两种方法保存同种异体髌腱移植重建膝关节交叉韧带的光镜电镜观察

目的从实验角度观察采用程序冷冻液氮保存和-80℃深低温保存同种异体髌腱及移植重建膝关节交叉韧带后的组织学变化,为临床同种异体腱移植提供理论依据。方法分别将兔的1/2骨-髌腱-骨复合体经程序冷冻液氮保存2周和-80℃深低温保存2周后,观察冻存变化差异并行同种异体移植重建前交叉韧带,分别于术后3周和8周在光镜和电镜下观察其组织学变化。结果光镜和电镜下可见,经程序冷冻液氮保存方法处理后,冷冻损伤较-80℃深低温保存方法轻微; -80℃深低温保存组和程序冷冻液氮保存组的移植物在术后愈合过程中的组织学行为均与自体移植组相似,而程序冷冻液氮保存组更接近于自体移植组。结论经程序冷冻液氮保存和-80℃深低温保存方法冻存的兔异体髌腱重建膝关节交叉韧带后愈合过程和自体韧带移植重建过程相似,但程序冷冻液氮保存法优于传统的-80℃深低温保存法。     

冷冻预处理温度对胎兔许旺细胞免疫原性的影响

目的探讨不同维持温度冷冻预处理超深低温保存对胎兔许旺细胞免疫原性的影响。方法设未冷冻处理细胞为对照组,实验组细胞设计冷冻维持温度为-30℃,-35℃,-40℃,-45℃,-50℃,-55℃,-60℃,-65℃,-70℃,10%二甲基亚砜（DMSO）为低温保护剂,对胎兔许旺细胞进行冷冻预处理,液氮中保存48h,复温,培养48h后培养液中加入IFN-γ（100U/ml）继续培养72h,流式细胞仪检测许旺细胞MHC-Ⅱ分子的表达率。结果流式细胞仪检测显示各实验组-30℃至-70℃许旺细胞MHC-Ⅱ分子的表达率依次分别是：7.59±0.91,10.43±0.90,14.35±0.73,16.80±0.73,15.41±0.71,14.50±0.73,10.92±0.89,8.36±0.68和5.26±0.76,对照组为35.98±1.06,统计学显示实验组MHC-Ⅱ表达率和对照组之间有显著性差异（P〈0.01）。结论不同维持温度冷冻预处理超深低温保存能降低胎兔许旺细胞的免疫原性。     

自体颅骨不同保存方法的超微结构改变与临床研究

目的 通过对自体颅骨不同保存方法超微结构的研究确定最适宜的颅骨骨瓣保存方法.方法 对经过酒精浸泡、皮下埋植和深低温冷冻的颅骨骨瓣保存前后的超微结构、骨密度及骨应力的改变分别进行对比研究.结果 酒精浸泡保存的颅骨骨瓣超微结构改变明显,物理性质下降,深低温保存的颅骨骨瓣次之,皮下埋植保存的颅骨骨瓣最接近于新鲜颅骨.结论 经皮下埋植保存的颅骨骨瓣最接近于新鲜颅骨,其方法简单,易于推广.     

三种不同方法保存的兔角膜内皮细胞形态学观察

目的 通过观察兔角膜内皮细胞形态,了解不同保存方法和不同保存时期及时间点对角膜内皮细胞活性和密度的影响.方法 采用短期湿房4 ℃保存6 h、D-X角膜中期保存液4 ℃保存3 d、长期深低温保存3个月,取3组各自限定时间的保存角膜片进行检测,分别行角膜内皮细胞茜素红和台盼蓝活性染色、光学显微镜观察及图像分析.结果 长期深低温保存后的兔角膜内皮细胞活性率、细胞密度及六边形细胞率低于前两组,细胞面积高于前2组,均具有统计学差异.结论 正确掌握3种方法,维持角膜内皮细胞生物活性,虽然深低温保存方法对角膜内皮细胞活性和密度有一定影响,但其活性率在80%以上,仍在角膜移植手术可接受的范围内.     

乌拉坦增强延长离体大鼠心脏的低温保存效果

目的：观察乌拉坦对延长离体大鼠心脏的低温保存作用.方法：成年雄性SD大鼠分为两组（n=6）：对照组：HTK保存液; 试验组：HTK保存液加乌拉坦（30mmol/L）.心脏分别置入两种保存液4℃下保存6和18h.采用Langendorff心脏灌注装置进行保存前及保存后再灌注30min时心脏功能测定,比较心脏功能恢复率、ATP含量、细胞凋亡和超微结构变化.结果：低温保存后实验组左室功能恢复率较对照组明显升高,细胞凋亡及超微结构损伤较对照组减轻; 保存18h后实验组ATP含量显著高于对照组.结论：乌拉坦加入HTK心脏保存液能够显著增强离体大鼠心脏的低温保存效果.     

自体颅骨低温保存的研究

目的探讨保存于-80℃深低温条件下的颅骨在微生物学和组织形态学方面的变化及临床应用情况。方法在无菌条件下封存颅骨骨瓣。对30例已死亡病例的颅骨骨瓣标本进行微生物学检测。根据保存条件,将颅骨标本分为冻存组、深低温组、保护剂组和对照组,保存时间为3个月、6个月和12个月。从2007年10月至2009年1月,临床应用共16例。结果在30例标本中,29例为无细菌生长,1例为微小棒状菌生长。保护剂组、深低温组、冻存组的成骨细胞结构破坏程度和细胞核溶解度依次加重。各组保存3个月、6个月、12个月无明显差别。临床应用的16例,术后均无感染,术后随访CT骨窗显示骨缝未出现增宽,ECT99mTc-MDP静态显像显示颅骨骨瓣区放射性核素浓聚。结论在-80℃深低温保存的颅骨,无细菌生长,深低温保存组少部分成骨细胞结构被破坏,临床应用后,骨瓣并无感染且能于移植后再生存活。     

小鼠卵巢组织的深低温保存和移植研究

①目的 采用深低温保存方法冷冻保存小鼠的卵巢组织，观察移植后卵巢功能和组织学的恢复情况。②方法 36只昆明种小鼠随机分为3组：假手术组、对照组(新鲜移植组)和深低温保存组。假手术组不切除卵巢，对照组切除卵巢后即行自体原位移植，深低温保存组则将双侧卵巢完全摘除后，行二期手术自体原位移植深低温保存的卵巢。观察所有小鼠的动情周期的变化，并对卵巢的卵泡发育情况进行组织学检查。③结果 假手术组小鼠的动情周期没有任何变化，对照组小鼠的动情周期也在手术后的不同时间内恢复正常，深低温保存组小鼠在完全切除卵巢后，完全失去了动情周期的变化；冷冻复温卵巢自体移植后，多数小鼠的动情周期恢复正常。组织学分析显示，深低温保存卵巢在自体移植后，卵巢可以存活，并有各级卵泡发育。④结论 采用深低温保存方法保存后的小鼠卵巢复温后保持组织活性，自体移植后小鼠的动情周期恢复，卵巢中有正常卵泡发育。     

股骨近端防旋髓内钉联合抗骨质疏松药物治疗老年不稳定型股骨转子间骨折的临床疗效

目的：探讨股骨近端防旋髓内钉联合抗骨质疏松药物对老年不稳定型股骨转子间骨折的疗效。方法随机选取该院2012年3月—2015年5月收治的50例老年不稳定型股骨转子间骨折患者,将其随机分为观察组和对照组,均为25例,观察组患者接受股骨近端防旋髓内钉联合抗骨质疏松药物治疗,对照组患者接受动力髋部螺钉治疗,对比两组临床疗效。结果两组住院时间、Harris评分、骨痂出现时间、骨折愈合时间比较无差异(P>0.05);观察组Ward三角、股骨颈、股骨大转子分别为(0.875±0.022)、(1.009±0.062)、(0.880±0.032)g?cm-2,对照组分别为(0.646±0.010)、(0.799±0.017)、(0.684±0.022)g?cm-2,3组指标组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论股骨近端防旋髓内钉联合抗骨质疏松药物治疗老年不稳定型股骨转子间骨折,可提升老年不稳定型股骨转子间骨折的骨密度恢复,效果显著。     

不同条件下保存后自体颅骨瓣活性的研究

随着标准化大骨瓣减压治疗的应用,临床中必然会出现越来越多的大面积颅骨缺损的病例,自体骨瓣具有其他颅骨修补材料不可比拟的优点.有关自体骨瓣保存后活性及术后远期活性的组织学及影像学的研究较为少见.骨瓣埋藏于腹壁下,病理检查发现为骨髓腔细胞的死亡;扫描电镜可见骨板及骨小梁均存在,但是陷窝内骨细胞逐渐死亡.深低温保存的颅骨瓣的骨细胞仅出现皱缩,骨胶质纤维稍紊乱,结构较稳定.组织学发现新鲜骨91.5％的骨陷窝内有骨细胞,冷冻骨73.3％的骨陷窝内有骨细胞,皮下保存骨45.8％的骨陷窝内有骨细胞.自体骨瓣皮下保存与深低温保存的临床和基础研究尚不完备,缺乏与临床治疗时间节点相一致的实验资料,需进一步研究.     

深低温冷冻与常温储骨对皮质骨生物力学特性影响的研究

目的：研究深低温冷冻法和常温法储骨对皮质骨生物力学特性的影响。方法：用深低温冷冻法和常温酒精浸泡法储存相同时间的股骨皮质作标本,分别将其修成弯瞳及压缩试件,在Instron1195型电子拉伸试验机上测试两组的极限弯曲强度,弹性模量及极限压缩强度,所得数据进行组间t检验。结果：两组间极限弯曲强度、弹性模量、极限压缩强度差异均不明显（P〉0．05）。结论：深低温冷冻及常温法储骨对皮质骨生物力学特性无影响,在无深低温冷冻储骨条件的地方,如有合适的骨源,也可积极取骨用常温法储存,以免骨源浪费。     

虎骨及其类似品的组织结构观察

本实验选取虎骨、豹骨、熊骨、黄牛骨、猪骨、狗骨、猫骨７种胫骨中段，采取骨研磨片和骨切片染色方法进行骨组织结构的对比观察。结果表明：虎骨、豹骨、熊骨和黄牛骨其组织结构相近似，后３种骨可考虑作虎骨的代用品。     

抗癫痫药物致儿童骨损害的常用检测指标

抗癫痫药物(AEDs)是治疗儿童癫痫的最有效方法,长期服用AEDs会对儿童骨骼发育造成损害,本文对近年来临床上较常用的骨损害检测指标进行综述。     

组织工程骨修复骨缺损的应用瓶颈分析

骨肿瘤的治疗导致骨缺损很常见,修复缺损的方法是采取骨移植。骨移植材料根据来源大致可分为自体骨、同种异体骨、异种骨和人工骨替代材料。骨组织工程的兴起为骨缺损的治疗带来新的选择。利用骨组织工程培养的人工骨不仅可以修复大面积骨缺损,而且可以按需塑形并大量制备,是一种理想的骨修复材料。现就组织工程骨在治疗骨缺损中的应用现状进行综述。     

珊瑚／骨髓复合人工骨修复颌骨缺损的临床应用研究

目的：评价珊瑚／骨髓复合人工骨修复颌骨缺损的疗效。方法：将珊瑚／骨髓复合人工骨用于充填9例颌骨囊肿和3例造釉细胞术后贵留的骨腔,术后1周、1、6和12个月通过临床和X线检查以评价其骨修复效果。结果：10例伤口Ⅰ期愈合,术后1个月缺损区有新骨形成;6个月缺损区可见大量成熟的骨组织,部分珊瑚被降解吸收;12个月珊瑚完全被宿主骨取代,缺损区得到完全修复。另有2例因伤口袭开需去除珊瑚骨。结论：珊瑚／骨髓复合人工骨可促进颌骨缺损的修复,是较理想的骨移植替代材料,减少缝合时伤口的张力是植骨成功的关键。     

骨缺损的临床治疗进展

骨移植是治疗骨缺损的有效方法。自体骨移植是传统的骨移植方法,具有骨生成能力强、愈合快的特点,但来源有限,可能二次手术创伤和增加感染机会。同种异体骨不具有自身成骨能力,其愈合主要靠骨传导作用和骨诱导作用,移植骨的抗原性是影响其与宿主愈合的重要因素。异种骨应用于临床的主要障碍是免疫排异反应。人工骨及其替代材料成骨方式单一,缺乏生物活性,修复不彻底,愈合缓慢,与自体骨髓及细胞组成的复合物能克服上述缺点。骨迁移延长术是治疗肢体大段骨缺损安全有效的方法。     

白藜芦醇影响骨生长作用的研究进展

白藜芦醇是一种天然的植物雌激素，类似于机体产生的甾体激素，其在骨正常生长环境下，对骨生长具有明显的促进作用，对失重、疾病等状态下的骨具有保护作用。有关白藜芦醇的骨保护和促进生长作用，以及相关的作用机制是近年来国内外的研究热点。     

骨髓活检和骨髓涂片在淋巴瘤骨髓浸润诊断中的价值

目的探讨骨髓活检和骨髓涂片在淋巴瘤骨髓浸润诊断中的价值。方法选择22例霍奇金淋巴瘤(HL)和97例非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者,抽吸患者的骨髓液常规涂片作瑞特染色,用塑料包埋法制作组织切片,常规HE染色。结果22例HL患者中6例(27.3%)骨髓活检显示存在骨髓浸润,1例(4.5%)骨髓涂片阳性;97例NHL患者中39例(40.2%)骨髓活检存在骨髓浸润,15例(15.5%)骨髓涂片阳性,骨髓活检阳性率高于骨髓涂片(P<0.05)。结论骨髓活检更能准确反映淋巴瘤骨髓浸润,将其与骨髓涂片相结合对淋巴瘤诊断和分期具有重要意义。     

MicroRNA在骨代谢中的研究进展

microRNA(miRNA)是一种非编码的小分子RNA,在基因的表达调控过程中起着非常重要的作用。骨组织的发生、生长、代谢同样与miRNA有着密切的关联。与骨代谢相关的miRNA的表达水平变化都会引起骨质代谢异常,进而导致骨质疏松等骨疾病的发生。而在骨相关疾病状态下,改变相关miRNA的表达水平也能对其起到治疗作用。现针对miRNA在骨代谢相关研究及其进展予以综述。     

骨形态发生蛋白治疗骨折和骨缺损的发展及临床疗效

骨折和骨缺损是骨科临床常见病症,在传统治疗方法中存在骨折或骨缺损愈合过程缓慢、骨组织来源不足以及修复后的骨组织力学性能不佳等缺点。在骨形态发生蛋白家族被发现后,学者们对其生理学进行了许多研究,并结合各种载体系统及应用基因治疗技术将其作为新型治疗方法引入临床。本文对骨形态发生蛋白的研究进展、在临床前期及临床应用中的疗效、优势及有待解决的问题等予以综述。