HMGB1抗体对刀豆蛋白A引起小鼠肝损伤的保护作用

目的研究高迁移率族蛋白1(HMGB1)抗体对刀豆蛋白A(ConA)引起小鼠肝损伤的保护作用。方法将健康无污染雄性Balb/c小鼠分成空白对照组(注射生理盐水)、模型组(注射ConA)和实验组(注射ConA+HMGB1抗体),3组小鼠注射药物6 h后摘眼球取血,所获血液离心后取血清检测谷丙转氨酶(ALT)和HMGB1,留取肝脏组织进行HE染色、Tunel、免疫荧光等检测。结果实验组小鼠肝组织病理炎症反应轻于模型组。小鼠血清中ALT、HMGB1:空白对照组分别为(52.00±8.34)U/L、(7.54±0.53)ng/mL,模型组分别为(5 551.50±1 445.74)U/L、(18.06±1.65)ng/mL,实验组分别为(1 977.40±654.89)U/L、(10.77±0.71)ng/mL;肝组织中HMGB1 mRNA、HMGB1表达量(相对值):空白对照组分别为1.886±0.253、0.086±0.028,模型组分别为4.718±0.341、0.268±0.043,实验组分别为3.005±0.331、0.116±0.008;实验组小鼠血清中ALT、HMGB1,以及肝组织中HMGB1 mRNA、HMGB1表达量均低于模型组(均P0.001)。肝组织细胞凋亡、肝细胞内HMGB1迁移(标准化):空白对照组均为1±0,模型组分别为4.67±0.33、4.50±0.22,实验组分别为2.67±0.21、2.33±0.21;实验组小鼠肝组织细胞凋亡、肝细胞内HMGB1迁移均低于模型组(均P0.001)。结论 HMGB1抗体能改善肝组织的病理损伤,可以保护ConA引起的小鼠肝损伤。     

刀豆球蛋白A刺激对人外周血T淋巴细胞的增殖作用

目的探讨刀豆球蛋白A刺激人外周血T淋巴细胞增殖的最佳浓度。方法以人外周血制备T淋巴细胞,与刀豆球蛋白A共同培养后,采用CCK-8法检测T淋巴细胞的增殖情况。结果不同浓度的刀豆球蛋白A对人外周血T淋巴细胞的刺激效果不同,以20μg/m L时刺激增殖效果最好。大于20μg/m L时,刀豆球蛋白A表现出对人外周血T淋巴细胞的抑制作用。结论刀豆球蛋白A对人外周血T淋巴细胞的增殖具有双重作用,且在20μg/m L时刺激增殖效果最好。     

脂多糖及伴刀豆球蛋白A诱导脾淋巴细胞增殖试验方法用于免疫毒性评价的可行性研究

目的研究脂多糖(LPS)及伴刀豆球蛋白A(ConA)诱导脾淋巴细胞增殖试验的两种方法用于免疫毒性评价的可行性。方法雄性Wistar大鼠40只,体重180~200 g,随机分为对照组和2,5,10 mg/kg环磷酰胺染毒组,每组10只大鼠,各剂量组每日灌胃染毒1次,连续28 d,对照组给予生理盐水。染毒结束后24 h,断头处死大鼠,取脾脏,制浓度为3×106个/ml的脾细胞悬液,用MTT方法进行LPS及ConA诱导脾淋巴细胞增殖试验。结果10 mg/kg环磷酰胺染毒组大鼠的B淋巴细胞和T淋巴细胞的增殖能力(吸光度值,分别为0.032±0.037和0.028±0.050)低于对照组的B淋巴细胞和T淋巴细胞的增殖能力(分别为0.124±0.093和0.458±0.320),差异有统计学意义(P<0.05)。结论LPS及ConA诱导脾淋巴细胞增殖试验的两种方法用于免疫毒性评价具有可行性。     

槲皮素对Con A诱导自身免疫性肝损伤作用

目的 建立刀豆蛋白A(Con A)诱导的小鼠肝损伤模型, 观察槲皮素对Con A诱导的小鼠自身免疫性肝损伤的作用。方法 将48只小鼠随机分为6组:对照组、模型组、地塞米松组、槲皮素低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg), 小鼠连续灌胃7 d后尾静脉注射15 mg/kg Con A, 地塞米松于Con A给药前30 min腹腔注射。分别于尾静脉给药后2、6 h取血清, 检测干扰素(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、IL-6和丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH), 取肝、脾, 称重计算脏器系数。结果 与对照组比较, 模型组小鼠血清中ALT、AST、LDH活性[分别为(1 214.20±168.03)、(1 079.40±168.05)、(2 748.00±508.98)U/L]明显升高, 细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6水平[分别为(580.67±157.01)、(231.67±119.4)、(14 077.5±9 699.09)pg/mL]明显升高(P<0.05);与模型组比较, 400 mg/kg槲皮素组小鼠血清ALT、AST、LDH活性[分别为(204.20±31.62)、(372.60±29.85)、(1 923.40±418.63)U/L]均明显降低, 细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6水平[分别为(339.67±76.73)、(108.33±21.47)、(7 068.33±3 414.4)pg/mL]均明显降低(P<0.05);肝、脾脏器系数无明显变化。结论 槲皮素对自身免疫性肝损伤具有一定保护作用。     

柳叶提取液对实验性动物肝损伤的作用

柳叶具有清热、透疹、利尿、解毒、抗感染作用，柳叶中主要含有水杨苷、碘、邻苯二酚、鞣质等物质，其生理活性为协同作用，民间常食用柳叶以清热、利肝、明目。我们对其提取液进行实验性动物肝损伤的治疗作用的实验。现报告如下。     

山莨菪碱对实验性肝损伤的保护及其机制的研究

目的　探讨山莨菪碱对实验性肝损伤的疗效及其作用机制。方法　应用ANIT和CCl4分别诱发大鼠肝内胆汁淤积及小鼠肝损伤的模型 ,使用山莨菪碱治疗后观察、测定给药组与对照组的肝组织病理切片和生化指标、肝组织中的Ca2 + 含量、总抗氧化能力、丙二醛的含量及山莨菪碱对CCl4中毒小鼠戊巴比妥钠睡眠时间的影响。结果　山莨菪碱能明显对抗ANIT和CCl4所致的ALT、ALP、Bil升高和血清Tp下降 (P <0 0 1) ,并且使肝细胞和胆管上皮细胞变性、坏死显著减轻。检测山莨菪碱治疗组肝匀浆Ca2 + 含量为( 15 6 9± 3 2 8) μg/g、丙二醛为 ( 62 9± 17 4)nmol/ml及总抗氧化能力为 ( 3 1 9± 8 5 )U/ml ,CCl4中毒小鼠腹腔注射戊巴比妥钠后的睡眠时间为 ( 13 0 9± 3 5 9)min。提示山莨菪碱能明显减低肝匀浆含量 (P <0 0 5 )、脂质过氧化产物丙二醛含量 ,提高机体总抗氧化能力 (P<0 0 1)且可缩短CCl4中毒小鼠腹腔注射戊巴比妥钠后的睡眠时间 ( P <0 0 1)。结论　山莨菪碱对实验性肝损伤具有保护作用 ,其疗效与茵栀黄注射液和肝炎灵相似 ( P >0 0 5 ) ,其作用机制可能与M受体阻断、Ca2 + 拮抗和抗氧化作用有关     

硫酸镍,亚砷酸钠所致转化细胞的凝集试验

为了从细胞表面的变化来观察转化细胞的特性，对于经硫酸镍，亚砷酸钠染毒的ＳＨＥ细胞，用ＣｏｎＡ进行了凝集试验。结果表明，两染毒组的凝集试验的均呈阳性，且与ＣｏｎＡ浓度呈依赖关系。     

板蓝根对小鼠实验性肝损伤的保护作用及机制

目的探讨板蓝根对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)致小鼠肝损伤的保护作用和机制。方法 2013年1—4月选取健康小鼠40只随机分为生理盐水组(A组)、CCl4组(B组)、低剂量板蓝根组(C组)和高剂量板蓝根组(D组)各10只,A、B两组腹腔注射生理盐水10 ml/kg,1次/d;C组腹腔注射板蓝根剂20 ml/kg,1次/d;D组腹腔注射板蓝根剂80 ml/kg,1次/d,四组均注射10 d。末次给药2 h后,B、C、D三组均腹腔注射1 ml/L的CCl4花生油溶液10 ml/kg建立急性CCl4小鼠肝损伤模型。比较四组小鼠肝脏病理组织学变化、肝匀浆中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平、血清ALT、AST水平。计量资料采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果空泡变性、肝细胞坏死、炎性细胞浸润情况A组分别为0、0、0只,B组分别为8、10、10只,C组分别为7、6、7只,D组分别为5、4、5只。SOD、MDA水平A组分别为(36.24±3.12)U/mg、(5.20±1.93)nmol/mg,B组分别为(19.21±5.67)U/mg、(8.96±2.65)nmol/mg,C组分别为(25.72±4.35)U/mg、(8.65±2.22)nmol/mg,D组分别为(34.61±4.66)U/mg、(5.98±2.15)nmol/mg。A、B两组比较差异均有统计学意义(均P<0.05);C、D两组与B组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。ALT、AST水平A组分别为(39.06±15.42)、(42.34±16.27)U/L,B组分别为(129.46±39.01)、(144.14±30.51)U/L,C组分别为(100.68±29.36)、(106.54±30.36)U/L,D组分别为(74.25±25.87)、(81.73±20.21)U/L。A、B两组比较差异均有统计学意义(均P<0.05);C、D两组ALT、AST的水平与B组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论板蓝根对CCl4诱导的急性肝损伤具有明显的保护作用。     

不同剂量刀豆蛋白A腹腔注射诱导昆明小鼠肝纤维化的效果观察

目的观察不同剂量刀豆蛋白A(ConA)诱导昆明小鼠肝纤维化的效果,探讨其最佳剂量及成模时间。方法昆明小鼠96只,随机分为低剂量ConA组(A组)、中剂量ConA组(B组)、高剂量ConA组(C组)及正常对照组(N组),每组24只,分别经腹腔注射ConA-PBS溶液15mg/kg、20mg/kg、25mg/kg及PBS溶液,每周一次。于注射6、7、8、9周后分批处死各组昆明小鼠6只,测ALT、AST,肝脏作病理学检查。结果实验组ALT、AST一直明显增高,B组第8周出现典型的肝纤维化病理改变,且无动物死亡。结论 20mg/kgConA腹腔注射是合适的剂量,每周1次,注射8次可建立肝纤维化动物模型。     

人胎盘提取物对实验性肝损伤保护作用的观察

本文采用CCL4诱导大鼠肝损伤模型，治疗各组采用不同途径、不同剂量给予人胎盘提取物观察大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)，谷草转氨酶(AST)，乳酸脱氢酶(IDH)，胆城酯酶(CHE)，超氧化物歧化酶(SOD)的变化，并做肝脏病理切片检查，研究人胎盘提取物对实验性肝损伤大鼠的保护作用结果表明，人胎盘提取物对CCL4肝损伤有一定的保护作用。     

人参皂苷Rg1对小鼠免疫性肝损伤保护作用

目的探讨人参皂苷Rg1对小鼠免疫性肝损伤的保护作用及机制。方法实验设Rg1高、中、低剂量(60、30、15 mg/kg), 灌胃给予15 d, 尾静脉注射20 mg/kg刀豆蛋白A制备免疫性肝损伤小鼠模型;采用自动生化分析仪测定小鼠血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性;酶联免疫吸附实验测定小鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、干扰素(IFN-γ)水平, 并进行肝组织病理学观察。结果与对照组比较, 模型组小鼠血清中AST、ALT含量[分别为(235.5±79.9)、(262.1±63.9)U/L]及TNF-α、IFN-γ水平[分别为(46.3±13.3)、(165.3±86.1)pg/mL]明显升高(P<0.01);与模型组比较, 高剂量Rg1组小鼠血清中AST、ALT含量[分别为(57.1±19.9)、(44.1±16.2)U/L]及TNF-α、IFN-γ水平[(12.9±6.1)、(55.06±29.5)pg/mL] 明显下降(P<0.01);组织学观察显示, Rg1各剂量组小鼠肝损伤程度明显轻于模型组。结论Rg1对小鼠免疫性肝损伤具有一定保护作用, 其机制可能与降低炎性细胞因子、减轻T淋巴细胞毒性作用有关。     

小鼠酒精性肝损伤模型的动态研究

目的 建立小鼠酒精性肝损伤模型，并对该模型进行动态观察。方法用50％乙醇造成肝损伤模型。实验分7个组，即12ml／kg乙醇灌胃1，3，5，10，30和60d，空白对照组给予蒸馏水。实验结束，取动物肝脏进行病理组织学检查。血清进行生化检测。结果灌胃50％的乙醇30d即可出现酒精性脂肪肝模型，灌胃50％的乙醇60d可见肝脏纤维化改变。结论选择50％的乙醇灌胃不同时间，模拟酒精性肝损伤的不同阶段，可将该模型应用于保健食品护肝功能的筛选。     

灌注酒精液体饲料建立酒精性肝损伤小鼠模型

目的探索胃插管灌注含酒精液体饲料建立酒精性肝损伤小鼠模型的方法.方法通过手术给小鼠植入胃插管,用自制微量灌注泵向小鼠胃内持续灌注含酒精液体饲料4周,观察血液生化和肝组织病理改变.结果灌注含酒精液体饲料的小鼠血清丙氨酸氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶和甘油三酯升高,血清白蛋白降低,肝组织出现明显的脂肪变性、轻到中度的炎症浸润及组织坏死.结论通过胃插管持续4周灌注含酒精液体饲料可诱导小鼠出现明显的肝损伤,成功建立了酒精性肝损伤小鼠模型.     

原花青素对小鼠乙醇性肝损伤的保护作用机制

目的研究原花青素对乙醇导致肝脏损伤的保护作用机制。方法将昆明种小鼠分为正常对照组、乙醇对照组、原花青素低剂量组(100mg/kg)和高剂量组(300mg/kg),观察各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)以及肝匀浆中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和活性氧(ROS)等指标水平,并采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织Cu,Zn-SOD和toll样受体4(TLR4)的mRNA水平。结果原花青素低、高剂量组与乙醇对照组比较,ALT、MDA、ROS明显降低(P<0.01),SOD明显升高(P<0.01),并可使Cu,Zn-SODmRNA的表达上调和TLR4mRNA的表达下调。结论原花青素对小鼠乙醇性肝损伤的保护作用与增强Cu,Zn-SOD的表达、抑制TLR4的表达有关。     

四氧嘧啶致小鼠糖尿病造模条件组合优化研究

目的：了解四氧嘧啶致小鼠糖尿病模型建立的实验条件和主要影响因素。方法：观察小鼠性别、体重、禁食时间、四氧嘧啶剂量、四氧嘧啶溶媒的不同组合,对造模成功率、死亡率的影响。结果：选择体重27～29g的雄性小鼠禁食24 h,并用pH值为4.5柠檬酸缓冲液溶解的160 mg/kg四氧嘧啶腹腔注射,获得成模率较高、死亡率较低、血糖较持续稳定的糖尿病小鼠模型。结论：本次造模条件组合优化,充分考虑了各影响因素之间的关联与制约,筛选出较理想的造模条件。     

Case report: mixed cholestatic/hepatocellular liver injury induced by the herbicide quizalofop-p-ethyl

CONTEXT: Quizalofop-p-ethyl is an often applied, slightly toxic herbicide for which no severe toxicity has been reported in humans. CASE PRESENTATION: We present the case of a farmer exposed to quizalofop-p-ethyl who presented with obstructive cholestasis. A complete workup disclosed no other cause of liver pathology, but liver biopsy established drug-induced hepatotoxicity. The patient was treated with ursodeoxycholic acid and prednisolone, and was recovered fully 70 days after his exposure to the herbicide. The patient was followed for the next 9 months. CONCLUSION: Quizalofop-p-ethyl can induce a mixed cholestatic/hepatocellular liver injury. We discuss possible mechanisms implicated in liver injury after exposure to quizalofop-p-ethyl. RELEVANCE TO CLINICAL OR PROFESSIONAL PRACTICE: In patients presenting with mixed cholestatic/ hepatocellular liver injury, occupational exposure to quizalofop-p-ethyl in the course of agricultural use should be investigated.     

无机铬复合物对实验性糖尿病小鼠血糖和肝糖原水平的影响

采用葡萄糖氧化酶法观察口服无机铬复合物 (Cr3 +10 μg/kg体重每日 )对实验性糖尿病小鼠血糖水平的影响。与实验前相比血糖有明显下降 ,差异显著 (P <0 0 5 ) ,与糖尿病对照组相比差异极为显著 (P <0 0 1)。无机铬溶液 (Cr3 +10 μg/kg体重每日 )喂养组与实验前相比血糖有明显下降 ,差异显著 (P <0 0 5 ) ,与糖尿病对照组比较差异显著 (P <0 0 5 )。无机铬复合物实验组肝糖原含量与糖尿病对照组相比明显增高 (P<0 0 5 )。     

豚鼠三氯乙烯中毒性肝损伤的作用剂量研究

目的掌握三氯乙烯(TCE)引起中毒性肝损伤的作用剂量。方法①取FMMU白化豚鼠25只,随机分成5组,每组5只,分别皮内注射TCE0、167、500、1500、4500mg/kg,48h后处死动物取血清分析丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB),取肝脏观察病理变化;②取FMMU白化豚鼠12只,随机分成2组,分别涂皮TCE0、900mg/kg,48h后处死动物,处理同上。结果与对照组(0mg/kg)相比,皮内注射TCE48h后4500mg/kg组的ALT、AST均升高(P<0.01),TP、GLB下降(P<0.05);1500mg/kg组AST升高(P<0.05)。4500mg/kg组动物均见明显的肝细胞脂肪变性,部分动物肝窦扩张,并见炎细胞浸润,肝细胞局灶性坏死;1500mg/kg组个别动物血管周围肝窦轻度扩张。与对照组比较,TCE900mg/kg涂皮组的观察指标未见显著异常。结论TCE皮内注射剂量低于500mg/kg,涂皮剂量低于900mg/kg时,都不会导致明显的肝损伤。TCE急性中毒性肝损伤病理学变化以脂肪变性为主。