p16,bcl—2,bax和fas／apo—1基因在急性白血病中的表达及 …

采用免疫组织化学染色法，检测了６１例急性白血病（ＡＬ）的ｐ１６，ｂｃｌ－２，ｂａｘ和ｆａｓ／ａｐｏ－１基因表达，结果表明，急性髓系白血病（ＡＭＬ）和急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）组的ｐ１６ｂａｘ和ｆａｓ／ａｐｏ－１表达均显著低于对照组（Ｐ〈０．００１），ＡＬＬ组的ｐ１６，ｆａｓ／ａｐｏ－１表达又显著低于ＡＭＬ组（Ｐ〈０．０５），ＡＭＬ和ＡＬＬ组ｂｃｌ－２基因表达均显著高于对照组（Ｐ〈０．００１），Ａ     

细胞周期素D1在结肠癌中的表达

目的 探讨细胞周期素（ｃｙｃｌｉｎ）Ｄ１与ｐ５３基因在结肠癌中的表达意义及其关系。方法 应用原位杂交技术和免疫组织化学技术检测结肠癌中ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因ｍＲＮＡ和ｐ５３蛋白的表达。统计处理采用卡方检验。结果 发现结肠癌组织和癌旁组织中ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１表达阳性率分别为６３．４％（４０／６３）及４４．４４％（２８／６３）,两者之间差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１表达程度与癌组织分化程度及临床分期有关,差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１表达与其他临床病理指标无关（Ｐ〉０．０５）。ｐ５３蛋白在结肠癌中阳性率为３８．０９％（２４／６３）,ｐ５３阳性的患者其ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１的表达较之ｐ５３阴性者为高,差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。结论 ｃｙｃｌｉｎＤ１的过表达及ｐ５３突变在结肠癌的癌变     

抗凋亡基因bcl-2在肾癌中的表达与意义

目的 研究ｂｃｌ－２在肾癌组织中的表达与意义。方法：采用鼠抗人单克隆抗本及ＳＡＢＣ免疫组织化学染色法。结果：ｂｃｌ－２蛋白在肾癌组织中的阳性率为５２．１％（２５／４８）,正常肾组织中为１６．１％（５／３１）肾癌组织中ｂｃｌ－２表达阳性率明显高于正常肾组织（Ｐ〈０．０５）,但不同病理细胞类型及不同临床分析正常肾组织（Ｐ〈０．０５）,但不同病理细胞类型及不同临床分期的肾癌组织ｂｃｌ－２表达阳性率无明显     

肺癌组织中细胞周期蛋白D1的表达

目的　观察细胞周期蛋白Ｄ１（Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１）在肺癌发生中的作用及其与生物学行为的关系。方法　收集肺癌及癌前病变和正常肺组织,采用免疫组化ＳＰ法检测Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１的表达。结果　正常肺组织和鳞状化生的支气管上皮未见Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１表达;在轻→中→重度不典型增生、原位癌、浸润癌,Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１表达的阳性率逐渐升高,阳性细胞数也增多,低分化癌的阳性率高于中高分化癌（Ｐ＜ ０．０５）。Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１阳性组的增殖活性高于阴性组（Ｐ＜ ０．０５） ;肺鳞癌有淋巴结转移组Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１的阳性率高于无转移组（Ｐ＜ ０．０５） 。结论　Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１表达与肺癌的发生和增殖有关,而且Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１表达是支气管粘膜上皮癌变的早期表现。Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１表达与肺鳞癌分化不良及淋巴结转移有关,可能是预后不良的标志。     

Cyclin D1、P53在口腔鳞癌中的表达及意义

目的：研究ＣｙｃｌｉｎＤ１、Ｐ５３蛋白在口腔鳞癌中的表达及与口腔鳞癌发生、发展间的关系。方法：应用免疫组化ＳＰ法,检测了４０例口腔鳞癌中ＣｙｃｌｉｎＤ１、Ｐ５３蛋白的表达情况。结果：５７．５％（２３／４０）的口腔鳞癌ＣｙｃｌｉｎＤ１过表达。正常口腔粘膜Ｐ５３蛋白均为阴性;５２．５％（２１／４０）的口腔鳞癌Ｐ５３蛋白阳性,两组间差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。其中高分化鳞癌阳性率为３６．８％（７／１９）;中分化鳞癌阳性率为６６．７％（１４／２１）,差异具有显著性（Ｐ＜０．０５）。结论：ＣｙｃｌｉｎＤ１过表达及Ｐ５３蛋白异常协同作用引起口腔鳞癌细胞的失控性生长,在口腔鳞癌的发生、发展中发挥着重要的作用。     

ＲＮＡｉ沉默ＰＥＬＰＩ／ＭＮＡＲ基因对子宫内膜癌细胞增殖和细胞周期的作用

【目的】 构建脯氨酸－谷氨酸－亮氨酸富集蛋白１（ＰＥＬＰ１）基因慢病毒表达载体,研究沉默ＰＥＬＰ１／雌激素受体非基因组活性辅助调节因子（ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ）基因表达对子宫内膜癌细胞增殖和周期的作用及机制。【方法】 构建合成靶向ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ ＲＮＡｉ慢病毒表达载体,并转染子宫内膜癌Ｉｓｈｉｋａｗａ细胞,Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ ＰＣＲ和ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ ｍＲＮＡ和蛋白水平的表达。使用普通培养基和加入Ｅ２的培养基培养各组细胞,ＭＴＴ检测各组细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞生长周期情况;Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ＥＲ下游靶基因ｃ－ｆｏｓ,ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１的蛋白表达水平。【结果】 成功构建合成靶向ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ ＲＮＡｉ慢病毒表达载体,转染子宫内膜癌Ｉｓｈｉｋａｗａ细胞,转染后 ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ ｍＲＮＡ的表达和蛋白的表达分别下降８６％和６５％（Ｐ ＜ ０．０５）。转染后Ｉｓｈｉｋａｗａ细胞与对照组相比增殖抑制（Ｐ ＜ ０．０５）, 细胞周期Ｇ０／Ｇ１期细胞比例增加,Ｓ期细胞比例减少 （Ｐ ＜ ０．０５）。加入雌激素后,三组细胞的生长速度加快,细胞Ｓ期的比例增加,转染组增殖抑制明显（Ｐ ＜ ０．０５）,Ｓ期比例降低（Ｐ ＜ ０．０５）。转染组ＥＲ下游基因ｃ－ｆｏｓ、ｃｙｃｌｉｎ－Ｄ１蛋白水平均显著降低（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 在子宫内膜癌细胞中沉默ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ的表达能能抑制细胞生长、使细胞阻滞在Ｇ１期,下调ＥＲ靶基因蛋白表达,ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ有望成为子宫内膜癌治疗的潜在靶点。     

原癌基因蛋白CyclinD1在喉癌中的表达

目的：探讨ＣｙｃｌｉｎＤ１基因表达与喉癌发生发展的关系。方法：应用Ｓ－Ｐ免疫组化方法检测１０例声带息肉组织及４４例喉鳞癌组织中ＣｙｃｌｉｎＤ１蛋白的表达。结果：ＣｙｃｌｉｎＤ１在喉癌组织中的阳性表达率为６８．３％（３０／４４），在声带息肉组织中的阳性率为３０．０％（３／１０），是者差别有统计学意义，Ｐ〈０．０５，而在癌旁正常组织中未见表达。ＣｙｃｌｉｎＤ１蛋白表达与喉癌患者年龄、淋巴结合转移无明显     

鼻咽癌中EB病毒感染与癌基因、抑癌基因表达的关系研究

目的：观察ＥＢ病毒感染与癌基因、抑癌基因在鼻咽癌（ＮＰＣ）中的表达与相互关系,研究ＮＰＣ发生的有关机制。方法：免疫组化检测５０例ＮＰＣ组织中ＥＢ病毒潜伏膜蛋白（ＬＭＰ１）癌基因蛋白、细胞周期素Ｄ１（ＣｙｃｌｉｎＤ１）、Ｈ－ｒａｓ、ｃ－ｆｏｓ,抑癌基因收害ＮＰＣＷＨＯⅢ型中显著高于ＷＨＯⅡ型（Ｐ〈０．０１）,在转移组中表达亦增加。ＣｙｃｌｉｎＤ１在癌呈巢性膨胀性生长中显著高于其他类型（Ｐ〈０．０１）     

AR与cyclinD1、p16在喉鳞癌发病中作用及其相互关系

目的：探讨雄激素受体（ＡＲ）与细胞周期蛋白Ｄ１（ｃｙｃｌｉｎＤ１）、ｐ１６基因三者在喉鳞癌中的作用及相互关系。　方法：　应用ＡＲ、ｃｙｃｌｉｎＤ１、ｐ１６单克隆抗体，通过免疫组化Ｓ－Ｐ法检测４４例喉鳞癌和１１例癌旁组织中的ＡＲ、ｃｙｃｌｉｎＤ１、ｐ１６的表达。　结果：　ＡＲ、ｃｙｃｌｉｎＤ１、ｐ１６在喉鳞癌上皮组织中阳性表达分别是６８．２％，５６．８％，５２．３％，与癌旁正常组织对照，两者差异有显著性（Ｐ　＜０．０５），ＡＲ与ｃｙｃｌｉｎＤ１的表达呈正相关，同样ｃｙｃｌｉｎＤ１与ｐ１６的表达呈正相关，而ＡＲ与ｐ１６之间无相关性，同时发现ＡＲ、ｃｙｃｌｉｎＤ１、ｐ１６的阳性表达与临床及病理分级无相关性（Ｐ　＞０．０５）。结论：ＡＲ、ｃｙｃｌｉｎＤ１、ｐ１６蛋白阳性表达在喉鳞癌的发生和发展中起重要作用。ＡＲ在喉鳞癌上皮细胞的阳性表达可作为诊断喉鳞癌的辅助指标。     

大肠癌中bcl-2和增殖细胞核抗原的表达及其临床意义

目的　研究大肠癌中ｂｃｌ－２和ＰＣＮＡ的表达及其临床意义,探讨其细胞凋亡和细胞增殖之间的关系。方法运用免疫组化法ＳＰ法检测５６例大肠癌组织中ｂｃｌ－２和ＰＣＮＡ的表达。结果５６例大肠癌中ｂｃｌ－２和ＰＣＮＡ的阳性率分别为６０．７％和１００．０％。ｂｃｌ－２在侵及肌层和Ａ、Ｂ期的表达高于侵及浆膜及浆膜外和Ｃ、Ｄ期（Ｐ＜０．０５）,高、中分化癌高于低、未分化癌但无明显差异（Ｐ＞０．０５）;ＰＣＮＡ增殖指数在低、未分化癌,侵及浆膜及浆膜外和Ｃ、Ｄ期高于高、中分化癌,侵及肌层和Ａ、Ｂ期（Ｐ＜０．０１）;ｂｃｌ－２和ＰＣＮＡ的表达无相关关系（Ｐ＞０．０５）。结论大肠癌中ｂｃｌ－２的表达与浸润深度和Ｄｕｋｅｓ分期密切相关,而与分化程度无关,ＰＣＮＡ增殖指数与肿瘤分化程度、浸润深度和Ｄｕｋｅｓ分期有关。     

p42/p44~(MAPK)和cyclinD1蛋白在霍奇金病中的表达及其相互关系

利用SP免疫组织化学方法检测了 4 0例不同类型霍奇金病 (HD)RS/H细胞及 13例反应性增生淋巴结(RH)的p4 2 /p4 4MAPK和cyclinD1蛋白的表达。结果显示p4 2 /p4 4MAPK及cyclinD1蛋白在HD之RS/H细胞中均呈过度表达 (阳性率分别为 72 5 %和 70 % ) ,且两者阳性率呈明显的正相关 (P <0 .0 1) ,提示MAPK级联信号转导在HD发生中起重要作用 ,并通过诱导cyclinD1蛋白高表达使RS/H细胞持续增殖及演进。     

p42／p44^MAPK和cyclin D1蛋白在霍奇金病中的表达及其相互关系

利用ＳＰ免疫组织化学方法检测了４０例不同类型霍奇金病９ＨＤ）ＲＨ／Ｓ细胞及１３例反应性增生淋巴结（ＲＨ）的ｐ４２／ｐ４４＾ＭＡＰＫ和ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１蛋白的表达。结果显示；ｐ４２／ｐ４４＾ＭＡＰＫ及ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１蛋白在ＨＤ之ＲＳ／Ｈ细胞中均呈过度表达，且两者阳性率呈明显的正相关，提示ＭＡＰＫ级联信号转导在ＨＤ发生中起重要作用，并通过诱导ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１蛋白高表达使ＲＳ／Ｈ细胞持续增殖及演进。     

胃MALT淋巴瘤Bcl-2和fas蛋白的表达及其临床预后的关系

目的:胃粘膜相关淋巴组织型(MALT)淋巴瘤Bcl-2和fas蛋白的表达及其与临床预后的关系。方法:利用免疫组织化学检测39例胃MALT淋巴瘤Bcl-2及fas蛋白的表达。结果:在低度恶性组Bcl-2蛋白的阳性表达率(83.3%,25/30)和阳性信号强度明显高于高度恶性组(33.3%,3/9)(P<0.01);而低度恶性组fas蛋白的阳性率(26.7%,8/30)和阳性信号强度明显低于高度恶性组(88.9%,8/9)(P<0.01);在低度恶性和高度恶性胃MALT淋巴瘤中Bcl-2和fas蛋白的阳性信号强度均呈明显的负相关(r=-0.6825和-0.6934,P<0.01)。有肌层及浆膜层侵犯者Bcl-2和fas蛋白表达分别明显低于和高于局限于粘膜下层者(P<0.05),但肌层与浆膜层浸润,Bcl-2和fas蛋白表达均无显著性差异(P>0.05);有淋巴结转移的Bcl-2蛋白表达明显低于无淋巴结转移者,而fas蛋白表达则相反(P<0.01)。结论:Bcl-2和fas蛋白参与胃MALT淋巴瘤的恶性转化,与其浸润、进展及其恶性生物学行为有关,检测两者可能作为判断该肿瘤生物学行为和临床预后的指标之一。     

STAT3磷酸化对胃MALT淋巴瘤细胞凋亡的调控作用

目的　探讨STAT3磷酸化对胃MALT淋巴瘤细胞凋亡的调控作用。方法　采用SP免疫组织化学方法检测了 45例胃MALT淋巴瘤细胞及 13例滤泡型淋巴结反应性增生病 (RH)的p -STAT3、促凋亡基因 /蛋白fas和抗凋亡基因 /蛋白bcl-2的表达。结果　p -STAT3、fas及bcl-2蛋白在胃MALT淋巴瘤细胞中均呈过度表达 (阳性率分别为 64 .4%、60 .0 %和 66.7% ) ;低度恶性组的fas蛋白阳性信号强度明显低于高度恶性组 (P <0 .0 5 ) ,而bcl-2蛋白则明显高于高度恶性组 (P <0 .0 5 ) ,在低度与高度恶性组间的p -STAT3阳性表达强度无明显差异 (P >0 .0 5 ) ;p -STAT3与fas蛋白在胃MALT淋巴瘤细胞中的阳性表达呈明显的负相关 (r=-0 .6791,P <0 .0 5 ) ,而与bcl -2蛋白的阳性表达则呈明显的正相关 (r=0 .72 3 1,P <0 .0 5 )。结论　STAT3活化可能通过抑制细胞凋亡导致胃MALT淋巴瘤细胞的恶性转化及高增殖性 ,并在其演进中起重要作用     

fas/apo-1、bcl-2蛋白在急性髓系白血病细胞的表达特点及意义

用免疫印迹（Western blot）、碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法（APAAP）分析19例急性髓系白血病（AML）骨髓细胞fas/apo-1、bcl-2蛋白表达水平的变化。结果表明绝大部分AML骨髓过表达bcl-2蛋白,部分病例表达fas/apo-1,两者表达呈一定的负相关性。分析结果显示bcl-2蛋白过表达所致的凋亡抑制状态是化疗耐药的主要机制之一,而fas/apo-1的表达是预后较好的特征。     

在多发性骨髓瘤中bcl-1基因重排、细胞周期D_1蛋白高表达及其临床意义

21例多发性骨髓瘤患者的外周血和骨髓的单个核细胞,同时用免疫组织化学和两步法半筑巢式多聚酶链反应(PCR)技术进行分析,检出5例(24%)细胞周期D_1蛋白高表达,4例(19%)bcl-1基因重排.该4例bcl-1基因重排的患者都高表达细胞周期D_1蛋白.5例细胞周期D_1蛋白高表达的患者都具有较晚的临床分期、骨髓中瘤细胞比率较高、化疗效果差等特点.     

膀胱癌尿脱落细胞P16、cyclin D_1、P53、mdm2蛋白表达及其意义

目的 :检测P16、cyclinD1、P5 3、mdm2蛋白在膀胱移行细胞癌 (TCC)尿脱落细胞中的表达 ,以探讨其临床意义。方法 :用免疫组织化学S -P法检测 2 1例膀胱TCC尿脱落细胞及组织中P16、cyclinD1、P5 3、mdm2蛋白的表达。结果 :膀胱TCC尿脱落细胞中 ,P16蛋白阳性表达率为 71.4 % (15 / 2 1) ;cyclinD1蛋白阳性表达率为 2 8.6 % (6 / 2 1) ;P5 3蛋白阳性表达率为 33.3% (7/ 2 1) ;mdm2蛋白阳性表达率为 2 3.8% (5 / 2 1)。对照组P16蛋白表达均为阳性 ,cyclinD1、P5 3、mdm2蛋白表达均为阴性。P16、cyclinD1、P5 3、mdm2基因在尿脱落细胞中异常表达均与相应的组织中表达相吻合。多基因蛋白联合表达肿瘤检出率为 81% (17/ 2 1) ,常规尿细胞学检查肿瘤检出率为19.1% (4/ 2 1)。两种方法比较差异有显著性意义 (χ2 =18.0 8,P <0 .0 0 5 )。结论 :尿脱落细胞的P16、cyclinD1、P5 3、mdm2多基因蛋白联合检测可作为膀胱TCC诊断有意义的参考指标。     

胃癌PCNA、CyclinD1、H—ras表达与临床意义

目的 :探讨 PCNA、Cyclin D1 、H- ras在胃癌中的表达规律与临床意义。方法 :运用 SP免疫组织化学技术对 6 8例胃癌标本进行检测。结果 :胃癌 PCNA L I平均为 6 1.88± 16 .0 0 ,显著高于正常粘膜 ,良性溃疡和癌旁粘膜。 Cyclin D1 在胃癌中的阳性率为 80 .88% ,Cyclin D1 高表达与淋巴结转移呈正相关 ;H- ras在胃癌阳性表达率为73.5 3% ,与 Cyclin D1 表达相似 ,H- ras过表达与淋巴结转移呈正相关 ;H- ras与 Cyclin D1 之间显示出正相关 ,P值<0 .0 0 1;PCNA与预后关系密切 (P<0 .0 0 1) ,PCNA L I越高 ,术后生存时间越短 ,预后越差。结论 :(1) PCNA是反映细胞增殖状态的良好指标 ,PCNA L I对估计胃癌恶性程度 ,判断预后及指导临床治疗有重要价值 ;(2 ) H- ras,CyclinD1 过表达是胃癌发生的早期变化 ,有助于胃癌的早期诊断     

p27Kip1、cyclin D1蛋白和Ki-67在口腔鳞癌中的表达及其意义

目的 研究口腔鳞癌组织中p27Kip1及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)表达以及与临床生物学特性和细胞增殖的关系.方法 采用免疫组化方法检测53例原发性口腔鳞癌组织及20例正常口腔黏膜组织中p27Kip1及cyclin D1蛋白的表达水平,Ki-67作为细胞增殖活性的指标也被检测.结果 p27Kip1在口腔鳞癌中阳性表达率显著低于正常口腔黏膜组织(P＜0.05),cyclin D1蛋白和Ki-67在口腔鳞癌中阳性表达率显著高于正常口腔黏膜组织(P＜0.05) ;cyclin D1蛋白过表达与临床分级及淋巴结转移有关(P＜0.05),p27Kip1缺失表达与淋巴结转移有关(P＜0.05);p27Kip1负表达和cyclin D1过度表达与细胞增殖评价因子Ki-67呈负相关(r=-0.587和-0.667,P＜0.05).结论 在鳞癌的发生发展过程中,p27Kip1的缺失表达和cyclin D1的过度表达两者可能单独或共同参与.p27Kip1的缺失可能还与口腔鳞癌细胞的分化、转移及增值和预后有关.