γ-羟基丁酸受体在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的作用

研究γ-羟基丁酸(gamma-hydroxybutyric acid，GHB)受体在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的作用及其机制。选用GHB受体选择性激动剂NCS-356和特异性拮抗剂NCS-382作为工具药，采用改良的Longa法制备大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型。缺血2 h再灌注2 h后，动物进行Longa法行为功能评分；再灌注24 h后，部分动物用TTC染色法测定大鼠脑梗死体积；部分动物应用流式细胞仪测定神经细胞内游离钙离子浓度；分光光度法测定缺血侧大脑皮质中总一氧化氮合酶(tNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性和一氧化氮(NO)含量；放射免疫法测定大鼠缺血侧大脑皮层环磷酸鸟苷(cGMP)含量。Isc/R组大鼠行为功能评分、脑梗死体积、神经细胞内游离Ca²⁺浓度、cGMP和NO含量、tNOS及iNOS活性均显著高于假手术组；NCS-356 160 μg·kg^-1(N₁)、NCS-356 320 μg·kg^-1(N₂)、 NCS-356 640 μg·kg^-1(N₃)和尼莫地平600 μg·kg^-1(Nim)组的上述各指标均不同程度地低于Isc/R组，而NCS-382 640 μg·kg^-1+NCS-356 640 μg·kg^-1 (NCS-382+N₃)组则能显著对抗N₃组的作用。激动GHB受体对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用，其作用机制可能与降低神经细胞内游离Ca²⁺浓度，减少NO及cGMP含量有关。     

脑5-HT1A/1B、α2受体及腺苷酸环化酶参与了胍丁胺的抗抑郁作用

为了在单胺受体及受体后腺苷酸环化酶(adenylate cyclase,AC)水平探讨胍丁胺(agmatine,AGM)抗抑郁作用的精细机制,采用小鼠悬尾实验和强迫游泳实验观察AGM抗抑郁行为改变。采用放射免疫方法测定大鼠前额皮层突触膜蛋白AC活性。结果表明,AGM(5～40 mg·kg^-1,ig)在小鼠悬尾实验和强迫游泳实验模型上均有显著抗抑郁活性。同时伍用β受体/5-HT_1A/1B受体阻断剂吲哚洛尔(pindolol, PIN, 20 mg·kg^-1, ip)、 α₂肾上腺素受体拮抗剂育亨宾(yohimbine, YOH, 5～10 mg·kg^-1, ip)或咪唑克生(idazoxan, IDA, 4 mg·kg^-1, ip)对AGM(40 mg·kg^-1, ig)的抗抑郁活性具有显著拮抗效应; 而β受体阻断剂普萘洛尔(propranolol, PRO, 5～20 mg·kg^-1, ip)或5-HT₃受体拮抗剂曲匹西隆(tropisetron, TRO, 5～40 mg·kg^-1, ip)对AGM(40 mg·kg^-1, ig)的抗抑郁活性无显著影响。AGM(0.1～6.4 μmol·L^-1)与大鼠前额皮层提取的突触膜共孵可剂量依赖地激活AC活性, 而PIN(1 μmol·L^-1)或YOH(0.25～1 μmol·L^-1)均显著拮抗AGM(6.4 μmol·L^-1)对AC的激活作用; 慢性给予大鼠AGM(10 mg·kg^-1, ig, bid)或氟西汀(fluoxetine, FLU, 10 mg·kg^-1, ig, bid) 2 w也显著增强大鼠前额皮层基础及Gpp(NH)p 预激活的AC活性。本研究表明, 调节脑内5-HT_1A/1B和α₂等受体功能, 并激活前额皮层AC可能是AGM抗抑郁活性的重要机制之一。     

人参皂甙Rh2体外对小鼠黑色素瘤细胞的分化诱导作用

体外实验证明人参皂甙Rh₂在10μg·ml^-1的浓度下能明显抑制B₁₆细胞的生长,并呈浓度依赖性,其IC₅₀为4.1μg·ml^-1。Rh₂在10μg·ml^-1浓度下对B₁₆细胞有较强的分化诱导作用,表现为黑色素生成能力明显增加;形态向上皮样细胞分化;细胞呈网状结构;黑色素颗粒增多,生长变缓慢。细胞动力学研究结果表明,Rh₂可使B₁₆细胞阻断在G₁期。提示Rh₂对B₁₆细胞具有分化诱导作用。     

慢性孵育β-淀粉样肽(25-35)对培养大鼠海马神经元外向钾电流的影响

目的　研究慢性孵育β-淀粉样肽_(25-35) (β-AP_25-35)对海马神经元上瞬时外向钾电流(I_A)和延迟整流钾电流(I_K)的影响。方法　在培养的大鼠海马神经元上用膜片钳全细胞记录钾通道电流。结果　β-AP_25-35 3μmol·L^-1 孵育细胞24h ,I_K 电流幅度增加(44.3±5.4)% ,电流密度由(30.4±6.4)pA·PF^-1 增加至(43.8±4.7)pA·PF^-1 ;β-AP_25-3510μmol·L^-1 孵育12h ,I_K 电流幅度增加(69.8±4.1) % ,电流密度增加至(51.6±7.9)pA·PF^-1,呈浓度依赖性;β-AP_25-35引起的I_K 增加对TEA 5mmol·L^-1 敏感;β-AP_25-35上调I_K 的作用主要发生在β-AP_25-355用药后48h内。β-AP_25-35对I_A无显著性影响。结论　β-AP_25-35选择性地增加海马神经元上I_K,这一作用可能与β-AP的神经毒性有关     

HPLC法测定复方吡拉西坦脑蛋白水解物片中维生素B1、B2和B6含量

摘 要 目的:建立HPLC法测定复方吡拉西坦脑蛋白水解物片中维生素B₁、维生素B₂和维生素B₆含量的方法。方法: 采用Insteril ODS-3色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相：0.01 mol·L^-1庚烷磺酸钠（含0.25%三乙胺,用冰醋酸调节pH至3.8)-甲醇（75∶25）,柱温30℃,检测波长为280 nm,流速：1.0 ml·min^-1。结果: 维生素B₁、维生素B₂、维生素B₆分别在3.98～99.40 μg·ml^-1（r=0.999 7）、4.08～101.91μg·ml^-1（r=0.999 9）、2.08～52.00 μg·ml^-1（r=0.999 9）范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.18%、99.53%、99.27%,RSD分别为0.60%、0.67%、0.71%(n=9)。结论:本法简便、快速、准确,可用于复方吡拉西坦脑蛋白水解物片中维生素B₁、维生素B₂和维生素B₆的含量测定     

速激肽受体拮抗剂对白三烯C4引起的豚鼠心血管反应的抑制作用

iv白三烯C₄(LTC₄)0.8nmol·kg^-1引起麻醉豚鼠血压降低和心脏微血管依文思蓝渗出增加。速激肽NK-1受体拮抗剂CP-96345 (2.06μmol·kg^-1,iv)和NK-2受体拮抗剂SR-48968(1.66μmol·kg^-1,iv)部分抑制心房微血管渗漏(分别为46.6%和37.5%);两药合用可明显抑制LTC₄引起的低血压和心房、心室微血管渗漏(分别为58.1%和54.1%),其作用与白三烯特异性拮抗剂ONO-1078(0.06μmol·kg^-1,iv)相似。结果表明速激肽NK-1和NK-2受体可能参与白三烯引起的低血压和心脏炎症反应。     

M3受体与大鼠缺血性心肌细胞凋亡关系的研究M3受体与大鼠缺血性心肌细胞凋亡关系的研究

目的观察M₃受体对大鼠缺血性心肌细胞凋亡的作用及其机制。方法结扎大鼠左冠状动脉前降支建立急性心肌缺血模型,给予M₃受体激动剂胆碱或阻断剂4DAMP进行干预,观察M₃受体对其的影响。结果缺血前15 min iv胆碱10 mg·kg^-1可提高血清超氧化物歧化酶(SOD)活力,降低丙二醛(MDA)含量,减少凋亡细胞的数量(P<0.01),并可增加Bcl-2表达,减少Fas表达。预先5 min iv 4DAMP 0.12 mg·kg^-1阻断心肌M₃受体可逆转胆碱的作用。结论激动M₃受体对结扎大鼠冠状动脉诱导的心肌损伤有保护作用,其机制可能与调节Bcl-2和Fas表达从而抑制心肌细胞凋亡有关。     

五味子乙素抑制M146L细胞Aβ42生成的机制研究

目的研究五味子乙素抑制M146L细胞Aβ₄₂生成的机制。方法体外培养高效表达Aβ42的M146L细胞株，分别加入不同浓度的五味子乙素(1.67，5.00和15.00 μg·mL^-1)、 β分泌酶抑制剂(S4562，100.00 μg·mL^-1)和γ分泌酶抑制剂(S2188，13.68 μg·mL^-1)。用CCK-8(cell counting kit-8)比色法检测不同处理对M146L细胞活性的影响；用ELISA法测定M146L细胞所分泌的Aβ₄₂的变化；用Western blotting检测APP的β分泌酶剪切产物C99蛋白的含量变化，结合用β和γ分泌酶活性试剂盒，检测五味子乙素对这两种酶活性的影响。结果不同处理因素对M146L细胞的存活率均无影响，不具有细胞毒作用。中、高剂量的五味子乙素均不同程度地抑制M146L细胞分泌Aβ₄₂及γ分泌酶的活性，但都不改变M146L细胞C99蛋白的含量及β分泌酶的活性。结论五味子乙素可抑制γ分泌酶活性，其降低Aβ₄₂生成是通过抑制γ分泌酶的活性来实现的。     

多环胺化合物HH01抗实验性大鼠胃溃疡作用

HH01(A和B)在60mg·kg^-1剂量下,对无水乙醇型、冷应激型和幽门结扎型胃溃疡模型有较好的预防作用;大剂量时对胃液分泌有一定的抑制作用,并可减少胃酸分泌,同时减少胃液中DNA的含量,作用特点与甲氰脒胍不同;在同样剂量下对消炎痛型胃溃疡模型无效。     

酪氨酸单用及合并RU486对小鼠生殖功能的影响及作用机理

用小鼠抗早孕实验及体外大鼠黄体细胞培养的方法,研究酪氨酸单用及酪氨酸与已知抗生育药RU486合并用药对小鼠早期妊娠的影响及作用机制。结果表明,酪氨酸与RU486合用有协同抗早孕作用。进一步的机理研究发现,酪氨酸170mg·kg^-1·5d可使早孕小鼠血清孕酮水平显著降低;酪氨酸50μg·mL^-1与(+)PG05合用;对抑制大鼠黄体细胞孕酮的基础分泌有协同作用,并能显著抑制hCG诱导的大鼠黄体细胞孕酮的分泌。结果提示:降低孕酮分泌可能是酪氨酸抗生育作用的途径之一。     

(+),(-)和(±)棉酚在雌大鼠抗早孕作用的研究

妊娠第6～9天大鼠,分别ig(±)和(-)棉酚80mg·kg^-1·d^-1和40mg·kg^-1·d^-1,结果有明显的抗早孕作用。然而(+)棉酚40mg·kg^-1·d^-1对大鼠生育无明显影响。(-)棉酚30μg·ml^-1能抑制体外培养黄体细胞孕酮的分泌。(+)棉酚10μg·ml^-1能促进黄体细胞分泌孕酮。hCG1IU·ml^-1能明显刺激体外培养颗粒细胞孕酮的分泌。(±)棉酚10和30μg·ml^-1皆能明显降低颗粒细胞对hCG的反应性。     

4种川乌类药材急性毒性的差异性研究

目的 比较同源饮片川乌、黑附片、白附片与天雄之间急性毒性及其所引发毒性表现的差异性。方法 采用急毒实验方法测定小鼠灌胃生川乌和黑附片提取物的半数致死量（LD₅₀）和天雄提取物的药物最大耐受量（MTD）,同时对白附片提取物做限度实验并观察小鼠毒性表现。结果 生川乌和黑附片半数致死量测定结果分别为4.55 g饮片/kg和78.71 g饮片/kg;天雄药物最大耐受量测定结果为34.19 g饮片/kg;白附片提取物以5 g·kg^-1的剂量灌胃小鼠,引起严重毒性反应,但不能引起小鼠死亡。4种饮片引起的毒性表现十分相似,可能累及神经、呼吸和循环等多个系统,不同的是除白附片外,其他3种饮片均可使小鼠发生眼球突出、惊厥甚至死亡反应。结论 4种饮片的急性毒性由大到小依次为生川乌、黑附片、天雄和白附片。虽然其引发的毒性表现十分类似,但是在严重程度上略有差异。     

灵芝孢子油、破壁灵芝孢子粉及灵芝孢子提取物对小鼠急性胃溃疡的保护作用

目的 探讨灵芝孢子油、破壁灵芝孢子粉及灵芝孢子提取物对小鼠急性胃溃疡的影响。方法 雄性ICR小鼠随机分为12组：对照组,模型组,奥美拉唑（阳性药,4 mg·kg^-1）组,灵芝孢子提取物低、中、高剂量（0.2、0.4、0.8 g·kg^-1）组,破壁灵芝孢子粉低、中、高剂量（0.6、1.2、2.4 g·kg^-1）组,灵芝孢子油低、中、高剂量（0.2、0.4、0.8 g·kg^-1）组,每组20只。ig给药,每天1次,对照组和模型组给予等体积的生理盐水。连续给药7 d后,禁食12 h,除对照组外,每组随机选取10只小鼠ig无水乙醇（10 mL·kg^-1）建立急性胃溃疡模型,1.5 h后取材;每组余下10只小鼠ig吲哚美辛（40 mg·kg^-1）建立急性胃溃疡模型,3 h后取材。观察小鼠的一般状况、胃出血和溃疡情况,进行胃损伤评分,计算损伤抑制率和损伤发生率。结果 各组小鼠给药过程中无异常。小鼠给予无水乙醇后,模型组和奥美拉唑组10 min后开始出现行动变缓,肢体活动不协调,呼吸加深、频率减慢等症状,而给予灵芝孢子提取物、破壁灵芝孢子粉和灵芝孢子油的小鼠在30 min后才陆续出现症状;给予吲哚美辛的小鼠自主活动减少,各组之间无差别;对照组小鼠行为活动如常。与对照组比较,小鼠经无水乙醇、吲哚美辛ig导致非常明显的胃溃疡,胃损伤评分显著升高（P<0.01）,损伤发生率为100%;与模型组比较,预防性给予灵芝孢子提取物、破壁灵芝孢子粉、灵芝孢子油可明显降低胃出血或溃疡等胃黏膜损伤,其中灵芝孢子提取物高剂量组、破壁灵芝孢子粉组、灵芝孢子油组的胃损伤评分显著降低（P<0.01）,损伤抑制率显著提高（P<0.01）,损伤发生率明显降低。结论 灵芝孢子油、破壁灵芝孢子粉及灵芝孢子提取物能有效抑制小鼠急性胃溃疡的发生,灵芝孢子油效果最佳,破壁灵芝孢子粉次之,并且对于无水乙醇导致的急性胃溃疡抑制作用尤为显著。     

甘草次酸对苯并芘诱发DNA损伤及非程序DNA合成的影响

甘草次酸(GA)是甘草的有效成分之一。实验结果表明,GA能够抑制巴豆油诱发的小鼠耳肿胀和鸟氨酸脱羧酶(ODC)活性。甘草次酸对由苯并芘所诱发的DNA损伤有一定的保护作用,同时还降低强致癌剂苯并芘所引起的非程序DNA合成。结果提示GA是一种有前途的癌化学预防药。     

穴贴定喘膏对过敏性哮喘豚鼠IL3、IL5和IgE的影响

目的　探讨穴贴定喘膏治疗过敏性哮喘模型豚鼠的作用机理。方法　用10%卵蛋白液给豚鼠致敏,2周后再用1%的该溶液雾化吸入,以诱发豚鼠哮喘,然后将发作的哮喘豚鼠随机分为模型组、先声咳喘宁组 (7.5ml·kg^-1)、穴贴定喘膏组(1g·kg^-1、3g·kg^-1),同期另设一正常组。先声咳喘宁组豚鼠灌胃给药,穴贴定喘膏组豚鼠经皮给药。每日给药1次,连续7日。其间在给药1h后,诱发哮喘1次。1周后取豚鼠血清,测定IL₃、IL<     

间硝苯地平对老龄肾性高血压大鼠心肌和脑微粒体Na+,K+-ATP酶,Ca2+-ATP酶和Mg2+-ATP酶活性的影响

间硝苯地平(m-Nif,ig20mg·kg^-1·d^-1持续给药9周)可显著降低老龄肾性高血压大鼠(RVHR)血压和左室重量(P<0.01),增高心、脑微粒体Na⁺,K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶活性(P<0.01),降低Mg²⁺-ATP酶活性,体外量效关系研究发现,m-Nif在较高剂量(10～1000μmol·L^-1)时可增高RVHR心脑微粒体Na⁺,K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶活性,且随剂量增加而增高。上述结果表明,m-Nif可改善老龄RVHR心脑微粒体Na⁺,K⁺泵和Ca²⁺泵功能。     

氯哌胺对15-甲基前列腺素F2α致泻和兴奋子宫作用的影响

氯哌胺(Loperamide)是一种新型止泻药,能拮抗15-M-PGF_2α引起的小鼠小肠内碳粉推进加速和腹泻,作用比吗啡和阿托品强,对离体大鼠回肠的抑制作用也比吗啡、阿托品强。氯哌胺能降低肠平滑肌张力,抑制离体大鼠回肠对15-M-PGF_2α的反应性,但却增强子宫平滑肌对15-M-PGF_2α的反应性。氯哌胺对离体大鼠子宫自发收缩活动低浓度兴奋、高浓度抑制。氯哌胺对15-M-PGF_2α促进大鼠空肠水和钠离子分泌也有拮抗作用,此作用不能被纳洛酮翻转。氯哌胺在小鼠的急性半数致死量为77.9 mg/kg。     

2-[对-(二甲氨基)苯乙烯]氯化甲基吡啶对大鼠心电图、豚鼠左心房收缩及乳头肌动作电位的影响

2-[对-(二甲氨基)苯乙烯]氯化甲基吡啶(DSPM-Cl),是由氯取代2-[对-(二甲氨基)苯乙烯]碘化甲基吡啶(DSPM)上的碘而得。本文应用心电图、机械收缩描记方法及细胞内标准微电极技术,研究DSPM-Cl对大鼠心电图(ECG)、豚鼠心房肌量效曲线及对豚鼠乳头肌快反应动作电位(AP)、高钾除极慢反应动作电位(SAP)的影响。结果显示,DSPM-Cl(2mg·kg^-1)对大鼠有明显的负性频率、负性传导作用,分别使PP间期、PR间期延长达66.2%(P<0.01),17.0%(P<0.01),50μmol·L^-1能明显抑制左心房收缩力,非竟争性拮抗Iso及CaCl₂对豚鼠左心房的正性肌力作用,PD^2'分别为4.6,4.34,100μmol·L^-1DSPM-Cl延长动作电位时程APD₉₀,有效不应期(ERP),降低高钾除极豚鼠乳头肌0期最大上升速率Vmax,其作用与Ver相似,提示DSPM-Cl可能为钙拮抗剂。     

复方湿生扁蕾提取液镇痛、抗炎及急性毒性研究

目的 研究复方湿生扁蕾提取液的镇痛、抗炎作用,并考查其单次给药的急性毒性反应,为临床用药提供一定的理论依据.方法 通过热板致小鼠疼痛、二甲苯致小鼠耳肿胀模型,观察复方湿生扁蕾提取液对小鼠的镇痛、抗炎作用;通过单次以最大灌胃体积不同浓度给药观察该复方提取液对小鼠的急性毒性.结果 本复方提取液具有一定的镇痛、抗炎作用,复方组给药前后的痛阈差值与空白对照组相比具有显著性差异(P<0.01),复方组对二甲苯致小鼠耳肿胀抑制率达31.7%.100、120 g·kg-1剂量组给药后4 h之内部分小鼠出现昏睡、萎靡少动、进食减少、稀便、反应迟钝等临床症状,这些症状在2d内逐渐消失.观察期间这两复方组体重增长缓慢,观察结束后剖检主要脏器未见肉眼可见病变.结论 在100、120 g·kg-1剂量下发现对小鼠体重具有不良影响,未发现致小鼠死亡及器官性病变的毒性作用,其LD50大于120 g·kg-1,安全性较好,可一定程度上为临床用药提供实验依据.