HPLC法测定儿童吗替麦考酚酯的血药浓度

目的:建立一种高效液相色谱法(HPLC)测定儿童血浆中吗替麦考酚酸(MPA)的方法,以进行吗替麦考酚酯的血药浓度监测。方法:采用C18柱(Waters Spherisorb 5μm ODS,4.6 mm×250 mm),流动相:乙腈:水:三乙胺(40:60:0.3)(磷酸调pH至3.5);流速1.0 mL/min;柱温:25℃;检测波长:252 nm。结果:当吗替麦考酚酸浓度在0.5~60mg/L时,其峰面积与浓度的线性关系良好(r=0.996);高、中、低3个浓度的绝对回收率分别为91.5%,93.7%和96.9%,相对回收率分别为103.3%,95.6%和104.7%,日内及日间精密度的RSD均小于5%。目前采用此方法已测定儿童谷浓度血样20份,浓度范围在0.76~2.67 mg/L。结论:本方法测定结果准确、方法简便,可用于儿童患者的血药浓度监测。     

重症肌无力患者吗替麦考酚酯的血药浓度监测

 目的建立一种高效液相色谱法测定人血浆中吗替麦考酚酸的新方法,以进行吗替麦考酚酯的血药浓度监测。方法采用Phenomenex C₁₈(4.6mm×150mm,5μm)色谱柱;甲醇-10mmol·L^-1醋酸铵水溶液(95%水-5%甲醇)为流动相,比例为60:40;流速:1mL·min^-1;柱温:25℃;紫外检测波长:250nm。结果当吗替麦考酚酸浓度在0.5～60mg·L^-1时,其峰面积与浓度的线性关系良好(r=0.9995);高、中、低3个浓度的绝对回收率分别为93.80%,95.82%和98.14%,相对回收率分别为88.20%,99.50%和101.36%,日内及日间精密度的RSD均小于5%。目前采用此方法已测定20例重症肌无力患者谷浓度血样52份,大多数在1～3.5mg·L^-1。临床观察的结果显示,吗替麦考酚酯可以改善患者的临床症状,85%患者的合并用药减少,一些患者有轻度的不良反应,但是所有患者未发生严重的不良反应。结论本方法测定结果准确、方法简便,可用于患者的血药浓度监测。     

UPLC-MS/MS和HPLC-UV测定肾移植患者麦考酚酸血药浓度的相关性研究

 目的 采用UPLC-MS/MS和HPLC-UV测定肾移植患者麦考酚酸（MPA）血药浓度,考察方法间的相关性, 建立普遍适用的测定结果换算关系。方法 分别采用UPLC-MS/MS测定肾移植患者全血及血浆的麦考酚酸浓度,HPLC-UV测定肾移植患者血浆的麦考酚酸浓度,测定结果采用LEVENE和LSD法进行方差分析, 用Spearman法进行相关性比较。结果 经过统计分析得到3种方法互换方程式,分别为：Y_质谱血浆=1.612 X_质谱全血＋0.686;Y_液相血浆=1.414X_{质谱全血测定}-0.206;Y_液相血浆=0.848 X_质谱血浆-0.692。结论 UPLC-MS/MS测定肾移植患者全血及血浆麦考酚酸浓度与HPLC-UV测定肾移植患者血浆的麦考酚酸浓度,3种方法浓度结果间具有良好的相关性, 通过方程式可进行结果互算。     

一测多评法测定复方丹参片中4种丹参酮类成分的含量

 目的 采用一测多评法建立同时测定复方丹参片中4种丹参酮类成分的高效液相色谱分析方法。方法 以丹参酮Ⅱ_A为内标,建立其与二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ的相对校正因子,用高效液相色谱法进行含量测定,计算二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱ_A的含量,实现一测多评。结果 建立的相对校正因子重现性良好,采用相对校正因子计算的含量与外标法实测值无显著性差异。结论 一测多评法可用于复方丹参片中丹参酮类成分的含量测定。     

基于UPLC及一测多评法同时测定苁蓉总苷胶囊中的活性成分

目的:采用"一测多评"(QAMS)技术建立超高效液相法(UPLC)同时测定苁蓉总苷胶囊中6种成分的分析方法,并与标准曲线法进行比较,评价一测多评法用于苁蓉总苷胶囊质量控制的技术适应性和应用可行性。方法:以苁蓉总苷胶囊为研究对象,有机酸类成分以绿原酸为内参物,建立其与咖啡酸的相对校正因子;苯乙醇苷类成分以毛蕊花糖苷为内参物,建立其与管花苷A,异毛蕊花糖苷,松果菊苷间的相对校正因子,同时考察了各相对校正因子的耐用性,并比较该方法与标准曲线法测定结果的差异,以验证一测多评法的准确性和可行性。结果:有机酚酸类成分绿原酸与咖啡酸的相对校正因子为0.538,苯乙醇苷类成分毛蕊花糖苷与管花苷A,异毛蕊花糖苷,松果菊苷间的相对校正因子分别为1.346,1.266和1.135,各相对校正因子的耐用性较好,10批样品QAMS法的计算结果与标准曲线法的测定结果无显著性差异,实验所得的相对校正因子可信。结论:QAMS法可以作为一种简便可靠的质量评价模式用于苁蓉总苷胶囊多种成分的定量测定方法。     

高效液相色谱法测定辐射固化替加氟血药浓度

 目的：研究建立测定替加氟血药浓度的方法。方法：采用高效液相色谱法，测定不同给药方式的替加氟血药浓度。结果：本法灵敏度高，最低检测限为1.5ng·ml^-1，重现性好，操作简便。结论：本法为临床监测或血药浓度研究提供了一种简便、快速、微量、准确的分析手段。     

Real-time PCR法检测肾移植患者外周血淋巴细胞次黄嘌呤核苷酸脱氢酶基因表达

 目的建立测定肾移植术后患者外周血淋巴细胞中次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)Ⅰ型和Ⅱ型基因表达水平的Real-time PCR方法,研究吗替麦考酚酯(MMF)药效个体差异。方法取肾移植后门诊复查患者外周血分离淋巴细胞,提取总RNA,进行Real-time PCR反应,选用β-actin作为内参,靶基因的相对定量按公式得出:靶基因=2^-(△△Ct),高效液相色谱法测定吗替麦考酚酸(MPA)浓度。结果IMPDH表达个体间差异大(Ⅰ型0.118～3.313;Ⅱ型0.185～2.928),MPA对于个体IMPDH两种亚型的抑制程度不同,MPA的谷浓度>1.0mg·L^-1时,IMPDHⅠ型和Ⅱ型的基因表达水平表现出明显的抑制作用。结论本法实用性强,结果可靠、重现性好,可用于肾移植患者服用MMF后的药效个体化研究。     

基于UPLC指纹图谱及一测多评法的天麻标准汤剂质量评价研究

建立天麻标准汤剂中存在转化关系的6种成分的一测多评方法和指纹图谱,验证该方法的准确度及可行性,并对标准汤剂质量进行评价。采用超高效液相色谱技术,以天麻素为内标物,通过考察柱温、流速、不同色谱柱以及多点浓度校正,确定对羟基苯甲醇、巴利森苷E、巴利森苷B、巴利森苷C和巴利森苷与天麻素的相对校正因子。测定18批天麻标准汤剂总含量,计算相似度。比较标准曲线法,外标一点法和一测多评法测量结果,结果表明一测多评法,外标一点法和标准曲线法的含量测定结果无显著差异,通过分析不同产地标准汤剂结果可以看出,来源于安徽、云南制得天麻标准汤剂质量较优,陕西、湖北次之,甘肃相对较差,且多批次指纹图谱相似度均在0.90以上。以天麻素为内标物,一测多评测定天麻标准汤剂中天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷E、巴利森苷B、巴利森苷C和巴利森苷等6个成分总含量,结合指纹图谱的方法准确、可行、快捷,可用于天麻标准汤剂质量评价体系的建立,亦可对天麻药材饮片等原料质量标准研究提供参考。     

高效液相色谱法研究比格犬口服丹参素的药物代谢动力学

目的 建立丹参素在比格犬血浆中的高效液相色谱分析方法,并利用此方法研究丹参素经口服给药后在比格犬体内的药物代谢动力学行为.方法 选用咖啡酸作为内标物质,用乙酸乙酯对血浆中药物进行萃取.采用Agilent 1200高效液相色谱系统,Zorbax SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以0.1%甲酸-乙腈溶液系统为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,进样量100μL,检测波长280 nm.比格犬按丹参素9 mg/kg单剂量口服给予丹参素载药微丸后,测定不同时间血药浓度,并用WinNolin软件计算药动学参数.结果 丹参素标准曲线线性范围为0.09～7.20μg/ml_(r=0.9999),此范围内线性关系良好;提取回收率为74.3%～89.1%,最低定量浓度为0.04μg/mL.血药浓度平均达峰时间为1.08 h,平均峰浓度为3.06μg/mL.结论 此方法简便、稳定、准确,可用于丹参素在比格犬体内药物代谢动力学研究.     

固相萃取反相高效液相色谱法测定人血浆麦考酚酸浓度

 目的建立固相萃取反相高效液相色谱法测定人血浆麦考酚酸(MPA)浓度,探讨MPA与其代谢产物间的转化。方法用固相萃取法处理样品,以泼尼松为内标物,C₁₈硅胶键合相为固定相,甲醇-四氢呋喃-水(60∶2∶50)作流动相,在波长254 nm处紫外定量检测。结果MPA浓度在0.2～40 μg·mL^-1范围内与色谱峰高呈良好线性关系,血浆MPA回收率为92.3%～103.1%,绝对回收率为50.2%～53.7%。最低检测极限为0.2μg·mL^-1,批内与日间(n＝5)RSD为3.34%和4.70%。结论本法用于MPA测定具有准确、灵敏、简便等特点,能满足临床常规血药浓度监测。     

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??OBJECTIVE To analyze the individual features of mycophenolate mofetil exposure in renal transplantation patients receiving immunosuppressive therapy postoperatively to provide reference for clinical individualized medication.METHODS Ninety-seven cases of renal transplantation patients were included in the study, with mycophenolic acid blood concentrations determined by HPLC method. The mycophenolic acid exposure characteristics was analyzed,using the domestic and foreign recommended drug exposure target value of 30-60 μg·h·mL^-1 as reference. SPSS20.0 was used to analyze the data.Normal distribution diagram was drawn for the data and single factor analysis of variance with a completely randomized design was performed to compare the drug exposures under different conditions.RESULTS The study included 526 cases of mycophenolic acid plasma concentration data. The trough concentration was (2.51±1.79) μg·mL^-1, and 332 cases reached the recommended plasma concentration range. The average plasma concentration was (2.08±0.71) μg·mL^-1, and the target achievement rate was 63.0%. There was no significant difference in the plasma concentrations between male and female patients (P>0.05). The plasma concentrations were significantly different between middle-aged (18-64 y) and elderly (65 to 77 y) patients (P<0.05). There was no significant difference in the plasma concentrations among different dosage groups (P>0.05). Between the different treatment groups, ie MMF+CsA+Pre group and MMF+FK506+Pre group (P=0.00), MMF+CsA group and MMF+FK506 group (P=0.00), MMF+FK506+Pre group and MMF+CsA group (P=0.00), MMF+CsA+Pre group and MMF+FK506 group (P=0.00), the plasma concentrations were significantly different (P<0.05). There was no statistically significant difference in the plasma drug concentrations among patients with different GFRs (P>0.05).CONCLUSION There is remarkable inter-individual difference in the plasma concentration of mycophenolic acid, and a variety of clinical factors affect the drug exposure. Therefore, it is necessary to carry out therapeutic drug monitoring for mycophenolic acid in order to lay the foundation for individualized treatment.     

人血浆中霉酚酸浓度测定方法研究及药物监测应用

 目的建立用高效液相色谱快速测定人血浆中霉酚酸浓度的方法,对我院肾移植病人霉酚酸血药浓度进行监测。方法血浆样品加20μLH₃PO₄酸化,乙醚提取,萘啶酸为内标,采用Kromasil 100-5C₈(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-乙腈-0.05 mol·L^-1 KH₂PO₄(用磷酸调pH2.8)(12∶38∶50)为流动相,流速0.5 mL·min^-1,柱温25℃,检测波长254 nm。结果霉酚酸在0.191～24.45 mg·L^-1内线性关系良好(r=0.999 8),最低定量限为0.191 mg·L^-1(S/N=10)。高、中、低3个质控样品的平均方法学回收率为89.7%～101.5%,提取回收率大于85%,日内、日间精密度的RSD均小于10%。监测肾移植患者环孢霉素或他克莫司的谷浓度同时,测定其MPA血药浓度,82.3%的患者MPA浓度小于2 mg·L^-1,低于有效治疗谷浓度。结论本法简便、灵敏、重现性好,可用于肾移植病人服用霉酚酸酯后霉酚酸血药浓度监测和霉酚酸酯药动学研究。     

质子泵抑制剂对肾移植患者体内霉酚酸酯血药浓度的影响

 目的 本试验旨在考察我院肾移植患者术后早期应用质子泵抑制剂（PPIs）和后期停用PPIs后对霉酚酸酯(MMF)谷浓度的影响。方法 选择2009年～2010年在我院接受同种异体活体肾移植术的患者进行研究,所有患者均采用他克莫司（FK506）+霉酚酸酯（MMF）+泼尼松(Pred)的三联用药方案。利用HPLC法检测血浆霉酚酸（MPA）浓度,结合临床检验结果分析PPIs对MMF的影响。结果 术后早期服用PPIs的患者MPA谷浓度为（2.58±2.63）μg·mL-1,停用PPIs后MPA浓度为（1.98±1.57）μg·mL-1,二者无统计学差异。结论 移植早期应用PPIs不会降低MPA谷浓度,MMF固定剂量给药可使MPA浓度维持在目标浓度范围内。     

人血浆中拉莫三嗪、奥氮平、喹硫平浓度的UPLC-MS/MS分析方法建立及治疗药物监测

目的建立超高效液相色谱串联质谱法测定人血浆中拉莫三嗪、奥氮平、喹硫平的浓度,为指导临床用药提供帮助。方法血浆样品经甲醇沉淀蛋白后进样分析,以伏立康唑为内标,采用ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)分离;以含0.1%甲酸的水溶液-甲醇溶液为流动相梯度洗脱。电喷雾电离源正离子检测模式,以多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)方式进行分析。结果测定人血浆中拉莫三嗪、奥氮平、喹硫平分别在0.5~20μg·mL^-1、2~200、10~1000 ng·mL^-1内线性良好。基质效应、提取回收率、准确度、精密度和稳定性均符合要求,该法成功用于45例临床患者血浆样本分析。结论该方法操作简单快速灵敏度高,专属性高且稳定,测定结果可靠,适用于人血浆中拉莫三嗪、奥氮平、喹硫平的分析,能够服务于临床治疗药物监测。     

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??OBJECTIVE To develop an UPLC method for the determination of mycophenolic acid(MPA) for studying the pharmacokinetics of mycophenolate mofetil(MMF) dispersible tablets after multiple oral doses in early kidney transplant recipients for the rational use in the clinical practice.METHODS A total of 15 Chinese postoperative renal transplant recipients were given a multiple-dose of MMF (750 mg, q12 h) for 6 d. Their blood specimens (2 mL) were collected at 0 and 0.5, 1, 1.5, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12 h after drug oral administration on day 7. The concentrations of MPA in plasma were determined using UPLC-UV. The main pharmacokinetic parameters were assessed.RESULTS Determination of MPA had good linearity in the concentration range of 0.1-40 ??g??mL^-1, lower limit of quantization was 0.10 ??g??mL^-1.The main pharmacokinetic parameters on day 7 of MMF dispersible tablets were as follows:AUC_{0-12 h} was (24.63??9.51) ??g??h??mL^-1, ??_max was (6.51??3.27) ??g??mL^-1, t_max was (1.83??1.30) h, ??₀ was (1.26??0.99) ??g??mL^-1,CL was (34.66??12.45) L??h^-1. Most of the patients revealed a second small peak in the 4-12 h.CONCLUSION This established method is simple, rapid and suitable for determination of MPA in human plasma.Interindividual variability in AUC_{0-12 h}, ??_max and ??₀ values was considerable in the early renal transplant patients. The MPA exposures under the fixed dose of MMF are low. It is necessary to monitor the MPA-AUC_{0-12 h} to guide the adjustment of drug dosage.     

固相萃取-高效液相色谱法测定肝移植病人血清中麦考酚酸浓度

 目的　建立血清中麦考酚酸(霉酚酸)的高效液相色谱检测法,并监测肝移植病人霉酚酸血药浓度。方法　应用OASIS固相萃取小柱提取血清中霉酚酸,采用反相高效液相色谱法二极管阵列检测器检测,色谱柱为Symmetry C₁₈(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-2.5mmol·L^-1 KH₂PO₄ 缓冲液(50∶50),pH为4.5,流速为1.0mL·min^-1,柱温25℃,检测波长210nm。结果　霉酚酸在0.1～10.0μg·mL^-1内定量线性良好(r=0.9999),精密度和回收率均良好,成功用于肝移植病人霉酚酸血药浓度测定。结论　本方法适用于肝移植病人霉酚酸血药浓度的测定,但临床测定结果较文献报道的肾移植病人口服麦考酚酸酯后MPA血药浓度数据低,有待进一步研究。