系列单克隆抗体分析癌胚抗原的决定簇图谱及生化特性

用7个抗癌胚抗原(CEA)、2个抗血型Lewis~v和H-2型抗原和2个抗上皮生长因子受体之系列单克隆抗体,分析了CEA的决定簇图谱、生化稳定性。结果表明,7个抗CEA的单抗有5个识别特异性抗原决定族,而另2个的决定簇与正常交叉抗原(NCA)有交叉。决定簇图谱分析表明,有2个单抗的对应决定簇是独立的,与其它的决定簇无交叉,且是识别CEA的特异决定簇;另5个单抗的决定簇彼此有交叉,但不完全一致。确定了CEA分子中包含血型前体抗原Lewis~y的决定簇。依据系列单抗对CEA的免疫学和生化稳定性分析,对其抗原决定簇进行了分类。     

用单克隆抗体对西尼罗病毒的抗原分析（文摘）

西尼罗(West Nile)病毒是黄病毒属中经蚊传播的成员，广泛分布于非洲、亚洲及欧洲的部分地区，主要引起地方性和流行性人类感染。亚尼罗病毒体为单链RNA基因组，含有表面囊膜(E)、衣壳(C)及膜样(M）三种结构蛋白。E蛋白含有大多数涉及免疫反应的抗原决定族。     

抗幽门螺杆菌单克隆抗体的制备与特性研究

幽门螺杆菌 (Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ,Ｈｐ)感染是人类最常见的慢性细菌感染 ,可导致胃炎、消化性溃疡和胃癌等 ,还可引起口腔溃疡 ,与一些非胃肠疾病如发育不良、冠心病、糖尿病和胆石症等的发生有关[1,2 ] 。幽门螺杆菌粪抗原 (Ｈｐｓｔｏｏｌａｎｔｉｇｅｎ ,ＨｐＳＡ)检测是一种诊断Ｈｐ感染的新技术 ,其诊断准确性可达 90 %以上 ,同时具有简便快速、价格低廉、对病人无任何创伤 ,可不需任何仪器等优点[3 ,4 ] 。本研究采用传统的杂交瘤细胞技术 ,通过制备效价高、特异性好的抗Ｈｐ单克隆抗体 ,为Ｈｐ抗原检测技术的建立…     

以DNA免疫和细胞抗原加强制备抗DAF单克隆抗体及特性分析

目的:联合应用DNA免疫和细胞抗原加强制备抗DAF单克隆抗体(mAb)并鉴定其特性。方法:利用分子克隆的方法构建重组质粒pcDNA3.1/DAF。以其免疫BALB/c小鼠股四头肌3次,并在融合前用表达DAF分子的HPB-ALL细胞为抗原加强免疫1次,制备抗DAFmAb。以ELISA法测定mAb的Ig亚类。采用流式细胞术和Westernblot鉴定mAb的特异性和结合活性。以非免疫竞争法测定mAb的亲和常数。结果:成功地获得2株可识别DAF分子不同抗原表位的mAbB6E和2B6B,其Ig亚类均为IgG2a。mAb2B6E的亲和常数为1.81×10-7mol/L,与天然的细胞膜蛋白、变性的膜蛋白以及重组DAF蛋白都有良好的结合活性和特异性。结论:先以pcDNA3.1/DAF肌肉内免疫,再应用细胞抗原加强免疫的方法制备特异性的mAb,为在无法获得纯化蛋白质的情况下开拓了研制特异性抗体的新途径,也为日后改造抗DAFmAb进行靶向治疗研究打下了基础。     

胸腹水中癌胚抗原和糖类抗原联检的分析

形成胸腹水的原因有多种,为了区别胸腹水的良恶性,本文收集了1 4 1例不同病因的胸水或腹水,并用免疫放射分析(IRMA)测定了癌胚抗原(CEA)、糖类抗原CA - 5 0 (CA -5 0 )、糖类抗原CA - 2 4 2 (CA - 2 4 2 )的含量。旨在探讨其对良恶性疾病胸腹水的鉴别诊断价值,现将结果报告如下     

CEA单克隆抗体在肿瘤诊断和治疗中的应用及进展

ＣＥＡ单克隆抗体自问世以来，已成为在肿瘤的诊断和治疗中应用最为广泛的单克隆抗体之一，本文就有关方向的研究、应用和发展进行概述。     

抗人心肌单克隆抗体的制备及其生物学特性的初步研究

本文以人心肌抗原免疫BALB/c小鼠脾细胞与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,获2株(2F_1和1F_6)分泌抗人心肌单克隆抗体的杂交瘤细胞系。免疫印迹试验证明,细胞培养上清及小鼠腹水中的特异性抗体均能与分子量为55KD蛋白带结合。抗原阻断试验结果,证明获得的两株单抗是人心肌抗原特异的。染色体数分别为102条和96条。1F_6和2F_1的Ig亚类型均为IgG_1。间接免疫荧光呈肌束膜型,ABC免疫组化显示肌束膜和肌原型(胞浆)。     

抗果蝇ECP蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定

目的:制备抗果蝇ECP蛋白的单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定。方法:用大肠杆菌表达并纯化的GST-ECP融合蛋白,免疫6~8wk的雌性BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选和克隆化培养制备杂交瘤细胞系。用间接ELISA及Western blot等方法对mAb的Ig亚类(型)、腹水效价及特异性进行鉴定。结果:获得1株杂交瘤细胞株,命名为8G9。Ig亚类(型)鉴定表明,此株mAb为IgG1(κ型)。腹水mAb的效价为1∶1×105。Western blot分析表明,该株mAb可与果蝇的幼虫、蛹及成虫组织中表达的ECP特异性结合,可特异性的识别ECP抗原的231~300aa区段。结论:获得1株能稳定分泌抗ECP mAb的细胞株,为进一步研究ECP的功能奠定了基础。     

单克隆抗体检测分析S.typhiO,H,Vi抗原方法的建立及初步应用

以Ｓ．ｔｙｐｈｉ全菌体免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，通过细胞融合技术，建立了分别针对Ｓ．ｔｙｐｈｉ Ｏ９、Ｏ１２、Ｈｄ和Ｖｉ抗原的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤共３０株。通过对ＭｃＡｂ的亚类、效价和表位测定等进行筛选，建立了可分别检测Ｓ．ｔｙｐｈｉ可溶性Ｏ、Ｈ和Ｖｉ抗原的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法。检测３种抗原成分的敏感度分别为：１５．６２５ｎｇ／ｍｌ，８ｎｇ／ｍｌ和０．３０５ｎｇ／ｍｌ。检测全菌体的敏感度为１     

抗肿瘤相关糖抗原sTn单克隆抗体的制备及鉴定

细胞发生转化时,经常伴随着细胞膜表面糖脂或糖蛋白糖链的改变〔１〕。在肿瘤细胞,特别是腺癌细胞,其表面粘蛋白分子的糖链经常由于合成不全而缩短,形成肿瘤相关的简单粘蛋白糖抗原,ｓＴｎ即为其中的一种〔２〕。ｓＴｎ（ＮｅｕＡｃα２→６ＧａｌＮＡｃα１→ＯＳｅｒ／Ｔｈｒ）是一种二糖结构,可表达于各种腺癌组织,而在正常组织中则很少或不表达。血清、细胞或组织中ｓＴｎ的检测,主要依赖抗ｓＴｎ的单克隆抗体（ｍＡｂ）。我们应用富含ｓＴｎ侧链的绵羊颌下腺粘蛋白（ＯＳＭ）免疫制备了抗ｓＴｎ的ｍＡｂ〔３〕,目的在于为建立检测ｓＴ…     

H1亚型流感病毒HA蛋白单克隆抗体的制备及部分特性鉴定

目的:制备针对H1亚型流感病毒HA蛋白的单克隆抗体(mAb),并分析其反应特性。方法:分别以2009年甲型H1N1、季节性A1流感病毒裂解疫苗为免疫原,常规法免疫、融合、克隆化,获得各抗原特异性mAb。应用ELISA、HI试验和Western blot等技术研究mAb的反应性和特异性。结果:获得稳定分泌抗H1亚型流感病毒HA蛋白的杂交瘤细胞97株。其中株特异性mAb39株,29株具有HI活性;亚型特异性mAb7株,5株具有HI活性;2009年流行株与季节性A1、A3流行株共同抗原的mAb16株,9株具有HI活性;针对流感病毒共同抗原mAb35株,22株具有HI活性。结论:两种疫苗均具有较好的免疫原性和免疫保护活性,这些mAb的获得为流感病毒株特异、亚型特异性诊断试剂盒及流感病毒通用诊断试剂盒的制备提供了实验资料,为进一步研究H1N1流感病毒HA的抗原表位奠定了基础。     

中间丝系列单克隆抗体的研制与特性鉴定

从人胼胝、鸡胗、猪眼晶体、牛大脑及牛脊髓中提取角蛋白、结蛋白、波形蛋白、胶质纤维酸性蛋白和神经微丝蛋白，经分子量测定、电镜负染色观察确定为中间丝后，免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，用Ｂ淋巴细胞杂交瘤技术制备相应的单克隆抗体。经染色体分析、Ｉｇ亚类鉴定、免疫印迹及３８６例次人体肿瘤的免疫组化检测，肯定了它们是一组可用于临床病理诊断的中间丝系列单克隆抗体。     

抗人肿瘤细胞核单克隆抗体的制备及鉴定

根据Ｅｐｓｔｅｉｎ等报告，肿瘤坏死部分的不溶性抗原可以俾为放射免疫检测与治疗的靶部位。作者制备了抗人肿瘤细胞核单克隆抗体，并对其性质进行了鉴定。放射性同位素标记的抗核ＭｃＡｄｓ的初步生物分布试验表明，抗核ＭｃＡｄｓ确可到达肿瘤坏死部位。     

单克隆抗体诱发肿瘤抗原调变的初步研究

给同基因小鼠皮下接种TD。小鼠宫颈癌(U_(14))细胞;然后,给实验组动物腹腔注入不同剂量的抗U_(14)单克隆抗体(AU_(14-1))。结果发现,肿瘤细胞接种后的267天中,对照组动物全部未发生肿瘤,都存活;而在大剂量AU_(14-1)处理的实验组动物中,86—88%在接种部位发生了实体瘤,且死于全身性肿瘤疾患。表明AU_(14-1)对于U_(14)细胞的免疫促进作用。应用AU_(14-1)研究U_(14)细胞在体外对特异抗体的反应,结果证实,AU_(14-1)诱发U_(14)细胞抗原调变。间接膜免疫荧光表明,AU_(14-1)抗体和U_(14)抗原从这些细胞表面消失。本研究结果提示抗原词变可能是宫颈癌细胞逃逸单克隆抗体治疗的重要机制。     

抗胃癌单克隆抗体MG7的应用

胃粘膜异型增生,尤其是重度异型增生被视为是胃癌的重要癌前病变,易发展为癌或与癌并存。重度异型增生有时又难以与高分化腺癌区别,诊断时多凭观察者的经验难免出现误差。因此,寻找判定异型增生良恶性的可靠指标对胃癌的防治是很重要的。为此本文应用抗胃癌单克隆抗体MG7对59例胃粘膜异型增生(轻度35例,中度11例,重度10例及可疑癌3例),44例胃癌及30例正常胃粘膜作免疫组化PAP法染色,观察胃癌相关抗原在各类胃粘膜中有何差异并就其意义作初步探讨。