线粒体跨膜电位和细胞凋亡相关性的研究

线粒体跨膜电位的降低是细胞凋亡早期的不可逆事件。线粒体膜内外的电势差降低,可引起线粒体膜内外一系列的生化改变,如诱导细胞色素C释放,活化caspase蛋白酶家族,呼吸链与氧化磷酸化失耦联,三磷酸腺苷合成停止;线粒体膜通透性改变;凋亡诱导因子(AIF)的释放等,引起细胞凋亡的级联反应,最终导致细胞凋亡。本文就线粒体跨膜电位的形成,其在细胞凋亡时的变化及其机制进行综述。     

黄芪注射液对阿霉素中毒性小鼠心肌细胞凋亡及细胞线粒体膜电位的影响

目的观察黄芪注射液对阿霉素中毒性小鼠心肌细胞凋亡及心肌细胞线粒体膜电位的影响。方法昆明小鼠60只,随机分为黄芪注射液治疗组（大、中、小剂量组）、阿霉素模型组和正常对照组,建立阿霉素中毒性心肌损伤模型,实验结束24 h后处死小鼠,取出心脏,应用流式细胞仪分析技术检测小鼠心肌细胞线粒体膜电位及心肌细胞凋亡百分率。结果（1）阿霉素模型组的心肌细胞线粒体膜电位小于其他各组（P＜0．05）;黄芪注射液各剂量组的心肌细胞线粒体膜电位小于正常对照组（P＜0．05）。（2）阿霉素模型组心肌细胞凋亡率高于正常对照组及黄芪注射液中、小剂量治疗组（P＜0．01）,但阿霉素模型组与黄芪注射液大剂量治疗组比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论黄芪注射液可通过稳定细胞线粒体膜电位,抑制心肌细胞发生异常凋亡,保护心肌细胞。     

线粒体与神经细胞凋亡研究的进展

细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉ）是一种普遍的生理现象,它在神经系统发育过程中和许多神经系统疾病的发病机制中都起到重要作用,但其确切机制目前尚不清楚。自由基、Ｃａ’”、蛋白酶、核酸酶、一氧化氮（ＮＯ）、线粒体都参与细胞凋亡过程,而线粒体同时又是ｃａ’”、氧化应激的来源和作用对象。线粒体氧化磷酸化过程中起倡联作用的。Ｔｍ在细胞凋亡早期开始下降,维持。ｖｍ可以阻止凋亡的进展。细胞凋亡过程中的酶解反应、染色质浓缩、ＤＮＡ断裂均需要能量,因而细胞的ＡＴＰ水平也是调亡的重要因素。所以线粒体与细胞凋亡间存在着密切…     

灵芝对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡率及线粒体跨膜电位的影响

目的探讨灵芝对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡率及线粒体跨膜电位的影响。方法采用线栓阻断大脑中动脉闭塞法（MCAO）建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。动物随机分为假手术组（Sham）、脑缺血再灌注组（IR）、灵芝组（GA）;于再灌注后3h、12h、24h、48h处死动物取材,流式细胞仪检测脑细胞凋亡率和线粒体跨膜电位。结果（1）IR组和GA组与Sham组比较,脑细胞凋亡率明显增高（P〈0．01）;再灌注3hGA组与IR组比较,脑细胞凋亡率没有明显差异（P〉0．05）;再灌注12h、24h、48hGA组与IR组比较,脑细胞凋亡率降低,有明显差异（P〈0．01）。（2）IR组脑细胞线粒体跨膜电位在再灌注3h、12h、48h较Sham组显著下降（P〈0．05）,其中3h值最低,其后逐渐升高,至48h又出现后续性降低;GA组细胞线粒体跨膜电位在再灌注3h较Sham显著下降（P〈0．01）;GA组线粒体跨膜电位在再灌注12h、48h较IR组显著升高（P〈0．05）。结论急性局灶性脑缺血再灌注后大鼠脑细胞凋亡率升高,线粒体跨膜电位显著降低,灵芝具有降低凋亡发生率、改善脑组织细胞线粒体跨膜电位水平的作用。     

灵芝对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡率及线粒体跨膜电位的影响

目的 探讨灵芝对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡率及线粒体跨膜电位的影响.方法 采用线栓阻断大脑中动脉闭塞法(MCAO)建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型.动物随机分为假手术组(Sham)、脑缺血再灌注组(I/R)、灵芝组(GA);于再灌注后3 h、12 h、24 h、48 h处死动物取材,流式细胞仪检测脑细胞凋亡率和线粒体跨膜电位.结果 (1)IR组和GA组与sham组比较,脑细胞凋亡率明显增高(P<0.01);再灌注3 hGA组与IR组比较,脑细胞凋亡率没有明显差异(P＞0.05);再灌注12 h、24 h、48 hGA组与IR组比较,脑细胞凋亡率降低,有明显差异(P<0.01).(2)IR组脑细胞线粒体跨膜电位在再灌注3 h、12 h、48 h较sham组显著下降(P<0.05),其中3 h值最低,其后逐渐升高,至48 h又出现后续性降低;GA组细胞线粒体跨膜电位在再灌注3 h较sham显著下降(P<0.01);GA组线粒体跨膜电位在再灌注12 h、48 h较IR组显著升高(P<0.05).结论 急性局灶性脑缺血再灌注后大鼠脑细胞凋亡率升高,线粒体跨膜电位显著降低,灵芝具有降低凋亡发生率、改善脑组织细胞线粒体跨膜电位水平的作用.     

PUVA对HL-60细胞凋亡及线粒体膜电位的影响

[目的]研究补骨脂素（PSO）加长波紫外线（UVA）光化学疗法（PUVA）对人白血病细胞HL-60凋亡及线粒体膜电位的影响。[方法]HL-60细胞接受或不接受UVA照射后,在不同浓度PSO培养,电镜下观察细胞超微结构改变,流式细胞仪（FCM）检测细胞凋亡率和线粒体膜电位变化,多因素方差分析法进行统计学处理。[结果]PUVA处理后的HL-60细胞超微结构出现明显的凋亡形态;PSO、UVA照射及PUVA在作用后24 h均可使细胞凋亡率增加,ΔΨm下降,对照组、80μg/mL PSO组、5 m in UVA组及PUVA（80μg/mL PSO＋5 m in UVA）组凋亡率分别为（10.60±0.31）%、（26.94±0.26）%、（28.53±0.05）%、（37.72±0.09）%;线粒体膜电位水平分别为388.47±6.35、173.17±10.89、200.00±2.91以及71.83±9.47,各组间P〈0.01,PUVA的作用明显强于前两者。[结论]PUVA可诱导人白血病细胞HL-60发生凋亡,诱导凋亡的途径之一为下调线粒体膜电位。     

氧化砷诱导食管癌细胞凋亡线粒体超微结构和膜电位的改变

目的 :研究氧化砷 (As2 O3)诱导食管癌细胞凋亡的过程中线粒体超微结构和功能的变化。方法 :培养的食管癌细胞系SHEE85加入 3 μmol LAs2 O3,作用 2 ,4 ,6,12 ,2 4h ,在光镜和电镜下观察细胞形态。以罗丹明 (Rhodamine 12 3 )荧光探针标记线粒体 ,细胞荧光光度计检查线粒体荧光强度 ,计算线粒体跨膜电位 (MTP ,△Ψm)的改变。结果 :线粒体荧光强度的改变反映MTP的状态。荧光强度早期增加 ,中期下降 ,后期最低 ,2 4h后细胞核呈典型凋亡改变伴有线粒体肿胀。结论 :在As2 O3诱导下 ,SHEE85细胞线粒体有明显的形态和功能改变伴随线粒体跨膜电位的降低 ,线粒体改变是As2 O3诱导食管癌细胞凋亡过程重要的一环     

白藜芦醇通过影响线粒体膜电位诱导HepG2细胞凋亡

目的 研究白藜芦醇诱导HepG2细胞凋亡的机制,探讨白藜芦醇诱导HepG2细胞凋亡过程中线粒体膜电位的变化。方法采用MTT法测定白藜芦醇对HepG2细胞的生长抑制作用,通过荧光染色及流式细胞术检测细胞凋亡,电子显微镜观察细胞超微结构的变化,用Rhodaminel23和TMRE标记细胞线粒体膜电位（△ψ）,并分别通过流式细胞仪和共聚焦激光扫描显微镜检测。结果低浓度白藜芦醇（≤25μmoFL）对HepG2细胞的生长抑制作用不显著,而高浓度白藜芦醇（〉25μmol／L）显著地抑制HepG2细胞的生长,且呈时间和浓度的依赖性（F=18．532,P〈0．05）;流式细胞术分析显示,白藜芦醇能显著诱导HepG2细胞凋亡,且呈浓度依赖性（P〈0．05）;白藜芦醇能降低HepG2细胞线粒体膜电位。结论白藜芦醇抑制HepG2细胞增殖,并诱导细胞凋亡,白藜芦醇使HepG2细胞线粒体膜电位去极化,提示线粒体膜电位去极化在白藜芦醇诱导细胞凋亡的过程中起作用。     

丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注神经细胞凋亡的影响

目的观察丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注神经细胞凋亡的影响。方法 大鼠随机分为假手术组、模型组、丹红注射液高剂量组、丹红注射液低剂量组。在大鼠腹腔内注射丹红注射液后10d,采用TUNEL法、Caspase3检测4组大鼠海马细胞及周围皮质凋亡情况。结果 大鼠海马及周边脑组织细胞凋亡情况,模型组与丹红注射液高剂量组、低剂量组差异显著（P〈0.01）。结论 丹红注射液对损伤的大鼠海马及周围皮层神经元有保护作用。     

线粒体通路与缺血性脑血管病中神经细胞凋亡的关系

线粒体是细胞内一个重要的细胞器,它不仅为真核生物提供能量,而且在凋亡发生过程中发挥了重要的作用。通过对缺血性脑血管病中神经细胞凋亡以及线粒体通路的研究,将有助于开发缺血性脑血管疾病药物。因此,我们将这三者之间的关系一一综述。     

清开灵注射液中黄芩苷的药代动力学研究

目的 建立清开灵注射液中黄芩苷血药浓度分析方法并研究其在家免体内药物动力学过程,获得相关药动学参数.方法 采用Venusil ASB C18色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-水-磷酸(23:77:0.18);流速:1 mL/min;检测波长:276 nm;柱温:30℃.结果 清开灵注射后其黄芩苷...     

超滤去除清开灵注射液中热原的研究

目的 选择适用于清开灵注射液除热原的超滤膜.方法 采用鲎试剂凝胶法,在对超滤膜除细菌内毒素性能初步筛选后,确定一种膜孔径用于清开灵注射液除热原.用含有热原的清开灵注射液通过选定的膜过滤,以热原检查法检查热原,验证超滤膜的除热原效果,并以指标性成分黄芩苷的转移率和膜通量对膜工艺条件进行筛选.结果 用灵敏度0.06 EU/mL的鲎试剂检查,饮用水通过10 KD和30 KD的膜后符合注射用水内毒素标准要求,6批产品超滤前热原检查,3只家兔升温总和最低1.04 ℃,最高2.40 ℃,经过30 KD膜超滤后升温总和最低0.43 ℃,最高0.88 ℃,明显低于1.0 ℃;药液温度为40 ℃、泵转速250 r/min、操作压力为0.10～0.15 MPa时超滤通量最大,效率最高.结论 选择30 KD的超滤膜能有效去除清开灵注射液中的热原,药液温度、泵转速对膜通量有显著影响,超滤后黄芩苷的转移率为97.15%,指标性成分含量符合清开灵质量标准.     

9个生产企业清开灵注射液细菌内毒素检查方法学研究

目的：考察清开灵注射液细菌内毒素检查法可行性。方法：利用不同厂家生产的鲎试剂和不同厂家生产的清开灵注射液进行干扰试验,全面考察清开灵注射液对细菌内毒素检查的干扰作用,以确定其最大不干扰浓度。结果：18批清开灵注射液稀释至60倍,使用灵敏度为0．125EU·mL^-1的鲎试剂进行细菌内毒素检查,12批（66．7％）供试品细菌内毒素检查符合规定;其余6批（33．3％）供试品对此法存在一定干扰因素。结论：清开灵注射液细菌内毒素检查仍需要严格的方法学验证。     

清开灵注射液合通脉降脂饮治疗高脂血症合并脂肪肝临床研究

目的观察清开灵注射液合通脉降脂饮治疗高脂血症合并脂肪肝的疗效.方法随机分为两组.治疗组72例运用地坛牌清开灵注射液合通脉降脂饮,对照组36例用地奥脂必妥胶囊和联苯双酯滴丸.结果治疗组总有效率91.7%,对照组总有效率72.2%,两组比较,有显著性差异(P＜0.01);治疗组治疗前后对比,血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度酯蛋白胆固醇(LDL-CH)、谷-丙转氨酶(ALT)、谷-草转氨酶(AST)指标改善明显,有显著性差异(P＜0.01).结论清开灵注射液合通脉降脂饮在降低血脂和改善肝功能指标方面疗效明显.     

清开灵对内毒素性发热家兔血管内皮细胞分泌功能的影响

目的探讨清开灵注射液对内毒素性发热家兔血管内皮细胞分泌功能的作用.方法复制内毒素(ET)性发热家兔模型,观察清开灵对体温的影响,并用放免法测定内皮素以及血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的含量,用发色底物法测定血浆组织纤溶酶原激活物(t-PA)及其组织纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)的活性.结果清开灵对ET性发热家兔有显著性的解热效应(P＜0.01),清开灵 ET组内皮素、TXB2的含量(P＜0.01)以及PAI的活性(P＜0.05)明显低于ET组;而6-keto-PGF1α的含量(P＜0.05)和t-PA的活性(P＜0.01)明显高于ET组.结论清开灵可能通过改善内毒素性发热家兔血管内皮细胞的分泌功能,起到扩张微血管,加快体表散热,从而对发热家兔的解热效应起到一定的整合作用.     

补骨脂素加长波紫外线光化学疗法对K562细胞凋亡及线粒体膜电位的影响

目的：研究补骨脂素（psoralen，PSO}加长波紫外线（ultraviolet—A，UVA）光化学疗法（PUVA）对人白血病细胞K562凋亡及线粒体膜电位的影响。方法：K562细胞与不同浓度PSO，接受或不接受UVA照射后共同培养，透射电子显微镜下观察细胞超微结构改变，流式细胞仪检测细胞凋亡率和线粒体膜电位变化，采用多因素方差分析法进行统计学处理。结果：PUVA处理后的K562细胞超微结构出现明显的凋亡形态学改变。PSO、UVA照射及PUVA均可使细胞凋亡率增加，线粒体膜电位下降；PUVA的作用显著强于前两者（P〈0．01）。结论：PUVA可诱导白血病K562细胞发生凋亡，诱导凋亡途径之一为下调线粒体膜电位水平。     

异硫氰酸苯酯法测定清开灵注射液中氨基酸的含量

目的 建立准确测定清开灵注射液中氨基酸含量的方法.方法 采用异硫氰酸苯酯为衍生化试剂,清开灵注射液衍生化反应后,进行HPLC分析.色谱柱为Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相A为0.1 mol/L醋酸钠-乙腈(pH 6.5) (93∶7),流动相B为乙腈-水(4∶1),梯度洗脱,流速为1 mL/min;检测波长为254 nm.结果 该方法可以对清开灵注射液中20种氨基酸准确定量,其浓度在0.019 ～24.855 g/L范围内,线性关系良好(r=0.999 7～0.999 9).方法重复性的RSD(％)在0.766％ ～4.49％之间;20种氨基酸的加样回收率在92.2％ ～ 106.8％之间.结论 该方法准确、可靠、灵敏,可用于清开灵注射液中氨基酸的含量测定.     

补骨脂素加长波紫外线光化学疗法诱导人白血病细胞凋亡时对线粒体膜电位的影响

目的 研究补骨脂素 (PSO) 加长波紫外线 (UVA) 光化学疗法 (PUVA) 诱导人白血病细胞 K562、NB4 凋亡时对线粒体膜电位的影响。方法 细胞与不同质量浓度 PSO,接受或不接受 UVA 照射后共同培养,电镜下观察细胞超微结构改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率和线粒体膜电位变化,采用多因素方差分析法进行统计学处理。结果 PUVA 处理后的 K562、NB4 细胞超微结构出现明显的凋亡形态学改变;PSO、UVA 照射及 PUVA 均可使细胞凋亡率增加,线粒体膜电位下降,PUVA 的作用显著强于前两者 (P＜0.01)。结论 PUVA 可诱导人白血病细胞发生凋亡,诱导凋亡的途径之一为下调线粒体膜电位水平。