胸腔积液腺苷脱氨酶活性、总蛋白水平及二者比值对结核性胸膜炎的诊断价值

目的:分析胸腔积液中腺苷脱氨酶(ADA)活性、总蛋白(TP)水平以及二者比值(ADA/TP)对结核性胸膜炎(TPE)的诊断价值。方法:收集胸腔积液住院患者128例,根据临床诊断分为TPE组(n=64)和非TPE组(n=64)。使用全自动生化分析仪测定胸腔积液中ADA活性和TP水平,并计算ADA/TP。统计学分析两组间ADA活性、TP水平及ADA/TP差异及对TPE的诊断效能。结果:TPE组胸腔积液ADA活性、TP水平及ADA/TP均高于非TPE组,差异有统计学意义(均P<0.01)。受试者工作特征(ROC)曲线显示胸腔积液ADA、TP、ADA/TP诊断TPE的曲线下面积(AUC)依次为0.86、0.71及0.90。以ADA 17.50U/L为Cut-off值,其诊断TPE的灵敏度和特异度分别为90.06%和70.30%;以TP 43.25g/L为Cut-off值,其诊断TPE的灵敏度和特异度分别为89.10%和53.10%;以ADA/TP 0.56为Cut-off值,其诊断TPE的灵敏度和特异度分别为92.90%和74.40%。结论:胸腔积液ADA、TP及ADA/TP对诊断TPE均具有中等价值,其中ADA/TP好于ADA和TP。     

脑脊液腺苷脱氨酶测定在小儿结核性脑膜炎诊断中的应用

目的:探讨脑脊液腺昔脱氨酶(ADA)活性测定在小儿结核性脑膜炎诊断中的应用价值。方法:选择结核性脑膜炎35例、病毒性脑膜炎36例、化脓性脑膜炎32例及非脑膜炎40例,测定并比较各组患者脑脊液ADA活性及阳性率。结果:结核组脑脊液ADA活性和阳性率明显高于非结核组,差异有显著性(P<0.05);结核性脑膜炎组治疗前后脑脊液ADA活性比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:脑脊液腺苷脱氨酶可作为诊断结核性脑膜炎的重要参考指标。     

巨噬细胞条件培养基神经营养活性成分的分离,纯化和鉴定

用快速自动比色微量分析法检测巨噬细胞条件培养基(MΦCM)对体外培养的生后7d SD大鼠小脑皮质神经元的作用。结果表明,MΦCM内分子量大于30kD的组分(加入量40μl/孔)对神经元(细胞密度1×10~5/孔)具有明显的神经营养活性,与对照组相比有显著性差异(P<0.01)。盖片培养法证明,此组分还具有促神经元突起生长的作用。另外,把MΦCM进行Sephadex G-100凝胶层析及生物活性鉴定,获得具有神经营养活性的第一峰洗脱液。降此洗脱液及上述MΦCM分子量大于30kD的组分经SDS-聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳分析,证明MΦCM中含有支持神经元生存和增强其活性作用的成分,是一种分子量为97.9kD的蛋白质。     

血清腺苷脱氨酶在肝病诊断中的特异性

目的:通过测定血清中腺苷脱氨酶(ADA)的活性,来了解ADA在肝病诊断中的临床价值和特异性。方法:用速率法测定肝功能损伤者和正常健康人组的腺苷脱氨酶及转氨酶(ALT)值。结果:通过ADA及ALT的测定结果,表明77例病人ADA与ALT值明显高于正常人,除黄疸标本升高不明显外,其余各组均有非常显著的升高。结论:ADA对各肝脏疾病的诊断有较高的特异性,对肝脏功能是否损伤有一定的临床意义。     

腺苷脱氨酶在巨噬细胞激活中的作用

腺苷脱氨酶(ADA)主要是与嘌呤核苷的细胞内运转和利用有关的一个酶。遗传性缺乏此酶的人,体液和细胞免疫均缺损而呈严重的联合免疫缺陷状态。许多研究表明,ADA对淋巴细胞尤其对T细胞的成熟和功能至关重要。用ADA特异性抑制剂人工造成ADA缺乏的淋巴细胞失去对有丝分裂原的反应和对同种异体移植物的排斥能力。ADA抑制剂也影响单核细胞的成熟,但关于ADA在单核细胞或巨噬细胞功能激活中的作用无所了解。本文目的是研究豚鼠腹腔巨噬细胞功能与ADA活性之间的相关性。     

孕小鼠注射海洛因对仔鼠大脑颞叶皮层结构及ADA、SDH、NOS、GSH活性的影响

目的 探讨海洛因对发育中仔鼠大脑颢叶皮层结构及腺苷脱氨酶(ADA)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、一氧化氮合酶(NOS)及还原型谷胱甘肽(GSH)活性的影响. 方法对48例受孕小鼠(第8天开始)分别连续注射3种不同浓度(1.0 g/L、1.5g/L和2.0g/L)的海洛因溶液和等量的生理盐水至小鼠分娩,称量检测各实验组仔鼠在胚胎15d(E15)及生后1d、7d、15d时大脑重量的变化,用生物显微技术观察仔鼠大脑颞叶皮层结构的变化,用比色法检测仔鼠大脑ADA、SDH、NOS、GSH的活性变化. 结果 海洛因影响仔鼠脑的发育,实验组仔鼠大脑重量明显低于对照组;实验组仔鼠大脑颞叶皮层结构不清,神经元发育不良,皮层厚度减少,除在E15和生后1d大脑颞叶皮层第Ⅵ层神经元细胞数量高于对照组外,其他发育期各层神经元细胞数量均小于对照组;1.0g/L、1.5g/L和2.0g/L 3个剂量组在E15时,胎鼠大脑中ADA、SDH及NOS活性高于对照组,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01),GSH活性低于对照组,差异极显著(P<0.01);仔鼠在生后15d的发育过程中,1.0g/L剂量组仔鼠大脑中ADA、SDH、NOS及GSH的活性逐渐恢复到正常水平;1.5g/L剂量组大脑中NOS和SDH的活性逐渐恢复到正常水平,但ADA的活性仍高于对照组,GSH的活性仍低于对照组;2.0g/L剂量组仔鼠大脑中ADA、SDH、NOS的活性在生后15d时仍保持较高的水平,GSH的活性仍低于对照组.双因素方差分析表明,剂量因素对结果的影响大于时间因素. 结论 海洛因影响发育期仔鼠大脑的重量和组织结构,这可能与脑内ADA、SDH、NOS活性升高和GSH活性下降有一定的相关性.     

脑创伤组织提取液的神经营养活性及其活性因子来源的探讨

切除成年大鼠大脑双侧顶叶部分皮质,在术后不同时间取损伤周围脑组织,制成脑创伤组织提取液(BWTE);并建立新生大鼠大脑皮质神经元体外培养模型,检测BWTE中的神经元营养因子(NTFs)和促神经突起生长因子(NPFs)。为探讨这些因子的来源,是否与脑创伤区早期出现大量的巨噬细胞有关,我们培养巨噬细胞,收集巨噬细胞条件性培养基(MφCM),检测MφCM对大脑皮质神经元的神经营养活性。此外,亦观察BWTE和MφCM对PC 12细胞的作用,以进一步探讨NPFs的作用机制。实验结果表明,BWTE和MφCM中含有对大脑皮质神经元的NTFs和NPFs。这些因子于脑损伤后第4天开始出现,第5天达高峰(NPFs在第9天还出现一个高峰),第13天仍有活性。MφCM的NTF活性不及BWTE,但NPF活性则比BWTE强。BWTE和MφCM对PC 12细胞也具有NPF活性。通过实验分析认为,BWTE中的神经营养因子,早期主要来源于巨噬细胞,后期可能与星形胶质细胞有关。这些因子成分复杂,可能含多种有效成分,有待今后进一步探讨。     

输卵管妊娠与巨细胞病毒活性关系研究

目的 研究输卵管妊娠与巨细胞病毒(HCMV)活性关系。方法 应用聚合酶链反应(PCR)技术检测输卵管妊娠妇女宫颈分泌物及输卵管液中巨细胞病毒(HCMV-DNA);用ELISA法检测血清中HCMV-IgG、HCMV-IgM。结果 输卵管妊娠组宫颈分泌物和输卵管液中HCMV-DNA检出率依次为80.9％和71％,显著高于正常妊娠组有极显著性差异(P<0.001);输卵管妊娠组宫颈分泌物与输卵管液中HCMV-DNA检出率比较无显著性差异(P>0.05);输卵管妊娠组血清HCMV—IgG、IgM检出率分别为90％、65％较正常妊娠组有显著性差异(P<0.01)。结论 输卵管妊娠妇女中HCMV活动性感染较高。     

急性病毒性肝炎患者外周淋巴细胞腺苷脱氨酶活性与T淋巴细胞花环形成的关系

外周淋巴细胞腺苷脱氨酶(ADA)缺陷可影响机体的免疫机能,ADA对T淋巴细胞的分化具有一定作用。急性病毒性肝炎患者可出现细胞免疫应答障碍。因此,本文旨在探索急性病毒性肝炎患者ADA活性变化及其与T淋巴细胞花环形成百分率的关系。本文检测20例急性病毒性肝炎患者,年龄20～50岁。经临床、免疫学及生化学检查     

宫颈腺癌伴CIN3及双侧卵巢Brenner瘤1例并文献复习

目的探讨宫颈腺癌(uterine cervix adenocarcinoma)伴宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)3的临床与病理学特征。方法对1例宫颈腺癌伴CIN3进行液基细胞学、组织学检查及免疫组化染色,并复习相关文献。结果患者50岁,宫颈液基细胞学检查发现原位腺癌(ade-nocarcinoma in situ,AIS)及高级别鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)结构。宫颈活检结果为高分化腺癌伴CIN3,术后病理显示宫颈高分化腺癌伴CIN3,双侧卵巢Brenner瘤。免疫组化标记宫颈腺癌及CIN3两种病变p16、Ki-67均强阳性。结论宫颈腺癌伴CIN3是一种十分少见的恶性肿瘤,液基细胞学普查对宫颈肿瘤的早期发现具有重要价值。     

乙肝患者淋巴细胞内腺苷脱氨酶活性变化与T-淋巴细胞亚群的关系

腺苷脱氨酶(adenosine deaminase, ADA)是一种与机体细胞免疫系统有重要关系的核酸代谢酶.近年的研究证实:ADA测定对肝胆疾病的诊断和鉴别诊断具有一定的临床价值[1,2],但尚未见有乙肝患者淋巴细胞内ADA活性变化与T-淋巴细胞亚群关系的报道,为此,我们进行了探讨,现将结果报道如下:     

两性霉素B通过NF-κB通路对小鼠隐球菌性脑膜炎脑组织中小胶质细胞及炎性因子的影响

目的探讨两性霉素B是否通过NF-κB通路对小鼠隐球菌性脑膜炎脑组织中小胶质细胞及炎性因子产生影响。方法以C57BL/6小鼠为研究对象,分为假手术组(sham组)、隐球菌性脑膜炎模型组(CM组)、两性霉素B低剂量组(CM+AmB-L组,0.5mg/kg)和两性霉素B高剂量组(CM+AmB-H组,1 mg/kg),HE染色观察小鼠脑组织病理变化,ELISA检测小鼠脑脊液中TNF-α、IL-6和IL-10的水平变化,提取原代小胶质细胞并测定小胶质细胞活力,免疫组化检测小胶质细胞中Iba1的表达情况,免疫荧光染色检测小胶质细胞中Rab5的表达情况,流式细胞仪检测小胶质细胞中Caspase-3活性的变化,Western blot检测NF-κB信号通路相关蛋白的表达水平。结果 CM组小鼠脑组织中发现大面积炎症部位和隐球菌生物,CM+AmB-L组和CM+AmB-H组小鼠脑组织中炎症部位和隐球菌生物明显减少;CM组小鼠脑脊液中TNF-α、IL-6的含量明显升高(均P0.01),IL-10的含量明显下降(P0.01),CM+AmB-L组和CM+AmB-H组小鼠脑脊液中TNF-α、IL-6的含量下降(均P0.05),IL-10的含量升高(均P0.05);CM组小胶质细胞活力明显升高(P0.01),CM+AmB-L组和CM+AmB-H组小胶质细胞活力降低(均P0.05);CM组中Iba1呈阳性表达(P0.001),Rab5的表达明显下调(P0.001),CM+AmB-L组和CM+AmB-H组中Iba1的阳性表达降低(均P0.05),Rab5的表达上调(均P0.05);CM组小胶质细胞中Caspase-3活性显著降低(P0.001),CM+AmB-L组和CM+AmB-H组小胶质细胞中Caspase-3活性升高(均P0.05);CM组小鼠脑组织中TLR4、NF-κB p65蛋白显著上调(P0.001),CM+AmB-L组和CM+AmB-H组小鼠脑组织中TLR4、NF-κB p65蛋白下调(均P0.05)。结论两性霉素B通过抑制NF-κB通路的激活,下调小胶质细胞活力来治疗隐球菌引起的脑膜炎。     

乙肝患者淋巴细胞内腺苷脱氨酶活性变化与T—淋巴细胞亚群？…

腺苷脱氨酶(adenosine deaminase, ADA)是一种与机体细胞免疫系统有重要关系的核酸代谢酶.近年的研究证实:ADA测定对肝胆疾病的诊断和鉴别诊断具有一定的临床价值[1,2],但尚未见有乙肝患者淋巴细胞内ADA活性变化与T-淋巴细胞亚群关系的报道,为此,我们进行了探讨,现将结果报道如下:     

联合检测IFN-γ、VEGF-C、CRP及ADA对结核性与恶性胸腔积液鉴别诊断的价值

目的探讨干扰素-γ(IFN-γ)、血管内皮生长因子(VEGF-C)、C-反应蛋白(CRP)及腺苷脱氨酶(ADA)在结核性与恶性胸腔积液鉴别诊断中的应用价值。方法检测122例临床确诊的胸腔积液患者(恶性胸腔积液56例,结核性胸膜炎48例,其他类型18例)胸水和血清中的IFN-γ、VEGF-C、CRP及ADA含量。结果结核组的IFN-γ、CRP浓度及ADA活性明显高于恶性肿瘤组,差异有统计学意义(P0.01),根据受试者工作特征(ROC)曲线结果判断,以100ng/L为临界值,IFN-γ对结核性胸腔积液诊断的灵敏度、特异性分别为83.1%、92.3%;以45U/L为临界值,ADA对结核性胸腔积液诊断的灵敏度、特异性分别为85.6%、96.3%;以110mg/L为临界值,CRP对结核性胸腔积液诊断的灵敏度、特异性分别为79.1%、84.2%;三项指标联合检测,其灵敏度、特异性分别达到87.8%和86.0%。恶性胸腔积液中VEGF-C高于结核性及其他类型胸腔积液(P0.01);VEGF-C/ADA≥8对恶性胸腔积液诊断的灵敏度、特异性分别为86.3%、82.6%;VEGF-C/ADA≤3对结核性胸腔积液诊断的灵敏度、特性度分别为85.1%、87.1%。结论联合检测IFN-γ、VEGF-C、CRP及ADA可以提高结核性胸膜炎诊断的灵敏度及特异性,VEGF-C与ADA浓度比值对胸腔积液的鉴别诊断具有较好的临床价值。     

31 巨噬细胞条件培养基的神经营养活性组分的分离、纯化和鉴定

<正>我们实验室先前的工作曾发现巨噬细胞条件培养基(M(?)CM)有支持中枢神经元生存和生长的作用,并初步证明其活性组分是M(?)CM中分子量大于10KD的部分.本文对该活性部分再进一步分离、纯化和鉴定.一方面,把该分子量大于10KD组分的M(?)CM经Centrio-30微浓缩器(microconcentrator)离心,分离出分子量10～30KD和>30KD两个组分.用快速自动比色微量分析法(MTT比色微量分析法)检测它们对体外培养的生后7天SD大鼠小脑皮质神经元的作用.结果表明:M(?)CM分子量>30KD的组分(加入量40μl/孔)对神经元具有明显的生物活性,与对照组相比有显著性差异(P<0.01).将此组分经SDS-聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳,呈现一条明显的主带,分子量在95KD左右.另方面,把分子量大于10KD组分的M(?)CM进行SePhadexG-100层析,得到三个主峰的洗脱液.用MTT比色微量分析法检测它们对小脑皮质神经元作用,证明第一峰洗脱液具有神经营养活性,经SDS-聚丙烯酸胺梯度凝胶电泳,同样呈现一条明显的主带,在95KD左右.以上两方面实验的结果相吻合,提示M(?)CM的神经营养活性组分为95KD左右的蛋白质分子.     

脂酶缺乏

脂蛋白脂酶(LL)和肝脏甘油三酯脂酶(HTL)都与乳糜微粒(CM)和极低密度脂蛋白(VLDL)的甘油三酯的水解有关。LL的活性与载脂蛋白CⅡ(ApoCⅡ)有必然联系。本文将从生化和临床角度对LL缺乏(家族性高脂蛋白血症Ⅰ型),HTL缺乏和ApoCⅡ缺乏进行探讨。乳糜微粒(CM)和极低密度脂蛋白(VLDL)中甘油三酯的水解至少有两种酶催化,即脂蛋白脂酶(LL)和肝脏甘油三酯脂酶(HTL)。它们都是糖蛋白,均存在于毛细血管的内皮细胞中。LL和HTL的主要区别是LL的完全活化依赖于ApoCⅡ。ApoCⅡ对LL的活性是一个复合因子,而HTL的活性     

富含溶酶体的细胞具有LAK细胞的溶解活性

人们已经确定了人和鼠LAK细胞的溶细胞特异性及动力学性质,但对其群体中的效应细胞所知甚少。已有人报道了NK细胞和T细胞杀伤作用中富含溶酶体细胞的重要作用。本文首次确定了溶酶体在LAK细胞溶解活性中的作用并利用这个特性测定了LAK细胞的溶解活性。作者用10~(-7)M quinacrine(奎纳克林)在37℃、完全培养基(CM)中对LAK细胞(10~6/ml)染色20分钟,用CM洗涤3次后,用荧光激活的细胞分离仪(FACS)     

慢性肝炎患者血清ADA活性与HA、PⅢP的诊断价值探讨

目的:探讨了慢性肝炎患者血清腺苷脱氨酶活性与HA、PⅢP的诊断价值.方法:应用全自动生化分析仪检测36例慢性肝炎患者血清腺苷脱氨酶活性,放射免疫分析检测HA、PⅢP 含量,并与35名正常健康人作比较.结果:慢性肝炎患者血清腺苷脱氨酶(ADA)活性和HA、PⅢP 含量均非常显著地高于正常人组(P＜0.01),且血清ADA活性水平与HA、PⅢP 水平呈明显的正相关(r=0.6117、0.7134,P＜0.01).结论:检测慢性肝炎患者血清ADA活性可反映肝脏合成储备功能,也可提示体内有活性肝纤维化,是一个十分有用的临床检测指标.     

不明原因不孕妇女宫颈粘液中抗精子抗体、IL-2和IFN-γ的测定

不孕的原因十分复杂,由免疫学因素造成的不孕近年来引起人们极大关注.作者检测49例不明原因不孕妇女和30例正常妇女宫颈粘液(CM)中细胞因子与抗精子抗体(AsAb)水平,探讨它们与不孕的关系.     

人宫颈粘液抗菌机制:抗菌多肽的分离鉴定

目的：从人的了宫颈枯液分离鉴定抗菌多肽。探讨子宫颈粘液抗菌机制。方法：用5％乙酸提取人子宫领枯液可溶物,应用电泳凝胶抗菌蛋白分析法(gel overlay assay)分析其抗菌蛋白,制备性酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳(AU-PAGE)及反相高效液相色谱(HPLC)分离纯化抗菌多肽。凝胶琼脂糖弥散法抗菌检测抗菌活性。纯化的抗菌多肽进行氮端氨基酸序列测定,