维生素K3诱导MR2细胞凋亡及其与三氧化二砷联合作用的体外研究

近年来 ,已有研究发现 ,维生素K3(VK3)对某些实体肿瘤和白血病细胞有诱导凋亡作用[1 ] ,然而其作用机制不十分清楚。我们在证实VK3对MR2细胞具有诱导凋亡作用的同时 ,观察其与三氧化二砷 (As2 O3)的联合作用 ,并进一步探讨VK3可能的作用机制。材料和方法1　主要试剂　VK3(亚硫酸氢钠甲萘醌 )注射剂购于无锡市第七制药厂。As2 O3购于美国Sigma公司。MDA试剂盒、谷胱甘肽 (GSH)试剂盒及超氧化物歧化酶 (SOD)检测试剂盒均购于南京建成生物工程研究所。VK3使用时以RPMI 16 4 0溶解稀释 ,配制成所需浓度。 1.0mol LAs2 O3经NaOH溶…     

兔骨关节炎软骨细胞中caspase-3表达及其细胞凋亡的研究

[目的]观察兔骨关节炎软骨细胞中caspase-3的表达,探讨其与软骨细胞凋亡的关系.[方法]Hulth法建造兔右膝骨关节炎动物模型.造模4周后,解剖其双侧膝关节,取出关节软骨观察软骨退变情况,观测软骨细胞caspase-3的表达,检测软骨细胞凋亡.[结果]骨关节炎组软骨细胞caspase-3的表达以及软骨细胞凋亡率均高于对照组(P＜0.05).[结论]骨关节炎软骨细胞中caspase-3的高表达,与软骨细胞凋亡密切相关.     

白藜芦醇诱导食管癌细胞凋亡及其相关基因表达的研究

目的研究白藜芦醇诱导人食管癌Eca109细胞凋亡的作用并探讨其对凋亡相关基因survivin、bax和bcl-2表达的影响。方法不同浓度白藜芦醇作用于Eca109细胞后,采用流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期分布及survivin、bax和bcl-2蛋白的表达。结果白藜芦醇能诱导食管癌Eca109细胞凋亡,使其细胞周期阻滞在GO／G1期;白藜芦醇可以上调bax蛋白的表达,下调survivin蛋白并协同抑制bcl-2蛋白的表达。结论白藜芦醇能明显诱导Eca109细胞凋亡,其机制可能与促进bax表达、抑制survivin和bcl-2表达有关。     

白藜芦醇诱导食管癌细胞凋亡及其相关基因表达的研究

目的研究白藜芦醇诱导人食管癌Eca109细胞凋亡的作用并探讨其对凋亡相关基因survivin、bax和bcl-2表达的影响。方法不同浓度白藜芦醇作用于Eca109细胞后,采用流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期分布及survivin、bax和bcl-2蛋白的表达。结果白藜芦醇能诱导食管癌Eca109细胞凋亡,使其细胞周期阻滞在G0/G1期;白藜芦醇可以上调bax蛋白的表达,下调survivin蛋白并协同抑制bcl-2蛋白的表达。结论白藜芦醇能明显诱导Eca109细胞凋亡,其机制可能与促进bax表达、抑制survivin和bcl-2表达有关。     

膜联蛋白V与碘化丙啶用于细胞周期特异性凋亡的检测

目的 建立一种新的细胞周期特异性凋亡检测方法。方法 将急性早幼粒细胞白血病细胞株（HL－60）分别经喜树碱（CAM）、紫外线诱导、及喜树碱和N－甲苯磺酰基－L－苯基丙氨酸氯甲基酮（TPCK）共同诱导后，用异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V（Annexin V）进行标记，经1％不含甲醇的甲醛溶液冰浴固定，再用含洋地黄皂苷的碘化丙啶染色液染色后，流式细胞术分析凋亡细胞的周期特异性和细胞凋亡率，并与DNA链缺口标记法（TdT）和常规Annexin V法检测结果进行比较。结果 细胞凋亡的周期特异性分析：膜联蛋白V／碘化丙啶法（PA法）和TdT法结果一致，CAM和紫外线诱导的细胞凋亡分别发生在S期和G1期；GAM和TPCK共同诱导试验显示，PA法对早期凋亡具有较高的检测灵敏度，TdT法则不能有效检测；而常规Annexin V法无法进行凋亡细胞的周期特异性分析。凋亡率的检测：HL－60经CAM、紫外线、CAM与TPCK三种方法诱导后，PA法检测凋亡率的结果（17.3%、34.7%、35.9%）与常规Annexin V法的检测结果（18.1%、35.6%、37.0%）一致（P＞0.05），而TdT法（10.7%、19.5%、－）则明显偏低（P＜0.01）。结论 PA法可以用于凋亡细胞周期特异性检测，其稳定、可靠、灵敏度高。     

流式细胞仪检测人白细胞抗原-B27的影响因素

目的获得外周血淋巴细胞人白细胞抗原（HLA）-B27检测准确可靠的结果。方法用双抗体双色免疫荧光标记,流式细胞仪分析,对标本放置不同时间、溶血后洗涤前后的结果进行比较。结果标本放置不同时间可影响检测结果,洗涤可显著增加HLA-B27阳性细胞百分比和细胞表面平均荧光强度。结论制备好的标本应在6 h内检测,溶血后标本宜洗涤后测定,以提高检测的准确性。     

流式细胞术检测活化血小板

建立了流式细胞术检测活化血小板的方法并作了方法学方面的探讨，同时比较了几种抗活化血小板特异性单克隆抗体的特点。实验结果表明：该法结果准确，特异性和灵敏度高，能检出２％以上的活化血小板，并可反映单个或亚群血小板质膜上活化抗原的变化，为研究血小板活化提供了一种新方法。     

探讨流式细胞术检测HLA-B27在强直陛脊柱炎中的临床应用价值

目的以序列特异性引物一聚合酶链反应（sequence-specificprimerpolymerasechainreac-tion．PCR-SSP）作为金标准,探讨贝克曼一库尔特EPICSXLHLA-B27在强直性脊柱炎中的临床诊断价值。方法上海交通大学附属瑞金医院进行HLA-B27流式细胞术检测的患者187例,分别进行流式细胞术HLA-B27抗原检测和PCR-SSP基因型检测,并对检测结果进行分析。结果在187份AS患者标本中,DNA抽提合格标本157份。PCR-SSP结果显示58份阳性,99份阴性,流式细胞术结果显示阳性标本60份．阴性标本97份。以PCR-SSP为金标准,流式细胞术检测HIA-B27的灵敏度为100．O％,特异性为96．7％,准确度为98．7％。结论流式细胞仪检测HLA-B27对AS有较高的灵敏度与特异性,适合于临床大规模样本量的筛查。     

流式细胞仪检测人白细胞抗原-B_(27)的影响因素

目的获得外周血淋巴细胞人白细胞抗原(HLA)-B27检测准确可靠的结果。方法用双抗体双色免疫荧光标记,流式细胞仪分析,对标本放置不同时间、溶血后洗涤前后的结果进行比较。结果标本放置不同时间可影响检测结果,洗涤可显著增加HLA-B27阳性细胞百分比和细胞表面平均荧光强度。结论制备好的标本应在6 h内检测,溶血后标本宜洗涤后测定,以提高检测的准确性。     

流式细胞仪计数网织红细胞方法评价

目的　建立流式细胞仪计数网织红细胞的方法并应用于临床。方法　 5 μl全血加入噻唑橙 (TO)染色液中 ,流式细胞仪计数 10万个红细胞 ,分析其中的网织红细胞百分数 (Ret % ) ,并与手工法进行比较。结果　流式细胞仪法与手工法计数网织红细胞结果差异无显著性 ,该法批内变异系数 (CV) <3.2 3% ,批间CV<4 .86 %。结论　流式细胞仪计数网织红细胞快速、客观、结果准确、重复性好 ,适合临床常规检测网织红细胞。     

流式细胞术检测HLA-B27两种试剂比较与结果分析

目的 比较两种人类白细胞抗原B27(HLA-B27)检测试剂盒临床检测效果与异常结果 分析,为临床提供可靠的检测报告.方法 采用HLA-B27-FITC/HLA-B7-PE和HLA-B27-FITC/CD3-PE两种检测试剂盒检测1208例腰椎病、颈椎病、关节痛、脊柱僵硬和强直性脊柱炎患者标本中HLA-B27的表达,结...     

应用CD45/SSC设门的流式细胞术对骨髓增生异常综合征免疫分型

目的:探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者的免疫表型特片。方法:对54例 MDS 患者的骨髓细胞悬液应用三色流式细胞术和一组单克隆抗体对 CD45/SSC 设门提取的原始细胞进行免疫表型分析。结果:54例 MDS中,原始细胞阳性表达 CD34、CD13、CD33、CD2、CD7、CD10和 CD19的患者分别为27例(50.0%)、43例(79.6%)、39例(72.2%)、8例(14.8%)、18例(33.3%)、4例(7.4%)和3例(5.5%);9/9例(100%)患者呈 HLA-DR 阳性,3/9例(33.3%)患者CD117阳性,5/47例(10.6%)患者 CD14阳性,2/8例(25.0%)患者 CD15阳性,1/14例(7.1%)患者 CD3阳性.2/37例(5.4%)患者 CD20阳性,15/15例(100%)患者 CD22均阴性。难治性贫血/伴环形铁粒幼细胞的难治性贫血(RA/RARS)、伴原始细胞增多的难治性贫血(RAEB)和转变中的 RAEB(RAEB-T)3组间各免疫表型差异无显著性。结论:免疫分型是 MDS 诊断中对细胞形态学和细胞遗传学检查的重要补充。