一株临床不常见念珠菌的检验

目的对1株临床不常见念珠菌的检测进行探讨。方法采用4种不同方法(ATB、DADE、Remel和分子生物学方法)对1株不常见念珠菌进行检测。结果ATB、Remel系统检测结果为邹褶念珠菌;DADE系统检测结果为克柔念珠菌;分子生物学检测结果为近邹褶念珠菌。讨论对于临床不常见的念珠菌,仅用生化反应鉴定是不够的,为了正确鉴定到种,必要时还要用分子生物学方法作核酸序列分析。     

平常念珠菌临床分离株的鉴定探讨

平常念珠菌(Candida inconspicua)首先由Lodder和Kreger于1952年报道,称平常球拟酵母菌(Torulopsis inconspicua),1978年归念珠菌属[1].临床虽不多见,但因对氟康唑多数不敏感[2],将其准确鉴定到种对其感染患者的治疗至关重要.国内目前尚未见该菌的相关报道.我们对临床标本分离的3株平常念珠菌生物学特性及与其表型特征相关的念珠菌的鉴别进行了探讨,现报告如下.     

临床常见念珠菌的PCR-RFLP鉴定方法研究

目的 建立临床常见念珠菌的聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测技术.方法 用真菌通用引物ITS1-ITS4 分别扩增白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌和近平滑念珠菌5 种菌株的ITS1-5.8 S rDNA-ITS2 区域,然后对扩增产物进行MspⅠ酶切分析.结果 5种念珠菌标准菌株经PCR-RFLP 分析后产生了5 种不同的特异性条带,成功地将临床上常见的5 种念珠菌区分开来.应用此方法鉴定了60 株临床分离的念珠菌,其PCR-RFLP 结果与标准菌株一致,测序结果进一步证实了此方法的可靠性.结论 PCR-RFLP 检测技术具有快速、稳定、特异、准确性高的特点,在常见致病念珠菌鉴定方面具有良好的临床应用前景.     

临床分离437株念珠菌的菌种分布及耐药性分析

念珠菌感染已成为真菌感染和死亡的重要病原菌。本文对临床标本中分离的念珠菌进行回顾分析,以了解念珠菌感染的菌种分布及药敏状况,为临床合理使用抗真菌药物提供参考。     

19株都柏林念珠菌的来源及其鉴定

都柏林念珠菌是1995年才命名的新的致病性念珠菌，因该菌的表型特征与白色念珠菌极为相似，故临床上许多微生物实验室长期以来误将其鉴定为白色念珠菌，它主要来源于患者的痰、咽拭子、分泌物、尿液等标本，为了更进一     

两种方法对比检测临床常见念珠菌

目的对两种检测念珠菌的方法进行比较。方法对167例疑诊为霉菌性阴道炎患者同时收集两份阴道拭子标本，分别用生理盐水直接涂片法和科玛嘉念珠菌显色培养法进行检测，并将两种检测结果进行比较。结果涂片法阳性率为21．6％，科玛嘉念珠菌显色培养法阳性率为38．3％，明显高于涂片法（P〈0．05）。结论涂片法是一种简单、快速的检测方法，可不进行菌种鉴定，但阳性率低。念珠菌显色培养法不失为一种有效检测念珠菌的方法。     

临床分离鉴定念珠菌及耐药性1110株分析

如何选用合适的抗真菌药是当前临床医生和微生物鉴定工作者面临的一大问题。为此对2006-01-01~2006-12-31我院分离的1 110株真菌鉴定及药敏试验结果进行分析如下。1临床资料1.1一般资料取自我院住院及门诊患者送检的痰、尿液、分泌物、血液、粪便、胸腹水等标本1 110株。1.2鉴定方法将各种临床标本接种于沙保罗培养基,35℃孵育,培养阳性者菌落经革兰氏染色确认为酵母样菌后,采用珠海H em a微生物鉴定/药敏分析系统进行鉴定和药敏试验。2结果1 110株念珠菌在各类标本中的分布及菌种构成见表1,耐药率见表2。表1 1 110株念珠菌在各类标本中的…     

恶性肿瘤患者念珠菌临床分离株的药物敏感性分析

目的 以美国临床实验室标准化委员会（NCCLS） M27-A方案的微量肉汤稀释法为金标准,评价丹麦ROSCO公司的纸片扩散法在检测念珠菌耐药性方面的应用价值,为临床实验室寻找一种简便的念珠菌药敏试验方法.方法 分别采用丹麦ROSCO公司抗真菌药敏纸片和法国生物梅里埃公司ATBFUNGUR2念珠菌药敏板条来检测78株常见念珠菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑等4种抗真菌药物的敏感性,以NCCLS的微量稀释法作为金标准,评价纸片扩散法的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值.结果 纸片扩散法检测5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑的药敏结果,其Kappa值达到了0.89,未出现一种方法敏感而另一种方法耐药的严重错误现象;对78株念珠菌的药敏结果进行分析,5-氟胞嘧啶、两性霉素B敏感性高,分别为88.20％和89.17％,氟康唑和伊曲康唑敏感性较低,分别为56.34％和52.12％.白色念珠菌和热带念珠菌对4种抗真菌药物的敏感性较高,分别为90.95％、85.71％,而光滑念珠菌和克柔念珠菌的敏感性低,分别为67.50％、41.67％.结论 纸片扩散法与微量稀释法一致性高,在临床实验室可以替代微量稀释法进行念珠菌的药敏分析.我院念珠菌对两性霉素B的敏感性最高,对伊曲康唑的敏感性最低;抗真菌药物对白色念珠菌的抑菌率最高,对克柔念珠菌的抑菌率最低.     

近平滑念珠菌血流感染4例报告

近年来,非白念珠菌所致侵袭性念珠菌病持续性增多,现将我院4例病例报道如下. 病例资料 病例1：患者女,73岁.因咳嗽、咳痰伴发热、胸闷、心悸、阵发性呼吸困难等症状,以肺间质纤维化合并双肺感染收入院.入院当日体温37℃,双肺呼吸音粗,可闻及Velcro啰音,予头孢哌酮-舒巴坦＋左旋氧氟沙星治疗肺部感染.入院第2天患者呼吸衰竭加重,行气管插管,呼吸机辅助通气,入院第4天患者双肺可闻及湿啰音及Velcro啰音,予深静脉营养支持治疗.[第一段]     

白色念珠菌感染器官分布及药敏实验分析

目的了解院内白色念珠菌感染菌种的分布及耐药情况,为临床抗真菌治疗提供依据。方法采用PCR技术进行菌种鉴定,用真菌药敏条进行药敏试验。结果2008年从临床送检的痰、尿、分泌物等标本中共检出白色念珠菌198株,检出率为54%,其中痰标本白色念珠菌检出率最高77株占70.2%,其次是在阴道拭子检出53株占67.4%;体外药敏试验显示氟胞嘧啶(92%)、两性霉素(87.9%)敏感性最好,耐药率最低。结论白色念珠菌感染越来越多,加强真菌分离及药敏监测,合理用药,有助于患者的治疗。     

Detection of 10 medically important Candida species by seminested polymerase chain reaction

A seminested PCR detecting ten medically important Candida species were achieved. Analytical sensitivity and specificity were not compromised.     

白色念珠菌DNA指纹图谱分析及其在临床耐药检测中的应用

目的建立临床分离56株白色念珠菌的DNA指纹图谱,结合其药敏特性,研究白色念珠菌的指纹图谱与其耐药性的关系。方法利用60条随机引物进行随机扩增多态性DNA(Random amplified polymorphic DNA,RAPD)的分子标记方法,构建56株白色念珠菌的指纹图谱。利用GIS2010凝胶成像处理系统对得到的DNA指纹图谱进行分析,生物学软件DNAMAN得出各菌株的遗传距离和亲源关系树状图。采用NCCLS M27-A方案测定56株不同来源的白色念珠菌对氟康唑(FCZ)的耐药性。结果筛选出3条随机引物,进行RAPD-PCR;白色念珠菌基因组DNA含量在100ng/μl时,得到的指纹图谱最为清晰;DNAMAN软件分析发现56株白色念珠菌中的5株遗传距离指数较小,其亲源关系也较近;并且通过耐药性分析发现该5株菌均对FCZ耐药。结论白色念珠菌的指纹图谱与其耐药性有关。     

耐氟康唑白念珠菌临床株ERG11基因突变检测

目的 筛查耐氟康唑白念珠菌ERG11基因突变,探讨其与耐药的关系.方法 用柯玛嘉显色培养基和25S rDNA转座内含子保守区分型方法,收集鉴定白念珠菌临床株.联用微量稀释法和Rosco药敏纸片扩散法体外测定试验菌株对氟康唑的敏感性.以ERG11序列明确的白念珠菌标准耐药株ATCC 76615-19和达令顿株为质控,以标准敏感株C1b和临床敏感株02928为对照,分3段扩增临床耐药株ERG11基因并测序.结果 获得15株A型白念珠菌临床耐药株.ERG11基因测序共发现16处同义突变和11处错义突变.质控株突变与既往报道一致.敏感株共出现9处同义突变和3处错义突变G640A(E165K)、A945C(E266D)、G1609A/G(V488I).耐药临床株中的14株均出现2处共有的错义突变G487T(A114S)和T916C(Y257H),不伴其他突变;另1株出现8处同义突变和4处错义突变R541C(Y132H)、T495A(D116E)、A530C(K128T)、T1493A(F449Y),其中T1493A(F449Y)未见报道.结论不同来源的白念珠菌临床耐药株集中发生G487T(A114S)和T916C(Y257H)突变,暗示这2处突变极可能参与菌株耐药.耐药株可以发生T1493A(F449Y)突变.     

The clinical significance of Candida colonization of respiratory tract secretions in critically ill patients

PURPOSE: Clinical uncertainty exists regarding the significance of colonization confined to respiratory tract secretions with Candida sp in critically ill patients. Our objectives were to describe such colonization, its associated risk factors, and to examine the clinical outcomes in patients with a clinical suspicion of ventilator-associated pneumonia with isolated Candida colonization compared to those without. MATERIALS AND METHODS: In a retrospective analysis of the Canadian ventilator-associated pneumonia study, patients were divided into 2 groups according to the isolated presence or absence of Candida in the respiratory tract enrollment culture. We compared length of mechanical ventilation, intensive care unit and hospital stay, and mortality outcomes between groups. We used multiple logistic regression analysis to determine factors independently associated with Candida colonization and hospital mortality. RESULTS: Of the 639 eligible patients, 114 (17.8%) were colonized with Candida in the enrollment culture. A multivariate analysis identified female sex (odds ratio [OR], 1.65; 95% confidence interval [CI], 1.02-2.65), number of comorbidities (OR, 1.35; 95% CI, 1.08-1.71), worsening or persistent infiltrate at randomization (OR, 1.92; 95% CI, 1.09-1.38), antibiotics started within 3 days of randomization (OR, 3.16; 95% CI, 1.71-5.83), and on antibiotics at randomization but all started more than 3 days before randomization (OR, 3.04; 95% CI, 1.68-5.50) as variables associated with Candida respiratory tract colonization. A significant increase in median hospital stay (59.9 vs 38.6 days, P = .006) and hospital mortality (34.2% vs 21.0%, P = .003) was observed in patients with Candida colonization. In a multivariate model, Candida colonization of the respiratory tract was independently associated with hospital mortality (OR, 2.47; 95% CI, 1.39-4.37). CONCLUSION: Respiratory tract Candida colonization is associated with worse clinical outcomes and is independently associated with increased hospital mortality. However, it is unclear whether Candida colonization is causally related to poor outcomes or whether it is a marker for increased morbidity and mortality.     

In-vitro activity of five antifungal agents against uncommon clinical isolates of Candida spp

A broth microdilution method and an agar dilution method were used for testing fluconazole, itraconazole, ketoconazole, flucytosine and amphotericin B against 98 clinical isolates belonging to seven species of Candida. The approximate rank order of fluconazole MICs was Candida lusitaniae approximately Candida kefyr < Candida famata approximately Candida guilliermondii < Candida pelliculosa approximately C. lipolytica approximately Candida inconspicua. Candida lypolitica and C. pelliculosa were the species least susceptible to itraconazole and ketoconazole. Flucytosine MICs revealed the highest prevalence of resistant strains among C. lipolytica and C. lusitaniae. All isolates were susceptible to amphotericin B.     

白色念珠菌巢式PCR法的建立和临床应用初步评价

目的建立用于临床标本中白色念珠菌快速检测的巢式聚合酶链反应。方法以念珠菌属18SrDNA上一段保守序列为通用引物(外套引物),可扩增出257bp的片段,以白色念珠菌内转录2区中选择种特异性引物(内套引物),目标碱基长度为386bp,建立巢式聚合酶联反应(nestedPCR,nPCR)。结果对白色念珠菌的实验检测表明,nPCR的特异性和重复性均达100%,敏感性为32~64cfu/ml。初步临床标本应用表明,nPCR的检测效果显著高于培养法(χ2=31.52,P<0.001)。结论采用nPCR技术,不但可对分离的白色念珠菌进行鉴定,而且可直接用于临床标本中白色念珠菌的检测。     

白假丝酵母菌简便培养方法的建立及临床应用研究

目的探讨真菌简便培养方法的临床应用价值。方法收集2006年1月-2013年12月我院门诊及住院患者疑似真菌感染标本,建立真菌简便培养基对收集标本进行培养,并将其与法国梅里埃培养基进行比较;对比新鲜自制简便培养基与2—8℃放置6个月后简便培养基的真菌检出率。结果在2011-2013年收集的307份标本中,简便培养基白假丝酵母菌的检出率为38．4％,而梅里埃培养基的检出率为26．1％,自制简便培养基对阴道分泌物标本、痰标本白假丝酵母菌检出率优于梅里埃培养基,且差异均有统计学意义（P均〈0．05）,而尿标本和咽拭子标本中两种方法白假丝酵母菌的检出率差异均无统计学意义（P均〉0．05）。白假丝酵母菌在两种培养基上的菌落形态相似,但梅里埃培养基上白假丝酵母菌菌落显示蓝色,而自制简便培养基白假丝酵母菌菌落呈奶油色,并且均能抑制大部分杂菌的生长。痰标本、阴道分泌物标本及其他标本的白假丝酵母菌检出率在新鲜与2～8℃放置6个月后培养基中差异均无统计学意义（P均〉0．05）。在2006—2010年共2840份阴道分泌物标本中,检出白假丝酵母菌以外的其他致病菌475份,阳性检出率为16．7％（475／2840）,其中白假丝酵母菌与其他致病菌双重感染者有87例,阳性检出率为3．1％（87／2840）。结论真菌简便培养基制作简单、成本低廉,对白假丝酵母菌有良好选择性,可向农村基层医疗机构推广使用。