雌二醇对苯并(a)芘致雄性小鼠肺癌抑制作用

目的 建立苯并(a)芘[B(a)P]诱发雄性昆明小鼠肺癌的动物模型,探讨雌二醇(E2)在该模型中对B(a)P致肺癌作用的影响.方法 将不同组的雄性昆明小鼠分别给予B(a)P、E2干预,每周1次,持续8周,恢复8周后处死,进行形态学观察和病理学诊断,并检测血清超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平.结果 B(a)P组小鼠的肺癌发病率和肿瘤数分别为36.0%和1.154±0.54,明显高于对照组和E2组(P<0.05);B(a)P+E2组小鼠的肺癌发病率和肿瘤数分别为32.0%和0.88±0.33,明显高于对照组和E2组(P<0.05);B(a)P组小鼠的肺癌发病率和肿瘤数高于B(a)P+E2组,肿瘤数差异有统计学意义(P<0.05),而发病率差异无统计学意义(P>0.05).血清MDA水平以B(a)P组最高,B(a)P+E2组及E2组次之,对照组最低;SOD与MDA的趋势相反.结论 建立了灌胃B(a)P诱发雄性昆明小鼠肺癌的动物模型,E2可能通过抗氧化作用减少B(a)P诱发的肺癌肿瘤数.     

苯并(a)芘对不同时相人胚肺成纤维细胞细胞周期的影响

目的研究不同细胞周期状态下,苯并（a）芘[B（a）P]对人胚肺成纤维细胞周期的影响。方法采用血清饥饿的方法使人胚肺成纤维细胞（HELF）同步于G0期,血清再刺激后细胞较为同步地进入周期,分别于G1、S和G2-M期细胞占多数的情况下对细胞进行B（a）P（2、10、50μmol/L）染毒处理,染毒方式分B（a）P经代谢活化和未经代谢活化两种。结果血清饥饿48h,细胞较好地同步于G0期,血清再刺激后10～12h、16～18h、22～24h为G1、S和G2-M期改变明显的时间。未经代谢活化的B（a）P对细胞周期的影响较弱,改良的代谢活化方法既能较好地代谢活化B（a）P,又尽可能避免了对细胞周期的干扰作用。除2μmol/L组在22h引起G1期细胞百分比下降和S期细胞百分比增加外,其他时点和剂量均有S期百分比下降的效应,随着剂量增加,该效应越明显,16h改变最明显;16h出现G2-M期细胞百分比增加的效应;10和22h出现G1期细胞百分比增加和G2-M期细胞百分比下降的效应。结论血清饥饿及再刺激方法能得到处于各时相的细胞;改良的代谢活化方法适合细胞周期研究;B（a）P在实验周期均能引起HELFS期细胞减少,作用于G1期可引起G1期阻滞,作用于S期可引起G2-M阻滞,作用于G2期可引起G1阻滞。     

苯并(a)芘对小鼠肝细胞凋亡的影响

目的探讨苯并（a）芘（BaP）对小鼠肝细胞Fas／Fas—L凋亡信号通路的影响。方法ICR小鼠灌胃染毒，染毒剂量分别为0，5，10，20，40mg／kg，采用免疫组织化学法检测肝细胞Fas、Fas—L、caspase-3基因表达情况，应用吖啶橙／溴化乙啶（AO／EB）荧光双染法检测肝细胞凋亡情况。结果BaP各剂量染毒组肝细胞凋亡发生率及Fas、Fas—L、caspase-3基因表达阳性率与对照组比较差异均有统计学意义（P〈O．05）。结论BaP可诱发小鼠肝细胞发生凋亡。Fas／Fas—L信号通路改变是引起肝细胞凋亡发生的重要途径之一。     

苯并(a)芘对大鼠睾丸支持细胞连接蛋白基因表达的影响

[目的]探讨苯并(a)芘(BaP)对大鼠原代培养睾丸支持细胞的连接蛋白(connexin 43、occludin、ZO-1、N-cadherin)基因mRNA表达的影响及可能机制. [方法]取出生21d SD大鼠睾丸组织,分离支持细胞,细胞分离后,均按照1.5×106个/mL浓度接种于细胞培养板中.培养48h后,以0、1、10、50、100 μmol/L浓度的BaP同时染毒于原代培养的大鼠支持细胞12h,每个剂量设置6个平行孔.检测支持细胞活力、凋亡蛋白caspase-3活性,以及连接蛋白基因的mRNA表达. [结果]在BaP 50 μmol/L时,支持细胞活力降低(和对照组相比,P＜0.01);在BaP 10 μmol/L时caspase-3活性升高,连接蛋白connexin 43、occludin、和ZO-1基因的mRNA表达降低(和对照组相比,P＜0.05).在BaP 100 μmol/L时连接蛋白N-cadherin基因的mRNA表达降低(和对照组相比,P＜0.05).加入caspase-3抑制剂后,BaP所诱导的连接蛋白基因表达下降,且随caspase-3活性变化而发生改变. [结论]BaP能诱导大鼠支持细胞连接蛋白mRNA表达下降,BaP诱导的caspase-3活性上升是调节连接蛋白mRNA表达下降的可能机制.     

030 苯并(a)芘对细胞周期、细胞增殖的影响及相关信号传导途径的作用

以苯并(a)芘及其代谢物为模式化学物,围绕着DNA损伤修复、细胞信号传导途径、细胞周期检测点调控等方面,从化学致癌物对细胞周期的影响角度来阐明化学致癌物的致癌机制已成为当前环境毒理学的热点问题与研究前沿.本文就苯并(a)芘对细胞周期分布与细胞周期调节因子的影响、以及相关信号传导途径在苯并(a)芘对细胞周期与细胞增殖影响中的作用等方面,对苯并(a)芘对细胞周期的影响进行了综述.     

维生素E对苯并(a)芘所致小鼠肺癌的干预作用

目的 研究维生素E对苯并(a)芘所致小鼠肺癌的干预作用.方法 将清洁级昆明种小鼠随机分为9组,每组25只.雌性和雄性B(a)P组灌胃1.8μg/kg B(a)P,每周1次,连续8周.雌性和雄性B(a)P 高剂量VE组和雌性B(a)P 低剂量VE组,在染毒的同时通过食物定量摄入VE,分别为100和50 mg/(kg·d).雌性、雄性对照组和VE组通过灌胃给予橄榄油.计算肺癌发病率和肿瘤数.测定小鼠血清中氧化和抗氧化指标.结果 雌性和雄性B(a)P组的肺癌发病率和肿瘤结节数分别明显高于相应的雌性、雄性对照组和VE组,差异有统计学意义(P＜0.05).雌性B(a)P 高剂量VE组和B(a)P 低剂量VE组肺癌发病率和肿瘤数明显高于对照组、VE组和雌性B(a)P组,差异有统计学意义(P＜0.05).雄性B(a)P 高剂量VE组肺癌发病率和肿瘤数高于对照组和VE组,差异有统计学意义(P＜0.05);与雄性B(a)P组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).与雌性B(a)P组比较,雌性B(a)P 低剂量VE组和雌性B(a)P 高剂量VE组SOD活力明显上升,MDA含量明显减少,ROS明显升高,差异均有统计学意义(均P＜0.05);雌性B(a)P 高剂量VE组GSH-Px升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 VE对B(a)P所致肺癌的影响机制与抗氧化作用无关.VE对B(a)P所致小鼠肺癌没有预防作用,对雌性小鼠可能具有促癌作用.     

苯并(a)芘对大鼠睾丸胰岛素样因子3基因表达的影响

目的 观察青春期大鼠苯并(a)芘(BaP)亚慢性染毒对睾丸间质细胞功能标志物胰岛素样因子3(Ins13)mRNA表达水平的影响.方法 72只青春期健康雄性SD大鼠随机分为溶剂对照组(玉米油)、1、5mg/kgBaP染毒组,每组24只.隔日染毒,等体积灌胃,连续染毒90d.分别于染毒后30、60和90 d,每组各随机选取8只大鼠处死.取睾丸、附睾、心、肝、脾、肾称重并计算脏器系数,放免法检测血清睾酮含量,实时荧光定量PCR法检测睾丸Ins13 mRNA表达差异.结果 60dBaP各染毒组以及90 d5 mg/kg组附睾系数显著低于对照组(P＜0.05);染毒30 d5 mg/kg组肝脏系数显著大于对照组(P＜0.05),90d时显著小于对照组(P＜0.05);血清睾酮水平30 d和60 d 5 mg/kg染毒组明显高于对照组(P＜0.05),90 d 5 mg/kg组明显低于1 mg/kg组(P＜0.05);BaP处理组睾丸Ins13 mRNA表达水平各时相点比对照组显著下调(P＜0.01),染毒60 d比30 d显著下调(P＜0.05),尤其是5mg/kg组(P＜0.01).结论 青春期大鼠BaP亚慢性暴露可以干扰血清睾酮及睾丸Ins13基因表达水平,对附睾、肝脏可能有潜在毒性.     

苯并(a)芘对雄性小鼠生殖细胞毒性作用

目的 研究不同剂量苯并(a)芘对小鼠睾丸细胞酶活性、精子畸变率及生殖细胞DNA损伤影响。方法 采用分光光度法测定小鼠睾丸细胞乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)和山梨醇脱氢酶(SDH)活性;利用单细胞凝胶电泳检测苯并(a)芘对生殖细胞DNA作用;采用精子畸变和微核试验方法检测精子畸变率和精细胞微核率。结果 随着染毒剂量增加,LDH活性逐渐降低,20 mg/kg苯并(a)芘组与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);不同剂量苯并(a)芘均可造成小鼠生殖细胞DNA损伤,5,10,20 mg/kg的损伤率分别为44%,79%和88%,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),精子畸变率和精细胞微核率分别为1.10%,2.24%,3.64%和11.00%,14.40%,17.40%;与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 一定剂量条件下,苯并(a)芘能够影响小鼠睾丸细胞酶活性,导致小鼠生殖细胞DNA损伤,并在一定剂量范围内对雄性小鼠的生殖细胞产生毒作用。     

番茄红素对苯并(a)芘诱发小鼠前胃组织癌变的影响

目的观察番茄红素对苯并(a)芘[B(a)P]诱发小鼠前胃组织癌变过程的影响及其可能的作用机制。方法昆明小鼠随机分成5组(n=30):正常对照组、B(a)P组、番茄红素高[20mg/kg+B(a)P]、中[10mg/kg+B(a)P]、低[5mg/kg+B(a)P]3个不同剂量的实验组,实验组与B(a)P组给予B(a)P,建立前胃癌模型,观察不同浓度的番茄红素对小鼠前胃癌形成的作用;同时用单细胞凝胶电泳法检测外周血淋巴细胞DNA损伤情况,检测超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量。结果正常对照组未见肿瘤形成,其余4组均见肿瘤形成,并经病理证实。番茄红素高、中、低剂量组、B(a)P对照组前胃肿瘤发生率分别为50%、60%、80%、100%。与正常对照组相比,番茄红素高、中、低剂量组和B(a)P对照组MDA含量升高,SOD活性下降,DNA氧化损伤加重,差异有显著性(P<0.05)。与B(a)P对照组相比,番茄红素高剂量组MDA含量降低,高、中剂量组SOD活性升高,DNA氧化损伤减轻,差异有显著性(P<0.05)。番茄红素对GSH-Px影响不显著。结论番茄红素具有抑制肿瘤...     

苯并(a)芘对鲫鱼肝脏总抗氧化能力的影响

目的研究苯并(a)芘对鲫鱼幼鱼肝脏总抗氧化能力(T-AOC)的影响。方法鲫鱼幼鱼分别暴露于3×10-4、3×10-3、3×10-2、3×10-1mg/LB(a)P,于染毒后1、3、6、12d用化学比色法测定T-AOC。结果染毒后第6天,3×10-1mg/L组的T-AOC水平明显低于其他各组(F=5.853,P<0.01),与3×10-2mg/L组比较,差异有显著性(t=7.114,P<0.01)。染毒后第12天,3×10-1mg/L组的T-AOC水平继续下降,而3×10-2mg/L组的T-AOC水平与染毒后第6天的检测结果比较也出现明显下降(t=7.544,P<0.01),与3×10-3mg/L组比较,差异有显著性(t=9.728,P<0.01)。在染毒后第12天,鲫鱼肝脏T-AOC水平与染毒剂量呈现明显的负相关关系(经spearman相关分析,r=-0.581,P<0.01)。3×10-1mg/L组的T-AOC水平随染毒时间的增加而出现明显的下降(经spearman相关分析,r=-0.830,P<0.01)。结论苯并(a)芘暴露可抑制鲫鱼肝脏的T-AOC水平,降低机体对环境毒物及致病因子的抵抗能力。     

中草药及绿茶对B(a)P的抗诱变作用研究

目的 探讨中草药及绿茶对B(a)P的抗诱变作用.方法 采用Ames试验,检测几种中草药和绿茶的水溶性提取物对苯并芘[B(a)P]的抗突变作用.结果 除各受试物的最小剂量组外,其它各试验浓度的绿茶、茶多酚、半枝莲、白花蛇舌草及犀黄丸等5种受试物的提取物均有明显抑制B(a)P诱发的TA98和TA100回复突变的作用.经统计学处理,各实验组与对照组比较有显著性差异(P<0.01).结论 受试的中草药及绿茶对B(a)P具有抗诱变作用.     

全反式视黄酸阻断苯并(a)芘致成纤维细胞周期改变的通路

目的 观察全反式视黄酸（ATRA）逆转苯并（a）芘诱导的人胚肺成纤维细胞（HELF）细胞周期紊乱过程中细胞周期素D1（cyclin D1）、细胞周期素依赖性激酶K4（CDK4）、转录因子E2F-1和E2F-4的作用.方法 用0.1 μmol/L ATRA预处理细胞后,再用2 μmol/L苯并（a）芘作用细胞,用Western blotting方法测定其蛋白表达水平;建立稳定转染了反义cyclin D1质粒和反义CDK4质粒的细胞系,应用反义技术证明上下游关系;用流式细胞技术 测定细胞周期.结果 2μmol/L苯并（a）芘作用于HELF24h后,cyclin D1、E2F-1蛋白表达水平明显增高,CDK4和E2F-4蛋白表达水平无明显变化;用0.1 μmol/LATRA预处理24h后,cyclin D1、E2F-1蛋白表达水平明显下降;与相同作用的对照组相比,苯并（a）芘刺激反义cyclin D1或反义CDK4细胞后E2F-1表达增加的幅度明显降低;与相同作用的对照组相比ATRA预处理的反义cyclin D1或反义CDK4细胞中,苯并（a）芘诱导的E2F-1过表达水平降低的幅度明显降低;流式细胞术测定结果显示,苯并（a）芘诱导细胞从G1期进入S期,ATRA通过聚积G1期细胞而阻滞苯并（a）芘诱导的细胞周期进程.结论 ATRA通过cyclin D1/E2F-1途径阻断苯并（a）芘诱导的HELF的细胞周期改变.     

寒区部队居室苯并（a）芘调查报告

本文调查了寒区部队三市六个营区冬、夏、两季室内外苯并(a)芘的含量。结果表明,冬季室内外苯并(a)芘浓度0.00001～0.1796μg/100m~3,检出率100％;夏季0～0.0085μg/100m~3,检出率27.％8。一日内从早到晚呈上升趋势,但未超过参考标准(0.1μg/100m~3);旧营房居室分别是新营房的3.2、46.0和43.3倍。燃煤取暖的旧营房冬季是夏季的200多倍,提示燃煤取暖是苯并(a)芘含量增高的主要原因。     

药物代谢酶维生素E琥珀酸酯抑制苯并(a)芘

目的　探讨药物代谢酶在维生素E琥珀酸酯 (VES)抑制苯并 (a)芘毒性中的作用。方法　建立B(a)P诱导的小鼠前胃癌模型 ,观察不同途径投予VES对前胃癌的抑制作用。再选择最佳途径观察两相药物代谢酶在此过程中的变化。采用免疫荧光光度法检测小鼠肝脏微粒体 (S - 9组分 )中Ⅰ相药物代谢酶乙氧基异吩恶唑 0 -脱乙基酶(Ethoxyresorufin 0 -deethylase,EROD)活性 ;应用试剂盒测定S - 9组分中Ⅱ相药物代谢酶谷胱甘肽 -S -转移酶(GST)活性。结果　经口投予和腹腔注射VES均可明显降低B(a)P诱导的小鼠前胃癌的发生。VES可显著降低肝脏Ⅰ相药物代谢酶乙氧基异吩恶唑 0 -脱乙基酶 (EROD)的活性 (39 1± 3 0 5 ) ,与阳性对照组 (5 7 9± 3 16 )比较 ,有显著性差异。结论　VES可降低B(a)P诱导的小鼠前胃癌 ,作用机制可能是通过影响肝脏药物代谢酶的活性来实现。     

苯并(a)芘对焦炉工和大鼠体内脂质过氧化水平的影响

[目的]探讨苯并(a)芘[B(a)P]对焦炉工及动物体内脂质过氧化水平的影响。[方法]对134名焦炉工和36名对照组人员进行问卷调查,并检测其血浆中的总超氧化物歧化酶(T-SOD)水平及全血中的谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平;40只雄性SD大鼠分为4组[对照组,B(a)P 1.3 mg/kg组、3．2 mg／kg组、7．8 mg/kg组],分别腹腔注射B(a)P染毒,隔天1次,历时60d后处死,用SOD、MDA、GSH、ROS(活性氧)试剂盒检测血浆中及脑海马回组织的上述指标。[结果]焦炉作业工人血浆中SOD、全血中GSH活性均显著低于对照组(P<0．05);而MDA活性显著性高于对照组(P<0．05)。大鼠血浆中SOD及ROS均值组问差异有统计学意义(P<0．05),MDA均值组间差异无统计学意义(P>0．05)。与对照组相比,B(a)P7．8mg／kg组SOD均值增高,差异有统计学意义(P<0．05);B(a)P 7．8mg/kg组及B(a)P 3．2mg/kg组ROS均值降低,差异有统计学意义(P<0．05)。海马回神经细胞SOD、MDA及GSH均值组间差异有统计学意义(P<0．05)。与对照组相比, B(a)P7．8mg/ks组SOD及GSH均值降低,MDA均值增高,差异有统计学意义(P<0．05);B(a)P 3．2mg/kg组GSH均值降低,差异有统计学意义(P<0．05)。[结论]苯并(a)芘可以引起生物膜脂质过氧化改变,对脑海马回组织的损害比对血液的损害严重。     

B(a)P对鲫鱼全脑NO、NOS水平的影响

目的　探讨苯并 (a)芘 [B(a)P]对鲫鱼全脑一氧化氮 (NO)和一氧化氮合酶 (NOS)的影响及水生态毒理学机制 ,同时为苯并 (a)芘的水污染监测探寻灵敏简便的亚致死指标。方法　设立空白对照、溶剂对照、3× 1 0 -4～ 3×1 0 -1 mg/LB(a)P处理组共 6个实验组 ,分别于染毒后 1 ,3,6和 1 2d取鲫鱼全脑进行检测。 结果　全脑一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶 (NOS)水平与苯并 (a)芘存在着剂量及染毒时间依赖关系。结论　引起体内NOS活性升高及NO的过量产生是苯并 (a)芘在鲫鱼体内发挥毒性的机制之一。     

苯并(a)芘对不同时相人胚肺成纤维细胞阻滞作用

目的 研究低遗传损伤浓度苯并(a)芘(BaP)对人胚肺成纤维细胞(HELF)的细胞周期调控的影响.方法 0.5%血清饥饿法及10%血清再刺激方法获得处于各细胞周期时相的HELF;分别以二甲基亚砜(DMSO)、2,10和50μmol/L BaP于血清再刺激后10~12,16~18和22~24 h作用HELF2 h;采用流式细胞术分析细胞周期分布;采用蛋白印迹法分析细胞周期调控蛋白Cyclin D、Cyclin E、Cyclin A、Cyclin B、P53、P21和P16表达.结果 BaP针对血清再刺激后10~12,16~18和22~24 h作用均引起明显的S期细胞比例的下降;血清再刺激后10~12 h作用引起G0/G1期细胞比例增加,BaP低、中、高浓度组分别为36.79%,42.73%,43.28%,伴随Cyclin D表达明显下降;血清再刺激后16~18 h作用引起G2/M期细胞比例增加,BaP低、中、高浓度组分别为18.46%,23.55%,28.44%,伴随P53和P21表达增强;血清再刺激后22~24 h作用引起G0/G1期细胞比例增加,BaP低、中、高浓度组分别为38.92%,54.08%,51.69%,伴随P53和P21表达增强.结论 BaP针对不同时相的HELF作用顺序激活了G1和G2 2种周期关卡监控机制,并产生相应的周期阻滞效应.     

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1在苯并(a)芘诱导人支气管上皮细胞DNA甲基化改变中的作用

目的 观察苯并(a)芘[benzo(a)pyrene,B(a)P]诱导体外细胞DNA甲基化水平改变,探讨聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1[poly(ADP-ribose)polymerase 1,PARP1]在该过程中的作用.方法 以1.0、2.0、5.0、10.0、15.0、30.0 μmol/L浓度B(a)P分别处理人支气管上皮细胞(16HBE)及其PARP1缺陷细胞(16HBE-shPARP1)72 h.采用免疫荧光和高效毛细管电泳检测其基因组DNA整体甲基化水平改变,同时动态监测PARP1和DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferases 1,DNMT1)表达的变化.结果 16HBE和16HBE-shPARP1细胞基因组整体甲基化百分比(mCpG%)分别为(4.04±0.08)%和(9.69±0.50)%.经5-氮杂脱氧胞苷(DAC)处理72 h后,mCpG%值分别下降为(3.15±0.14)%、(6.07±0.54)%.经B(a)P染毒72 h后,16HBE细胞基因组mCpG%值[B(a)P浓度由低到高]分别为(5.10±0.13)、(4.25±0.10)、(3.91±0.10)、(4.23±0.27)、(3.70±0.15)、(3.08±0.07);16HBE-shPARP1细胞基因组mCpG%值(浓度由低到高)分别为(10.63±0.60)、(13.08±0.68)、(9.75±0.55)、(7.32±0.67)、(6.90±0.49)、(6.27±0.21).两种细胞不同处理组间mCpG%差异有统计学意义(F值分别为61.67、60.91,P值均＜0.01).16HBE细胞各剂量组[B(a)P浓度由低到高]PARP1基因mRNA相对表达水平分别为对照组的141.0%、158.0%、167.0%、239.0%、149.0%、82.9%,差异均有统计学意义(t值分别为11.45、17.32、32.24、33.44、20.21、9.87,P值均＜0.01);16HBE-shPARP1细胞各剂量组(浓度由低到高)PARP1基因mRNA相对表达水平分别为对照组的169.0%、217.0%、259.0%、323.0%、321.0%、256.0%,差异有统计学意义(t值分别为9.06、15.92、22.68、26.23、37.19、21.15,P值均＜0.01).当B(a)P染毒剂量达5.0 μmol/L后,16HBE细胞各剂量组(浓度由低到高)DNMT1基因mRNA相对表达水平分别为对照组的125.0%、162.0%、275.0%、233.0%,差异有统计学意义(t值分别为12.74、24.92、55.11、59.07,P值均＜0.01);当B(a)P染毒剂量达2.0 μmol/L后,16HBE-shPARP1细胞各剂量组(浓度由低到高)DNMT1基因mRNA相对表达水平分别为对照组的135.0%、151.0%、180.0%、229.0%、186.0%,差异有统计学意义(t值分别为23.82、40.17、32.69、74.85、46.76,P值均＜0.01).结论 B(a)P诱导的16HBE细胞基因组整体甲基化水平降低可能是其恶性转化过程中早期重要的分子事件,PARP1可通过抑制DNMT1的酶活性来调节B(a)P诱导的16HBE细胞DNA甲基化水平,这种效应可因PARP1的缺失而缓解.

Abstract：

Objective To investigate DNA methylation variation in human cells induces by B (a)P, and to explore the role of PARP1 during this process. Methods The changes of DNA methylation of 16HBE and its PARP1-deficient cells exposed to B ( a ) P ( 1.0, 2. 0, 5.0, 10. 0, 15.0, 30. 0 μ mol/L ) were investigated by immunofluorescence and high performance capillary electrophoresis, and simultaneously, the expression level of PARP1 and DNMT1 were monitored dynamically. Results The percentage of methylated DNA of overall genome ( mCpG% ) in 16HBE and 16HBE-shPARP1 cells were separately (4. 04 ±0. 08) %and (9. 69 ±0. 50)%. After being treated by 5-DAC for 72 hours,mCpG% decreased to (3.15 ±0. 14)%and (6. 07 ± 0. 54 ) %. After both being exposed to B (a) P for 72 hours, the mCpG% in 16HBE group ( ascending rank ) were separately ( 5. 10 ± 0. 13 ), ( 4. 25 ± 0. 10 ), ( 3.91 ± 0. 10 ), ( 4. 23 ± 0. 27 ),(3.70 ± 0. 15 ), ( 3.08 ± 0. 07 ); while the figures in 16HBE-shPARP1 group ( ascending rank ) were respectively (10.63 ±0.60), (13.08 ±0.68), (9.75 ±0.55), (7.32 ±0.67), (6.90 ±0.49) and (6. 27 ±0. 21 ). The difference of the results was statistically significant ( F values were 61.67 and 60. 91,P＜ 0.01 ) . For 16HBE group, expression of PARP1 and DNMT1 were 141.0%, 158.0%, 167.0%,239. 0%, 149. 0% ,82. 9% and 108. 0%, 117.0%, 125.0%, 162. 0% ,275. 0% ,233.0% comparing with the control group, whose difference also has statitical significance (t values were 11.45,17. 32,32. 24,33.44,20.21 and 9. 87 ,P ＜ 0. 01 ). For 16HBE-shPARP1 group, expression of PARP1 and DNMT1 were 169.0% ,217.0%, 259.0%, 323.0% , 321.0% , 256.0% and 86.0% , 135.0% , 151.0% , 180.0%,229. 0%, 186. 0% comparing with the control group,with statitical significance (t values were 9. 06,15. 92,22. 68,26. 23,37. 19 and 21.15, P ＜ 0. 01 ). When the dose of B (a) P reached 5.0 μmol/L, the mRNA expression of DNMTI in 16HBE group (ascending rank) were 125.0%, 162. 0% ,275.0% ,233.0% times of it in control group, with statistical significance ( t values were 12. 74,24.92,55. 11,59. 07, P ＜ 0. 01 );while the dose of B(a) P reached 2.0 μmol/L, the mRNA expression of DNMT1 in 16HBE-shPARP1 group were 135.0%, 151. 0%, 180. 0% ,229.0%, 186. 0% of the results in control group, and the differences were statistically significant ( t values were 23. 82,40. 17,32. 69,74. 85,46. 76, P ＜ 0. 01 ). Conclusion The hypomethylation of 16HBE cells induced by B(a)P might be one important molecular phenomenon in its malignant transformation process. It suggests that PARP1 could regulate DNA methylation by inhibiting the enzyme activity of DNMT1, and this effect could be alleviated by PARP1-deficiency.     

硒对苯并芘所致细胞DNA链断裂损伤效应的保护

用缺口翻译分析技术检测了苯并芘对人胚肺细胞ＤＮＡ链断裂的损伤效应，并观察了微量元素硒对苯并芘所致细胞ＤＮＡ链断裂损伤效应的保护作用。经０．２５～５μｇ／ｍｌ苯并芘作用后的人胚肺细胞３Ｈ－ｄＴＴＰ掺入量明显增加（Ｐ＜０．０１），表明苯并芘造成了人胚肺细胞ＤＮＡ链断裂损伤。且损伤效应随着苯并芘作用剂量的增加而逐渐增加。经硒保护处理后的人胚肺细胞３Ｈ－ｄＴＴＰ掺入量与单纯苯并芘作用的细胞比较明显下降（Ｐ＜０．０１），证明硒对苯并芘所致人胚肺细胞ＤＮＡ链断裂损伤效应具有保护作用。