离鉴定和完善雷公藤多苷产品的质量控制标准。方法：硅胶柱层析分离,理化常数和光谱数据确定三萜化合物的结构。结果：分离纯化获得10个三萜化合物,分别鉴定为雷公藤内酯甲(1),雷公藤内酯乙(2),regelin(3),demethylregelin(4),salaspermic acid(5),雷公藤酮(6),cangoronine(7),3-hydroxy-2-oxo-3-fridelen-20α-car-boxylic acid(8),3-epikatonic acid(9),雷公藤三萜酸A(10)。结论：化合物(3),(4),为首次从该植物中分离得到。     

中药复方对抗雷公藤多苷毒性的研究Ⅲ对雷公藤多苷抗炎作用的影响

以瓜菱、石斛、白芍、川芎、生地、元参、牛膝、五味子、菟子、枸杞子、车前子、覆盆子、益母草、泽兰、麦冬、当归组成的中药复方,其水提剂１１．２７,５．６４,２．８２ｇ／ｋｇ与等量雷公藤多苷组成复方制剂级动物ｉｇ。小剂量复方中药＋雷公藤多苷组对小鼠急性、慢必琰症及大鼠急性和免疫炎症均有明显的抑制作用,且该作用优于等剂量的雷公藤多苷。中药复方剂量过大可拮抗雷公藤多苷的抗炎作用。     

雷公藤治疗子宫内膜异位症的实验研究

在临床应用雷公藤制剂治疗很多疾病的同时致育龄期女性出现闭经 ,我们利用这一点临床将雷公藤制剂用于治疗子宫内膜异位症 (内异症 ) ,子宫肌腺症 (肌腺症 ) ,并取得较好的效果。在临床的基础上我们进行动物实验观察研究 ,目的是进一步探讨雷公藤治疗内异症、肌腺症的机理 ,为临床提供更深的理论依据。1　材料1 1　动物　成熟未交配ＳＤ雌性大鼠 ,由浙江省医学科学院动物房提供。1 2　药品　复方雷公藤胶囊为本院制剂 (雷公藤多甙、甘草、丹参 )。炔诺酮片剂由中国上海信谊药厂生产。鼠血清卵泡刺激素 (ＦＳＨ)、黄体生成激素 (ＬＨ)、雌二…     

白藜芦醇对脂多糖诱导一氧化氮和肿瘤坏死因子生成的影响

目的:探讨白藜芦醇对脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞激活时所分泌的一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子-α(TNFα-)的影响。方法:采用LPS诱导的小胶质细胞活化模型,用ELISA法测定细胞外液中的炎症介质NO和TNFα-的含量。结果:LPS能高度激活小胶质细胞并且能使NO和TNFα-分泌增加,白藜芦醇明显抑制NO和TNFα-的含量。结论:白藜芦醇有抑制炎症介质NO和TNFα-的分泌作用。     

回心草对脐静脉内皮细胞的保护作用及对分泌一氧化氮和一氧化氮合酶的影响

目的:研究回心草水提取液及其含药血清对人脐静脉内皮活细胞数、内皮细胞一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NO合酶)的影响,探讨回心草抗动脉硬化的药理作用机制。方法:采用H₂O₂建立体外培养的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)损伤模型。采用MTT法测定回心草提液对H₂O₂损伤的内皮细胞的吸光度(OD);采用经典Griess Reagent检测各剂量组细胞上清液中NO浓度,采用一氧化氮荧光检测探针DAF-FMDA(3-amino,4-aminomethyl-2′,7′-difluorescein,diacetate)检测细胞内NOS的活性。结果:H₂O₂12.5mmol·L^-1为最合适的细胞刺激浓度;回心草药液与H2O2损伤的血管内皮细胞共同孵育24h后,2.50mg·mL^-1、3.33mg·mL^-1浓度组与模型组比较有显著差异(P<0.05,P<0.01);回心草水提液作用于内皮细胞,进行NO,NOS含量的测定,其中回心草2.50mg·mL^-1剂量组有显著作用(P<0.05)。结论:12.5mmol·L^-1的H₂O₂作用24h,可成功建立内皮细胞氧化应激损伤模型;回心草水提液直接作用于H₂O₂损伤的内皮细胞,2.50,3.33mg·mL^-1两个浓度组可以减轻内皮细胞的损伤;回心草2.50mg·mL^-1可增加NOS活性,促进NO的分泌。     

三七总皂甙对肝纤维化小鼠血清酶学及NO的影响

目的:观察三七总皂甙对肝纤维化小鼠血清酶学及NO的影响.方法:用CCl4 复制小鼠中毒性肝纤维化模型,同时给与三七总皂甙治疗, 检测血清丙氨酸氨基转氨酶(AST)和门冬氨酸转氨酶(ALT)活性,采用硝酸还原酶法测定血清NO水平,并行肝脏病理组织切片检测.结果:三七总皂甙能显著降低肝纤维化小鼠血清中的转氨酶和NO水平,减轻肝纤维化程度.结论:三七总皂甙具有抗肝纤维化作用,其机理可能与降低血清中NO的水平有关.     

芎芷地龙汤对偏头痛模型动物血液和脑干中NO、NOS的影响

目的 研究芎芷地龙汤对偏头痛模型体内NO、NOS的影响.方法 健康雄性SD大鼠随机为4组:生理盐水组、模型组、舒马普坦组、中药治疗组.皮下注射NTG注射剂复制实验性偏头痛动物模型,经药物干预后在4小时、6小时两个时间点测定各组血液和脑干中NO、NOS的含量.结果 (1)模型组血浆和组织中NO含量升高,且4小时高于6小时,两个时间点的含量与生理盐水组比较均有显著性差异(P<0.01);中药组和舒马普坦组血浆和组织中NO含量降低,两个时间点的含量与模型组比较均有显著性差异(P<0.05).(2)模型组血浆和组织中NOS含量升高,且4小时高于6小时,两个时间点的含量与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.05);中药组和舒马普坦组血浆和组织中NOS含量降低,两个时间点的含量与模型组比较有显著性差异(P<0.05).结论 芎芷地龙汤可以下调由硝酸甘油诱导的NO、NOS异常升高的水平,这种作用可以遏制偏头痛发病过程中一系列级联反应的恶性循环,从而发挥抗偏头痛的作用.     

八角茴香产地加工方法的对比研究

目的以广西八角茴香鲜果为原料,通过7种不同处理方法的研究,优选出阴雨天气条件下,无二氧化硫熏蒸的八角茴香最佳产地加工方法。方法采用水分、外观性状、挥发油含量、反式茴香脑含量、二氧化硫残留量和挥发油成分GC-MS分析等考核指标对7种不同加工方法的产品开展评价。结果臭氧预处理方法可在无需硫磺熏蒸的情况下,延长鲜果保存的时间,产品的二氧化硫残留量符合规定,其它各项考核指相当于或略优于传统加工方法产品。结论臭氧预处理法可以在不使用有害化学物质的前提下,延长八角茴香鲜果的保存时间,明显提高由于阴雨天气不能及时加工处理的八角茴香产品质量,方法操作简便,是一项值得推广的新技术。     

枸杞多糖对染铅小鼠海马区NO和NOS活性的影响

目的:探讨枸杞多糖对染铅小鼠海马区NO和NOS活性的影响。方法:腹腔注射Pb(AC)2使小鼠染铅,枸杞多糖于染铅后第二天灌胃给药,于第6周后测全血铅浓度和小鼠海马区NO含量及NOS活性。结果:枸杞多糖组血铅浓度显著低于染铅模型对照组;枸杞多糖3.6g/kg组与染铅模型对照组比较,NO浓度和NOS活性显著升高。结论:枸杞多糖可促进小鼠体内铅的排出,提高小鼠海马区NO含量和NOS活性。     

前荷叶碱对人脐静脉内皮细胞一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的:观察前荷叶碱(Pronuciferine)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分泌一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)的影响,探讨其对HUVECs血管活性分子分泌的调节作用.方法:从莲子心中提取前荷叶碱,体外培养HUVECs,用不同浓度(10μmol/L、1μmol/L、0.1μmol/L、0.01μmol/L)的前荷叶碱分别作用于HUVECs,观察细胞形态,MTT法观察前荷叶碱对HUVECs活性的影响,比色法测定各组的NO、总NOS(tNOS)、诱导型NOS(iNOS).结果:和对照组比较,前荷叶碱对内皮细胞形态和活性无明显影响,能增加HUVECs释放NO,及tNOS生成(p＜0.01),但对iNOS影响不大.结论:前荷叶碱可能通过增加tNOS生成而提高HUVECs释放NO,从而保护内皮功能.     

黄芪对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响

目的:研究黄芪水煎剂(HQD)对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响。方法:取18~22 g昆明小鼠100只,随机分10组,每组10只。分别为对照组,灌服不同剂量黄芪水煎剂组,同剂量不同给药途径组,黄芪与地塞米松并用组。各处理组每天给药1次,连续6 d。结果:在不同剂量灌服给药组中,高、中、低剂量试验组吞噬百分率和吞噬指数均高于对照组(P<0.01),其中以高剂量组效果最好;在不同给药途径组中,吞噬百分率以腹腔注射的效果优于皮下注射和灌服(P<0.01),但各组间的吞噬指数差异不明显(P>0.05);在黄芪与地塞米松并用组中,黄芪能明显对抗地塞米松的免疫抑制作用(P<0.01)。结论:黄芪不同剂量、不同给药途径给药对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力均有不同程度的增强作用,并能对抗地塞米松对其抑制作用。     

商陆对阿霉素肾病大鼠肾组织NO表达的影响

目的:研究商陆对阿霉素肾病大鼠肾组织一氧化氮(NO)的影响。方法:经大鼠尾静脉分次注射阿霉素合计7.5mg/kg制备肾病模型,分别灌以商陆粗提物4g/kg.d和1g/kg.d或强的松16mg/kg.d,连续2周,观察各组动物肾组织NO的改变。结果:商陆粗提物对阿霉素肾病模型大鼠具有减少尿蛋白、降低肾组织内NO浓度作用。结论:商陆对阿霉素肾病具有治疗作用,其治疗作用可能与降低肾组织内NO浓度有关。     

板蓝根提取物对RAW 264.7细胞生成NO及表达iNOS的影响

目的:研究板蓝根的抗炎作用及分子机制。方法:以LPS刺激RAW 264.7细胞,用板蓝根提取物进行干预,测定NO和TNF-α含量,Western blot法检测iNOS和COX-2蛋白表达水平。结果:板蓝根在12.5～100μg.mL-1浓度范围内可明显抑制RAW 264.7细胞释放TNF-α及NO,并可显著抑制iNOS蛋白表达。结论:板蓝根通过下调iNOS蛋白表达,抑制炎症介质TNF-α及NO而发挥抗炎作用。