乳铁蛋白六肽降低人卵巢癌细胞的耐药性及其机制

目的 研究乳铁蛋白六肽(LfcinB4-9)降低人卵巢癌细胞的耐药性并探究其作用可能的机制.方法 MTI检测顺铂(DDP)联合LfcinB4-9对人卵巢癌细胞SKOV3、SKOV3/DDP、CI3K、CI3K/DDP的增殖抑制;HE细胞染色切片实验检测人卵巢细胞经加药处理后细胞形态发生的变化;平板克隆实验检测DDP联合LfcinB4-9对人卵巢癌细胞克隆形成能力的影响;Transwell实验检测DDP联合LfcinB4-9对人卵巢癌细胞侵袭能力的影响;qRT-PCR检测人卵巢癌细胞在LfcinB4-9和DDP联合处理下HSF1、HSP70、OPTN等基因的表达情况.结果 LfcinB4-9和DDP联合作用对卵巢癌细胞的抑制率明显高于DDP单独作用组(P＜0.05或P＜0.01),人卵巢细胞经DDP联合LfcinB4-9作用后细胞形态变化显著大于DDP单独作用组,与DDP单独组相比,DDP联合Lf-cinB4-9作用后人卵巢癌细胞克隆形成能力和侵袭能力均显著降低(P＜0.05或P＜0.01).qRT-PCR实验显示,DDP联合LfcinB4-9时HSF1、HSP70、OPT等耐药相关基因表达显著低于对照组和DDP单独组.结论 LfcinB4-9与DDP联合作用后明显增强了卵巢癌细胞对DDP的敏感性,其作用是通过降低HSF1、HSP70、OPTN等基因表达,通过HSF1-HSP70-耐药蛋白的信号途径来实现的.     

乳源免疫调节肽通过泛素-蛋白酶体途径抑制卵巢癌耐药性及其机制研究

目的 研究乳源免疫调节肽(PGPIPN)抑制卵巢癌耐药性及其机制.方法 MTT法检测PGPIPN与抗癌药顺铂(DDP)联合用药抑制人卵巢癌敏感细胞株(SKOV3)、耐药细胞株(SKOV3-DDP)和原代卵巢癌细胞的半数抑制浓度(IC50)和细胞增殖抑制率,PCR法和Western blot法检测人卵巢癌细胞株和原代卵巢癌细胞用药情况下泛素-蛋白酶体途径相关基因的表达.结果 PGPIPN和DDP联合用药细胞增殖抑制率显著高于单独DDP组或PGPIPN组,差异有统计学意义( P＜0. 05),PCR和Western blot结果表明 PG-PIPN通过调节泛素-蛋白酶体途径相关基因表达降低卵巢癌细胞的耐药性. PGPIPN促进SIAH和PSMA1 表达,降低β-catenin基因的表达(P ＜0. 05,P ＜0. 01),且有剂量依赖性.结论 PGPIPN通过泛素-蛋白酶体途径降低卵巢癌细胞对DDP的耐药性.     

卵巢癌细胞中乳源免疫调节肽受体蛋白的筛选

目的乳源免疫调节肽(PGPIPN)在人卵巢癌细胞株(SKOV3)上进行受体蛋白的筛选。方法异硫氰酸荧光素(FITC)标记PGPIPN,作用于SKOV3观察其细胞定位;从SKOV3中提取作用部位的蛋白;通过NHS-activated亲和层析柱进行分离和纯化受体蛋白质,SDS-PAGE的初步鉴定。结果在激光扫描共聚焦显微镜下观察荧光标记肽结合于SKOV3的胞膜上。通过提取膜蛋白和亲和层析法成功筛选了受体膜蛋白。结论 PGPIPN的作用位点位于细胞膜上,其抗癌作用可能通过胞膜结合蛋白而启动信号转导通路,为进一步探讨其抗癌机制奠定基础。     

顺铂对人舌癌细胞的抑制作用和对端粒酶活性的影响

目的 研究化疗药物顺铂对人舌癌Tca8113细胞的抑制作用和对端粒酶活性的影响及其抗癌机制、并初步探讨端粒酶作为化疗敏感性指标的可行性。方法 应用顺铂处理的人舌癌Tca8113细胞为用药组，相同条件培养但不用药的细胞为对照组。MTT法研究细胞的生长和增殖情况，双层琼脂培养法研究细胞的克隆形成率，透射电镜观察细胞的超微结构，应用流式细胞术检测细胞周期，TRAP-PCR—ELISA法检测人舌癌Tca8113细胞端粒酶活性。结果 顺铂对人舌癌Tca8113细胞有明显的抑制作用，且呈浓度依赖性；能明显改变细胞大体形态和超微结构；抑制端粒酶活性且有一定的时间依赖性；细胞周期改变不明显。结论 顺铂可以明显抑制Tca8113细胞的增殖活性及其转移复发倾向、还可作用于线粒体，抑制端粒酶活性，对细胞周期的改变不明显。     

顺铂对人卵巢癌CAOV3细胞端粒酶活性和凋亡的影响

目的研究顺铂作用于卵巢癌CAOV3细胞后，端粒酶活性、细胞凋亡和细胞周期变化与细胞耐药性的关系。方法用顺铂处理卵巢癌CAOV3细胞，端粒酶重复序列扩增(TRAP)一银染法测定端粒酶活性，流式细胞仪观察细胞凋亡和细胞周期的改变。结果顺铂(DDP)处理卵巢癌CAOV3细胞后，CAOV3细胞端粒酶活性受到抑制，细胞周期受阻于G2／M期，未见细胞凋亡峰改变。结论CAOV3细胞对顺铂的耐药性通过多因素起作用，DDP对端粒酶活性具有抑制作用，可以改变细胞周期，但对细胞凋亡无明显影响。     

紫杉醇体外对人卵巢癌细胞的影响

目的探讨国产紫杉醇体外对人卵巢癌HO8910细胞凋亡的作用。方法MTT染色法测定HO8910细胞的生长,用流式细胞仪观察凋亡及细胞周期的变化。结果紫杉醇与HO8910细胞抑制作用呈浓度依赖关系,IC50=16．66umol／L。人卵巢癌细胞在紫杉醇作用下,没有出现明显凋亡。细胞分裂阻滞在G2M期。结论紫杉醇能有效抑制HO8910细胞生长,但是没有引起细胞凋亡。     

乳源免疫调节肽诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡的研究

目的研究乳源免疫调节肽(PGPIPN)对人食管癌Eca-109细胞生长和凋亡的影响。方法采用MTT法测定PGPIPN对人食管癌Eca-109细胞的作用,用流式细胞仪(FCM)、琼脂糖凝胶电泳检测PGPIPN诱导Eca-109细胞凋亡,用免疫组化SP法检测PGPIPN诱导Eca-109细胞凋亡过程中survivin、caspase-3蛋白的表达变化情况。结果 PG-PIPN对人食管癌Eca-109细胞有明显的生长抑制作用并有剂量依赖性,其增殖抑制作用与诱导细胞凋亡有关,Eca-109细胞经PGPIPN作用后,其survivin蛋白表达下降,caspase-3蛋白表达增强。结论 PGPIPN能诱导人食道癌Eca-109细胞凋亡,这可能与survivin蛋白表达下降,caspase-3蛋白表达增强有关。     

胎盘免疫调节肽对免疫抑制状态小鼠的免疫调节作用

目的探讨胎盘免疫调节肽对免疫抑制状态小鼠的免疫调节作用。方法醋酸氢化泼尼松诱导小鼠免疫抑制书态，同时用胎盘免疫调节肽、转移因子、胸腺用治疗，观察实验小鼠机体的免疫指标。结果胎盘免疫调节肽与转移因子和胸腺肽作用相同，可使处于免疫抑制状态的小鼠体重。脾重指数、中性白细胞数、Ｔ及Ｂ淋巴细胞转化刺激指数、游泳能力等多项指标获得明显恢复且在恢复上述某些指标到正常水平方面优于转移因子和胸腺肽。结论胎盘免疫调节肽类似于转移因子、胸腺肽，可明显提高机体免疫功能，是一种理想的免疫调节剂。     

凋亡素在体外对人卵巢癌细胞及正常卵巢细胞凋亡的影响

目的　探讨凋亡素基因 (VP3)表达对人卵巢癌细胞和正常卵巢细胞凋亡的影响。方法　采用LipofectamineTM2 0 0 0介导的基因转染方法将重组凋亡素真核表达质粒pcDNA3.1 -VP3 导入仓鼠正常卵巢细胞CHO -K1、人卵巢癌细胞CoC1及人卵巢癌细胞耐药亚株CoC1 DDP。结果　凋亡素基因已在转染细胞中存在并在转录水平表达 ;CHO -K1中凋亡素组与空质粒组凋亡率差异无显著性 (P >0 .0 5 )。CoC1和CoC1 DDP中 ,凋亡素组凋亡率明显高于空白对照组和空质粒组 (P <0 .0 1 ) ,且凋亡素更易诱导CoC1 DDP细胞凋亡 (P <0 .0 1 )。结论　在转染细胞中凋亡素基因在转录水平得到表达 ;凋亡素能特异性诱导人卵巢癌细胞CoC1及人卵巢癌细胞顺铂耐药亚株CoC1 DDP凋亡 ,不影响正常卵巢细胞CHO -K1 ;凋亡素更易诱导卵巢癌顺铂耐药亚株CoC1 DDP细胞的凋亡     

金雀异黄素联合顺铂对SK-OV-3人卵巢腺癌细胞生物学行为影响的研究

目的 观察金雀异黄素联合顺铂对SK-OV-3人卵巢腺癌细胞生物学行为的影响,探讨其可能的作用机制.方法 培养SK-OV-3人卵巢腺癌细胞,分别给予金雀异黄素(20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L、200μmol/L)、顺铂(1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、16...     

活性肽免疫调节作用的研究进展

<正>免疫活性肽是源于蛋白质的多功能化合物,具有促进和调节免疫功能的作用;其以活性高、来源广、稳定性强等优点受到国内外的广泛关注,并进行了大量的探究与试验。乳蛋白生物活性肽的研究始于1979年,德国的Brantl等人通过酶解牛乳酪蛋白得到了一些多肽产物并证明它们具有类吗啡活     

胎盘免疫调节肽对化疗小鼠免疫水平的影响

目的探讨胎盘免疫调节肽（ＰＩＰ）对化疗小鼠的免疫调节作用。方法用环磷酸酰胺对实验小鼠进行化疗或给实验小鼠致死量的阿糖胞苷（ＡＲＡ—Ｃ），然后给小鼠腹腔注射或口服ＰＩＰ，比较腹腔注射或口服ＰＩＰ两组实验。小鼠的吞噬功能、胸腺和脾脏的重量、体内淋巴细胞转化率和生存时间等免疫指标。结果腹腔注射式口服ＰＩＰ对化疗小鼠的免疫缺损均有恢复作用，而腹腔注射略高于口服ＰＩＰ的效应。ＰＩＰ治疗组的吞噬指数、淋巴细胞转化率（ＬＴ％）与对照组比均有显著性提高（Ｐ＜０．０５）；ＰＩＰ可防止化疗小鼠胸腺和脾脏重量的下降（Ｐ＜０．０１）；ＰＩＰ可显著延长给阿糖胞苷致死量小鼠的生命（Ｐ＜０．０１）。结论腹腔注射和口服ＰＩＰ都可显著提高化疗小鼠的免疫水平，效果基本一致。     

胎盘免疫调节肽与化疗药物联合对肿瘤细胞生长的影响

目的 探讨胎盘免疫调节肽（ＰＩＰ）联合化疗药物对肿瘤细胞的影响。 方法 胎盘免疫调节肽（ＰＩＰ）联合化疗药物体外与Ｓ１８０、Ｋ５６２细胞接触，观察对肿瘤细胞增殖的影响，并观察对接种Ｓ１８０或Ｆｃ瘤细胞小鼠，肿瘤重量和转移结节数。 结果 ＰＩＰ与化疗药物联合作用明显抑制Ｓ１８０、Ｓ５６２细胞的增殖。体内实验结果显示：环磷酰胺单独使用的抑瘤率和转移率为２３．７％和２０％，与ＰＩＰ联合作用为５８％和６．     

胎盘免疫调节肽对放疗小鼠免疫功能的影响

目的探讨胎盘免疫调节肽对放疗小鼠免疫功能的影响方法用60Co照射小鼠使其免疫功能低下，同时用胎盘免疫调节肽和胸腺肽治疗，观察并比较两组实验小鼠的白细胞吞噬功能，抗体形成细胞、脾重指数、淋巴细胞转化刺激指数等免疫指标。结果胎盘免疫调节肽可明显升高小鼠的白细胞总数；使巨噬细胞的吞噬率提高70％左右。吞噬指数达2．7左右；能明显升高抗体形成细胞和牌重指数；增高了放疗小鼠淋巴细胞转化刺激指数。胎盘免疫调节肽的某些免疫指标优于胸腺肽。结论胎盘免疫调节肽可显著提高放疗小鼠的免疫功能，作用效果与胸腺肽相似。     

卵巢癌细胞株COC1、顺铂耐药细胞株COC1/DDP的蛋白质组学比较

目的:应用蛋白质组学技术比较人卵巢癌细胞株COC1及耐药细胞株COC1/DDP之间的蛋白质差异,寻找与顺铂耐药有关的相关蛋白质。方法:提取细胞株COC1、耐药细胞株COC1/DDP的总蛋白,用双向凝胶电泳(2-DE)的方法获得两细胞株的双向电泳图,选择差异倍数在3倍以上、边界清晰的蛋白质点胶内酶切后,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和超高效纳升液相色谱-电喷雾串联质谱(NanoUPLC-ESI-MS/MS)分析鉴定。结果:双向凝胶电泳图谱上检测到1 878个蛋白质点,匹配率为93.6%,差异倍数3倍以上的蛋白质点67个,其中COC1/DDP细胞株高表达有23个,低表达的有44个。选取差异蛋白斑点6个用两种质谱方法初步鉴定了6种蛋白质:dUTP焦磷酸酶、aarF域含蛋白激酶4(ADCK4)、3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)、角蛋白1、角蛋白9、角蛋白10。结论:双向凝胶电泳结合质谱技术可用于肿瘤蛋白质差异的分析,有助于研究肿瘤耐药的机制。     

顺铂对肝癌细胞杀伤效应的研究

目的：探讨顺铂（ＣＤＤＰ）对Hca-F细胞的生长抑制及其导凋亡的作用。方法：采用MTT,Hoechst33342和PI荧光染色,流式细胞术分析法。结果：CDDDP对Hca-F细胞有明显的细胞毒性,其IC50值为0．57μg/ml,且诱导细胞凋亡贯穿全程并呈逐渐增强趋势。结论：顺铂能明显抑制癌细胞的生长;诱导细胞凋亡是其抗肿瘤作用的主要机制之一。