ELISA和RPHA法检测4073份血液标本乙肝抗体抗原结果比较

ELISA和RPHA法检测HBsAg的结果呈不同程度的差异，造成临床诊断混乱，为探讨其原因，本文将近三年来用两法同时检测的4073份血液标本作一比较。     

ELISA法检测梅毒螺旋体特异性抗体

建立一种可用于血源筛查检测梅毒螺旋体特异性抗体的方法。方法：要用重组表达的梅毒螺旋体表面膜蛋白Ｐ４７和Ｐ４５作为抗原建立酶联免疫吸附试验．（ＥＬＩＳＡ）法,与甲苯胺红卡片试验（ＴＲＵＳＴ）法对比检测７５例梅毒病人和１２７例相关疾病以及１０６１例献血员的血清,不符合者用螺旋体血球凝集试验（ＴＰＨＡ）法验证。     

一种新的ELISA无毒底物TMBS在血清结核菌抗原检测中的应用

通过实验室操作,介绍3,3,5,5,一四甲基联苯胺硫酸盐(TMBS)作为ELISA底物,应用于血清结核抗原的检测;TMBS的主要优点是无致癌性,敏感性高,显色结果终止后稳定。通过实验确定了TMBS在ELISA中的最佳反应条件;经试用于Ⅲ例各种结核病人血清结核抗原检测,结果敏感性是目前最常用的底物邻苯二胺(OPD)的2.3倍,阳性检出率增加10.81%差异显著(P<0.05)。     

抗体ELISA检测联合丙肝病毒核心抗原检测在丙肝治疗中的意义

目的探讨在丙肝治疗中应用抗体ELISA检测联合丙肝病毒核心抗原检测的意义。方法将2012年10月—2013年11月于该院进行临床申请HCV-RNA检测的325例患者（325份标本）作为研究对象,325例患者全部进行抗体ELISA检测和丙肝病毒核心抗原检测,对不同检测方法的检测结果进行分析对比。结果抗体ELISA检测与丙肝病毒核心抗原检测结果均阳性时,两者联合检测的假阴性率为0%,单用抗体ELISA检测的假阴性率为12.9%,与单用抗体ELISA检测相较两者联合检测的假阴性率明显较低（P〈0.05）;抗体ELISA检测及与丙肝病毒核心抗原检测均阴性时,两者联合检测的假阴性率为0.3%,单用抗体ELISA检测的假阴性率为2.3%,与单用抗体ELISA检测相较两者联合检测的假阴性率明显较低（P〈0.05）;丙肝病毒核心抗原ELISA检测为阳性而抗体ELISA检测为阴性时,两者联合检测的假阴性率为0%,单用抗体ELISA检测假阴性率为75.0%,与单用抗体ELISA检测相较两者联合检测的假阴性率明显较低（P〈0.05）。结论采用抗体ELISA检测联合丙肝病毒核心抗原检测临床样本的假阴性率较低,两者联合检测提高丙肝的诊断符合率,有利于患者预后,具有重要意义。     

用ELISA法检测TORCH病毒特异性抗体在临床应中的价值

目的:ELISA法检测TORCH病毒特异性抗体在临床应用的价值。方法:用ELISA捕获方法对1360例门诊孕妇血清进行TORCH-IgM抗体的检测,并与化学发光法对比。结果:360例血清标本中,ELISA法检测出阳性率分别为TOXO-IgM 1.32%(18/1360)RV-IgM 2.57%(35/1360)CMV-IgM 4.41%(60/1360)和HAS-IgM 2.86%(39/1360)与化学发光法阳性检出率相比较,ELISA法检出阳性率均高于化学发光法,但两种方法检测TORCH病毒特异性抗体阳性率差异无显著性(P>0.05)。结论:ELISA法检测血清TORCH-IgM抗体具有简便、快捷、特异性强的优点,可以广泛用于临床对TORCH病毒感染的辅助诊断及早期筛查。     

多肽抗原检测淋球菌抗体ELISA法的建立及应用

目的建立多肽抗原检测淋球菌抗体的ELISA方法.方法用固相合成肽方法合成2个淋球菌多肽抗原,建立测定淋球菌抗体的酶免疫测定,并对89份正常人血清和47份淋病患者血清进行检测.结果批内测定变异系数为7.1%;批间测定变异系数为10.7%.与金标记的试剂盒平行检测临床标本符合性良好. 结论该方法操作简单,试剂稳定,已制备成试剂盒在国内应用,反映良好.     

多肽抗原检测淋球菌抗体ELISA法的建立及应用

目的建立多肽抗原检测淋球菌抗体的ELISA方法.方法用固相合成肽方法合成2个淋球菌多肽抗原,建立测定淋球菌抗体的酶免疫测定,并对89份正常人血清和47份淋病患者血清进行检测.结果批内测定变异系数为7.1%;批间测定变异系数为10.7%.与金标记的试剂盒平行检测临床标本符合性良好.结论该方法操作简单,试剂稳定,已制备成试剂盒在国内应用,反映良好.     

脂质体在检测血清子宫内膜抗体中的应用

目的　介绍一种以脂质体作为载体检测血清中抗体的实验方法。方法用磷脂酚胆碱、神经节苷脂、胆固醇制备脂质体,在内部包裹碱性磷酸酶（ＡＫＰ）,表面偶联子宫内膜抗原。取１ｍｌ上述溶液加被检血清和补体（豚鼠血清）作用后,再加入ＡＫＰ作用的底物,于４００ｎｍ处测其ＯＤ值。结果脂质体法检测健康孕妇（ＨＦＷ）和不孕症妇女（ＩＦＷ）血清的子宫内膜抗体阳性率分别为０％（０／３０）和３１．５％（３６／１１４）。与ＥＬＩＳＡ法检测的阳性率３％（１／３０）和２９．８％（３４／１１４）相近,且差别无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论脂质体可以作为酶和抗原的载体,检测血清中的抗体。     

ELISA法和MEIA法检测血清甲型肝炎总抗体的比较研究

目的评估酶联免疫吸附法(ELISA)和微粒子酶免疫分析法(MEIA)对血清甲型肝炎总抗体的检测性能,从而说明两种方法在各自实际应用中的区别。方法用ELISA法和MEIA法检测血清甲肝总抗体,再进行两种方法的比较。结果检测同一批血清甲肝总抗体样品:定量检测时ELISA法试剂盒敏感度57.57mIU/mL,变异系数(CV)为10.65%,其结果比MEIA法高,两种方法抗体几何平均滴度(GMT)分别为125.8mIU/mL、58.8mIU/mL;定性检测时41例标本中ELISA法检测39例阳性,MEIA法40例阳性。两法的符合率为97.56%(40/41)。结论定量检测时,MEIA法比ELISA法更精确;定性检测时,ELISA法能客观地反映疫苗的免疫原性和保护效果,与MEIA法结合能大大提高敏感性。     

用单克隆抗体SC3A检测子宫内膜癌组织中的相关抗原

目的:探讨抗人大肠癌单克隆抗体(MAb)SC3A相关抗原在子宫内膜癌组织中的表达。方法:应用免疫组化法检测66例子宫内膜癌,29例子宫内膜非典型增生病变和31例正常子宫内膜组织中MAbSC3A相关抗原的表达,并进行了比较。结果:在三种组织SC3A的阳性表达率分别为81.8%(54/66),51.7%(15/29)和12.9%(4/31)。表明MAbSC3A相关抗原在子宫内膜癌中呈高表达,其阳性率明显高于子宫内膜非典型增生病变和正常子宫内膜,比较显示有显著和非常显著性差异(P<0.05和P<0.01)。结论:提示用MAbSC3A相关抗原检测子宫内膜癌对其有关研究具有实用意义。     

ELISA二步法试剂在献血者抗-TP筛查中的应用

目的了解ELISA二步法试剂在献血者抗-TP筛查中的应用情况并建立预测TPPA结果方案。方法用两个厂家的ELISA方法试剂筛查21 620例无偿献血者血液,有反应性样本用TPPA方法确证,分析同方法不同厂家试剂的检测情况及其与TPPA结果的关系。结果 21 620例样本中抗-TP有反应性的129例,两个厂家试剂的结果和TPPA确证结果均无统计学意义;两厂家试剂有反应性样本和仅一厂家试剂有反应性样本经TPPA确证比较,结果有统计学意义。当S/CO值≥5时,两个厂家的试剂其阳性预测值≥88%;当S/CO值≥10时,两个厂家的试剂其阳性预测值≥98%。结论两个厂家试剂都会出现假阳性反应,应建立预测TPPA结果方案,以减少错误地反馈献血者检测信息的机率。     

H-1细小病毒抗体ELISA检测方法的建立与应用

目的建立H-1细小病毒抗体的ELISA检测方法,并进行初步应用。方法采用大鼠神经胶质瘤细胞C6培养大鼠H-1细小病毒,制备包被抗原,采用纯化后抗原建立该病毒的ELISA检测方法;将建立的方法与国外同类试剂盒进行比对,考察该方法的特异性和灵敏度。同时,应用该方法对35份大鼠血清进行检测。结果所建立的方法可检测出稀释1280倍的阳性血清;与犬细小病毒、小鼠微小病毒和猪细小病毒阳性血清均无交叉反应;与大鼠细小KRV病毒有交叉反应;对35份大鼠血清进行检测,结果均为阴性,与国外同类试剂盒结果一致。结论所建立的H-1细小病毒ELISA检测方法具有良好的种属特异性和灵敏度,可用于大鼠血清中H-1细小病毒抗体检测。     

巨噬细胞移动抑制因子ELISA方法的建立和应用研究

目的建立检测巨噬细胞移动抑制因子含量的ELISA检测法。方法采用方阵滴定法,比较4种封闭液、不同稀释度的捕获抗体、检测抗体和辣根过氧化酶标记链菌素对检测结果的影响,确定ELISA法的最佳实验条件。结果包被用捕获抗体的最适浓度为4mg/L,检测抗体的最适浓度为200mg/L,Streptavidin-HRP的最适稀释度为1∶5000。该方法的检测灵敏度为0.156μg/L,变异系数为7.3%～9.6%,回收率为91.2%～113.6%,与VEGF、TNF-α、IL-6、ICAM-1、胆红素、血红蛋白及甘油三酯均无交叉反应。结论建立的ELISA检测法简便、特异且灵敏,适用于检测血清中的MIF水平。     

乙型脑炎病毒(JEV)ELISA检测方法的建立

目的建立猪乙型脑炎病毒（JEV）抗体ELISA检测方法。方法培养BHK21细胞,接种JEV病毒,制备BHK21正常抗原和JEV特异抗原,滴定酶结合物和抗原最佳工作浓度,并进行精密性、敏感性、稳定性、特异性实验。结果正常、特异抗原和酶结合物最佳工作浓度分别为0.2μg/mL、10μg/mL和1∶20000;正常、特异抗原批内变异系数分别为8.3%和6.4%,批间平均变异系数分别为9.7%和11.5%;检测灵敏度为1∶1280;与猪瘟病毒（CSFV）、猪细小病毒（PPV）均无交叉反应。稳定性试验相对偏差小于25%。结论建立的ELISA方法重复性、稳定性好,特异性、敏感性强。可用于猪JEV抗体的检测。     

氧氟沙星ELISA检测方法的建立

目的:建立氧氟沙星(OFL)的ELISA快速检测方法。方法:在制备抗OFL单克隆抗体基础上,采用间接竞争酶联免疫吸附方法(ciELISA)检测OFL的含量。结果:筛选得到特异性分泌抗OFL的单克隆抗体细胞株3G3和3D9,应用3G3所制备腹水建立的ciELISA工作曲线的线性范围为0.5-128 ng/mL(r2=0.985 8),最低检出浓度为0.5 ng/mL,半数抑制浓度IC50为7.0 ng/mL,样品加样回收率为84%~120%,批内变异系数和批间变异系数均小于15%。结论:本文建立的氧氟沙星ELISA检测法可满足OFL残留检测的需要。     

兔出血症病毒抗原捕获ELISA检测方法

为了有效地预防和根除山羊痘，研制能够区分自然感染和疫苗免疫的标记疫苗。本研究在山羊痘病毒（goat pox virus，GPV）疫苗株AV41胸苷激酶（thymidine kinase，TK）基因克隆、鉴定的基础上，构建转移载体。将痘苗病毒（Vaccinia Virus，VV）晚期启动子P11和大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因（LacZ）报告基因片段插入含有TK片段同源臂的载体pTK的KpnI酶切位点，经酶切、PCR鉴定出，命名为pTK-LacZ。用脂质体法转染感染了GPVAV41株的犊牛睾丸（bovine testes，BT）细胞，待出现80%以上的细胞病变时收获病毒，经过连续9代蓝色蚀斑筛选、纯化和PCR鉴定，获得纯化的表达LacZ基因、TK功能缺失的重组病毒，命名为rGPV-LacZ。生物学特性研究显示，LacZ基因的插入不影响重组病毒的增殖特性，其毒力、生长特性与亲本株相似，保持原有疫苗株的生长特性，而且在BT细胞和羔羊睾丸（lamb testes，LT）细胞连续传20代遗传性状很稳定。本研究筛选、纯化的重组病毒rGPV-LacZ可以区分自然感染和疫苗免疫动物，为进一步研制山羊痘病毒基因工程标记疫苗奠定了基础。     

抗旋毛虫单克隆抗体竞争酶联免疫吸附试验的建立及初步应用

作者选用1株高特异性抗旋毛虫单克隆抗体2G_8B_(10)H_2,建立了单克隆抗体竞争酶联免疫吸附试验(competitive ELISA,简称cELISA),并进行了初步应用。结果表明:20只日本大耳兔在感染旋毛虫后17天有35％呈现阳性,31天全部阳性.对其中5只感染兔的血清终点滴度观察了142天,了解特异性抗体的变化规律.该规律为病程估计提供了线索。另外,其他蠕虫感染兔血清29份无1例假阳性发生。可以认为,单克隆抗体cELISA是一种灵敏、特异的旋毛虫病免疫诊断方法。