介绍一种新的牙本质扫描电镜样品的制备和观察方法

介绍一种新的牙本质扫描电镜样品的制备和观察方法蒋维中西安中国人民解放军牙髓生物学实验室（７１００３２）采用新的牙本质ＳＥＭ样品制备和观察方法，可以观察到成牙本质细胞突起的形态、结构及管周、管间牙本质基质中的纤维。现将方法介绍如下。（１）戊二醛液灌注处...     

Er:YAG激光处理对牙本质与树脂粘结强度的影响

目的:探讨Er:YAG激光处理对牙本质表面性能及树脂粘结强度的影响。方法:选取30颗无龋坏、无修复体的人离体磨牙,用高速涡轮手机在流水冲洗下磨除釉质层。每个牙冠以髓腔为中心沿近远中向切开成颊/舌两部分,最终选取50个样件,按不同的表面处理方法随机分为5组(A~E组),每组10个样件。每组2个样件扫描电镜观察,其余8个样件分别在处理后的牙本质表面粘结光固化复合树脂,进行剪切强度测试。结果:C组最高,为(7.11±1.73) MPa,E组次之,E组与A、C、D组无统计学差异, B组较低,其中B组与C、D、E组均有统计学差异。扫描电镜观察:酸蚀组可见部分牙本质小管口开放,管径未增大;管周牙本质与管间牙本质界限不明显。激光+酸蚀组可见牙本质表面清沽,牙本质小管开放,周围白晕环绕。激光组可见牙本质表面清洁、粗糙,无玷污层,呈片状、蜂窝状外观,管周牙本质与管间牙本质界限清晰。结论:Er:YAG激光处理能增加牙本质与树脂的剪切粘结强度,但是合适的能量参数有待进一步研究。     

3D激光扫描显微镜下牙本质龋微结构的观察和分析

目的 通过3D激光扫描显微镜观察牙本质龋的微结构,为临床上龋病的防治及相关研究提供形态学理论依据。方法 收集6颗新鲜拔除的有龋坏的第三磨牙,均制备成横剖面标本,在3D激光扫描显微镜下进行光学、激光彩色及3D形貌图的观察。结果 在样本整体结构中,光镜下可见病变组织的轮廓,激光彩色镜下较清晰分辨两层牙本质病变;在微结构中,激光彩色图下可以观察到透明层牙本质小管部分闭合,脱矿层管周和管间牙本质数目较少,细菌侵入层管周和管间牙本质均破坏,相邻小管融合,呈串珠样和椭圆形病灶,坏死崩解层无正常牙本质结构。3D形貌图下可根据颜色的不同观察到四层结构。结论 3D激光扫描显微镜能够分辨牙本质龋的两层病变组织结构,观察到牙本质四层结构中牙本质小管、管周、管间牙本质的不同改变,是观察牙本质微结构的有力工具。同时牙本质龋微结构的形态对临床上龋病的防治及相关研究具有理论指导意义。     

冷光漂白治疗对牙齿硬组织影响的扫描电镜观察

目的：观察BEYOND冷光漂白治疗对牙釉质表面及牙本质微结构的影响。方法：选用临床因正畸需要拔除A4、B4、C4和D4四颗健康前磨牙的患者12例作为受试者,每名受试者的D4作为空白对照牙,其余3颗牙予以BEYOND冷光漂白治疗。治疗结束后立刻拔除受试牙,分别制备牙釉质表面、牙本质纵剖和横剖观察面,以扫描电镜观察其微结构改变情况。结果：电镜显示BEYOND冷光漂白治疗后牙釉质表面出现溶融、脱矿现象;牙本质纵剖面可见管周牙本质轻微脱矿,管间牙本质胶原纤维网架塌陷;横剖面见牙本质小管口因脱矿而呈现不规则。结论：BEYOND冷光漂白可使牙釉质表层脱矿,并能透人到牙本质层使其微结构发生轻微改变。     

Er:YAG激光不同能量预处理对自粘结树脂水门汀剪切粘结强度的影响

目的探讨Er:YAG激光不同能量预处理对自粘结树脂水门汀剪切粘结强度的影响。方法按照纳入标准收集人离体磨牙70颗,根据对牙本质表面Er:YAG激光预处理能量的不同随机分为7组:A组(空白对照)、B组(50 m J,10 Hz)、C组(100 m J,10 Hz)、D组(150 m J,10 Hz)、E组(200 m J,10 Hz)、F组(250 m J,10 Hz)、G组(300 m J,10 Hz)。每组10颗牙中随机取2颗切取3 mm厚的牙本质片,按相应分组用不同激光能量预处理后扫描电镜观察;每组剩余8颗牙包埋后,制备一致标准牙本质表面,按相应分组要求预处理后,用自粘结树脂水门汀Rely XTMUnicem将其与Everest ZS氧化锆瓷片粘结,24 h后测试各组剪切粘结强度并进行统计学分析。结果扫描电镜观察显示Er:YAG激光预处理后牙本质表面形态改变明显,变得粗糙不平,牙本质小管开放,无玷污层,管周和管间牙本质脱矿,一定能量范围内呈现较好的粘结表面;剪切粘结强度结果显示Er:YAG激光预处理可增强自粘结树脂水门汀Rely XTMUnicem的剪切粘结强度(P<0.01);C、D、E组的剪切粘结强度与A组有显著性差异(P<0.05)。结论粘结强度与牙本质的粘结表面密切相关,合适能量下的Er:YAG激光预处理能获得较好的牙本质粘结表面,提高自粘结树脂与牙本质和氧化锆瓷的剪切粘结强度。     

人牙根部龋:静止龋损的组织病理学

对人拔出牙进行组织病理学观察,静止龋损的主要结构特征为表面区域完全矿化以及明显的牙本质小管酸化。除牙本质小管外的管间牙本质被充分矿化直至牙根表面,近牙本质表面的牙本质小管为无活性微生物或不同形状的磷灰石晶体所填塞。牙本质小管的酸化以发生在小管酸化带典型区域的三种管内矿化形式为其特征。矿化形式取决于结晶体的种类以及它们与有机结构如胶原纤维或造牙本质细胞突的相关关系。作者推测静止损害是由于以下原因而致: ①干扰牙髓基质扩散到入侵细菌(微生物)的内层屏障的形成;②由阻止细菌代谢产物进入牙本质的致密     

EDTA凝胶与溶液对根管壁结构影响的比较研究

目的 研究EDTA凝胶与EDTA溶液在不同作用时间下,对根管玷污层及根管壁结构的影响.方法 采用因正畸需要新鲜拔除的健康上颌恒前磨牙7颗,常规根管预备后,取根中1/3段沿牙体长轴剖开,每根管分为两部分,每颗牙的两根管共获得4个标本,取其中1颗牙的4个标本作为对照组,其余每颗牙的4个标本分别纳入4个实验组.A组:15% EDTA水溶液冲洗1 min;B组: 15?TA水溶液冲洗5 min;C组:格兰凝胶涂布1 min;D组:格兰凝胶涂布5 min.扫描电镜观察各组根管内玷污层情况及牙本质结构的变化.结果 15?TA水溶液处理1 min即可有效去除根管玷污层,处理5 min则会引起管周和管间牙本质轻微脱矿;格兰根管凝胶处理1 min和5 min均能有效去除根管内玷污层,但均会引起牙本质过度脱矿和腐蚀.结论 格兰根管凝胶和EDTA水溶液均可去除根管玷污层,但持续作用于根管壁的时间不应超过1 min,以避免管壁过度脱矿.     

碱性成纤维因子用于犬牙盖髓剂的实验研究

目的探讨碱性成纤维因子(bFGF)对犬牙髓损伤修复的影响。方法选取健康英国小猎兔犬牙齿64颗,分为bFGF盖髓组、Dycal盖髓组及ZOE盖髓组。进行直接盖髓术,观察术后14天和28天修复性牙本质形成及牙髓组织学变化。免疫组化检测骨形成蛋白表达情况。结果术后14天:实验组及阳性对照组有纤维性基质形成,无牙本质桥形成;术后28天:实验组及阳性对照组有骨样牙本质桥、管状牙本质形成,阴性对照组无牙本质桥形成。结论bFGF在体内能够有效诱导牙髓细胞分化,形成修复性牙本质。     

氟化物预处理减轻漂白治疗术中牙齿敏感的扫描电镜观察

目的观察氟化物对漂白治疗中牙体硬组织微结构的影响，探讨氟化物用于减轻漂白治疗中牙齿敏感的可行性及其作用机制。方法选取临床因正畸治疗需拔除4颗健康第一前磨牙的患者共12名，按处理方法不同随机分为3组：加氟化钠漂白组、漂白组和空白组。在不同处理后分别制备釉质、牙本质纵剖面和横剖面电镜观察标本，以扫描电镜观察其超微结构改变情况。结果电镜显示漂白组釉质表面出现溶融、脱矿现象；牙本质纵剖面可见管周牙本质轻微脱矿，管间牙本质胶原纤维网架塌陷；横剖面见牙本质小管口因脱矿而呈现不规则，小管径增大。加氟化钠漂白组釉质及牙本质的脱矿程度均减轻，牙本质小管口小于漂白组。结论局部应用氟化钠可减轻釉质表层及牙本质脱矿，降低牙体硬组织通透性，从而缓解漂白过程中所产生的牙齿敏感症状。     

EDTA预处理硬化牙本质前后的电镜观察

目的:通过扫描电镜观察硬化牙本质经乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)预处理前后的差异,在超微结构下分析硬化牙本质的结构改变,为临床应用EDTA预处理法提供理论依据。方法:选择10颗具有硬化牙本质(视觉分类Ⅲ级及以上)的离体牙,经扫描电镜观察比较EDTA预处理前后硬化牙本质表面超微结构的变化。结果:扫描电镜所拍摄的图片显示,经EDTA预处理后硬化牙本质表面的超矿层以及接近牙本质小管开口5 μm内的钙盐沉积物全部或大部分溶解,且不破坏管口处的管周牙本质,而在牙本质小管深部,可见到较小的散在晶体。结论:EDTA能有效清除溶解牙本质小管内的矿盐沉积晶体,改善硬化牙本质的不良粘结表面,提高粘结修复的成功率。     

第三期牙本质的生成和活髓保存治疗

1　概述牙本质的生成贯穿于牙齿的整个生物学生命过程。它是通过成牙本质细胞分泌基质、矿化完成的。牙本质一般可分为三类 :①第一期牙本质 (原发性牙本质 ) ,是由有丝分裂后的成牙本质细胞所分泌 ,构成牙本质的主体。②第二期牙本质 (生理性继发性牙本质 ) ,是在牙根发育完成后髓腔内侧壁四周缓慢形成的牙本质。③第三期牙本质 ,是外界对牙齿组织损伤性刺激时髓腔内侧相应部位形成的牙本质。第一、二期牙本质的生成涉及到绝大部分功能性的成牙本质细胞 ,只是由于成牙本质细胞的合成和分泌活性明显降低而使第二期牙本质形成速度减缓。第三…     

应用扫描电镜和电子自旋共振技术分析四环素牙显微结构及其自由基变化

目的:通过扫描电镜(SEM)和电子自旋共振(ESR)法分析四环素牙的显微结构和ESR信号,并与正常牙进行比较。方法:收集成人正畸需要而拔除的四环素前磨牙和正常前磨牙各10颗。应用扫描电镜观察牙体表面的牙釉质和剖面的牙本质结构,采用X-波段电子自旋共振检测牙体的ESR信号。结果:与正常牙体结构相比,四环素牙的牙釉质结构疏松,釉柱排列不规则;牙本质小管不明显,形态不规则,管间牙本质质地粗糙,结构无序。四环素牙和正常牙相比,其固有的自由基平衡亦有所不同。结论:四环素牙在显微结构和自由基平衡方面和正常牙有显著差别。     

牙本质龋损下牙本质-牙髓复合体的反应

目的 探讨牙本质龋损进展过程中,牙本质-牙髓复合体的变化特点及规律.方法 选择即刻拔除的第三磨牙65颗,其中牙本质浅龋27颗(急性龋15颗,慢性龋12颗);牙本质深龋28颗(急性龋16颗,慢性龋12颗);无龋损的正常牙10颗.常规固定、脱钙、切片(厚4 μm),光学显微镜下观察牙本质龋病损下方牙髓的组织病理学改变,并用多功能图象分析仪对相应部位的成牙本质细胞的数目、浆核比、前期牙本质面积等进行测量分析.结果 随龋损深度的增加,成牙本质细胞数目显著减少,细胞形态由高柱状变为立方状直至扁平状,前期牙本质变薄甚至消失,第三期牙本质变厚且发生率增加,血管扩张充血,炎症细胞增多,主要为淋巴细胞与浆细胞;牙本质浅龋阶段,成牙本质细胞浆核比显著下降,慢性龋成牙本质细胞样细胞分化、迁移活跃,胶原纤维增多.牙本质深龋阶段出现修复性牙本质,急性龋炎症细胞聚集明显.结论 牙本质-牙髓复合体对龋损的反应与龋损深度及活动性有关;龋损深度增加,损伤反应加重;龋损活动性降低时修复与防御反应加强.     

第一磨牙牙釉质及牙本质厚度测量研究

目的:了解上下颌第一磨牙牙釉质及牙本质的厚度。方法:用电子测量尺测量23颗上颌第一磨牙和18颗下颌第一磨牙牙合面不同部位牙釉质、牙本质的厚度。结果:牙合面突起结构组织厚度(牙釉质:上颌(1.36±0.27)mm,下颌(1.61±0.27)mm;牙本质:上颌(4.13±0.40)mm,下颌(4.2±0.47)mm大于各自牙合面凹形结构上颌(0.92±0.42)mm,下颌(1.12±0.38)mm;牙本质:上颌(3.15±0.42)mm,下颌(3.32±0.30)mm,P<0.05),下颌牙釉质厚度多大于上颌(P<0.01),但牙本质厚度无此差异(P>0.05)。结论:上下颌第一磨牙硬组织厚度在合面不同结构之间以及上下牙同名部位之间存在不同程度的差异。     

牙齿与年龄的推断──钙／磷比的SEM─EDAX测定

应用扫描电镜和能谱仪定点测量３８颗双尖牙牙体硬组织５个不同部位钙／磷比（Ｃａ／Ｐ），研究Ｃａ／Ｐ比与年龄的关系。结果表明：根尖部管周牙本质的Ｃａ／Ｐ比随年龄增长显著下降，其回归方程ｙ＝２０８．１３－８９．２４Ｘ，相关系数ｒ＝－０．９２９６（Ｐ＜０．０１），该回归方程对于法医学和古人类学的年龄推断具有一定的价值；冠部牙釉质Ｃａ／Ｐ比随年龄增长而增长，能否利用该相关关系来推断年龄，有待进一步研究。     

不同pH值过氧化氢漂白影响人牙本质颜色及透明度的对比及机制初探

目的:探讨不同pH值过氧化氢溶液对牙本质颜色和透明度的影响。方法:将30颗刚拔除的人前磨牙随机分为两组,每组15例,沿牙长轴剖开、去髓,使用pH=4.5和pH=7.0的两种过氧化氢溶液分别进行漂白,用 Crystaleye 电脑比色仪观察牙本质颜色和透明度的变化,以及与时间的关系,初步分析其机制。结果:pH=7.0过氧化氢溶液漂白1周后牙本质颜色变黄,透明度下降,基质金属蛋白酶活性下降。pH=4.5过氧化氢溶液漂白1周后牙本质颜色变黄,透明度下降,3周后部分牙本质颜色恢复,同时基质金属蛋白酶活性升高,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论::pH=7.0的过氧化氢溶液氧化性较强,对牙本质的破坏较大,pH=4.5过氧化氢溶液对牙本质破坏性略低。其机制与牙源性基质金属蛋白酶活性有关。     

人冠部牙本质中基质金属蛋白酶组织抑制剂1的表达与分布

目的 观察人正常牙冠部牙本质中基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)的分布特点,探讨其在牙本质形成与改建过程中的作用.方法 以21颗人正常牙冠部牙本质为研究对象,应用免疫组织化学染色法观察牙本质中TIMP-1的分布特点,采用Image-Pro Plus 6.0软件分析牙本质不同层的平均吸光度(A)值的差异.结果 人冠部牙本质全层均可见TIMP-1的免疫阳性染色.成牙本质细胞层、前期牙本质层及近釉牙本质界层较强,深层牙本质、中层牙本质和浅层牙本质强度逐渐减弱.结论 TIMP-1存在于牙本质全层,其在牙本质中的分布具有不均衡性,提示TIMP-1在调节牙本质基质的形成、改建及矿化过程中发挥重要的作用.     

牙齿与年龄的推断——钙／磷化的SEM—EDAX测定

应用扫描电镜和能谱仪点测量３８颗双尖牙牙体硬组织５个不同部位钙／磷比（Ｃａ／Ｐ），研究Ｃａ／Ｐ比年龄的关系。结果表明：根尖部管周牙本质的Ｃａ／Ｐ比随年龄增长显著下降，其回归方程ｙ＝２０８．１３－８９．２４Ｘ，相关系数ｒ＝－０．９２９６（Ｐ〈０．０１），该回归方程对于法医学和古人类学的年龄推断具有一定的价值；冠部牙釉质Ｃａ／Ｐ比随年龄增长而增长，能否利用该相关关系来推断年龄，有待进一步研究。     

脱矿牙本质基质材料对大鼠颅骨缺损修复的研究

目的：探讨生物相容性较好的脱矿牙本质基质材料对大鼠颅骨缺损的修复效果。方法：①拔除健康大鼠上下前牙,脱矿,脱脂,粉碎后提取脱矿牙本质基质粉末,后与熟石膏以重量2：1比例混合。②大鼠头盖骨正中建立直径约8mm的圆形骨缺损,实验组：在缺损区植入脱矿牙本质基质粉末与熟石膏复合物,用生理盐水调和。对照组：无修复治疗。术后4周和8周分组处死取标本,进行大体标本, X线和组织学HE染色光镜下观察。结果：脱矿牙本质基质粉末与熟石膏具有良好的组织相容性和骨引导性,并与新骨紧密结合,熟石膏可以较好的抑制脱矿牙本质基质牙粉末颗粒离散。结论：脱矿牙本质基质粉末与熟石膏复合骨材料对大鼠颅骨缺损有良好的修复作用,可促进新骨形成,缩短骨缺损修复时间。     

乳牙釉质、牙本质磷含量之分析研究

目的:探讨乳牙釉质、牙本质磷元素和儿童龋病的关系。方法:对象为5～7岁38名(男17名,女21名)幼儿,取其因乳恒牙替换所拔除的正常下颌乳中切牙38颗(Ⅰ19颗,Ⅰ19颗)。用电子探针X线显微分析仪检测其釉质、牙本质在近中、远中、唇和舌侧之不同深度的磷含量。38名幼儿按其临床检查分为无龋组14名,有龋组24名。结果:①釉质舌侧、近中侧和牙本质各侧之不同深度间,磷含量均有非常显著性差异(P均<0.001),且牙本质深层磷含量高于浅层。②釉质、牙本质之磷含量在男女性别间无差异(P>0.05);在左右同名牙间亦无显著性差异(P>0.05)。③牙釉质和牙本质之磷含量在无龋组和有龋组间无明显差异(P>0.05)。有龋组之磷含量与dfs仅在牙本质浅层存在低度负相关关系(r=-0.41596,P=0.0432),其余均无相关性。结论:乳牙牙釉质和牙本质磷含量是有高度差异,但磷含量与患龋状况无相关性。