用蛋白质A-琼脂糖珠亲和层析提纯免疫球蛋白

提纯免疫球蛋白的方法很多。使用蛋白A-琼脂糖珠(Protein A-Sepharose)可直接从血清中分离纯化IgG,是一种快速简便的方法。 蛋白质A是从葡萄球菌细胞膜中分离出来的。它具有能与马、狗、猪、兔、山羊、绵羊和牛的IgG分子的Fc部分结合的特性,当与交联基质(Sepharose CL-4B)偶联后,可用作亲和层析,直接从抗血清中提取IgG。具体方法如下:     

腺病毒载体介导的共刺激分子融合蛋白对实验性自身免疫性心肌炎的作用

目的探讨腺病毒载体介导的共刺激分子融合蛋白CTLA4Ig与ICOSIg联合治疗对实验性自身免疫性心肌炎（EAM）的作用.方法猪心肌肌球蛋白免疫Lewis大鼠制成EAM模型.分别构建CTLA-4胞外域、ICOS胞外域与人IgG Fc段融合的腺病毒表达载体,常规方法生产表达上述融合蛋白的腺病毒用于治疗,免疫第14天注射后观察至第28天.第28天超声心动图检测心脏功能,苏木素-伊红（HE）染色观察心肌炎症程度,Western blot检测心肌CTLA-4、ICOS、ICOSL及B7-1、B7-2蛋白表达水平,ELISA检测血浆IL-2、IL-4和IFN-γ水平.结果CTLA4Ig、ICOSIg单独或联合治疗均使大鼠心功能指标、心肌炎症程度明显改善.Western blot显示联合治疗组CTLA-4、ICOSL及ICOS、B7-1蛋白表达下调,而B7-2表达差异无统计学意义.细胞因子平衡向TH2方向偏离.结论CTLA4Ig及ICOSIg联合阻断共刺激分子通路减轻EAM自身免疫性心肌损伤,改善大鼠心脏功能.其机制可能通过下调心肌组织CTLA-4、ICOS、ICOSL及B7-1蛋白表达.     

单克隆抗体与HPD交联物对胃癌杀伤效应的实验研究

抗胃癌细胞BGC823的单克隆抗体(MoAb)BB4.3(IgG 2a亚类)经Protein A-Se-Phasose CL-4B亲和层析纯化后与血卟啉衍生物(HPD)在碳二亚胺作用下进行交联,     

脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白NMB0315作为B群流脑疫苗候选抗原的免疫效果

目的研究原核重组表达的B群脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白0315(rNMB0315)在诱导小鼠产生特异性免疫应答中的作用、免疫血清抗体体外杀菌活性和重组蛋白的免疫保护效果,初步评价rNMB0315作为B群流脑疫苗候选抗原的潜力。方法将构建的原核表达载体p ET30a-NMB0315转化大肠杆菌BL21表达重组蛋白,纯化鉴定后的重组蛋白免疫雌性BALB/c小鼠,检测体液免疫和细胞免疫水平;测定血清抗体在补体介导下的体外杀菌活性,观察rNMB0315蛋白疫苗对实验小鼠的免疫保护效果。结果 rNMB0315具有良好的免疫原性,能诱导产生较高水平的体液免疫应答:包括血清特异性IgG、IgG1、IgG2a、IgG3、IgG2b和生殖道黏膜特异性分泌型IgA(s IgA),免疫后第6周抗体效价分别为1∶150 000、1∶85 000、1∶60 000、1∶35 000、1∶30 000和1∶30 000;也能激发较高水平的细胞免疫应答,免疫小鼠脾淋巴细胞增殖反应的刺激指数(SI)值明显高于PBS、Freund佐剂对照组。在免疫的2、4、6周,血清IgG2a/IgG1比值均小于1,提示rNMB0315疫苗以诱导Th2细胞性体液免疫应答为主。rNMB0315疫苗免疫血清在补体介导下的体外杀菌抗体效价为1∶128;72 h内,对实验小鼠的免疫保护率为90%。结论原核表达的rNMB0315具有良好的免疫活性和免疫保护效果,NMB0315外膜蛋白具有作为预防B群流脑蛋白疫苗候选抗原的潜力。     

人HMGB1 B box蛋白的表达、鉴定及其单克隆抗体的制备

目的:表达人HMGB1 B box蛋白,制备其单克隆抗体(mAb),为进一步研究HMGB1 B box在免疫调节和抗感染免疫中的作用奠定基础。方法:将pET28-HMGB1 B box转化DH5α摇菌表达,使用His标记的蛋白纯化柱纯化、鉴定后免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与Sp2/0细胞进行常规融合,经间接ELISA筛选阳性克隆,获得分泌人HMGB1 B box蛋白mAb的杂交瘤细胞株,通过ELISA、Western blot等方法鉴定其特性(mAb的效价、Ig类别及特异性)。结果:成功地建立了2株稳定分泌抗人HMGB1 B box的mAb细胞株,分别命名为1D2F4E3和2D4E3A2。2株mAb的免疫球蛋白类型均为IgG,Western blot显示,2株mAb均能与HMGB1 B box发生特异性反应,其滴度为1×106,mAb1 D2F4E3和2D4E3A2的A450值分别为0.324±0.093和0.296±0.085。结论:获得了2株分泌HMGB1 B box mAb的细胞株,为HMGB1 B box蛋白的生物学功能研究奠定了基础。     

多房棘球绦虫ELP重组蛋白疫苗免疫Balb/c小鼠引起的免疫应答

目的：观察多房棘球绦虫ELP重组蛋白疫苗免疫Balb／c小鼠引起的体液和细胞免疫应答。方法：在成功构建多房棘球绦虫elp基因原核表达载体(pQ-ELP)的基础上，以亲和层析法纯化重组蛋白，SDS-PAGE鉴定，Bradford法进行定量。用ELP重组蛋白(A组)及ELP重组蛋白加弗氏佐剂(B组)免疫Balb／c小鼠(10只／组)，以生理盐水(NS组)作对照。ELISA方法检测免疫后不同时间产生的特异性IgG1，IgG2a和IgG2b水平。双抗体夹心ELISA试剂盒检测免疫鼠脾脏单个核细胞(PMNC)在受到特异抗原刺激后，产生IL-4、IL-12和IFN-γ的能力，^3H-TdR掺入法检测脾淋巴细胞的增殖能力。结果：本研究成功获得高纯度重组蛋白ELP。首次免疫后2周，A、B组小鼠均产生了大量的特异IgGl抗体，B组还产生了少量的特异IgG2b抗体。除B组小鼠脾PMNC产生了微量IFN-γ外，A组、NS组IFN-γ及各组IL-4和IL-12均未检出。A、B组小鼠脾淋巴细胞增殖能力增高，其淋巴细胞CPM值分别为NS组的2．8和10．8倍，受到多房棘球绦虫抗原或刀豆素刺激时，A、B组淋巴细胞增殖更明显。结论：多房棘球绦虫ELP重组蛋白疫苗可引起很强的体液免疫应答和微弱的细胞免疫应答，如与弗氏佐剂联合应用引起的细胞免疫应答会进一步提高。     

重组Bla g2变应原诱导小鼠变态反应气道炎症动物模型的建立

目的建立重组德国小蠊变应原Bla g2（rBla g2）诱导的小鼠变态反应气道炎症动物模型.方法在大肠杆菌中诱导表达Bla g2重组蛋白,用镍亲和柱层析法提纯重组蛋白;24只BALB/c小鼠随机分为德国小蠊粗浸液组（A组）、德国小蠊粗浸液＋重组Bla g2组（B组）、重组Bla g2（C组）、阴性对照组（D组）.分别通过HE染色和PAS染色（periodic acid-Schiff）观察小鼠肺部炎症和黏液分泌;观察支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数和细胞分类;用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测BALF、脾细胞培养上清的细胞因子和血清rBla g2特异的IgE、IgG1、IgG2a抗体.结果成功表达、纯化Bla g2重组蛋白;A、B与C组肺部病理改变呈现明显的变态反应性炎症;BALF中的细胞总数、中性粒细胞数、EOS计数、IL-4、血清抗原特异性IgE抗体、IgG1抗体和脾细胞分泌IL-4均显著高于阴性对照组（P＜0.01）.结论用rBla g2能成功建立小鼠变态反应气道炎症动物模型.     

EB病毒蛋白对免疫球蛋白产生的调节作用

目的检验EB病毒(Epstein-Barr Virus,EBV)蛋白对培养的人B细胞产生免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)的影响.方法用UV灭活和热处理的EBV刺激培养的人脐带血B细胞,流式细胞仪检测UV灭活EBV组细胞CD5、CD3、CD4和CD8的表达,ELISA法检测培养上清中IgG和IgM,同时与EBV转化B细胞产生的IgG和IgM 作对比.结果第14天未检测到T细胞,CD5+B 细胞占43%;28天时CD5+B细胞占47%.UV灭活EBV组第10、18、22和26天IgG A值与对照组相比有显著差异(P＜0.05),第10天以后各时间点IgM A值与对照组相比有显著差异(P＜0.05).EBV转化培养B细胞40天,IgG和IgM A值与同期其它各组有显著差异(P＜0.05).结论EBV蛋白有诱导Ig产生的作用.     

BET蛋白抑制剂JQ1对MRL/lpr狼疮小鼠外周B细胞分化的影响北大核心CSCD

目的:探讨BET蛋白抑制剂JQ1对MRL/lpr狼疮小鼠外周B细胞分化的影响及其治疗作用。方法:12周龄MRL/lpr小鼠分别腹腔注射JQ150 mg/(kg·d)或10%DMSO;每2周检测24 h尿蛋白定量;6周后检测血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、补体C3、补体C4、抗ds-DNA抗体、ANA及IgG、IgG1、IgG2a、IgM等免疫球蛋白水平;PAS染色观察肾脏组织病理学改变,免疫荧光染色观察IgG和C3免疫复合物沉积情况。利用流式细胞术检测小鼠B细胞各亚群细胞的比例;RT-qPCR检测脾脏prdm1 mRNA表达水平。结果:与DMSO组相比,JQ1治疗组小鼠24 h尿蛋白定量显著减少,血清BUN、Cr水平明显降低,补体C3、C4水平明显升高,抗ds-DNA抗体、ANA以及IgG、IgG1、IgG2a和IgM等免疫球蛋白水平明显降低;此外,JQ1治疗组小鼠肾小球、肾血管的病理损害程度均明显减轻,肾脏IgG和C3免疫复合物沉积显著减少。同时,JQ1治疗组小鼠脾脏、淋巴结、外周血B细胞中浆细胞和记忆B细胞亚群的比例显著下降;JQ1治疗亦显著抑制狼疮小鼠B细胞内调节浆细胞分化的关键转录因子prdm1 mRNA表达。结论:BET蛋白抑制剂JQ1对MRL/lpr狼疮小鼠具有显著的治疗作用,通过抑制Blimp1表达进而调节浆细胞分化可能是其发挥治疗作用的机制之一。BET蛋白可能是SLE治疗的新靶标。     

用含A蛋白的葡萄球菌提取人血清IgG的初步探讨

自从1966年Forsgren阐明葡萄球菌A蛋白(SPA)能与人IgG分子的Fc段结合之后,开拓了其在免疫学中应用的新途径。1972年Hjelm采用IgG-Sepharose亲和层析柱分离SPA以及用SPA-Sepharose层析柱提纯IgG,由此简化了IgG的提纯方法。加之Sjholm证明和SPA结合的IgG可     

SARS-CoV核衣壳蛋白用于SARS血清学诊断的研究

目的　研究SARS患者血清中抗SARS冠状病毒 (SARS CoV)核衣壳 (N)蛋白特异性抗体的产生规律 ,评价N蛋白在SARS诊断中的作用。方法　采用间接ELISA法测定 2 5 0例临床确诊、1 88例临床疑似、6 2例临床排除SARS患者血清中针对N蛋白IgG抗体 ,并与其SARS CoVIgG总抗体水平进行比较。结果　临床确诊病例针对N蛋白和全病毒特异性抗体IgG的阳性率均随着病程的延长而增高。N IgG在发病第 1周检出阳性率为 3.4 5 %(4 1 1 6 ) ,第 2周为 6 1 .76 %(42 6 8) ,第 3周为81 .82 %(1 8 2 2 ) ,2 2～ 93d达到 1 0 0 %(44 4 4) ;SARS CoVIgG第 1周检出阳性率为 4 .31 %(5 1 1 6 ) ,第 2周为 5 5 .88%(38 6 8) ,第 3周为 77.2 7%(1 7 2 2 ) ,2 2～ 93d达到 1 0 0 %(44 4 4) ;临床疑似病例N IgG检出阳性率为 3.1 9%(6 1 88) ,SARS CoVIgG检出阳性率为 2 .6 6 %(5 1 88) ;临床排除病例N IgG和SARS CoVIgG检出阳性率均为 6 .4 5 %(4 6 2 )。两种方法检测阳性率差异无统计学意义 (χ2 =0 .1 80 ,P <0 .0 0 1 ) ;两者之间符合率为 98.2 0 %(491 5 0 0 ) ,正常人群SARS CoVN IgG阳性率为 1 .88%(1 4 74 5 )。结论　SARS CoVN重组蛋白对于SARS诊断试剂的研究具有重要价值。     

小鼠肝炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

[目的]制备并鉴定小鼠肝炎病毒(MHV)N蛋白的单克隆抗体(mAb).[方法]以Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达的重组N蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,应用常规杂交瘤技术将免疫小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤进行融合,用间接ELISA方法筛选分泌N蛋白mAb的杂交瘤细胞系.并用Western blot和IFA方法对所获得的mAb进行鉴定.[结果]共获得4株稳定分泌抗N蛋白mAb的杂交瘤细胞系,其亚类鉴定2株为IgG2a,1株为IgG2b,1株为IgG1,轻链均为k型.经鉴定4株mAb均能与重组N蛋白发生特异性反应.[结论]成功获得了特异性抗MHV N蛋白的mAb,为进一步研究N蛋白的结构功能及建立诊断学方法奠定了基础.     

BALB / c 小鼠免疫重组蓖麻毒素B 链蛋白的免疫机制研究

目的:探讨重组蓖麻毒素B 链蛋白(rRTB)免疫雌性BALB/ c 小鼠的免疫机制。方法:雌性BALB/ c 小鼠分为rRTB 组和PBS 组,间隔14 d 皮下多点注射,共4 次。间接ELISA 分析小鼠血清抗体效价和抗体分型,采用流式细胞仪检测脾细胞因子IFN 和IL-4。结果:血清IgG 效价达到1 107 以上,且攻毒后产生二次免疫应答,与PBS 对照组差别有统计学意义(P<0.05);IgG1 达到1 105 以上,与PBS 对照组差别有统计学意义(P<0.05);IgG2a未发生明显变化。细胞因子检测结果表明IFN 的表达量与PBS 组差异无统计学意义,而IL-4 的表达量显著提高(P<0.05)。结论:rRTB 蛋白免疫可刺激小鼠产生高水平的特异性抗体和细胞因子,诱导以IgG1 为主的抗体和Th2 优势应答,为候选疫苗的研制奠定基础。     

HSPs对呼吸道合胞病毒重组蛋白抗原免疫应答的调节作用

目的考察热休克蛋白HSP70对呼吸道合胞病毒(RSV)重组蛋白抗原G1F/M2免疫应答的调节作用。方法构建并表达了Javelin-G1F/M2重组蛋白,在G1F/M2的N端引入Javelin序列,通过该序列可以实现重组蛋白与HSP70蛋白高亲和力结合。以HSP70:Javelin-G1F/M2复合物等免疫Balb/c小鼠,用乳酸脱氢酶释放法测定CTL活性,ELISA法测定IgG及其亚型IgG1和IgG2a抗体滴度,空斑抑制实验测定血清中和抗体。结果经表达和纯化获得了纯度达90%以上的融合蛋白;皮下免疫HSP70:Javelin-G1F/M2复合物可诱导高滴度的IgG抗体和强的CTL应答,其抗体滴度和CTL应答强度均优于Javelin-G1F/M2加铝佐剂腹腔免疫和单独Javelin-G1F/M2皮下免疫。HSP70:Javelin-G1F/M2复合物在诱导中和抗体方面与Javelin-G1F/M2加铝佐剂腹腔免疫基本相当。HSP70:Javelin-G1F/M2复合物可以诱导更强的IgG2a应答,IgG的亚型IgG1/IgG2a的比值明显低于Javelin-G1F/M2加铝佐剂腹腔免疫组和单独Javelin-G1F/M2皮下免疫组。结论 HSP70可能通过增强CTL应答进一步纠正Th2型优势应答,使得Th1/Th2应答更加平衡。     

肺表面活性物质蛋白B、C的提纯及生物活性功能分析

目的为了提高肺表面活性物质的疗效及减少异性蛋白造成的免疫反应,我们对猪肺组织中的肺表面活性物质蛋白B和C进行了提取及纯化.方法用生理盐水灌洗猪肺后,经低温离心,萃取,层析来提取肺表面活性物质蛋白B和C,又用高效液相色谱纯化蛋白B和C.并用膜天平测定所提纯的肺表面活性蛋白SP-B和SP-C的生物活性.结果用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,显示杂蛋白条带明显减少,分子量分别为6.7×1000、17.9×1000.且提纯的蛋白用较好的生物活性.P＜0.05.结论高效液相色谱能在分子水平上纯化肺表面活性物质蛋白B和C,并较好地保持了其生物活性.     

B 群脑膜炎球菌外膜蛋白0315 不同形式疫苗免疫效果比较

目的:初步探讨和评价NMB0315 核酸疫苗、重组蛋白疫苗及核酸疫苗+重组蛋白疫苗联合免疫诱导小鼠产生的特异性体液/ 细胞免疫应答水平及其免疫保护效果,为进一步探索NMB0315 疫苗有效的免疫方法和途径提供实验依据。方法:大量制备核酸疫苗[pcDNA3.1(+) / NMB0315]和重组蛋白疫苗(pET-30a/ NMB0315),采用核酸初免-蛋白加强的方法联合免疫或分别免疫雌性BALB/ c 小鼠,测定特异性体液/ 细胞免疫应答水平、免疫血清体外杀菌效价,观察疫苗对感染B 群脑膜炎球菌小鼠的免疫保护效果。结果:NMB0315 核酸疫苗组(pNMB0315-CpG)、蛋白疫苗组(rNMB0315-FA)及联合免疫疫苗组(pNMB0315-CpG+rNMB0315-FA)诱导的血清特异性IgG、IgG1、IgG2a 及生殖道灌洗液中特异性sIgA 水平在第八周达到峰值,A450 值分别为(0.505±0.042、0.513±0.022、0.342±0.017、0.250±0.015)、(0.823±0.061、0.807±0.045、0.596±0.027、0.450±0.028)和(0.694±0.053、0.711±0.032、0.455±0.021、0.386±0.024),明显高于PBS 对照组(P<0.01);其中,蛋白疫苗组的抗体水平明显高于联合免疫疫苗组和核酸疫苗组(P<0.05)。小鼠脾淋巴细胞刺激指数及IFN-γ酌水平,联合免疫疫苗组明显高于蛋白疫苗组和核酸疫苗组(P<0.05);核酸疫苗组、蛋白疫苗组和联合免疫疫苗组免疫血清在补体介导下的体外杀菌抗体效价分别为1 :64、1 :128 和1 ：128,对实验小鼠的免疫保护率分别为70%、95%和80%。免疫2、4、6、8 周时,核酸疫苗组、重组蛋白疫苗组和联合免疫疫苗组IgG2a/ IgG1 比值均小于1。结论:NMB0315 疫苗诱导的体液免疫(包括黏膜免疫)效果从高到低为:重组蛋白疫苗组、联合免疫疫苗组、核酸疫苗组;诱导细胞免疫的效果从高到低为:联合免疫疫苗组、核酸疫苗组、重组蛋白疫苗组; NMB0315 疫苗对实验小鼠的免疫保护效果从高到低为:重组蛋白疫苗组、联合免疫疫苗组、核酸疫苗组。     

母体IgG对N-甲基-D-天冬氨酸诱导乳鼠痉挛发作模型的作用及其对脑FOS蛋白的影响

目的探讨母体IgG对N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）诱导Wistar乳鼠痉挛发作模型抗痉挛的作用机制及其对脑内FOS蛋白的影响。方法从母鼠取血后提取γ球蛋白,采用离子交换法（DEAE-52）提纯大鼠母体IgG。将30只Wistar乳鼠随机分为3组：对照组（n=6）,NMDA组（n=12）和母体IgG组（n=12）。母体IgG组生后第11天起,于8：00时连续给予皮下注射所提取的各自母体IgG10mg·kg^-1·d^-1,所有注射剂量均稀释至5mL。对照组和NMDA组同时同部位注射等剂量生理盐水。NMDA组和母体IgG组生后第15天在分别注射生理盐水和母体IgG1h后,给予腹腔注射NMDA15mg·kg^-1·d^-1,诱发大鼠痉挛发作,制作Wishar乳鼠痉挛发作模型。对照组则在皮下注射生理盐水1h后腹腔注射生理盐水15mL·kg^-1。观察比较NMDA组和母体IgG组痉挛发作情况,采用免疫组化法观察各组乳鼠脑神经细胞FOS蛋白阳性细胞的表达数量。结果①对照组始终未出现临床症状。NMDA组抱团样发作总次数较母体IgG组明显增多（336次vs109次,P〈0.05）;NMDA组致症状评分为5.67分,母体IgG组为3.53分,差异有统计学意义（P=0.012）。母体IgG组抱团样发作潜伏期≥40min的比例为80%,NMDA组为32%,差异有统计学意义（P=0.022）。②NMDA组FOS蛋白阳性细胞呈弥漫性分布,其中以皮质、梨状皮质、海马和丘脑表达最多,染色深,其中皮质Ⅰ-Ⅴ均可见大量的FOS蛋白阳性细胞。母体IgG组FOS蛋白阳性细胞在以上各个脑区表达普遍减低。结论NMDA组FOS蛋白阳性细胞呈弥漫性分布、色深,其表达是对损伤刺激的早期反应,乳鼠痉挛发作模型FOS蛋白表达和NMDA受体分布部位基本一致。皮质、丘脑和海马、梨状皮质等边缘系统可能是NMDA诱导痉挛发作的主要结构。母体IgG具有抗痉挛作用,并可脑内使FOS蛋白表达降低。     

变形链球菌GbpA的GBD融合蛋白诱导SD大鼠产生免疫应答

目的 研究变形链球菌葡聚糖结合蛋白A(glucan binding protein-A，GbpA)的GBD融合蛋白免疫SD大鼠时，其所诱导的血清和唾液特异性免疫反应。方法 用纯化的变形链球菌GbpA的GBD融合蛋白皮下免疫SD大鼠，免疫后间隔一定的时间收集大鼠的血清及唾液，间接ELISA检测血清及唾液中特异性抗GBD抗体。结果 GBD融合蛋白免疫大鼠，可引起血清中IgG及唾液中IgA的显著提高。另外，GBD融合蛋白免疫大鼠，38d采血，血清中抗GBD抗体效价最高，后逐渐降低。结论 变形链球菌GbpA的GBD融合蛋白具有免疫原性，可供研制防龋疫苗参考。     

淀粉样蛋白对大鼠海马神经元驱动蛋白超家族基因表达的影响

目的:探讨淀粉样蛋白脑室注射对大鼠皮层与海马神经元驱动蛋白超家族(KIF)基因表达的影响。方法:脑室定向注射淀粉样蛋白复制大鼠阿尔兹海默病动物模型,水迷宫实验验证大鼠记忆损伤程度。RT-PCR方法检测大鼠皮层与海马ChAT、KIF1A、KIF2、KIF3A、KIF4与KIF5A基因的表达。结果:水迷宫实验与ChAT表达检测证实动物模型复制成功。RT-PCR结果表明淀粉样蛋白造成大鼠皮层与海马KIF基因表达的普遍上升。结论:淀粉样蛋白造成的皮层与海马胆碱能神经元损伤很可能是通过其兴奋性毒性作用实现的。     

链脲佐菌素敏感的胰岛细胞表达亨廷顿蛋白相关蛋白1

目的探讨亨廷顿蛋白相关蛋白1（HAP1）在大鼠胰岛中的定位.方法应用一次性大剂量腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin）的方法选择性破坏大鼠胰岛B细胞复制糖尿病模型,免疫组织化学ABC法显示胰岛内HAP1和胰岛素免疫反应性.结果在正常大鼠胰腺内,HAP1选择性表达于胰岛内,HAP1免疫反应阳性细胞呈短条索状或团状分布在每个胰岛内,主要位于胰岛的中央部,与胰岛B细胞的分布十分相似.注射链脲佐菌素的大鼠,胰岛中含HAP1的细胞数量在注射链脲佐菌素3d后已明显减少,并随着注射后动物存活时间的延长而进一步进行性减少;在注射后4周的大鼠,胰岛中仅有少数散在分布的HAP1免疫反应弱阳性细胞.链脲佐菌素对胰岛中表达HAP1细胞的影响与对表达胰岛素细胞的影响一致.结论HAP1也存在于胰岛内,并主要定位于链脲佐菌素敏感的B细胞内.